References
1. Kosolapov V.M., Trofimov I.A., Trofimova L.S. Kormoproizvodstvo v selskom hozyaystve, ekologii i ratsionalnom prirodopolzovanii (teoriya i praktika). M.: Rosselhozakademiya, 2014. 135 s.
2. Shpakov A.S., Byichkov G.V. Polevoe kormoproizvodstvo, sostoyanie i zadachi nauchnogo obespecheniya // Kormoproizvodstvo. 2010. № 10. S. 3-9.
3. Hramoy V.K., Ivasyuk N.M., Ivasyuk E.V Osobennosti formirovaniya travostoev lyutsernyi izmenchivoy (Medicago varia marlin) v chistom vide i v smeshannyih posevah s myatlikovyimi travami pri dvuhukosnom i trehukosnom ispolzovanii // Izvestiya Timiryazevskoy selskohozyaystvennoy akademii. 2012. № 6. S. 36.
4. Isakov A.N Produktivnost i kachestvo korma razlichnyih vidov travosmesey v usloviyah Tsentralnogo Nechernozemya na dernovo-podzolistyih srednesuglinistyih pochvah // Izvestiya Timiryazevskoy selskohozyaystvennoy akademii. 2009. №1. S. 108-114.
5. Organizatsiya sistemyi vedeniya lugovogo hozyaystva na osnove kombinirovannogo ispolzovaniya travostoev / S.A. Belchenko, V.E. Torikov, A.V. Dronov, I.N. Belous, K.Yu. Byichkova // Vestnik Bryanskoy GSHA. 2015. № 5. S. 8-15.
6. Vliyanie mineralnyih udobreniy i priYomov poverhnostnogo uluchsheniya pochvyi na urozhay i kachestvo zelYonoy massyi mnogoletnih trav / N.M. Belous, L.P. Harkevich, V.F. Shapovalov, E.A. Krotova // Kormoproizvodstvo. 2010. № 4. S. 15-18.
7. Napravleniya povyisheniya urozhaynosti kormovyih kultur i kachestva kormov v Ne-chernozYomnoy zone Rossii / A.D. Prudnikov, A.G. Prudnikova, A.Yu. Korzhov, E.A. Savina // Dostizheniya nauki i tehniki APK. 2014. T. 28. № 11. S. 53-55.
8. Kompleksnoe primenenie borofoski i udobreniy na bobovo-myatlikovyih travo-smesyah / V.V. Dyachenko, A.V. Dronov, O.V Dyachenko, T.V. Lyashkova // Agrohimicheskiy vestnik. 2015. № 5. S. 18-21.
9. Dyachenko V.V., Zubareva A.V., Karankevich T.N. Formirovanie urozhaya bobovo-zlakovyih travosmesey pervogo i vtorogo goda zhizni v agroklimaticheskih usloviyah Bryan-skoy oblasti // Vestnik Kurskoy gosudarstvennoy selskohozyaystvennoy akademii. 2014. № 6. S. 53-56.
10. Prudnikov P.V., Sanzharova N.I., Prudnikov S.P. Ispyitanie novyih meliorantov na radioaktivno zagryaznennyih territoriyah Bryanskoy oblasti //Agrohimicheskiy vestnik. 2010. № 2. S. 15-19.
11. Spravochnikpo kormoproizvodstvu / V.M. Kosolapov i dr. M.: Rosselhozakademiya, 2014. 715 s.
12. Metodicheskie ukazaniya po provedeniyu polevyih opyitov s kormovyimi kulturami. M. : Rosselhozakademiya, 1997. 156 s.
УДК 619:576.89:636.4
ИЗМЕНЕНИЯ МИКРОБИОЦЕНОЗА КИШЕЧНИКА СВИНЕЙ ПРИ ГЕЛЬМИНТОЗАХ
Changes ofMicrobiocenosis of Pigs' Intestine with Helminth Infestation
Иванюк В.П., д. в. н., профессор, [email protected] Бобкова Г.Н., к. б. н., доцент, [email protected]
Ivanyuk V.P., Bobkovа G.N.
