CC BY
19
ОРИГИНАЛЬНЫЕ ИССЛЕДОВАНИЯ
УДК 616.988.74:599. 824 О И.М. Аршба, И.В. Раковская, О.И. Бархатова, Г.А. Левина, Л.Г. Горина, H.A. Гамова, С.А. Гончарова, 2016
03.02.00 - Общая биология
14.03.00 - Медико-биологические науки
ИНФИЦИРОВАННОСТЬ МИКОПДАЗМАМИ ОБЕЗЬЯН, НАХОДЯЩИХСЯ В УСЛОВИЯХ НЕВОЛИ И ВНОВЬ ПРИВЕЗЕННЫХ ИЗ ТАНЗАНИИ
Аршба Илона Мурмановна, кандидат биологических наук, и. о. заведующей лабораторией инфекционной патологии, ФГБНУ «Научно-исследовательский институт медицинской приматологии», Россия, 354376, г. Сочи, с. Веселое, ул. Мира, д. 177, тел.: (862) 243-20-28, e-mail: [email protected].
Раковская Ирина Валентиновна, доктор биологических наук, ведущий научный сотрудник, заведующая лабораторией микоплазм и L-форм бактерий, ФГБУ «Федеральный научно-исследовательский центр эпидемиологии и микробиологии имени почетного академика Н.Ф. Гамалеи» Минздрава России, Россия, 123098, г. Москва, ул. Гамалеи, д. 18, тел.: (8499) 190-43-68, e-mail: [email protected].
Бархатова Ольга Ивановна, кандидат биологических наук, научный сотрудник лаборатории микоплазм и L-форм бактерий, ФГБУ «Федеральный научно-исследовательский центр эпидемиологии и микробиологии имени почетного академика Н.Ф. Гамалеи» Минздрава России, Россия, 123098, г. Москва, ул. Гамалеи, д. 18, тел.: (8499) 190-43-68, e-mail: [email protected].
Левина Галина Александровна, кандидат медицинских наук, научный сотрудник лаборатории микоплазм и L-форм бактерий, ФГБУ «Федеральный научно-исследовательский центр эпидемиологии и микробиологии имени почетного академика Н.Ф. Гамалеи» Минздрава России, Россия, 123098, г. Москва, ул. Гамалеи, д. 18, тел.: (8499) 190-43-68, e-mail: [email protected].
Горина Луиза Георгиевна, доктор биологических наук, ведущий научный сотрудник лаборатории микоплазм и L-форм бактерий, ФГБУ «Федеральный научно-исследовательский центр эпидемиологии и микробиологии имени почетного академика Н.Ф. Гамалеи» Минздрава России, Россия, 123098, г. Москва, ул. Гамалеи, д. 18, тел.: (8499) 190-43-68, e-mail: [email protected].
Гамова Наталья Александровна, кандидат биологических наук, научный сотрудник лаборатории микоплазм и L-форм бактерий, ФГБУ «Федеральный научно-исследовательский центр эпидемиологии и микробиологии имени почетного академика Н.Ф. Гамалеи» Минздрава России, Россия, 123098, г. Москва, ул. Гамалеи, д. 18, тел.: (8499) 190-43-68, e-mail: [email protected].
Гончарова Светлана Александровна, кандидат биологических наук, старший научный сотрудник лаборатории микоплазм и L-форм бактерий, ФГБУ «Федеральный научно-исследовательский центр эпидемиологии и микробиологии имени почетного академика Н.Ф. Гамалеи» Минздрава России, Россия, 123098, г. Москва, ул. Гамалеи, д. 18, тел.: (8499) 190-43-68, e-mail: [email protected].
Проведено сравнение инфицированных микоплазмами животных, родившихся и находящихся в питомнике, и обезьян, вновь поступивших из мест их естественного обитания (Танзания). У обезьян, привезенных из Танзании, ДНК возбудителей выявляли значительно чаще: в материале соскобов — в 100 % случаев и в пробах сыворотки крови — в 40 % наблюдений. У обезьян, находящихся в условиях неволи, показатели были ниже и составляли 25 и 17,8 %, соответственно. Данные по выявлению антигенов в реакции агрегатгематтлютинации и реакции пассивной гематтлютинации в основном совпадали с данными, полученными с помощью полимеразно-цепной реакции. Впервые из соскобов урогенитального тракта от 5 обезьян были выделены культуры Му-coplsma hominis, растущие в виде «мини-колоний». Линейные размеры «мини-колоний» были меньше типичных на порядок (30 мкм), а по площади на два порядка (300 мкм2). Они с трудом пассировались на агаровой питательной среде и ни в одном случае не реверсировали в колонии с типичной морфологией.
