CC BY
22
УДК: 615.28:
Гутий Б.В., к.вет.н., доцент © Лъв\всъкый нацюналъныыутеерсытет ветерынарногмедыцыны та бютехнологт Iмет С.З. Гжыцького, м.Лъв\в, Украта
досл1дження токсичност1 препарату "мевесел-
ш'екцшний" в хрон1чномудослщ1
Наведено результаты дослгдження токсычност1 новоствореного препарату «Мевесел-т 'екцтныы» у хротчному досл1д1. Встановлено статистично вгроггдне (р<0,05) збыъшення середнъого часу сну з одночасним зменшенням середнъого часу плавания (р<0,05). Щ зм1ны вказуютъ на порушення дезттоксыкуючог функцИ печткы / загалъты пригтчуючш дп на оргатзм, викликанш довготривалим введениям препарату у доз1 1/20 ЭЬ50. Препарат у дозах 1/50 ЭЬ50 / 1/100 ЭЬ50 не вплывав на результаты функцюналъных проб, що пов 'язано з нормальным функцюнування печтковог тканыны / в1дсуттстю негатывного вплыву на оргатзм тварын, що тдтверджено намы г1столог1чно.
Шсля дослгдження морфолог1чных показнытв кров/ щур1в за внутршнъом 'язового введения "Мевеселу-т 'екцтного" у ргзных дозах, встановлено тенденцт до зныження р1вня гемоглобту та велычыны колъорового показныка та в\рог\дне зменшення тлъкост\ леыкоцыт1в. За велычынамы гематолог1чных та бюх\м\чных показнытв встановлено, що, не зважаючы на нызьку токсычтстъ, " Мевеселу-т'екцшного " в доз1 1/20 та 1/50 ЭЬ50 вплывав на кровотворну функцгю
Шсля введения "Мевеселу-т'екцшного"у доз1 1/20ЭЬ50у сыроватщ кров1 щур1в досытъ высокым бувр1венълужногфосфатазы, вгдповгдноу 1,5разы выще, тж у щур1в контрольног групы. "Мевесел-т 'екцтныы" у дозах 1/20, 1/50 та 1/100 ПЬ5о у сыроватщ кров/ тдвыщував актывтстъ АлАТ, у пор1внянт з щурамы контролъноггрупы, одночасно вгроггдно тдвыщував актывтстъАсАТ.
Отже, створеныы намы новый втчызняныы препарат "Мевесел-т'екцтныы" належытъ до 4-го класу токсычност1, тобто до малотоксычных речовын.
Ключов1 слова: фармаколог1я, токсыколог1я, кров, щур1, препарат "Мевесел-т'екцШный", гексеналовапроба, пробазплаванням.
УДК: 615.28:
Гутый Б.В., к.вет.н.
Лъвовскыы нацыоналъныыуныверсытет ветерынарноымедыцыны ы быотехнологыы ымены С.З. Гжыцкого, Львов, Украына
исследование токсичности препарата "мевесел-инъекционный" в хроническом опыте
Представлены результаты ысследованыя токсычносты препарата «Мевесел-ынъекцыонныы» в хроныческом опыте. Установлено статыстыческы
© Гутий Б.В., 2014
42
достоверное (р <0,05) увеличение среднего времени сна с одновременным уменьшением среднего времени плавания (р <0,05). Эти измененияуказывают о нарушении дезинтоксикационной функции печени и общей подавляющему действию на организм, вызванных долговременным введением препарата в дозе 1/20 DL50. Препарат в дозах 1/50 DL50 и 1/100 DL50 не влиял на результаты функциональных проб, что связано с нормальным функционированием печеночной ткани и отсутствием отрицательного влияния на организм животных, что подтверждено нами гистологически.
После исследования морфологических показателей крови крыс введения "Мевеселу-инъекционного " в разных дозах, установлена тенденция к снижению уровня гемоглобина и величины цветного показателя и достоверное количества лейкоцитов. По величинам гематологических и биохимических показателей установлено, что, несмотря на низкую токсичность, "Мевесела-инъекционного " в дозе 1/20 и 1/50 ЛД50 влиял на кроветворную функцию.