ФГБОУ ВО «Брянский государственный аграрный университет» 243345 Брянская область, Выгоничский район, с. Кокино, ул. Советская, 2а
Bryansk State Agrarian University
Реферат. В статье освещены вопросы, касающиеся изменения микробиоценоза кишечника свиней в результате паразитирования аскарид, эзофагостом, трихоцефал и их ассоциаций (микс-тинвазия). В процессе функционирования паразитарной системы в кишечнике свиней возрастает факультативная (стафилококки, стрептококки, Е.соП, клостридии, протей, грибы) микрофлора при значительном снижении индигенной микрофлоры (лактобактерии, бифидобактерии, бактероиды). Отмеченные изменения состава микробиоценоза характерны для дисбактериоза, который при моноинвазии выражен умеренно, а при микстинвазии - резко.
Summary. The article deals with the questions concerning the changes of microbiocenosis ofpigs' intestine as a result of parasitizing with Ascarididae, Oesophagostoma, Trichocephali and their associations (mixed-invasion). In functioning ofparasitic system the optional microflora (Staphylococcus, Strep-
tococci, E.Coli, Clostridia, Proteus, fungi) increases in the pigs ' intestine at the considerable decrease in indigenous microflora (Lactobacillus, Bifidus Bacteria, Bacteroides). The observed changes in the composition of the microbiota are typical of disbacteriosis, which is moderate at mono-invasion and sharp at mixed-invasion.
Ключевые слова: аскариоз, эзофагостомоз, трихоцефалез, микстинвазия, микробиоценоз кишечника, лактобациллы, бифидобактерии, бактероиды, кокковые формы, непатогенные кишечные палочки, патогенные Е. coli, стафилококки, стрептококки, клостридии, протей, грибы, дисба-ктериоз.
Keywords: Ascariasis, Oesophagostomos, Trichuriasis, mixed-invasion, intestine microbiocenosis, Lactobacillus, Bifidus Bacteria, Bacteroides, Coccoidforms, non-pathogenic E. Coli, pathogenic E. Coli, Staphylococcus, streptococci, Clostridia, Proteus, fungi, disbacteriosis.
Введение. В организме теплокровных животных поддерживается стабильный уровень температуры тела, рН и осмотического давления тканей органов, а также пищеварительных ферментов. Этот баланс осуществляется микроорганизмами желудочно-кишечного тракта, которые вырабатывают целлюлозолитические, амилолитические, протеолитические ферменты, а также витамины и антибиотические вещества. Микроорганизмы, живущие в желудочно-кишечном тракте млекопитающих, находятся друг с другом в сложных взаимоотношениях, между ними возникают индифферентные, симбиотические и антагонистические отношения [1,3-6,10]. Микрофлору свиней делят на две группы: нормальную (индигенную, облигатную), к которым относятся лактоба-циллы, бифидобактерии, бактероиды, кокковые формы, непатогенные кишечные палочки, и случайную - факультативную, временную, транзитную (патогенные Е. coli, стафилококки, стрептококки, клостридии, протей, грибы). Основную роль в поддержании микробиоценоза в желудочно-кишечном тракте млекопитающих, отводится представителям облигатной микрофлоры, которые выполняют ряд важных для организма функций, обеспечивающих защиту эпителиальных клеток от повреждения (колонизационная резистентность), регуляцию липидного обмена, поддержание оптимального уровня метаболических, ферментативных процессов и иммунного статуса [3,5,6,10]. В результате паразитирования гельминтов в организме животных создаются различные ассоциации паразитов, в результате чего формируется микропаразитоценоз, сочленами которого являются гельминты, паразитические простейшие, патогенные и условно-патогенные бактерии [5,6]. У больных свиней возникает дисбактериоз желудочно-кишечного тракта, нарушается функция органов и систем, что приводит к значительному отставанию в росте и развитии молодняка. Так как в фермерских, крестьянских хозяйствах и специализированных комплексах Российской Федерации свиньи часто инвазируются аскаридами, эзофагостомами, трихоцефалами и их ассоциациями [2,6-8,11], весьма актуальным является вопрос формирования микропаразитоценозов в кишечнике свиней при моноинвазии и микстинвазии нематодами.