Ключевые слова: обезьяны, микоплазмы, соскобы урогенитального тракта, сыворотка, «мини-колонии».
MYCOPLASMA INFECTION IN COLONY LIVING MONKEYS AND IN MONKEYS NEWLY IMPORTED FROM TANZANIA
Arshba Ilona M, Cand. Sci. (Biol.), Head, Laboratory of Infectious Pathology, Research Institute of Medical Primatology, 177 Mira St., Sochi, 354376, Russia, tel.: (862) 243-20-28, e-mail: [email protected].
Rakovskaya Irina K, Dr. Sci. (Biol), Leading Researcher, Head, Laboratory of mycoplasmas and L-forms of bacteria, N. F. Gamaleya Federal Scientific Research Center of Epidemiology and Microbiology, 18 Gamaleya St., Moscow, 123098, Russia, tel.: (8499) 190-43-68, e-mail: [email protected].
Barkhatova OlgaL, Cand. Sci. (Biol.), Researcher, Laboratory of mycoplasmas and L-forms of bacteria, N. F. Gamaleya Federal Scientific Research Center of Epidemiology and Microbiology, 18 Gamaleya St., Moscow, 123098, Russia, tel.: (8499) 190-43-68, e-mail: [email protected].
Levina Galina A., Cand. Sci. (Med.), Researcher, Laboratory of mycoplasmas and L-forms of bacteria, N. F. Gamaleya Federal Scientific Research Center of Epidemiology and Microbiology, 18 Gamaleya St., Moscow, 123098, Russia, tel.: (8499) 190-43-68, e-mail: [email protected].
Gorina Luiza G., Dr. Sci. (Biol), Leading Researcher, Laboratory of mycoplasmas and L-forms of bacteria, N. F. Gamaleya Federal Scientific Research Center of Epidemiology and Microbiology, 18 Gamaleya St., Moscow, 123098, Russia, tel.: (8499) 190-43-68, e-mail: [email protected].
Gamova Natal'ya A., Cand. Sci. (Biol.), Researcher, Laboratory of mycoplasmas and L-forms of bacteria, N. F. Gamaleya Federal Scientific Research Center of Epidemiology and Microbiology, 18 Gamaleya St., Moscow, 123098, Russia, tel.: (8499) 190-43-68, e-mail: [email protected].
Goncharova Svetlana A., Cand. Sci. (Biol.), Senior Researcher, Laboratory of mycoplasmas and L-forms of bacteria, N. F. Gamaleya Federal Scientific Research Center of Epidemiology and Microbiology, 18 Gamaleya St., Moscow, 123098, Russia, tel.: (8499) 190-43-68, e-mail: [email protected].
In this investigation a comparison between colony living monkeys with mycoplasma infection and those newly imported from their natural habitat (Tanzania) was carried out. The DNA of the pathogen was significantly more frequently found in the monkeys imported from Tanzania - it accounted for 100 % in cytology materials, and for 40 % in the blood serum. In the colony living monkeys the rates were lower -25 % and 17,8 % respectively. The data on antigen finding with the help of aggregate hemagglutination reaction (AGR) and passive haemagglutination reaction (PGR) basically coincided with those obtained with the help of polymerase chain reaction (PCR). For the first time the cultures of Mycoplasma hominis growing as «mini-colonies» were isolated from brush cytology material of the urogenital tract of 5 monkeys. The linear dimensions of «mini-colonies» were ten times smaller than the typical ones (30 цт), and the area dimensions were 100 times smaller (300 цт2). They were hardly passaged on agar medium, and no cases of reversion in the colony with typical morphology were noted.
Key words: monkeys, mycoplasmas, brush cytology of the urogenital tract, serum, «mini-colonies».
Введение. Микоплазменные инфекции у обезьян, как и у человека, характеризуются длительной персистенцией и генерализацией инфекции [1, 2, 3, 4]. Известно, что микоплазмы способны оказывать иммунодепрессивное воздействие на инфицированный организм [9, 10], усиливать или подавлять апоптоз клеток [7], а также активировать или осложнять патологические процессы, индуцированные вирусами или другими бактериями. Поэтому при использовании обезьян в качестве экспериментальных животных необходимо иметь представление о степени их инфицированности различными условно патогенными микроорганизмами, вызывающими инфекции без патогномонических симптомов. К возбудителям таких инфекций относят микоплазмы. Работы по исследованию микоплаз-менной инфекции у разных видов обезьян в ФГБНУ «Научно-исследовательский институт медицинской приматологии» (ФГБНУ «НИИ МП») проводятся в течение ряда лет.
