CC BY
32
УДК 636.09:616.993.1:635.5
Xapiß I.I., Стибель В.В., Гуфрш Д.Ф, Гутий Б.В., Павл1в О.В. ©
Лъв\всъкий нацюнальнийутеерситет еетеринарногмедицини та бютехнологт iMeni С.З. Гжицъкого, м. Лъвгв, Украгна
ВИВЧЕННЯ Г0СТР01 ТОКСИЧНОСТ1 «АМПРОЛ1НСИЛУ»
У cmammi розглядаютъся результаты експерименталъних дослгдженъ гз вивчення moKCUHHOcmi «Ампролтсилу» на тфузор1ях та на лабораторных тваринах. Встановлено, що у 10% концентрацИ «Ампролтсил» за 15 хв. спричинив загибелъ 22% тфузорт. У решти парамецт було сповыьнення активно! рухливост1. За 60 хв. встановлено загибелъ 50% тфузорт, а за 24 yci парамецИ загинули. У тфузорт, що загинули, встановлено зменшення po3Mipie клтин, клтинног оболонки. У 20% концентрацИ «Ампролтсил» за 15 хв спричинив загибелъ маиже 50% парамецт. За 30хв загинуло 75%, а за 60 хв -100% тфузорт. За внутрШнъошлункового введения быим щурам встановлено, що препарат "Ампролтсил", у do3i 5000мг/кг маси тыа i вище, спричиняв появу клтгчних ознак ттоксикацп еже через 4-5 годин, ям характеризувалися порушенням координацгг pyxie, тремором окремих м'яз1в. Загибелъ тварин проходила протягом 1-4 di6. Кглъкгстъ тварин, що загинули, перебувала в прямт залежност1 eid введеного препарату у певши do3i. Шсля внутр1шнъо шлункового введения быим мишам встановлено, що препарат "Ампролтсил" у do3i 4000 мг/кг маси тыа i вище спричиняв клтгчт ознаки iнтоксикацИ через 56 годин, ят характеризувалися порушенням координацгг pyxie, тремором окремих м'яз1в. Тварини збивалися у групи, намагалисъ заховатися у тдстилку. Загибелъ мишеи проходила протягом 1-3 di6 в прямт залежност1 введеного препарату в певши do3i. Введения тдикам препарату в дозах 5, 25 г 50 г/кг маси тыа не викликало загибел1 дослгдних nmaxie упродовж усъого часу спостереження. Шсля введения препаратуу do3i 50 г/кгутдичат спостер1гали ргзке пригтчення, вгдмову eid корму, реакщя на подразники eidcymm. На наступну добу стан nmaxie значно покращився, а на 3-4-ю добу змт в клшчному стат до^дних тварин nopieнянo з контрольною групою не спостерйали. У peзyлъmami до^дженъ i3 вивчення гострог m0KCU4H0cmi «Ампролтсилу» в do^idax на парамещях за показниками ЛК100 - концентращя препарату, за яког за 48 год гине 100% парамещи та на лабораторних тваринах, новии втчизняний протипротозоинии препарат «Ампролтсил» належитъ до малотоксичних лтарсъких 3aco6ie.
Ключов{ слова: фapмaкoлoгiя, гостра токсичтстъ, бровтакокцид, «Ампролтсил», тдики, еимерИ, zicmoMonadu.
УДК 636.09:616.993.1:635.5
Харив И.И., Стибель В.В., Гуфрий Д.Ф Гутый Б.В., Павлив О.В.