После введения "Мевесела-инъекционного" в дозе 1/20 DL50 в сыворотке крови крыс достаточно высоким был уровень щелочной фосфатазы, соответственно в 1,5 раза выше, чем у крыс контрольной группы. "Мевесел-инъекционный" в дозах 1/20, 1/50 и 1/100 DL50 в сыворотке крови повышал активность АлАТ, по сравнению с крысами контрольной группы, одновременно достоверно повышал активностьАсАТ.
Таким образом созданный нами новый отечественный препарат "Мевесел-инъекционный" относится к 4-го классу токсичности, то есть к малотоксичным веществам.
Ключевые слова: фармакология, токсикология, кровь, крысы, препарат "'Мевесел-инъекционный", гексеналовапроба, пробасплаванием.
udc: 615.28:
Hutiy B.
Lviv National University of Veterinary Medicine and Biotechnologies named after SZ Gzhytskiy, Lviv, Ukraine
RESEARCH OF TOXITY DRUG " MEVESEL INJECTING" IN CHRONIG
EXPERIMENTS
Show the results of toxicity studies of the newly created drug "Mevesel-injection" in the chronic experiment. Was found statistically significant (p <0.05) increase in the average sleep time while decreasing the mean time swimming (P <0.05). These changes indicate on breach of the liver detoxification function and overall depressing effect on the body caused by long-term administration of the drug at a dose of 1/20 DL50. The drug in doses of 1/50 and 1 DL50 / DL50100 had no effect on the results offunctional tests, due to the normal functioning of liver tissue and no negative impact on animals, as confirmed us histologically.
After the study of the morphological parameters of blood in rats by intramuscular injection by the "Mevesel-injection" in different doses, was found tendency to reduce of hemoglobin and color index values and the likely reduction in the number of white blood cells. For values of hematological and biochemical parameters revealed that, despite the low toxicity, "Mevesel-injection" in a dose of 1/20 and 1/50 DL50 affect the hematopoietic function.
43
After entering "Mevesel-injection" at a dose of 1/20 DL50 in serum of rats was quite high levels of alkaline phosphatase, respectively, in 1.5 times higher than in the control group of rats. "Mevesel-injection" in doses of 1/20, 1/50 and 1/100 DL50 in serum ALT activity increased as compared with rats in the control group, while significantly increased the activity of AST.
So we've created a new national drug "Mevesel-injection" it refers to a 4 grade of toxicity, that is, to low-toxic substances.
Key words: pharmacology, toxicology, blood, rats, the drug "Mevesel-injection" hexenal test, test of swimming.
KpiM високо1 фармаколопчно! активное^, одшею з найважливших вимог до лжарських препаратов е ix безпека. Важливо, щоб л1карськ1 препарата, як1 використовуються з терапевтичною метою, проявляли мЫмальний негативний вплив на стан i функци систем, оргашв i оргашзм в цшому. Властиво тому, вивчення токсичних властивостей перспективних лжарських засоб1в е важливим етапом до клмчних дослщжень.
Метою першого етапу дослщжень було вивчення хрошчно! токсично! препарату «Мевесел-ш'екцшний».
Матер1али та методи дослщжень. Шсля вивчення хрошчно! токсичност1 керувалися результатами, отриманими пщ час проведения гостро! токсичности Препарат застосовували щоденно, внутршньом'язово. Впродовж дослщу проводили спостереження за клшчним станом та поведшкою тварин.
Хрошчну токсичшсть вивчали на 40 бших щурах масою 90-110 г. Було сформовано по 4 однаков1 за к1льк1стю та масою групи, по 10 щур1в кожна. Перша (I) група тварин була контрольною. 1м вводили ¿зотошчний розчин натр1ю хлориду. Тваринам шших трьох груп вводили "Мевесел" у дозах: II групи - 250 мг/кг (1/20 DL 50), HI групи - 100 мг/кг (1/50 DL 50) та IV групи - 50 мг/кг (1/100 DL 50). У хрошчному доелвд "Мевесел" вводили щурам протягом 30 Д1б.