Цель: сравнить инфицированных микоплазмами животных, родившихся и находящихся в питомнике, и обезьян, вновь поступивших из мест их естественного обитания (Танзания).
Материалы и методы исследования. Объектом исследования послужили 53 здоровые обезьяны (самцы и самки): макаки резус {Масаса mulatto) - 13 особей, макаки яванские {Масаса fascicularis) -15 особей и зеленые мартышки (Çhlorocebus sabaeus) - 25 животных. По заключению диагностической лаборатории клинико-ветеринарного отдела ФГБНУ «НИИ МП» здоровыми обезьянами считают активных животных, с хорошим экстерьером, нормальными показателями сердечно-сосудистой, дыхательной систем и желудочно-кишечного тракта, без клинических симптомов урогенитальной инфекции (УГИ). Материалами исследования стали: сыворотка крови животных, соскобы эпителиальных клеток из урогенитального тракта (УГТ): из влагалища самок и из уретры самцов.
Все обследованные обезьяны были разделены на две группы. Первая группа состояла из 28 животных в возрасте 6,5-28 лет, она включала в себя: макак резусов - 13 особей (6 самцов, 7 самок) и макак яванских - 15 особей (10 самцов, 5 самок). Все обезьяны этой группы рождены и живут в
ФГБНУ «НИИ МП». Во вторую группу вошли 25 зеленых мартышек (4 самца, 21 самка) в возрасте от 3,5 до 5 лет. Эти животные прибыли в питомник из мест естественного обитания (Танзания) и были помещены в отдельный изолятор, каждая обезьяна в отдельную клетку.
Определение инфицированности исследуемого материала микоплазмами проводили генно-диагностическим методом - полимеразно-цепной реакцией (ПЦР). Для подготовки и постановки ПЦР использовали лицензированные тест-системы, разработанные в ЦНИИ эпидемиологии Росздравнадзора (ООО «ИнтерЛабСервис», Россия). Выделение ДНК проводили с помощью набора «ДНК-сорб В», специально предназначенного для работы с клиническим материалом. При выявлении ДНК микоплазм и уреаплазм использовали универсальную для них тест-систему «МИК-КОМ» (Mycoplasma spp.). Для видовой идентификации были взяты следующие монотест-системы: «АмплиСенс М. hominis», «АмплиСенсМ. genitalium», «АмплиСенс М. pneumoniae». Для выявления ДНК уреаплазм использовали тест-систему «АмплиСенс Ureaplasma spp.», типирующую одновременно Ureaplasma urealyticum и Ureaplasma parvum. Реакцию ставили согласно прилагаемым к тест-системам методическим инструкциям с использованием амплификатора модели «Терцик» («ДНК-Технология», Россия). Детекцию продуктов амплификации проводили в агарозе с помощью электрофореза.
Для выделения культур микоплазм и уреаплазм из сыворотки крови и материала соскобов из УГТ использовали коммерческую питательную среду Becton Dickinson BBL Mycoplasma Base (США) агар (1,3 %) и бульон с добавлением 20 % сыворотки крови лошади, 1 % L-аргинина для роста аргинин-зависимых видов или 0,05 % мочевины для уреаплазм и 1 ООО ед/мл пенициллина.
Антигены клеток микоплазм в пробах сыворотки крови выявляли в реакции агрегатгемагглю-тинации (РАГА) по методике, разработанной в ФГБУ «Федеральный научно-исследовательский центр эпидемиологии и микробиологии имени почетного академика Н.Ф. Гамалеи».
Антитела микоплазм и уреаплазм в сыворотке крови определяли в реакции пассивной гемагг-лютинации (РПГА) по ранее описанной методике [3].
Результаты исследования и их обсуждение. Результаты исследования материала соскобов из УГТ и сыворотки крови обезьян методом ПЦР представлены в таблице 1.