Материалы и методы. Исследования микробиоценоза кишечника свиней при гельминто-зах провели на 30 поросятах 1-месячного возраста, которых разделили на 5 групп (по 5 голов в каждой). Молодняк первой группы не заражали, он служил контролем. Животным второй группы в 30-дневном возрасте однократно скормили по 600 инвазионных яиц Ascaris suum, третьей группы - по 600 инвазионных яиц Oesophagostomum dentatum, четвертой - по 600 инвазионных яиц Trichocephalus suis, пятой - по 200 инвазионных яиц Ascaris suum + по 200 инвазионных яиц Oesophagostomum dentatum + по 200 инвазионных яиц Trichocephalus suis (микстинвазия). Спустя 90 дней инвазии животных опытных групп дегельминтизировали (фенбендазол с кормом, однократно, индивидуально по 30 мг/кг по ДВ).
Материалом для бактериологического исследования служило содержимое прямой кишки свиней, которые исследовали в течение 1 часа после его получения. В стерильных условиях готовили ряд последовательных разведений до 10-10, каждое разведение сеяли в объеме по 0,1 мл на МПА (для определения общего числа аэробов), солевой МПА (стафилококков), на среду Блаурок-ка (бифидобактерии), на кровяной агар с колистином и налидиксовой кислотой (бактероиды), на среду Гарро (стрептококки), Вильсон-Блера (клостридии), на среду, предложенную ВНИИЖ, состоящую из глюкозы - 0,5, томатного сока - 0,05, агара - 1,5 (для определения лактобацилл), на среду Эндо (E.coli), на среду Чапека (грибы).
Результаты исследований. По результатам наших опытов установлено, что у агельминт-ных, клинически здоровых поросят 1 -7-месячного возраста в содержимом прямой кишки число стафилококков колебалось в пределах 3,5±0,12-3,9±0,11 log10 КОЕ микробных тел, стрептококков - 2,6±0,15-3,3±0,35, кишечных палочек - 2,9±0,43-3,8±0,38, лактобацилл - 4,4±0,12-5,9±0,22, би-
фидобактерий - 4,6±0,17-5,2±0,21, бактероидов - 1,2±0,05-2,2±0,36, клостридий - 0,05±0,01-0,21±0,05, протея - 0,03±0,01-0,15±0,02, грибов - 0,11±0,04-0,27±0,03 log10 КОЕ. У агельминтных поросят постоянными обитателями желудочно-кишечного тракта являются нетоксинообразую-щие стафилококки (Staph. saprophyticus, Staph. cereus flavus, Staph. epidermidis), негемолитические стрептококки (Str. lactis, Str. jodophilis, Str. faecium, Str. faecalis, Str. termophilus, Str. cinereus, Str. casei), а также слабопатогенные E.coli серогрупп 015, 026, 0,139. Кроме того, в кишечнике агельминтных свиней встречаются патогенные микроорганизмы. Так, общее количество патогенных стафилококков в кишечнике агельминтных поросят не превышает 17,2%, гемолитических стрептококков - 12,55%, апатогенных серогрупп E.coli - 21,3% от общего числа их. Наименьшее количество микроорганизмов в содержимом прямой кишки регистрируется у поросят 1-3-месячного, умеренное - у 4-5-месячного, максимальное - у 6-7-месячного возраста.
У инвазированных аскаридами поросят на 30 - 90 сутки количество стафилококков в содержимом прямой кишки было в 1,1-1,2 раза, стрептококков - в 1,1-1,2 раза, кишечных палочек - в 1,4-1,3 раза, клостридий - в 5,7-9,4 раза, протея - в 9,8-12,5 раза, грибов - в 3,6-3,8 раза больше, но число лактобацилл было в 1,2-1,4 раза, бифидобактерий - в 1,2-1,3 раза, бактероидов - в 1,2-1,6 раза меньше по сравнению с показателями контрольных животных. Качественный состав микрофлоры под влиянием аскарид подвергался значительным изменением. В процентном соотношении количество патогенных стафилококков, стрептококков, Е. coli в кишечнике поросят на 90 сутки инвазии составило соответственно 68,3%-37,1%-73,1%. 100%-ную гибель белых мышей вызывали виды Staph. aureus и Staph. citreus, Str. pyogenes, E. coli серогрупп 08, 09, 0141.