Львовский националъныйуниверситет ветеринарноймедицины и биотехнологий имени С. З. Гжицкого, г. Львов, Украина
ИЗУЧЕНИЕ ГОСТРОЙ ТОКСИЧНОСТИ «АМПРОЛИНСИЛА»
В статье рассматриваются результаты экспериментальных исследований по изучению токсичности «Ампролинсила» на инфузориях и на лабораторных животных. установлено, что в 10% концентрации
© XapiB I.I., Стибель В.В., Гуфрш Д.Ф, Гутий Б.В., Павл1в О.В., 2014
376
«Ампролинсил» за 15 мин причинил гибель 22% инфузорий. У остальных парамеций было замедление активной подвижности. За 60 мин установлена гибель 50% инфузорий, а за 24 часа все парамеции погибли. В инфузорий, погибших установлено уменьшение размеров клеток, клеточной оболочки. В 20% концентрации «Ампролинсил» за 15 мин причинил гибель почти 50% парамеций. За 30мин погибло 75%, а за 60 мин - 100% инфузорий. После внутрижелудочного введения белым крысам????? установлено, что препарат "Ампролинсил" в дозе 5000 мг / кг массы тела и выше вызывал появления клинических признаков интоксикации уже через 4-5 часов, которые характеризовались нарушением координации движений, тремором отдельных мышц. Гибель животных проходила в течение 1-4 суток. Количество животных, погибших, была в прямой зависимости от дозы введенного препарата. После внутрижелудочного введения белым мышам????? установлено, что препарат "Ампролинсил" в дозе 4000 мг / кг массы тела и выше вызывал клинические признаки интоксикации через 5-6 часов, которые характеризовались нарушением координации движений, тремором отдельных мышц. Животные сбивались в группы, пытались спрятаться в подстилку. Гибель мышей проходила в течение 1-3 суток в прямой зависимости введенного препарата в соответственной дозе. Введение индюкам препарата в дозах 5, 25 и 50 г / кг массы тела не вызывало гибели исследовательских птиц на протяжении всего времени наблюдения. После введения препарата в дозе 50 г / кг в индюшат наблюдали резкое угнетение, отказ от корма, реакция на раздражители отсутствовала. На следующие сутки состояние птиц значительно улучшилось, а на 3-4 и сутки изменений в клиническом состоянии подопытных животных по сравнению с контрольной группой не выявляли. У результате исследований по изучению острой токсичности «Ампролинсила» в опытах на парамеции по показателям ЛК100 - концентрация , при которой за 48 ч погибает 100% парамеций, и на лабораторных животных новый отечественный противопротозойный препарат «Ампролинсил» относится к малотоксичным лекарственным средствам.
Ключевъш слова: фармакология, гострая токсичность, бровитакокцид, «Ампролинсил», индюки, эймерии, гистомонады.
UDC 636.09:616.993.1:635.5
I. Chariv, B. Stybel, D. Hufrij, B. Gutij, O. Pavliv
Lviv National University of Veterinary Medicine and Biotechnologies named after S. Z.Gzhytskyj
STUDY OF ACUTE TOXICITY "AMPROLINSYLU"
he article reviews the results of experimental studies of the toxicity study "Amprolinsylu" on infusoria and in laboratory animals. Found that in 10% concentration "Amprolinsyl" for 15 minutes. caused the deaths of 22% of ciliates. The rest was slowing parametsiy active mobility. For 60 minutes. found death in 50% of ciliates and 24. All parametsiyi died. In ciliates killed installed reducing the size of the cells, the cell membrane. In the 20% concentration "Amprolinsyl" for 15 minutes caused the deaths of almost 50% parametsiy. For 30 minutes lost 75%, and for 60 minutes - 100% ciliates. For intra gastric administration white rats found that the drug "Amprolinsyl", at a dose of 5000 mg / kg and above caused the onset of clinical signs of intoxication after 4-5 hours, and marked by poor coordination of movements,
377
tremor individual muscles. The death of animals held for 1-4 days. Number of animals killed was directly dependent on the drug in a particular dosage. After intra gastric administration white mice found that the drug "Amprolinsyl" at a dose of 4000 mg / kg and above caused the clinical signs of intoxication after 5-6 hours, and marked by poor coordination of movements, tremor individual muscles. Stray animals in the group tried to hide in the litter. The death of the mice held for 1-3 days in direct proportion of the drug in a particular dosage. Introduction turkey drug in doses of 5, 25 and 50 g / kg did not cause death of birds throughout the experimental observation time. After injection at a dose of 50 g / kg in turkeys observed a sharp depression, refusal to feed, no response to stimuli. On the following day the state bird is much improved, and the 3-4 th day changes in the clinical condition of experimental animals compared with the control group were observed. The studies of acute toxicity study "Amprolinsylu" in experiments on parametsiyah on indicators LK100 - drug concentration at which 48 hours killed 100% parametsiy and in laboratory animals, domestic new antiprotozoal drug "Amprolinsyl" refers to low-toxic drugs.
