CC BY
5
МИКРОРНК КАК МАРКЕРЫ ОТВЕТА НА ЛЕЧЕНИЕ НЕОВАСКУЛЯРНОЙ ВОЗРАСТНОЙ МАКУЛЯРНОЙ ДЕГЕНЕРАЦИИ: ПИЛОТНОЕ ИССЛЕДОВАНИЕ
О.С. Кожевникова1, А.А. Шкляр1, 2, А.С. Дербенева1, 3, И.Ф. Никулин1' 3, А.Ж. Фурсова1' 3, Н.Г. Колосова1
1 ФИЦ Институт Цитологии и Генетики СО РАН, Новосибирск, Россия
2 Новосибирский государственный университет, Новосибирск, Россия
3 Новосибирская областная больница, Новосибирск, Россия
e-mail: [email protected]
Ключевые слова: возрастная макулярная дегенерация, анти-VEGF терапия, микроРНК.
Возрастная макулярная дегенерация (ВМД) — прогрессирующее многофакторное заболевание глаз, является одной из основных причин потери центрального зрения у лиц старше 60 лет [1]. Более 10 лет стандартом лечения неоваскулярной формы ВМД (нВМД) является анти-VEGF терапия — интравитреальное введение антител против фактора роста эндотелия сосудов. Несмотря на лечение, у 15-30% пациентов наблюдают ухудшение анатомических и зрительных функций из-за персистирующей неоваскулярной активности. Этот аспект требует более глубокого понимания альтернативных путей хориоидального неоангиогенеза. Вариабельность ответа на анти-VEGF терапию, включая задержку ответа, неполный ответ и его отсутствие, тахифилаксия и рецидивы определяют актуальность поиска биологических маркеров — прогностических критериев ответа на лечение. В настоящее время идет поиск новых диагностических и терапевтических мишеней ВМД среди малоизученных сигнальных каскадов этиопатогенеза ВМД.
Одним из перспективных подходов к диагностике, прогнозу течения заболевания и оценке эффективности лечения ВМД рассматривается профилирование экспрессии микроРНК в плазме крови (жидкая биопсия). Мы провели пилотное исследование, направленное на оценку профилей микроРНК 20 пациентов, разделенных на три группы: группа, состоящая из пациентов с ВМД, которые продемонстрировали хороший ответ на анти-VEGF; группа пациентов с плохим ответом; контрольная группа без патологии глазного дна. Для оценки экспрессии микроРНК в плазме крови использовали микрочиповые ПЦР-панели (Qiagen) с охватом 179 микроРНК. Анализ показал значительную вариабельность в экспрессии микроРНК, при этом наблюдалась кластеризация групп с ВМД и контрольной группы. С помощью биоинформатических подходов выделены гены-мишени дифференциально представленных микроРНК и регулируемые ими пути, потенциально участвующие в патогенезе ВМД. Хотя необходимы дополнительные исследования, miR-146b-5p, miR-122, miR-27a-3p и miR-21-5p представляют интерес для дальнейшего изучения в качестве маркеров ответа на лечение нВМД. Поддержано грантом РНФ № 21-15-00047.
Литература:
1. Kozhevnikova O.S., Fursova A.Z., Derbeneva A.S. et. al. Biomedi-cines. 2022. V. 10. P. 1658.
3D КУЛЬТИВИРОВАНИЕ УСИЛИВАЕТ АНГИОГЕННЫЙ ЭФФЕКТ VEGF, СЕКРЕТИРУЕМОГО ЭНДОМЕТРИАЛЬНЫМИ МЕЗЕНХИМНЫМИ СТВОЛОВЫМИ/ СТРОМАЛЬНЫМИ КЛЕТКАМИ ЧЕЛОВЕКА
И.В. Кожухарова, Л.Л. Алексеенко, О.Г. Люблинская, А.П. Домнина
Институт цитологии РАН, Санкт-Петербург, Россия
e-mail: [email protected]
Ключевые слова: мезенхимальные стволовые клетки, стро-мальные клетки, эндометрий, васкулярный эндотелиальный ростовой фактор, сфероиды, ангиогенез.