При эзофагостомозе в кишечнике увеличивается количество факультативной микрофлоры при уменьшении индигенной. На 60-90 сутки инвазии число стафилококков в содержимом прямой кишки увеличилось соответственно в 1,1-1,4 раза, стрептококков - в 1,1 раза, кишечных палочек - в 1,1-1,3 раза, клостридий - в 5,6-7,5 раза, протея - в 7,2-10,4 раза, грибов - в 2,8 раза. У больных поросят в те же сроки уменьшилось количество лактобацилл в 1,2-1,3 раза, бифидобак-терий - в 1,1-1,2 раза, бактероидов - в 1,2-1,5 раза по сравнению с контрольными, агельминтными поросятами. Наряду с изменением микрофлоры в количественном составе, мы наблюдали изменения и в качественном отношении. В содержимом прямой кишки больных эзофагостомозом свиней патогенные стафилококки составили 66,7%, гемолитические стрептококки - 48,6%, патогенные для белых мышей E.coli - 58,3% от общего числа изученных культур. Высоковирулентными были виды Staph. aureus и Staph. citreus, Str. pyogenes, E. coli серогрупп 08, 09, 0141
У больных трихоцефалезом свиней изменения состава микрофлоры кишечника были почти аналогичными. Так, на 90 сутки инвазии в содержимом прямой кишки больных животных стафилококков было в 1,1 раза, стрептококков - в 1,3 раза, кишечных палочек - в 1,2 раза, клостридий -в 5,2 раза, протея - в 8,5 раза, грибов - в 3,4 раза больше показателей контрольных, интактных свиней. Однако у больных поросят уменьшилось количество лактобацилл в 1,2 раза, бифидобактерий - в 1,1 раза, бактероидов - в 1,6 раза. При паразитировании в кишечнике власоглавов существенно меняется количественный и качественный состав микрофлоры. Так, на 90 сутки инвазии стафилококки в содержимом кишечника составили 67,6%, гемолитические стрептококки - 67,6%, патогенные Е. coli - 73,9% от общего числа изученных культур.
При микстинвазии изменение состава микробиоценоза было более глубоким. Так, на 90 сутки микстинвазии в содержимом прямой кишки общее число стафилококков было в 1,3 раза, стрептококков - в 1,3 раза, E.coli - в 1,4 раза, клостридий - в 11,5 раза, протея - 15,3 раза, грибов - в 4,6 раза больше, но количество лактобацилл было в 1,4 раза, бифидобактерий - в 1,3 раза, бактероидов - в 1,6 раза меньше показателей контрольных, агельминтных свиней. При ассоциированном течение в кишечнике свиней патогенные стафилококки составили 70,8%, гемолитические стрептококки -50%, патогенные для белых мышей E.coli - 75% от общего числа изученных культур.
После дегельминтизации фенбендазолом в кишечнике переболевших животных происходит улучшение количественного и качественного состава биоценоза за счет увеличения облигатной и уменьшения факультативной микрофлоры. При моноинвазии на 90 сутки лечения состав микрофлоры кишечника свиней полностью стабилизируется, тогда как при микстинвазии количественный и качественный состав микрофлоры у переболевших животных существенно отличается от показателей контрольных, интактных животных.
Заключение. У инвазированных аскаридами, эзофагостомами, трихоцефалами и микстин-вазии поросят возникает дисбаланс микрофлоры кишечника, в результате чего в кишечнике увеличивается число представителей факультативной (клостридии, протей, грибы, патогенные E. coli, стафилококки, стрептококки) при уменьшении индигенной микрофлоры (лактобациллы, би-
фидобактерии, бактероиды и непатогенные кокковые формы). Отмеченные изменения состава микробиоценоза характерны для дисбактериоза, который при моноинвазии выражен умеренно, а при микстинвазии - резко.
Библиографический список
1. Иванюк В.П., Глухова Э.Р. Динамика микрофлоры свиней при нематодозах // Актуальные проблемы и перспективы развития агропромышленного комплекса: мат. Международной научно-практической конференции. Иваново, 2013. С. 208-210.