Key words: pharmacology, acute toxicity, brovitacoccides, "Amprolinsile", Silybum marianum, turkeys, eimeria, histomonades
Актуальшсть теми. У проведених попередшх дослщженнях встановлено, що за еймерюзо-пстомонозно! швази шдиюв високу терапевтичну ефектившсть проявляв бров1такокцид за сукупного застосування з плодами розторопш1 плямисто! [1,2,3,4]. Бров1такокцид - це 12,5% премжс, що мютить: ампрол1уму хлористоводневого 12,5 г, в1тамшу А - 1млн ОД, в1тамшу К - 200 мг, борошна кукурудзяного до 100г. Ампрол1ум - протиеймерюзний препарат групп бензамщазол1в. В оргашзм1 еймерш ампрол1ум блокуе метабол1зм глюкозо-6-фосфатдегщрогшазу, що призводить до розлад1в обмшу вуглевод1в i загибел1 паразитсв. Оскшьки в тонкому кишечнику, де паразитують еймери, настае деструкщя еттел1альних кл1тин слизово! оболонки, це призводить до катарального запалення, токсини еймерш затримують згортання кров1, тому в склад1 комплексного препарату бров1такокциду наявний в1там1н К, що д1е гемокоагулянтно, та в1тамш А, що активуе регенерац1ю еттелш слизових оболонок. У ряд1 експериментальних досл1джень встановлено, що за протозойних ¿нваз1й пригн1чуеться стан ¿мунно! системи, внасл1док чого у тварин i птиц1 розвиваеться вторинний ¿мунодеф1цит. У таких тварин протозойна ¿нваз1я ускладнюеться в1русною i бактер1альною м1крофлорою [5,6]. У наших дослщженнях на штактних шдиках встановлено, що бров1такокцид нав1ть у терапевтичн1й доз1 (2 г/кг корму) пригшчуе ¿мунну систему птищ. Враховуючи вищевикладене про ¿мунодепресивну дш бров1такокциду, ми розробили метод л1кування ¿ндик1в, п1сля якого застосовували бров1такокцид сукупно з плодами розторопш1 плямисто! - по 2 г/кг корму обох препарат1в 5 д1б поспшь. Висока терапевтична ефективн1сть плод1в розторопш1 плямисто! зумовлена флавол1гнанами групи «Сил1марину». Останн1 блокують надм1рне перекисне окиснення л1п1д1в i захищають кл1тинн1 мембрани в1д агресивних форм кисню. Усе це забезпечуе препарату високу гепатопротекторну та антиоксидантну д1!. Другим надзвичайно важливим компонентом плод1в розторопш! плямисто! е широкий Ha6ip i високий р1вень в!там1н1в. Зокрема,
378
в1тамш С (аскорбшова кислота) активуе синтез антитш - ¿муноглобулш1в клаЫв IgA та IgM. В1там1н С посилюе актившсть компонента, пщвищуе ¿мунну функцш штерферону та посилюе неспециф1чну ланку ¿мунного захисту оргашзму проти бактер1альних шфекцш [253]. В1тамш К, що входить до складу розторопш1 забезпечуе стабшьне згортання кров1, а мшроелементи Купрум, Ферум i Кобальт беруть участь в еритропоезь В1тамш A i Е забезпечують швидку регенерацш еттелш кишечника ураженого еймер1ями [7]. Внаслщок детального вивчення фармакодинамжи бров1такокциду i плод1в розторопш1 плямисто!, для л1кування птищ, уражено! еймер1ями i пстомонадами, ми розробили препарат «Ампролшсил». Цей препарат мютить ампрол1ум -протиеймерюзний 3aci6 i сил1марин - антиоксидантний, гепатопротекторний та ¿муностимулювальний 3aci6. Ампролшсил