Таблица 1
Частота выявления ДНК микоплазм и уреаплазм в клиническом материале от 53 обезьян методом ПЦР
Группа и число обезьян Исследуемый материал Число обезьян с ДНК микоплазм и уреаплазм
Mycoplasma spp. М. hominis М. pneumoniae Ureaplasma spp. Другие виды
I группа (п = 28) соскоб 1 (25 %) 1 (14,3 %) 0 1 (14,3 %) 5 (71,4 %)
сыворотка крови 5 (17,8 %) 0 1 (20 %) 0 4 (80 %)
II группа, (п = 25) соскоб 25 (100 %) 16 (64 %) 1 (4 %) 8 (32 %) 7 (28 %)
сыворотка крови 10 (40 %) 4 (40 %) 1 (10 %) 1 (10 %) 4 (40 %)
Как видно из представленных данных, степень инфицированности микоплазмами и уреаплаз-мами животных обеих групп была высокой. У обезьян II группы ДНК возбудителей выявляли значительно чаще: в материале соскобов - в 100 % случаев и в пробах сыворотки крови - в 40 % наблюдений. У обезьян I группы эти показатели были ниже и составляли 25 и 17,8 %, соответственно. Данные по выявлению антигенов в РАГА и РПГА в основном совпадали со сведениями, полученными ПЦР. Типирование ДНК до вида показало, что у животных II группы в высоком проценте случаев обнаружили ДНК М. hominis и Ureaplasma spp., причем в материале соскоба из УГТ у 7 обезьян выявлена ДНК этих двух возбудителей одновременно.
Результаты микробиологического метода исследования представлены в таблице 2.
Таблица 2
Выделение культур микоплазм из клинического материала от 53 обезьян_
Группа и число Исследуемый Выделено Типировано до вида методом ПЦР
обезьян материал культур М. hominis Другие виды микоплазм
I группа (п = 28) соскоб 1 1 0
сыворотка крови 0 0 0
II группа (п = 25) соскоб 18(72%) 15 (83,3 %) 3 (16,7 %)
сыворотка крови 3 (12 %) 1 (4 %) 2 (8 %)
Как видно из данных таблицы 2, более успешным было выделение культур из клинического материала от животных II группы, особенно из соскобов из УГТ. Идентификация их до вида показала, что выделенные культуры в 82,3 % были типированы как М. hominis.
Из соскобов из УГТ от 5 обезьян II группы были выделены культуры М. hominis, растущие в виде «мини-колоний». Этот морфотип колоний микоплазм впервые был описан ранее [5]. Линейные размеры «мини-колоний» были меньше типичных на порядок (30 мкм), а по площади на два порядка (300 мкм2). Они с трудом пассировались на агаровой питательной среде и ни в одном случае не реверсировали в колонии с типичной морфологией.
При выделении уреаплазм использовали лишь материал соскобов из УГТ обезьян (табл. 3). При высеве образцов исследуемого материала на питательную среду было получено 16 культур уреаплазм. Обезьяны II группы были обсеменены уреаплазмами в довольно высокой степени (60 %). В 26,7 % культуры уреаплазм типировались тест-системой Ureaplasma spp. (U. parvum и U. urealyticum). В 73 % случаев идентифицировать их до вида не удалось.
Таблица 3
Выделение культур уреаплазм из клинического материала от 53 обезьян_
Группа и число Исследуемый Выделено Типировано методом ПЦР
обезьян материал культур Ureaplasma spp. Другие виды уреаплазм
I группа (п = 28) соскоб 1 1 0
сыворотка крови - - -
II группа (п = 25) соскоб 15(60%) 4 (26,7 %) 11 (73,3%)
сыворотка крови - - -
Особый интерес представляет самка макаки яванской, возраст 8 лет, диагноз «бесплодие». Из соскоба влагалища этой особи были выделены культура «мини-колоний» М. hominis и культура уреаплазм Ureaplasma spp. Возможно, причиной бесплодия этой обезьяны является высокая степень инфицированное™ ее этими возбудителями.
Данные анализа результатов по инфицированности обезьян микоплазмами и уреаплазмами в зависимости от пола животного представлены в таблицах 4 и 5.