2. Иванюк В.П., Бобкова Г.Н. Эпизоотология кишечных нематодозов свиней в хозяйствах Центрального федерального округа РФ //Вестник Брянской ГСХА. 2016. №6 (58). С. 86-91.
3. Карпеева Е.А. Характеристика микробиоценоза кишечника животных при инвазии Balantidium coli : автореф. дисс. ... канд. биол. наук. Саратов, 2011. 20 с.
4. Ленцер А.А. Лактофлора животного организма и её защитная функция // Теоретические и практические проблемы гнотобиологии. М.: Агропромиздат, 1986. С. 195-200.
5. Панасюк Д.И. Закономерности взаимоотношений сочленов паразитоценоза. Паразито-ценозы и ассоциативные болезни. М.: Колос, 1984. 62 с.
6. Петров Ю.Ф. Паразитоценозы и ассоциативные болезни с./х. животных. Л.: Агропромиздат, 1988. 176 с.
7. Петров Ю.Ф., Иванюк В.П., Рудковская Е.Г. Патогенез микстинвазий свиней // Ветеринария. 2003. № 4. С. 25-26.
8. Петров Ю.Ф. Ассоциативные болезни свиней и их профилактика. Иваново, 1994. 55 с.
9. Разумцова И.А. Распространение ассоциативных паразитов у свиней в Ставропольском крае и разработка эффективных мер борьбы с ними: автореф. дис. ... канд. вет. наук. Ставрополь, 2009. 22 с.
10. Сизова А.В. Значение микрофлоры желудочно-кишечного тракта животных и использование бактерий - симбионтов в животноводстве. М., 1974. 90 с.
11. Шестаков А.В. Нематодозы свиней в мелких свиноводческих хозяйствах Калининградской области // XVII Московский международный ветеринарный конгресс (16-24 апреля): труды. М., 2009. С. 238-239.
References
1. Ivanyuk V.P., Glukhova E.R. Dynamics of Microflora of Pigs with Nematodes Infestation // Current Problems and Prospects of Agribusiness Development: Mat. of International Scientific-Practical Conference. Ivanovo. 2013. P. 208-210.
2. Ivanyuk V.P., Bobkova G.N. Epizootiology of Intestinal Nematodes of Pigs in the Farms of the Central Federal District of the Russian Federation //Vestnik of the Bryansk State Agricultural Academy. 2016. №. 6 (58). P. 86-91.
3. Karpeeva E.A. The Characteristic of Intestinal Microbiota of Animals with Balantidium coli Infestation: Author's Abstract of Dissertation of Kand. of Biol. Sc. Saratov. 2011. 20 p.
4. Lentser A. A. Lactoflora of the Animal Organism and its Protective Function //Theoretical and Practical Problems of Gnotobiology. M.: Agropromizdat. 1986. P. 195-200.
5. Panasyuk D.I. Regularities of the Relationship of Parasitocenosis Members. Parasitocenosis and Associative Diseases. Moscow: Kolos. 1984. 62 p.
6. Petrov Yu.F. Parasitocenosis and Associative Diseases of Livestock. L.:Agropromizdat. 1988. 176 p.
7. Petrov Yu.F., Ivanyuk V.P., Rudkovskaya E.G. The Pathogenesis of Mixed-Invasion of Pigs // Veterinary Medicine. 2003. 34. P. 25-26.
8. Petrov Yu.F. Associative Swine Diseases and their Prevention. Ivanovo. 1994. 55 p.
9. Razumtsova I.A. Distribution of Associative Pigs Parasites in the Stavropol Territory and the Development of Effective Measures to Combat Them: Author's Abstract of Dissertation of Kand. of Vet. Sc.. Stavropol. 2009. 22 p.
10. Sizova A.V. Importance of Microflora of the Gastrointestinal Tract of Animals and the Use of Bacteria as Symbionts in Animal Husbandry. Moscow. 1974. - 90 p.
11. Shestakov A.V. Nematodoses of Pigs in Small Swine-Breeding Farms of the Kaliningrad Region //Papers of the XVII Moscow International Veterinary Congress (April, 16-24). Moscow. 2009. P. 238-239.