призначений для профшактики та л1кування птищ при протозоонозах, особливо за змшаних асощативних шваз1ях. 3 профшактичною метою задають i3 кормом 1 г/ кг корму, з л1кувальною - 2 г/ кг корму. Як i в препарат! бров1такокцид, «Ампролшсил» мштить ампрол1ум хлористоводневий, що д1е протипротозойно. Замють синтетичних в1тамш1в A i К у даний препарат входять розмелеш плоди розторопш1 плямисто!, що мютять природш в1тамши А, К, Е, групу В та мжроелементи: Купрум, Ферум, Кобальт та rnmi, що значно розширюють та пщвищують фармаколопчну дш препарату «Ампролшсил». У вщповщност1 з методичними рекомендациями з доклмчного вивчення лжарських препарат1в [8], кожний новий препарат необхщно дослщити за такими показниками: визначити токсичшсть «Ампролшсилу» бюпробою на шфузор1ях; установите токсичшсть препарату "Ампролшсил" на лабораторних тваринах теля одноразового введения-(гостра токсичшсть); дослщити кумулятивш властивост1 препарату на бших щурах; дослщити токсичшсть "Ампролтсилу" на лабораторних тваринах теля довготривалого введения (хрошчна токсичшсть); вивчити ефектившеть "Ампролшсилу". Дослщження проводили вщповщнодо методичних рекомендацш "Токсиколопчний контроль нових засоб1в захисту тварин" i "Доклмчш дослщження ветеринарних лкарськихзасоб1в" [9,10].
Матер1ал i методи. Виходячи з цього, ми визначили мету роботи, а саме вивчити токсичшсть «Ампролшсилу» на шфузор1ях та на лабораторних тваринах i на основ! цих даних дати обгрунтування застосування «Ампролшсилу» у практищ ветеринарно! медицини.
Дослщи проводили на шфузор1ях Paramecium caudatum за методикою Е.Г.Голубково! у модифкаци ДНДК1 ветеринарних препарат1в i кормових добавок [243]. Культуру шфузорш вирощували в пептоновому середовищ1, що в 100мл дистильовано! води мктить: пептону - 2 г, глюкози - 0,5 г, др1жджового екстракту 0,1 г, сол1 морсько! 0,1 г. У флакон антибютика наливали 10 мл пептонового середовища i вносили 0,2 мл шокуляту парамецш. Перед тестуванням готували 10- i 100- кратш розведення «Ампролшсилу». Для його отримання до 9 мл культури шфузорш додавали 1 мл розчину «Ампролшсилу». Шдрахунок шфузорш проводили за допомогою л1чильно! камери Богорова. Загальна кшьюсть шфузорш у кожному доелвд 100-150 екземпляр1в, у
379
стацюнарнш фаз! росту в якш бшьшшть кл1тин були великих розм1р1в. Кожен дослщ проводили у 5 разовш повторноси. За допомогою бшокулярного мжроскопа «МБС - 9», за збшьшення 6 х 4, пщраховували загальну кшьккть шфузорш до введения «Ампролшсилу», та кшькють кл1тин, яю загинули за 15, 30 I 60 хв та 24; 48 год теля введения «Ампролшсилу». Токсичшсть «Ампролшсилу» в гострому дослщ! на шфузор!ях визначали за тест-критер1ем ОЬ100 - концентращя препарату, за яко! гине 100 % кл1тин. Встановлення параметр1в гостро! токсичност! препарату. Дослщи з вивчення гостро! токсичност! препарату "Ампролшсилу" проводили на 30 бших щурах, 2-3 -мюячного вшу, масою 170-190 г та 30 бших мишах 2-3 - мюячного вшу, масою 19-22 г. Препарат вводили у шлунок пщдослщним тваринам за допомогою металевого зонда для лабораторних тварин натще, одноразово. Дослщ проведено на 5 трупах тварин, по 6 тварин у кожнш. Препарат вводили лабораторним тваринам у наступних дозах: для бших щур1в - 4000, 5000, 6000, 7000, 8000 мг/кг за дшчою речовиною (Д.