оригинальные статьи Журнал фундаментальной медицины и биологии
УДК 616.314-002+616.314.16]- 084-085:618.3
П.В. Мороз, А.С. Ломова, В.А. Проходная
ИЗУЧЕНИЕ АНТИМИКРОБНОГО ИММУНИТЕТА РОТОВОЙ ПОЛОСТИ БЕРЕМЕННЫХ ЖЕНЩИН С ПЕРВИЧНЫМ И РЕЦИДИВИРУЮЩИМ КАРИЕСОМ
Ростовский государственный медицинский университет
Цель: Изучено содержание лактоферрина в слюне у 24 беременных женщин с первичным и у 27 пациенток с рецидивирующим кариесом в течение гестационного периода.
Материалы и методы: При обследовании соматически здоровых небеременных женщин было установлено, что концентрация лактоферрина в слюне составила 1,12±0,05 мкг/мл, интерквартильный диапазон соответствовал 0,76-1,45 мкг/ мл. У женщин с физиологически протекающей беременностью и санированной полостью рта уровень лактоферринаво всех трех триместрах был достоверно выше, чем в группе здоровых небеременных женщин.
Результаты: Концентрация лактоферрина в слюне у женщин с первичным кариесом, в каждом из трех триместров была достоверно выше, чем в группе здоровых беременных с аналогичными сроками гестации. Прирецидивирующем кариесе уровень лактоферрина в слюне был выше по сравнению с пациентками с первичным кариесом как у беременных, так и у небеременных женщин. Наиболее выраженный прирост лактоферрина к третьему триместру беременности наблюдался у пациенток с рецидивирующим кариесом.
Выводы: Таким образом, лактоферрин в слюне можно рассматривать не только как маркер воспаления в ротовой полости, но и как индикатор неблагоприятного течения кариозного поражения зубов.
Ключевые слова: беременность, кариес, лактоферрин, антимикробный иммунитет.
P. V. Moroz, A.S. Lomova, V.A. Prohodnaja
ESPECIALLY ANTIMICROBIAL MOUTH IMMUNITY IN PREGNANT WOMEN WITH PRIMARY AND RECURRENT
CARIES
Rostov State Medical University
Purpose:The article examined the content of lactoferrin in saliva from pregnant women with primary 24 and 27 patients with recurrent caries during the gestational period.
Materials and methods: In a survey of healthy non-pregnant women found that lactoferrin concentration in saliva was 1,12+0,05 |g/ml, interquartile range corresponds to 0,76-1,45 |g/ml. In women with physiologically occurring in the absence of pregnancy caries lactoferrin level in all three trimesters was significantly higher than in a group of healthy non-pregnant women.
Reults: Lactoferrin concentration in saliva for women with a primary tooth decay in each of the three trimesters was significantly higher than in a group of healthy pregnant women with similar periods of gestation. When caries lactoferrin level in recurrent saliva was higher compared to patients with a primary tooth decay as in pregnant and non-pregnant women. The most pronounced increase of lactoferrin into the third by pregnancy was observed in patients with recurrent caries.
Summary: Thus, the lactoferrin in saliva can be seen not only as a marker of inflammation in the mouth, but also as an indicator of adverse currents of the carious lesions of teeth.
Keywords: pregnancy, dental caries, lactoferrin, antimicrobial resistance.
Журнал фундаментальной медицины и биологии Введение
вичным
В слюне человека содержится большое количество соединений, которые защищают ткани ротовой полости от различных микроорганизмов и продуктов их жизнедеятельности [1]. Стабильное и постоянное поступление слюны, которая осуществляет интеграцию мягких и твердых тканей в полости рта, обеспечивает не только поддер-жаниегомеостаза ротовой полости, эффективное удаление эндо- и экзогенных микроорганизмов и их метаболитов, но и постоянное присутствие в полости рта различных защитных факторов [2]. Лактоферрин — полифункциональный белок из семейства трансферринов, представленный во многих секретах организма, включая слюну [3]. Лактоферрин относится к системе врожденного иммунитета и опосредованно вовлечен в процессы клеточного иммунитета. Главные биологические функции этого белка — связывание и транспорт ионов железа, но кроме этого лактоферрин обладает антибактериальной, антивирусной, антипаразитарной, различными каталитическими активностями [4,5,6]. Наиболее изученным является механизм антибактериальной активности лактоферрина. Антибактериальные свойства белка обусловлены способностью лактоферринасвя-зывать железо и тем самым лишать бактериальную микрофлору необходимого для ее роста и жизнедеятельности микроэлемента [4]. Бактерицидные свойства белка также обусловлены наличием специфических лактоферриновых рецепторов на клеточной поверхности микроорганизмов [6].Лактоферрин связывается с липополисахари-дами бактериальных стенок, и входящая в состав белка окисленная форма железа инициирует их перекисное окисление. Это приводит к изменению мембранной проницаемости и последующему лизису клеток [7]. Однако наиболее изученным механизмом антибактериального действия белка, не зависящим от его железосвязывающей способности, является специфическое взаимодействие лактоферрина с наружной бактериальной мембраной, которое приводит к гибели клеток бактерий [3].