Таблица 4
Частота инфицированности микоплазмами и уреаплазмами самцов обезьян_
Группа и число обезьян Вид и число обезьян Исследуемый материал Число и % инфицированных животных (результаты ПЦР) Выделено культур
Mycoplasma spp. М. hominis Ureaplasma spp. Другие виды М. hominis Ureaplasma SPP-
I группа (п=16) макаки резус (п = 6) соскоб 0 0 0 0 0 0
сыворотка крови 0 0 - 0 0 -
макаки яванские (п = 10) соскоб 1 (10 %) 1 (10 %) 0 0 другие микоплаз- мы 1 (10 %) 0
сыворотка крови 0 0 - 0 0 -
П группа (п = 4) зеленые мартышки (п = 4) соскоб 4 (100 %) 2 (50 %) 1 (25 %) 1 (25 %) 2 (50 %) 1 (25 %)
сыворотка крови 1 (25 %) 0 - 1 (100 %) 0 -
Как видно из представленных результатов (табл. 4), у самцов макак резусов не выявлено носи-тельства микоплазм и уреаплазм. Самцы макак яванских инфицированы в очень низкой степени. Ин-фицированность самцов зеленых мартышек очень высокая (100 % - по материалу соскобов и 25 % -по пробам сыворотки крови). Данные по выявлению возбудителей имеют такую же тенденцию. Из материала соскобов из УГТ культура микоплазм (М. hominis) выделена от 3 животных, культура уреаплазм (Ureaplasma spp.) - от 1 особи.
Полученные результаты (табл. 5) указывают на высокую инфицированность микоплазмами и уреаплазмами самок обезьян всех трех видов. Особенно высокие показатели отмечены в группе зеленых мартышек (по результатам исследования материала соскобов 100 % и образцов сыворотки крови - 42,9 %). Из материала соскобов из УГТ выделены 16 культур микоплазм (76,2 %) и 14 - уреаплазм (66,6 %). Из проб сыворотки крови выделены три культуры М. hominis.
Таблица 5
Частота инфицированности микоплазмами и уреаплазмами самок обезьян_
Группа и число обезьян Вид и число обезьян Исследуемый материал Число и % инфицированных животных (результаты ПЦР) Выделено культур
Mycoplasma spp. M. hominis Ureaplasma spp. Другие виды M. hominis Ureaplasma spp.
I группа (п = 12) макаки резус (п = 7) соскоб 3 (43 %) 0 1 (33 %) 2 (67 %) 0 0
сыворотка крови 2 (28,6 %) 0 - 2 (100 %) 0 -
макаки яванские (п = 5) соскоб 3 (60 %) 1 (33 %) 1 (33 %) 2 (67 %) 1* 1*
сыворотка крови 3 (60 %) 1 (33 %) - 2 (61 %) 0 -
Пгруппа (п = 21) зеленые мартышки (п = 21) соскоб 21 (100 %) 13(62%) 6 (28,5 %) 2 (9,5 %) 16(76,2%) 14 (66,6 %)
сыворотка крови 9 (49,9 %) 4(44,4%) - 4(44,4%) 3(14,3%) -
Примечание: * - обе культуры выделены от одной обезьяны
Сравнение результатов, представленных в таблицах 4 и 5, свидетельствуют о том, что носи-тельство микоплазм и уреаплазм у самок изученных трех видов обезьян значительно выше, чем у самцов, что особенно выражено в наиболее инфицированной группе зеленых мартышек. Из материала соскобов выделено 16 культур М. hominis (76,2 %) и 14 культур Ureaplasma spp. (66,6 %). 3 культуры М. hominis выделены из проб сыворотки крови. У самцов зеленых мартышек эти показатели значительно ниже.
В таблице 6 представлены результаты выявления в ПЦР «других» микоплазм, то есть микоплазм, которые не удалось типировать до вида имеющимися монотест-системами.
Таблица 6
Частота выявления других микоплазм методом ПЦР_
Группа и число обезьян Вид и число обезьян Исследуемый материал Число животных с ДНК микоплазм и уреаплазм
Ureaplasma spp., п Другие виды микоплазм и уреаплазм
I группа (п = 28) макаки резус (п = 13) соскоб 3 2 (67 %)
сыворотка крови 2 2 (100 %)
макаки яванские (п = 15) соскоб 3 2 (67 %)
сыворотка крови 3 2 (67 %)
II группа (п = 25) зеленые мартышки (п = 25) соскоб 25 7 (28 %)
сыворотка крови 10 4 (40 %)
Как видно из представленных результатов, высокая степень инфицированности обезьян микоплазмами в значительной степени определяется неустановленными видами микоплазм и уреаплазм. Почти все микоплазмы, выделяемые от людей, находят и у обезьян. Это М. hominis, M. salivarium, M. buccale, M. orale, M. fermentons, M.faucium, U. urealyticum [1, 5, 7, 8]. Кроме того, y обезьян есть и собственные виды микоплазм: M. primatum и ахолеплазмы [1, 6]. Неудивительно, что с помощью тест-систем, использованных в данном исследовании, отсутствовала возможность идентифицировать до вида все выделенные культуры микоплазм.