Р.) 1 для бших мишей - 3000, 4000, 5000, 6000, 7000 мг/кг (за ДР.). Вивчення гостро! токсичност! препарату "Ампролшсил" для ¿ндиюв проводили на молодняку 25-денного в1ку, масою тша 1000-1200 г. Препарат вводили у зоб дослщним шдичатам у дозах: 5, 25 I 50 г/кг маси тша птах1в. Висою дози препарату вводили др1бними частинами з штервалом 2-3 години. Шсля введения препарату спостереження за лабораторними тваринами та птицею вели протягом 14 д1б. У першу добу дослщу тварини знаходились пщ постшним наглядом. Шсля цього враховували таю показники: загальний стан, зовшшнш вигляд, особливост! поведшки тварин, штенсившсть та характер рухливо! активное^, наявшеть судом, координацш рух1в, реакцш на зовшшш подразники (тактильш, звуков!, свалов!), стан волосяного покриву, видимих слизових оболонок, в!дношення до корму, ритм, частоту дихання, час виникнення та характер штоксикаци, !! важккть, переб!г, час загибел! тварин або !х одужання. П!д час дослщу враховували загибель лабораторних тварин та, залежно в!д д!! препарату в певнш доз!, вираховували середньосмертельн! дози (БЬ50) дано! л!карсько! форми за методом Г. Кербера.
Результати дослщжень та 1*х обговорення.
1. Токсичшсть «Ампролшсилу» на ¡нфузор1ях
У результат! проведених досл!джень (табл. 1) встановлено, що в 1% концентрац!! (терапевтична) «Ампрол!нсил» не спричиняе загибел! шфузорш.
Таблиця 1
Час загибел1 шфузорш за дй' «Ампролшсилу» в рпних коицентращях
Концентращя препарату Вщсоток шфузорш, яш загинули
15хв 30хв 60хв 24год 48год
1% - - - - -
10% 22 37 62 100 +
20% 45 75 100 + +
Приметка: - вщеутшеть загибел! шфузорш; + абсолютна загибель шфузорш.
380
Хоча в nepmi 30 хв кл1тини були збуджеш, на що вказуе прискорений хаотичний рух. У окремих особин можна було бачити швидке обертання навколо умовно! перпендикулярно! Bici тша кл1тини.
У 10% концентрацп «Ампролшсил» за 15 хв. спричинив загибель 22% шфузорш. У решти парамецш було сповшьнення активно! рухливостг
За 60 хв встановлено загибель 50% шфузорш, а за 24 год. yci парамеци загинули. У шфузорш, що загинули, встановлено зменшення po3MipiB кл1тин, кл1тинно! оболонки.
У 20% концентрацп «Ампролшсил» за 15 хв спричинив загибель майже 50% парамецш. За 30хв загинуло 75%, а за 60 хв - 100% шфузорш.
2. Гостра токсичшсть. За внутршньошлункового введения бшим щурам встановлено, що препарат "Ампролшсил", у доз! 5000 мг/кг маси тша i вище спричиняв появи клмчних ознак штоксикацп вже через 4-5 годин, яю характеризувалися порушенням координацп pyxiB, тремором окремих м'яз1в. Загибель тварин проходила протягом 1-4 д1б. Кшькють тварин, що загинули, була в прямш залежност1 в1д дози введеного препарату.