Исследования по изучению содержания лак-тоферрина в слюне при беременности отсутствуют, как и отсутствуют сведения о взаимосвязи антимикробной защиты ротовой полости с развитием кариеса в гестационный период.Между тем, изучение динамики лактоферрина во время беременности позволит выявить критические периоды снижения антимикробной защиты ротовой полости в гестационный период, что важно для профилактики кариеса.
Цель работы - изучение содержания лакто-феррина в слюне у беременных женщин с пер-
оригинальные статьи
и рецидивирующим кариесом в течение гестационного периода.
Материалы и методы
Нами проведено исследование24 женщин с первичным и27 пациенток с рецидивирующим кариесом во время беременности. В качестве контрольных групп были исследованы здоровые небеременные женщины (n=10), небеременные пациентки с первичным кариесом (n=11), небеременные женщины с рецидивирующим кариесом (n = 10), беременные без кариеса (n = 20). Возраст пациенток колебался от 18 до 33 лет.
Для исследования факторов местного иммунитета полости рта у каждой обследуемой проводили забор ротовой жидкости, которую получали без стимуляции, сплевыванием в стерильные пробирки. Затем ротовая жидкость центрифугировалась 15 минут при 8000 об/мин. Надосадоч-ную часть ротовой жидкости переливали в пластиковые пробирки и хранили при температуре — 30 °С. Количественное определение лактофер-ринав ротовой жидкости проводилось методом твердофазногоиммуноферментного анализа с использованием набора реагентов «Лактоферрин-стрип» («ВекторБест»).
По величине индекса КПУ определяли интенсивность пораженных кариесом зубов в постоянном прикусе, а также количество запломбированных и удаленных зубов (согласно ВОЗ). В структуре КПУ компонент К отмечали в случае обнаружения кариозной полости и рецидива кариеса после лечения, П — при наличии пломбы без признаков рецидива кариеса, У — количество удаленных или подлежащих удалению зубов (кроме 8-го зуба). Расчет индекса производили путем сложения показателей. Уровень интенсивности кариеса характеризовали согласно рекомендациям ВОЗ (1981): 0 - 1,5 очень низкая интенсивность; 1,6 - 6,2 низкая; 6,3 - 12,7 средняя; 12,8 - 16,2 высокая; более 16,2 - очень высокая.
При статистическом анализе полученных показателей использовали методы описательной статистики. При этом обработку результатов проводили с привлечением программы Statistica 7.0 (StatSoft, США).
Результаты и обсуждение
Результаты определения уровня лактоферрина в слюне у пациенток клинических групп и в группах сравнения отражены в табл.1.
оригинальные статьи Журнал фундаментальной медицины и биологии
Таблица 1.
Содержание лактоферрина (мкг/мл) в слюне женщин клинических групп
№ Группа Статистический параметр
M±m Me [25;75]
1 Здоровые небеременные женщины (n=10) 1,12+0,05 1,03 0,76-1,45
2 Небеременные женщины с первичным кариесом (n=11) 1,49+0,06 1,24 1,01-1,57
3 Небеременные женщины с рецидивирующим кариесом (n=10) 1,83+0,07 1,95 1,04-2,18
4 4.1 4.II 4.III Беременные женщины без кариеса (n=20): I триместр (n=6) II триместр (n=7) III триместр (n=7) 1,86+0,07 1,45+0,03 1,84+0,05 1,98+0,06 1,91 1,24 1,81 1,93 1,13-2,24 1,09-1,38 1,52-1,99 1,75-2,33
5 5.I 5.II 5.III Беременные женщины с первичным кариесом (n=24): I триместр (n=7) II триместр (n=9) III триместр (n=8) 2,38+0,01 2,17+0,03 2,25+0,04 2,43+0,09 2,39 2,19 2,21 2,54 2,16-2,49 2,08-2,29 2,11-2,45 2,36-2,78
6 6.I 6.II 6.III Беременные женщины с рецидивирующимкариесом (n=27): I триместр (n=9) II триместр (n=10) III триместр (n=8) 2,75+0,16 2,59+0,23 2,88+0,14 3,28+0,17 2,73 2,34 2,81 3,15 2,59-2,93 2,26-2,98 2,45-3,12 2,89-3,35
Р pb2=0,04 P4I-5I=0,05 P5 I-6 I=0,07 Pi-3=0,001 P4.„-5.„=0,03 P5:„-6.„=0,05 Pl-4=0,0002 P4.I„-5.I„ = 0,02 P5.„I-6.III=0,03 p^<0,001 P4I6I=0,001 P,-6<0,001 р4Пн; „=0,0003 P4.„i-6.i„=0,0001
При обследовании здоровых небеременных женщин было установлено, что медиана и средняя выборочная концентрация лактоферрина в слюне составили 1,03 мкг/мл и 1,12+0,05 мкг/мл соответственно, интерквартильный диапазон соответствовал 0,76-1,45 мкг/мл (табл.1).
У женщин с физиологически протекающей беременностью при отсутствии кариеса уровень лак-тоферринаво всех трех триместрах был достоверно выше, чем в группе здоровых небеременных женщин (р<0,05)и плавно повышался от первого к третьему триместру беременности.