На 31 добу в1д початку введения препарату на 5 бших щурах ¿з кожно! групи провели визначення дез1нтоксикуючо! функц1! печ1нки за допомогою гексеналово! проби (Розин Д.Г., 1964) [1]. Для цього лабораторним тваринам внутр1шньоочеревинно вводили 1%-й розчин гексеналу в доз1 45 мг/кг. Пот1м реестрували середн1й час сну вщ моменту коли тварина приймала бокове положения.
Одночасно на шших 5 щурах проводили пробу з плаваниям за М.Л. Риловою (1964) [2]. Для проведения дослщу використовували скляний аквар1ум. Стовп води в aKBapiyMi - 50 см. Температура води - 12-13 °С. Дослщним тваринам прикр1плювали вантаж (металев1 наважки) - 5% в1д маси тша. Перед початком досл1ду щура зважували i прикр1плювали на хв!ст вщповщний до його ваги вантаж. Пот1м пускали плавати одночасно досл1дних i контрольних тварин, приблизно однаково! ваги. Слщкували, що тварини пост1йно плавали. Показником працездатност1 е час, упродовж якого тварина може протриматись на водг Плавали тварини до повного опускания на дно.
44
На наступну добу лабораториях тварин за легкого еф1рного наркозу декаттували, проводили гематолопчш \ бюх1м1чш дослщження за загально-визиаиими методиками та проводили патологоанатом1чний розтии { визиачали коефщенти маси оргашв, пор1вняно з контрольною групою.
Результати дослщжень. Шсля проведения дослщу з вивчення хрошчно! токсичност1 загибел1 щур1в не встановлено.
Результати гексеналово! проби \ проби з плаваниям, яю були проведен! теля закшчення введения препарату в хрошчному дослда, наведено в таблиц! 1.
Таблиця 1
Група тварин Доза препарату Гексеналова проба Проба з плаваниям
Середнш час сну, хв. Середнш час плавания, хв.
1 контрольна 28,8±1,66 12,84±1,51
2 1/20 БЬ 50 36,6±1,66* 9,01±1,32*
3 1/50 БЬ 50 31,2±0,65 11,22±1,82
4 1/100 БЬ 50 29,8±1,99 13,13±1,68
Примтка:стутнъ в1рог1дност1 пор1вняно з даними контрольноI групи —р< 0,05-*, р<0,001-* *
Статистично в1рогщне (р<0,05) збшьшення середнього часу сну з одночасним зменшенням середнього часу плавания (р<0,05) спостер1гали у тварин 2 групи. Ц1 змши вказують на порушення дезштоксикуючо! функцп печшки I загально! пригшчуючо! на оргашзм, викликаних довготривалим введениям препарату у доз1 1/20 ВЬ50. Препарат у дозах 1/50 ВЬ50 I 1/100 ВЬ50 не впливав на результати функцюнальних проб, що пов'язано з нормальним функцюнування печшково! тканини I вщсутшстю негативного впливу на оргашзм тварин 3 I 4 груп.
На 31-ту добу дослщу, теля введения препарату у дозах 1/20 БЬ50 та 1/50 БЬ 50 встановлено деяю змши коефщ1ент1в маси печшки, пор1вняно з контрольною групою (табл. 2).