Секреция разнообразных ростовых факторов и цито-кинов мезенхимальными стволовыми/стромальными клетками (МСК) играет определяющую роль в терапевтическом эффекте, проявляемом МСК при трансплантации. Ангиогенез в местах поврежденнй является необходимым условием успешной регенерации ткани. МСК, выделенные из менструальной крови (еМСК) се-кретируют ангиогенные факторы, главным из которых является васкулярный эндотелиальный ростовой фактор VEGF. В работе исследовали динамику экспрессии и секреции VEGF в еМСК, ее корреляцию с ангиогенным потенциалом еМСК. Показали, что экспрессия и секреция VEGF усиливается при кратковременном культивировании еМСК в 3D сфероидах, и снижается при нокдауне гена VEGF с помощью коротких интерферирующих РНК. Ангиогенный эффект оценивали по влиянию кондиционированной среды еМСК на жизнеспособность и диффе-ренцировку эндотелиальных клеток человека (HUVEC), а также при совместном культивировании еМСК и HUVEC. Показали, что еМСК из сфероидов обладают более сильным ангиогенным потенциалом по сравнению с монослойной культурой еМСК. Работа поддержана грантом РНФ № 22-74-10126.
ИССЛЕДОВАНИЕ БИОИНТЕГРАЦИИ ДЕЦЕЛЛЮЛЯРИЗИРОВАННОЙ ТКАНИ КСЕНОГЕННОГО ПРОИСХОЖДЕНИЯ ПРИ ГЕТЕРОТОПИЧЕСКОЙ ИМПЛАНТАЦИИ
А.А. Кокорина1, 2, Т.В. Мосогутов2, Д.А. Решеткина2, В.Н. Александров1, 2
1 ФГБВОУ ВО Военно-медицинская академия
им. С.М. Кирова МО РФ, Санкт-Петербург, Россия
2 ФГБОУ ВО Санкт-Петербургский государственный педиатрический медицинский университет Минздрава России, Санкт-Петербург, Россия
e-mail: [email protected]
Ключевые слова: децеллюляризация, тонкая кишка, колла-геновый матрикс.
Актуальным вопросом для тканевой инженерии является оценка возможности использования ксеноген-ной децеллюляризированной ткани, поскольку материал от животного может быть отобран с учетом большого количества необходимых характеристик, что не всегда возможно при заборе кадаверных органов. С другой стороны, реакции реципиента при имплантации материала ксеногенного происхождения изучены в меньшей степени. В связи с этим целью работы стала оценка биоинтеграции децеллюляризированной ткани ксеногенного происхождения при гетеротопической имплантации.
Ткань тонкой кишки кролика была децеллюляризи-рована детергентным (группа 1, п=3) или детергентно-ферментативным методом с использованием дезокси-рибонуклеазы (группа 2, п=3). Участки бесклеточного матрикса площадью 2 см2 были имплантированы подкожно крысам в область холки, эксплантированы вместе с прилежащими тканями через 14 сут. После фиксации в 10% формалине проведена стандартная гистологическая проводка. Срезы толщиной 3-5 мкм окрашены гематоксилином-эозином и по Ван Гизону.
Спустя 14 сут децеллюляризированная ткань оставалась бесклеточной или практически бесклеточной в центральных областях. По периферии материала визуализировался слой коллагеновых волокон, включающий клеточные элементы фибробластоподобной морфологии, более выраженный в группе 2. Возможно, данная структура является формирующейся соединительнотканной капсулой. Также четко выделялся промежуточный слой, преимущественно инфильтрированный фибробластами, лимфоцитами, эозинофилами и макрофагами.
Ткань тонкой кишки после процедуры децеллюляри-зации является довольно плотной, что является причиной длительной миграции клеток вглубь матрикса. Процессы реорганизации ткани начинаются с периферии, и требуется более длительное наблюдение для оценки итога данного процесса. Работа была поддержана «Фондом содействия развитию малых форм предприятий в научно-технической сфере» (Фонд содействия инновациям) в рамках работы по конкурсу «УМНИК-2020» (дог. № 17022ГУ/2021от 10.06.2021 г.).
СОЗДАНИЕ ПРЕПАРАТА С РЕГЕНЕРАТИВНЫМИ СВОЙСТВАМИ НА ОСНОВЕ ВТОРИЧНЫХ МЕТАБОЛИТОВ ПРОБИОТИЧЕСКИХ ШТАММОВ БАКТЕРИЙ РОДА BIFIDOBACTERIUM ПРИ КУЛЬТИВИРОВАНИИ С ПЕРФТОРДЕКАЛИНОМ
Е.П. Колеватых
ФГБОУ ВО Кировский государственный медицинский университет Минздрава России, Киров, Россия
e-mail: [email protected]
Ключевые слова: вторичные метаболиты, пробиотические штаммы, бифидобактерии, перфтордекалин, культивирование, регенерация.
