CC BY
43
ПЦР; 3 мес, 6 мес с результатами кольпоскопии и прицельной биопсией, 1 год, 3 года.
Результаты. Критериями оценки эффективности ФДТ служили результаты клинического, вирусологического, цитологического, коль-поскопического методов. Полная и частичная регрессия очагов тяжелой дисплазии достигнута у 33 (86%) пациенток. У 3 больных зарегистрирована стабилизация, в связи с чем через 3 мес после лечения проведен 2-й сеанс ФДТ. В 2 случаях (5%) по поводу прогрессирования дисплазии через 6 мес после лечения выполнены диатермконизации шейки матки. Неэффектив-
ность данного лечения может быть связана с недооценкой тяжести процесса и, соответственно, неадекватным выбором методики ФДТ, дозы фотосенсибилизатора и дозы света. У 6 пациенток после клинического выздоровления наступила беременность, протекавшая без осложнений. У 4 из них родоразрешение произведено через естественные родовые пути.
Выводы. Предложенный метод является достаточно радикальным и органосберегающим. Может служить выбором при лечении фоновых и предраковых заболеваний шейки матки у женщин репродуктивного возраста.
ИСПОЛЬЗОВАНИЕ ТЕРМОЧУВСТВИТЕЛЬНЫХ ЛИПОСОМ И ЛОКАЛЬНОЙ ГИПЕРТЕРМИИ ДЛЯ ДОСТАВКИ ДОКСОРУБИЦИНА В ОПУХОЛЬ
Е.В. ТАЗИНА, В.В. МЕЩЕРИКОВА, А.П. ПОЛОЗКОВА, О.Л. ОРЛОВА, А.А. ВАЙНСОН, Н.А. ОБОРОТОВА, А.Ю. БАРЫШНИКОВ
ГУ Российский онкологический научный центр имени Н.Н. Блохина РАМН, г. Москва
Актуальность. Эффективность противоопухолевых препаратов ограничена их высокой общей токсичностью и метаболической неустойчивостью в организме. Так, дозозависимая кардиотоксичность антрациклинового антибиотика доксорубицина (Докс) - основной фактор, препятствующий его широкому применению в онкологии. Использование липосом для целенаправленной доставки цитостатиков является одним из перспективных направлений в химиотерапии злокачественных новообразований. Липосомы представляют собой везикулы, состоящие из одного или нескольких фосфолипид-ных бислоев, разделенных водной фазой. Идея термочувствительных липосом заключается в их способности высвобождать лекарственный препарат в опухоли в ответ на воздействие локальной гипертермии (40-43°С). Терапевтический эффект, возникающий при совместном применении термолипосом (ТЛ) и локальной гипертермии (ГТ), обусловлен несколькими причинами: ГТ увеличивает проникновение ТЛ из кровеносных сосудов в опухоль, поэтому ТЛ могут избирательно накапливаться в прогреваемой опухоли; повышенная температура способ-
ствует триггерному высвобождению препарата из ТЛ; ГТ оказывает прямое цитотоксическое действие на опухолевые клетки.
Цель исследования. Получение термочувствительной липосомальной формы доксорубицина (Докс-ТЛ), изучение противоопухолевой активности Докс-ТЛ на клетках in vitro и перевивных опухолях мышей in vivo в комбинации с ГТ.