Таблиця 2
Коефщ1енти маси внутр1шшх оргашв бших щу|мв на 31-ту добу
за вивчення хротчиоУтоксичностг "Мевесел- ш'екцшний" (М±т, п=6)
Внутршт органи Дози препарату
Контроль 1/20 ЛД50 1/50 ЛД50 1/100 ЛД50
Легеш 8,4±0,34 9,6±1,41 8,2±0,37 9,5±0,71
Печшка 33,1±0,49 44,3±2,80** 36,3±0,73* 32,8±0,49
Нирка права 3,3±0,20 3,7±0,21 3,3±0,11 3,1±0,20
Нирка л1ва 3,7±0,21 3,9±0,20 3,4±0,19 3,3±0,11
Серце 3,4±0,16 3,8±0,48 3,8±0,41 3,6±0,42
Селезшка 5,5±0,34 5,8±0,30 4,8±0,42 4,9±0,46
Примтка:стутнъ в1рог1дност1 пор1вняно з даними контрольноI групи —р< 0,05-*, р<0,001-* *
Отже, препарат "Мевесел-ш'екцшний" при введенш в дозах 1/20 ОЬ50 та 1/50 ОЬ50 протягом 30 д1б суттево впливае на функцюнальний стан внутршшх оргашв дослщних тварин (печшки).
45
Пкля дослщження морфолопчних показниюв кров1 щур1в за внутршньом'язового введения "Мевеселу-ш'екцшного" у р1зних дозах, встановлено тенденцш до зниження р1вня гемоглобшу та величини кольорового показника та в1рогщне зниження кшькост1 лейкоцит1в, пор1вняно з контрольною групою, в ус1х дослщних трупах (табл. 3).
Таблиця 3
МорфолоНчш показники кров1 бших щур1в на 31-ту добу дослвду за
вивчення хромчно! токсичного "Мевесел-ш'екцшний" (М±т, п=24)
Показники Трупа
К 1/20 1/50 1/100
Гемоглобш, г/л 76,6±5,74 70,6±4,27 93,3±13,03 93,3±2,23
Еритроцити, Т/л 4,8±0,40 5,5±0,42 5,4±0,60 5,5±0,37
Гематокрит, % 32,0±2,08 28,0±2,50 36,7±4,20 27,0±4,45
Кольоровий показник 0,72±0,05 0,57±0,06 0,77±0,02 0,77±0,05
Середнш вм1ст гемоглоб1ну в еритроцип, пг 16,0±1,15 12,8±0,26 17,1±0,45 17,1±1,09
Середня концентращя гемоглоб1ну в еритроцип, г/дл 23,8±0,38 24,9±0,93 25,3±0,67 34,6±0,67**
Середнш об'ем еритроципв, мкм3 67,0±1,15 51,5±2,12* 67,8±1,57 69,7±3,27
Лейкоцити, 109/л 3,7±0,76 3,5±1,32 3,7±1,35 4,2±1,62*
Еозиноф1ли, % 4,7±0,67 6,0±1,15 6,0±1,16 4,3±0,68
Нейтрофши, % 21,3±2,90 22,7±1,87 31,0±3,02 11,75±2,39
Л1мфоцити, % 72,3±2,90 70,0±3,06 61,3±1,70* 62,7±1,33*
Моноцити, % 1,7±0,33 1,3±0,70 1,7±0,70 2,0±0,31
Примтка:стутнъ в1рог1дност1 пор1вняно з даними контрольноI групи —р< 0,05-*, р<0,001-* *
Шсля введения "Мевеселу-ш'екцшного" кшьккть л1мфоцит1в у доз1 1/50 ВЬ50 та 1/100 БЬ50 достов1рно знизилась на 8,5 % та 8,7 % вщповщно. В IV груш за введения " Мевеселу-ш'екцшного" в доз1 1/100 ВЬ50 встановлено збшьшення кшькосп еритроцшгв та в1рогщне збшьшення середньо! концентрацп гемоглобшу в еритроцитг
Таблиця 4
Бшх1м1чш показники кров! бших щур1в на 31-ту добу дослвду теля
вивчення хромчно! токсичного "Мевесел-т'екщйний" (М±т, п=24)
Показники Групи тварин
Контрольна 1/20 ЛД50 1/50 ЛД50 1/100 ЛД50
Бшок загальний, г/л 8,4±0,25 8,76±0,78 9,0±0,29 9,1±0,47
ЛФ, Од./л 157,5±31,8 239,9±38,9* 187,8±51,1 176,3±16,05
АлАТ, Од./л 70,5±6,43 82,0±7,13 75,4±6,73 63,1±7,97
АсАТ, Од./л 202,4±10,54 254,9±9,94* 202,9±24,34 182,3±44,26
Лшди загальш, г/л 8,4±1,00 8,0±2,87 7,3±0,62 8,2±0,98
Сечовина, ммоль/л 6,2±0,35 4,8±0,38 4,9±0,30 7,4±0,53
Креатинш, ммоль/л 107,9±15,5 107,0±8,47 114,8±12,6 128,5±10,90
Молекули середньо! маси 1,19±0,01 1,12±0,06 1,16±0,01 1,15±0,03
Примтка:стутнъ в1рог1дност1 пор1вняно з даними контрольноI групи —р< 0,05-*, р<0,001-* *
46
3 анал1зу лейкоцитарного профшю встановлено в IV rpyni, пор1вняно з контрольною групою, в1рогщне збшьшення кшькост1 лейкоцит1в та в1рогщне зменшення л1мфоцит1в у тварин III i IV груп.