Бактерии рода Bifidobacterium играют важную роль в современной промышленной микробиологии, биологической инженерии и биофармацевтике. Они являются продуцентами метаболитов с различными свойствами [1]. Целью работы являлась оценка возможности интенсификации темпов роста Bifidobacterium bifidum 791 при культивировании с использованием перфто-рорганических соединений, получение метаболитов и изучение регенеративных свойств [2,3]. Использовали перфтордекалин производства ОАО «Кирово-Чепецкий химкомбинат им. Б.П. Константинова» [4]. В качестве культивируемого биообъекта был производственный штамм Bifidobacterium bifidum 791. Режим культивирования отрабатывался на лабораторном ферментере BIOSTAT®plus фирмы Sartorius (Германия). Применяли полужидкую питательную среду Блаурокка, в которую в опытной группе добавляли 2% раствор перфторде-калина. Интенсивность роста культуры Bifidobacterium
bifidum 791 оценивали методом высева серийных разведений отобранных в разные промежутки времени проб культуральной жидкости на плотную питательную среду. Затем получали метаболиты, очищали от балластных веществ, стерилизовали. Применяли полученную массу веществ в качестве лекарственного вещества при нанесении на поверхность моделированного термического ожога лабораторных беспородных крыс [5]. В результате исследования установили, что вторичные метаболиты производственного штамма Bifidobacterium bifidum 791, полученные при культивировании на питательных средах в присутствии перфтордекалина, вызывают активные регенеративные процессы по сравнению с веществами, выделенными из бактерий с питательной среды Блаурокка без специфических добавок.
Литература:
1. Бакулин В.М., Туманов А.С. и др. Антибиотики и химиотерапия, 2014. - № 59. - С.7-8.
2. Орлова Т.И., Булгакова В.Г., Полин А.Н. Антибиотики и химиотерапия, 2015. - № . - С.
3. Subramani R., Aalbersberg W.J. Microbiol.Ris, 2012. V. 167 P. 571.
4. Бакулин М.К., Дармов И.В. и др.Биомедицинский журнал Медлайн, 2004. - Т.5. - С. 235.
5. Физиологически активные вещества на основе перфтору-глеродов в экспериментальной и клинической медицине /Под ред. Г.А. Сафронова Тез. науч. конф. 19-20 июня 2001 г. Санкт-Петербург: ВМА, 2001. - 129 с.
CD133+ И CD133- КЛЕТКИ ГЛИОБЛАСТОМЫ ЧЕЛОВЕКА И ИХ УСТОЙЧИВОСТЬ К ВОЗДЕЙСТВИЮ АНТИПРОЛИФЕРАТИВНЫМИ И НЕЙРОИНДУКТОРНЫМИ ФАКТОРАМИ
В.А. Колесникова1, А.В. Ревищин1, Д.Ю. Усачев2, А.М. Копылов3, Г.В. Павлова1, 2 3
1 ФГБУН Институт Высшей Нервной Деятельности и Нейрофизиологии РАН, Москва, Россия.
2 НМИЦ нейрохирургии им. ак. Н.Н. Бурденко, Москва, Россия.
3 МГУ им. М.В. Ломоносова, Москва, Россия.
4 Первый МГМУ им. И.М. Сеченова, Москва, Россия.
e-mail: [email protected]
Ключевые слова: мультиформная глиобластома, опухолевые глиомные стволовые клетки, G-квадруплексы, малые молекулы, пролиферация.
Мультиформная глиобластома представляет собой одну из самых злокачественных опухолей головного мозга человека. Существующие методы терапии позволяют продлить жизнь пациента, но 5-ти летняя выживаемость пациентов с таким диагнозом составляет всего около 5% [1]. Вероятной причиной возникновения рецидивов опухоли могут являться резистентные к терапии опухолевые стволовые клетки глиомы. Одним из предположительных маркеров таких клеток принято считать поверхностный трансмембранный белок CD133 [2]. В предлагаемом подходе используется стратегия, в которой изначальное ингибирование пролиферации клеток с помощью антипролиферативного G-квадруплекса (GQ) сопровождается индуцированием клеток в сторону нейральной дифференцировки с помощью малых молекул SB431542 (SB), purmorphamine (PRM), LDN-193189 (LDN) и Brain-Derived Neurotrophic