Заключение. Показано, что наибольшая частота инфицированности микоплазмами отмечена у обезьян, привезенных в питомник из мест их естественного пребывания. Длительность их пребывания и условия содержания в неволе неизвестны. Можно предположить, что их инфицированность обусловлена этими обстоятельствами. Таким образом, в результате обследования обезьян установлена длительная персистенция микоплазм, о чем свидетельствуют серологические данные. Впервые выделены мини-колонии микоплазм у обезьян из сыворотки и урогенитальных соскобов, идентифицированные с помощью ПЦР-диагностики как М. hominis.
Результаты проведенных исследований обосновывают необходимость строгого контроля обезьян на носительство возбудителей урогенитальной инфекции как при формировании производственного стада, так и при использовании этих животных в медико-биологических экспериментах. Проведенное исследование дает основание рекомендовать обезьян в качестве моделей для экспериментального изучения вопросов патогенеза микоплазм и совершенствования диагностики у людей.
Список литературы
1. Джикидзе, Э. К. Спонтанные микоплазмозы обезьян / Э. К. Джикидзе, Р. И. Крылова // Бюллетень экспериментальной биологии и медицины. - 2001. - Т. 132, № 12. - С. 678-683.
2. Кебу, Т. И. Изучение распространения возбудителей заболеваний, передающихся половым путем, среди обезьян методом генной диагностики / Т. И. Кебу, Э. К. Джикидзе, М. Г. Чикобава, 3. К Стасилевич, В. А. Калашникова, О. А. Султанова, Л. И. Холодилова, Г. С. Галустян // Бюллетень экспериментальной биологии и медицины. - 2005. - Т. 139, № 2. - С. 215-218.
3. Прозоровский, С. В. Медицинская микоплазмология / С. В. Прозоровский, И. В. Раковская, Ю. В. Вульфович. - М.: Медицина, 1995. - 286 с.
4. Раковская, И. В. Генерализованная микоплазменная инфекция у больных и носителей / И. В. Раковская, Л. Г. Горина, Д. Н. Балабанов, Г. А. Левина, О. И. Бархатова, С. А. Гончарова, Н. А. Гамова // Журнал микробиологии, эпидемиологии и иммунобиологии. — 2013. — № 2. — С. 37—43.
5. Левина, Г. А. Необычные формы персистенции Mycoplasma hominis в организме инфицированных людей / Г. А. Левина, О. И. Бархатова, Л. Г. Горина, Н. А. Гамова, С. А. Гончарова, Г. Г. Миллер, Т. М. Раскова, И. Н. Растегаева, Н. А. Селиверстова, И. В. Раковская // Журнал микробиологии, эпидемиологии и иммунобиологии. - 2012. - № 4. - С. 104-109.
6. Чикобава, М. Г. Филогенетический анализ микоплазмы, выделенной от макаки яванской (М. fascicu-laris) / М. Г. Чикобава, Э. К Джикидзе, Д. В. Задорожный, Т. И. Кебу, И. М. Аршба, В. А. Калашникова, А. А. Агумава // Молекулярная генетика, микробиология и вирусология. — 2008. — № 1. — С. 23—26.
7. Щебляков, Д. В. Активация TLR-2 зависимого пути в клетках WEHI-3B миелоцитарного лейкоза мышей приводит к подавлению развития у них апоптоза и стимуляции прогрессии опухоли в условиях in vivo / Д. В. Щебляков, Д. Ю. Логунов, И. В. Раковская, М. М. Шмаров, Б. С. Народицкий, А. Л. Гинцбург // Acta Naturae. - 2011. - Т. 3, № 4. - P. 87-97.
8. Cole, В. С. Characterization of mycoplasmas isolated from the great apes / В. C. Cole, J. R. Ward, J. Golightly-Rowland, С. E. Graham // Can. J. Microbiol. - 1970. - Vol. 16. - P. 1331-1339.
9. Madden, D. L. The isolation and identification of mycoplasma from Cercopethecus aetcope / D. L. Madden, R. J. Hildebrandt, C. R. Monif// Lab. Animal Care. - 1970. - Vol. 20. - P. 467-473.