Шсля введения "Мевеселу-ш'екцшного" у доз1 1/20 DL50 у сироватщ кров! щур1в досить високим був р1вень лужно! фосфатази, вщповщно у 1,5 рази вище, шж у щур1в контрольно! груии. "Мевесел-ш'екцшний" у дозах 1/20, 1/50 та 1/100 DL50 у сироватщ кров1 пщвищував р1вень АлАТ, у пор1внянш з щурами контрольно! груии, одночасно в1рогщно пщвищував активнють АсАТ у тварин II груии (табл. 4).
Отже, при вивченш токсично! дп препарату "Мевесел-1н'екц1йний" в хрон1чному досл1д1, за величинами гематолог1чних та бюх1м1чних показник1в встановлено, що, не зважаючи на низьку токсичн1сть, "Мевесел" в доз1 1/20 та 1/50 ЛД50 впливав на кровотворну функц1ю (збшьшення кшькост1 лейкоцит1в, зменшення л1мфоцит1в у тварин III i IV груп).
Висновки.
1. Новостворений нами в1тчизняний препарат " Мевесел-1н'екц1йний " належить до 4-го класу токсичност1, тобто до малотоксичних речовин.
2. Введения препарату у зростаючих дозах суттево впливае на функц1ональний стан внутршшх орган1в досл1дних тварин (печ1нки) та викликае деструкц1ю мембран гепатоцит1в, про що вказуе п1двищення активност! внутр1шньокл1тинних ензим1в АлАТ, АсАТ i лужно! фосфатази.
Л1тература
1. Розин Д.Г. Современная оценка токсичности хлорпроизводных углеродов жирного ряда по гексеналовому тесту на белых мышах // Фармакология и токсикология. - 1964. № 5. - С.613-614.
2. Рылова М.Л. Методы исследования хронического действия вредных факторов среды в эксперименте. - Л. - 1964. - 227 с.
3. Гутий Б.В.,Гуфрш Д.Ф., Xapiß I.I. Препарат «Мевесел-шекцшний» -Техн1чн1 умови ТУ У 10.9-00492990-002:2013
4. Bogdan Gutij. Wplyw dodatkow paszowych Meweselu i Metifenu na poziom produktow peroksydacji lipidow w warunkach przewleklego zatrucia kadmem / Pasze przemyslowe slowe NR4/2013. st. 24-26.
5. Гутый Б.В. Влияние мевесела и е-селена на процессы перекисного окисления липидов и антиоксидантную систему организма бычков при кадмиевом токсикозе / Б.В. Гутый // Научно-практический журнал. Ученые Записки. Витебск, 2013. - Т. 49. - Вып. 2. - Ч. 2. - С. 38-43.
6. Гутый Б.В. Влияние мевесела и Е-селена на активность ферментов системы антиоксидантной защиты организма бычков при кадмиевой нагрузке / Б.В. Гутый // Вестник Саратовского госагроуниверситета им. НИ. Вавилова.-Саратов, 2014.- № 2.- С. 3-6.
Рецензент - д.вет.н., професор Стибель В.В.
47