Значение медианы концентрации лактоферри-нав слюне для женщин с первичным кариесом в
каждом из трех триместров было достоверно выше (р<0,05), чем в группе здоровых беременных с аналогичными сроками гестации. Уровни данного маркера воспаления в ротовой полости у беременных с первичным кариесом особенно широко варьировали и имели максимальные значения в третьем триместре.
Прирецидивирующем кариесе уровень лакто-феррина в слюне был выше по сравнению с пациентками с первичным кариесом как у беременных, так и у небеременных женщин. Наиболее выраженный прирост лактоферрина к третьему триместру беременности наблюдался у пациенток с рецидивирующим кариесом (рис.1).
Журнал фундаментальной медицины и биологии
оригинальные статьи
I триместр II триместр III триместр
Без кариеса —■—Первичный кариес —А—Рецидивирующий кариес
Рис.1. Динамика уровня лактоферрина в слюне у беременных женщин безкариозного поражения зубов,
при первичном и рецидивирующем кариесе.
В группах больных с кариесом были определены индексы КПУ (табл.2). Анализ результатов позволил установить, что у беременных женщин кариес протекал с большей выраженностью патологического процесса. Как у беременных, так и небеременных пациентокпри рецидивном кариоз-
ном процессе индекс КПУ был выше по сравнению с первичным кариесом. Cамые высокие значения КПУ были установлены в группе беременных женщин с рецидивирующим кариесом, что сопровождалось в этой же группе наибольшими показателями лактоферрина в слюне.
Таблица 2.
Индекс КПУ у пациенток клинических групп
№ Группа М±т
1 Небеременные женщины с первичным кариесом (п=11) 5,75+0,46
2 Небеременные женщины с рецидивирующим кариесом (п=10) 7,25+0,65
3 Беременные женщины с первичным кариесом (п=24) 8,93+0,59
4 Беременные женщины с рецидивирующимкариесом (п=27) 11,76+0,73
р р1 2=0,04 р1 2=0,02 р2-4=0,01 р3-4=0,03
Итак, уровень лактоферрина в слюне был ассоциирован как с фактом самой беременности, продолжительностью гестационного периода, так и с наличием и течением кариеса. Причем зависимость между этими явлениями была прямой.В течение всей физиологически протекающей беременности в слюне происходит повышение концентрации лактоферрина. При протекании кариеса уровень лактоферрина в слюне возрастал с большим градиентом. Антимикробный механизм лактоферрина может выступать причиной установленного сопряжения между развитием и течением кариеса и нарастанием уровня пептида в слюне. Таким образом, лактоферрин в слюне можно рассматривать не только как маркер воспаления в ротовой полости,
но и как индикатор неблагоприятного течения кариозного поражения зубов.
Выводы
1. Уровень лактоферрина в слюне выше у беременных женщин и возрастает к третьему триместру гестационного периода.
2. У беременных пациенток развитие кариеса сопровождается повышением лактоферрина в слюне.
3. Рецидивный кариес у беременных женщин ассоциирован с выраженным повышением уровня лактоферрина в крови.
оригинальные статьи
Журнал фундаментальной медицины и биологии ЛИТЕРАТУРА
Шишкин С.В., Вавилова Т.П., Шишкин В.С., Штрунова Л.Н. Использование показателей смешанной слюны в оценке состояния тканей пародонта // Российский стоматологический журнал.-2010.-№.-С.10-13.
Дурново Е.А., Воробьева А.В., Беспалова Н.А., Клочков А.С., Марочкина М.С., Шашурина С.В. Диагностические возможности динамики лактоферрина ротовой жидкости для оценки течения раннего послеоперационного периода при оперативных вмешательствах в полости рта // Медицинский альманах.-2012.-Ш.-С.242-246. Бухарин О.В., Валышев А.В., Валышева И.В. Роль лактоферрина в противоинфекционной защите // Успехи современной биологии.-20П.-№.-СЛ35-144.
Грамматикова Н.Э., Резван С.П., Немцова Е.Р., Безбородо-ва О.А., Тутыхина И.Л., Народицкий Б.С., Якубовская Р.И. Изучение антибактериальных свойств лактоферрина из
различных источников в системе invitro // Антибиотики и химиотерапия.-2010.^7.-С.4-9.
Макеева И.М., Смирнова Т.Н., Черноусов А.Д., Романченко А.И., Годьдман И.Л., Садчикова Е.Р. Применение лактофер-рина в комплексном лечении стоматологических заболеваний (обзор литературы) // Стоматология.-2012.^4.-С.66-71. Рабинович О.Ф., Абрамова Е.С. Бактерицидная активность ротовой жидкости в комплексной диагностике дисбиотиче-ских изменений слизистой оболочки рта // Стоматология.-2012.-N3.-C35-37.
Сухарев А.Е., Ермолаева Т.Н., Беда Н.А., Тегза В.Ю. Организация иммунохимических исследований лактоферрина в слюне для оценки состояния здоровья // Вестник Санкт-Петербургской государственной медицинской академии.-2008.-N4.-C81-84.