10. Muhlradt, P. F. Immunomodulation of Mycoplasmas : Artifacts, Facts and Active Molleculs / P. F. Muhlradt // Molecular Biology and Pathogenicity of Mycoplasmas / Ed. by Sh. Razin, R. Herrmann. - N.Y. : Springer Science & Business Media, 2002. - P. 445^72.
References
1. Dzhikidze E. K., Krylova R. I. Spontannye mikoplazmozy obez'yan [Spontaneous simian mycoplasma infection] Byulleten' eksperimental'noy biologii i meditsiny [Bulletin of Experimental Biology and Medicine], 2001, vol. 132, no. 12, pp. 678-683.
2. Kebu Т. I., Dzhikidze E. K, Chikobava M. G., Stasilevich Z. K., Kalashnikova V.A., Sultanova O. A., Kholodilova L. I., Galustyan G. S. Izuchenie rasprostraneniya vozbuditeley zabolevaniy, peredayushchikhsya polovym putem, sredi obez'yan metodom gennoy diagnostiki [Study of the prevalence of agents of sexually transmitted diseases in monkeys by the gene diagnosis method]. Byulleten' eksperimental'noy biologii i meditsiny [Bulletin of Experimental Biology and Medicine], 2005, vol. 139, no. 2, pp. 215-218.
3. Prozorovskiy S. V., Rakovskaya I. V, Vul'fovich Yu. V. Meditsinskaya mikoplazmologiya [Medical my-coplasmology]. Moscow, Medicine, 1995,286 p.
4. Rakovskaya I. V., Gorina L. G., Balabanov D. N., Levina G. A., Barkhatova О. I., Goncharova S. A., Ga-mova N. A. Generalizovannaya mikoplazmennaya infektsiya u bol'nykh i nositeley [Generalized mycoplasma infection in patients and carriers]. Zhurnal mikrobiologii, epidemiologii i immunobiologii [Journal of microbiology, epidemiology and immunobiology], 2013, no. 2, pp. 37-43.
5. Levina G. A., Barkhatova O. A., Gorina L. G., Gamova N. A., Goncharova S. A., Miller G. G., Raskova T. N., Rastegaeva I. N., Seliverstova N. A., Rakovskaya I. V. Neobychnye formy persistentsii Mycoplasma hominis v organizme infitsirovannykh lyudey [Unusual forms of persistence of Mycoplasma hominis in the body of infected people]. Zhurnal mikrobiologii, epidemiologii i immunobiologii [Journal of microbiology, epidemiology and immunobiology], 2012, no. 4, pp. 104-109.
6. Chikobava M. G., Dzhikidze E. K., Zadorozhnyy D. V., Kebu Т. I., Arshba I. M., Kalashnikova V. A., Agumava A. A. Filogeneticheskiy analiz mikoplazmy, vydelennoy ot makaki yavanskoy (M. fascicularis) [Phylogenetic analysis of the mycoplasma isolated from the Javanese macaque (M. fascicularis)]. Molekulyarnaya genetika, mikrobi-ologiya i virusologiya [Molecular Genetics, Microbiology and Virology], 2008, no. 1, pp. 23-26.
7. Shcheblyakov D. A., Logunov D. Yu., Rakovskaya I. V., Shmarov M. M., Naroditskiy B. S., Gintsburg A. L. Aktivatsiya TLR-2 zavisimogo puti v kletkakh WEHI-3B mielotsitarnogo leykoza myshey privodit k podavleniyu razvitiya u nikh apoptoza i stimulyatsii progressii opukholi v usloviyakh in vivo [Triggering of Toll-like receptor-2 in mouse myelomonocytic leukaemia cells WEHI-3B leads to the suppression of apoptosis and promotes tumor progression in vivo]. Acta Naturae, 2011, vol. 3, no. 4, pp. 87-97.
8. Cole B. C., Ward J. R., Golightly-Rowland J., Graham C. E. Characterization of mycoplasmas isolated from the great apes. Can. J. Microbiol., 1970, vol. 16, pp. 1331-1339.
9. Madden D. L., Hildebrandt R. J., Monif C. R. The isolation and identification of mycoplasma from Cer-copethecus aetcope. Lab. Animal Care, 1970, vol. 20, pp. 467-473.