Материал и методы. ТЛ получали методом обращения фаз из 1,2-дипальмитоил^п-глицеро-3-фосфохолина (DPPC), 1,2-дистеароил^п-глицеро-3-фосфохолина (DSPC) фирмы Lipoid (Германия), пегилированного 1,2-дистеароил^п-глицеро-3-фосфоэтаноламина (DSPE-PEG-2000) и холестерина (Avanti Polar Lipids, Inc., США) в молярном соотношении 9:1:0,02:0,2. Для предотвращения окисления липидов добавляли 2 моль% а-токоферола ацетата. ТЛ экструдировали через поликарбонатные мембраны Whatman с размером пор 200 нм при 50°C с помощью мини-экструдера Avanti Mini-Extruder (США). Докс загружали в ТЛ против градиента сульфата аммония при 50°C в течение 1 ч. Весовое соотношение препарат:липиды - 0,13:1. Для
стабилизации Докс-ТЛ проводили их сублимационную сушку с использованием в качестве криопротектора 4% раствора сахарозы. Диаметр везикул измеряли на приборе Nicomp-380 Submicron Particle Sizer (США). Докс-ТЛ очищали от невключившегося препарата методом гель-фильтрации на хроматографической колонке C10/20, заполненной сефадексом G-50 (Amersham Biosciences, Швеция). Эффективность действия Докс-ТЛ оценивали по сравнению со свободным Докс. In vitro Докс-ТЛ и свободный Докс вводили в суспензию клеток меланомы В-16 в дозах, соответствующих 3-15 мкг/мл Докс, а в суспензию клеток китайского хомячка V-79 - в дозе 10 мкг/мл Докс. Суспензии клеток с препаратами инкубировали в течение
1 ч при 37°C или 42,5°C. In vivo действие препаратов оценивали на меланоме В-16, привитой самкам мышей линии C57BL/6j, и карциноме Эрлиха линии ELD, привитой самкам мышей F1 в мышцу голени. Докс-ТЛ и свободный Докс вводили животным в ретроорбитальный синус в дозах 9 и 4,5 мг/кг Докс. ГТ голени с опухолью проводили в водяном ультратермостате при температуре 43°C в течение 30 мин.
Результаты. Получен препарат «Доксору-бицин термолипосомальный, лиофилизат для приготовления раствора для инъекций 0,7 мг» с диаметром везикул 170 ± 10 нм. Включение Докс в ТЛ до лиофилизации составило 87-94 %. В условиях ГТ Докс-ТЛ значительно увеличивали гибель как клеток меланомы B-16, так и клеток китайского хомячка V-79. Время удвоения объема меланомы B-16 в группе животных, которым вводили свободный Докс в дозе 9мг/кг
с последующей ГТ, составило 9 дней, а после введения Докс-ТЛ в дозах 4,5 и 9 мг/кг в комбинации с ГТ время удвоения объема опухоли увеличилось до 12 и 16 дней соответственно. В группе мышей, подвергнутых воздействию ГТ на фоне введения Докс-ТЛ в дозе 9 мг/кг, 50% выживаемость составила 34 дня, а в группе мышей, которым вводили Докс-ТЛ в дозе 4,5 мг/кг + ГТ, она составила 29 дней. Для группы животных, которым вводили свободный Докс в дозе 9 мг/кг + ГТ, 50% выживаемость составила 21 день. Наименьшую скорость роста карциномы Эрлиха линии ELD наблюдали в группе мышей, которым проводили ГТ спустя 15-20 мин после введения Докс-ТЛ. Время удвоения объема опухоли в этой группе возросло по сравнению с контролем с 3 до 14 дней. При воздействии ГТ через 10-12 мин и через 35-40 мин после введения Докс-ТЛ торможение роста опухоли было менее выраженным. Наибольшую выживаемость также наблюдали в группе животных, которым проводили ГТ через 15-20 мин после введения Докс-ТЛ. В этой группе 100% выживаемость отмечалась в течение 38 дней, к 50-му дню от начала эксперимента в живых остались
2 мыши, в контрольной группе к этому дню погибли все животные.
Выводы. Препарат «Доксорубицин термо-липосомальный, лиофилизат для приготовления раствора для инъекций 0,7 мг» в комбинации с ГТ менее токсичен, более эффективен, чем свободный Докс, и может быть рекомендован для термохимиотерапии солидных опухолей.
Работа выполнена при финансовой поддержке Правительства г. Москвы
КСЕЛОДА В НЕОАДЪЮВАНТНОМ ЛЕЧЕНИИ ОПЕРАБЕЛЬНОГО РАКА МОЛОЧНОЙ ЖЕЛЕЗЫ
Н.А. ТАРАБАНОВСКАЯ, А.В. ДОРОШЕНКО, Е.Ю. ГАРБУКОВ, Ю.Л. КОКОРИНА
НИИ онкологии СО РАМН, г. Томск
Актуальность. Одной из важных составляющих комплексного лечения рака молочной железы является неоадъювантная полихимиотерапия, основные задачи которой: уменьшение объема первичного очага с целью улучшения условий для выполнения органосохранных оперативных
вмешательств, определение чувствительности опухоли in vivo и планирование адьювантной терапии на основании выраженности терапевтического патоморфоза. Рандомизированными исследованиями показано, что достоверное улучшение показателей общей выживаемости