Матер1али отриманих даних досл1джень та пщрахунки DL50 препарату наведен! у таблиц! 2.
DL50 розраховували за формулою:
DL50= ЛД100 - S (z d)/ m,
де: DL100 - доза, вщ яко! загинули Bci тварини;
S - символ суми;
z - половина загально! кшькост! тварин, як! загинули в!д ди досл!дного препарату у двох наступних дозах;
d - р!зниця двох наступних доз;
m - кшьккть тварин у rpyni на кожну дозу.
DL 50 = 8000 - [(1000+2500+3500+5500):6] = 5916,7 мг/кг.
Таблиця 2
Середньосмертельн1 дози препарату "Ампролшсилу" на б1лих щурах
за внутр1шньошлункового введения п1сля обчислення за методом __Г. Кербера ___
Препарат у доз1, мг/кг 4000 5000 6000 7000 8000
Вижило 6 4 3 1 0
Загинуло 0 2 3 5 6
Z 1,0 2,5 3,5 5,5
d 1000 1000 1000 1000
z d 1000 2500 3500 5500
Отже, DL50 препарату "Ампрол!нсил" при внутр!шньошлунковому введенш б!лим щурам становить 5916,7 мг/кг.
Пкля внутр!шньошлункового введения б!лим мишам встановлено, що препарат "Ампрол!нсил" у доз! 4000 мг/кг маси тша i вище спричиняв кл!н!чн! ознаки ¿нтоксикац!! через 5-6 годин, як! характеризувалися порушенням координаци pyxiB, тремором окремих м'яз!в. Тварини збивалися у групи,
381
намагалися заховатися у пщстилку. Загибель мишей проходила протягом 13 д1б в прямш залежноси вщ введеного препарату в певнш дозг
Матер1али отриманих даних дослщжень та пщрахунки БЬ50 препарату висв1тлет у таблиц! 3.
БЬ50 розраховували за формулою: БЬ5о= ЛДюо - X (ъ ё)/ т,
де: ВЬ100 - доза, вщ яко! загинули вс1 тварини; £ - символ суми;
ъ - половина загально! кшькост1 тварин, як1 загинули вщ двох наступних
доз;
ё - р1зниця двох наступних доз;
т - кшьккть тварин у груш на кожну дозу.
БЬ5о = 7000 - [(500+2000+3500+5000):6] = 5166,7 мг/кг.
Таблиця 3
Середньосмертельш дози препарату "Ампролшсилу" на бших мишах
за внутр1шньошлункового введения теля обчислення за методом __Г. Кербера ___
Препарат у доз1, мг/кг 3000 4000 5000 6000 7000
Вижило 6 5 3 2 0
Загинуло 0 1 3 4 6
Ъ 0,5 2,0 3,5 5,0
ё 1000 1000 1000 1000
ъ ё 500 2000 3500 5000
Отже, ОЬ50 препарату "Ампролшсилу" теля внутршньошлункового введения бщим мишам становить 5166,7 мг/кг.
Введения шдикам препарату в дозах 5, 25 \ 50 г/кг маси тша не викликало загибел1 дослщних птах1в упродовж усього часу експерименту. Шсля введения препарату у доз1 50 г/кг у шдичат виявили р1зке пригшчення, вщмову вщ корму, реакщя на подразники вщеутня. На наступну добу стан птах1в значно покращився, а на 3-4-ю добу змш в клмчному сташ дослщних тварин у пор1вняно з контрольною групою не встановили.
Даш дослщжень наведен! у таблиц! 4.
Таблиця 4
Показники токсичностгпрепарату на ¡ндиках_
Кшьшсть тварин у груш Препарат у доз1, г/кг Число загиблих тварин
всього у % середнш час загибел!
3 5 0 0 0
3 25 0 0 0
3 50 0 0 0
Отже, ЛД50 за його внутршньо шлунковому введенш лабораторним тваринам "Ампролшсилу" (бш миш1 та щури) е бшьшою 5000 мг/кг.