10. Muhlradt P. F. Immunomodulation of Mycoplasmas: Artifacts, Facts and Active Molleculs. In "Molecular Biology and Pathogenicity of Mycoplasmas". Ed. by Sh. Razin, R. Hermann, N.Y., Springer Science & Business Media, 2002, pp. 445—472.
УДК 611.127-091.3:616.89-008.441.13 14.03.00 -Медико-биологические науки
О А.Е. Лазько, А.Ф. Вовченко, 2016
ГИСТОХИМИЧЕСКИЕ ИЗМЕНЕНИЯ МИОКАРДА
ПРИ ВОЗДЕЙСТВИИ ХРОНИЧЕСКОЙ АЛКОГОЛЬНОЙ ИНТОКСИКАЦИИ
Лазько Алексей Евгеньевич, доктор медицинских наук, профессор, заведующий кафедрой патологической анатомии, ГБОУ ВПО «Астраханский государственный медицинский университет» Минздрава России, Россия, 414000, г. Астрахань, ул. Бакинская, д. 121, тел.: (8512) 30-47-01, e-mail: [email protected].
Вовченко Алексей Федорович, ассистент кафедры патологической анатомии, ГБОУ ВПО «Астраханский государственный медицинский университет» Минздрава России, Россия, 414000, г. Астрахань, ул. Бакинская, д. 121, тел.: 8-937-120-17-45, e-mail: [email protected].
Проведено исследование гистохимической активности алкогольдегидрогеназы, глюкоз о-6-фосфатдегидрогеназы, сукцинатдегидрогеназы, кислой и щелочной фосфатаз и неспецифических эстераз в миокарде экспериментальных животных при хронической алкогольной интоксикации. Эксперимент проведен на 50 белых нелинейных мышах-самцах. Животных алкоголизировали в течение 3 месяцев полудобровольным методом, используя в качестве единственного источника жидкости 20 % этанол, что является оптимальным для создания модели хронического алкоголизма. Выявлено повышение активности алкогольдегидрогеназы в кардиомиоци-тах. Суммарная активность сукцинатдегидрогеназы в тканях миокарда снижена по сравнению с контролем. В большей части кардиомиоцитов активность глюкозо-6-фосфатдегидрогеназы определяли в виде линейного отложения диформазана. Повышенная гистохимическая активность щелочной фосфатазы выявлялась в стенках сосудов микроциркуляторного русла. Установлено, что в кардиомиоцитах экспериментальных животных при хронической алкогольной интоксикации возникает изменение обменных процессов, происходит нарушение клеточного метаболизма, что приводит к возникновению повреждений миокарда.
Ключевые слова: миокард, хроническая алкогольная интоксикация, гистохимическая активность, алко-голъдегидрогеназа, глюкозо-6-фосфатдегидрогеназа, сукцинатдегидрогеназа, кислая и щелочная фосфатаза, неспецифические эстеразы.
HISTOCHEMICAL CHANGES IN THE MYOCARDIUM WHEN EXPOSED TO CHRONIC ALCOHOLIC INTOXICATION
Laz'ko Aleksey E., Dr. Sci. (Med.), Professor, Head of Department, Astrakhan State Medical University, 121 Bakinskaya St., Astrakhan, 414000, Russia, tel: (8512) 30-47-01, e-mail: [email protected].
Vovchenko Aleksey F., Assistant, Astrakhan State Medical University, 121 Bakinskaya St., Astrakhan, 414000, Russia, tel: 8-937-120-17-45, e-mail: [email protected].
We have studied the histochemical activity of alcohol dehydrogenase, glucose-6-phosphate dehydrogenase, succinate dehydrogenase, acid and alkaline phosphatases and nonspecific esterases in the myocardium of experimental animals at chronic alcoholic intoxication. The experiment was carried out on 50 white non-linear male mice. The animals had been alcoholized for 3 months by a semi-voluntary method, 20 % ethanol being used as a sole source of liquid, which is optimal for creating a model of chronic alcoholism. The increased activity of alcohol dehydrogenase in car-diomyocytes was revealed. Total activity of succinate dehydrogenase in the tissues of the myocardium is reduced in comparison with the control. In most of the cardiomyocytes the activity of glucose-6-phosphate dehydrogenase was defined as linear deposits of diphormazane. Increased histochemical activity of alkaline phosphatase was detected in the walls of microcirculatory vessels. It was found that chronic alcoholic intoxication results in the change of metabolic processes in cardiomyocytes of the experimental animals, violation of cellular metabolism, which leads to damage of the myocardium.