382
Висновки.
1. У результат! дослщжень Í3 вивчення гостро! токсичност1 «Ампролшсилу» в дослщах на парамещях за показниками ЛК1оо - концентращя препарату, за яко! за 48 год гине 100% парамецш, та на лабораториях тваринах новий в1тчизняний протипротозойний препарат «Ампролшсил» належить до малотоксичних лжарських засоб1в (4-й клас токсичност1 за ГОСТ 12.1.007-76).
Л1тература
1. Xapiß I.I. Вплив po3Toponmi плямисто! на показники неспециф1чно! резистентное^ оргашзму шдиюв. // Науковий bíchhk Льв1вського нацюнального ушверситету ветеринарно! медицини та бютехнологш ¿меш С.З. Гжицького /1.1. Xapiß //Науковий bíchhk Льв1вського нацюнального ушверситету ветеринарно! медицини та бютехнологш ¿меш С.З. Гжицького. - Том 13, № 3 (45). Ч. 1. -Льв1в, 2010. - С.292-296.
2. Xapiß I.I. Стан ¿мунно! системи шдиюв, уражених асощативною еймерюзо-пстомонозною шваз1ею. /1.1. Xapiß //Науковий bíchhk Льв1вського нац1онального ун1верситету ветеринарно! медицини та бютехнологш ¿меш С.З. Гжицького. Том 13, № 4 (50). Ч. 1. - Льв1в, 2011. - С. 481-485.
3. Xapiß I.I. Вплив бров1такокциду i плод1в po3Toponmi плямисто! на активн!сть фермент1в у сироватщ kpobí ¿ндик1в, уражених асощативною еймер1озо-г1стомонозною ¿нваз1ею / I.I. Xapiß // Bíchhk Житомирського нац1онального агроеколопчного ун1верситету ВЕТЕРИНАРНА МЕДИЦИНА . Житомир, 2012, № 1, (32). Т 3, 4.1, С. 98-102
4. Xapiß I.I. Бшоксинтизувальна функц1я печшки в ¿нтактних ¿ндик1в на rai дй бров1такокциду i плод1в po3Toponmi плямисто! / I.I. Xapiß Науково-техн1чний бюлетень 1нституту 61олог11 тварин i Державного науково-дослщного контрольного шституту ветпрепарат1в та кормових добавок. Льв1в, - 2012, в.13, № 3-4 , С. 258-262
5. Тимофеев Б. А. Эймериоз птиц / Б.А. Тимофеев // Ветеринарный консультант. - М., 2004. - №5. - С. 6-10.
6. Прыдыбайло Н.Д. Иммунодефицита у сельскохозяйственных животных и птиц, профилактика и лечение их иммуномодуляторами /Н.Д. Прыдыбайло //Докл. ВАСХНИЛ - 1991. - №12. - С. 44-45.
7. Rui G.C. Advances in pharmacological studies of silimarin / G.C. Rui // Met. Inst. Oswaedo. Crur. - 1991. - №86. - P. 2205-2211.
8. Доклмчш дослщження ветеринарних лкарських 3aco6ÍB / 1.Я. Коцюмбас i ствавтори. - ЛьвАв: Tpiafla плюс, 2006. - 360 с.
9. Токсиколопчний контроль нових 3aco6ÍB захисту тварин: МетодичнА рекомендацп / Косенко М.В., Малик О.Г., Коцюмбас 1.Я., Патерега 1.П., Чура Д.О. - К., 1997. - 34 с.
10. Маланин Л.П. Методические указания по определению токсических свойств препаратов, применяемых в ветеринарии и животноводстве / Л.П. Маланин, А.П. Морозов, A.C. Селиванова // Ветеринарные препараты: Справочник / Подред. А.Д. Третьякова. - М.: Агропромиздат, 1988. - С. 239-289.
Рецензент - д.вет.н., професор Гунчак В.М.
383
