CC BY
10
российский жж w» ш а онкологический Y Y \ж I конгресс-2022 /\/\ V I
Онкогематология
ДЕТЕКЦИЯ МУТАЦИЙ В ГЕНАХ FLT3 И NPM1 ПРИ ОСТРЫХ МИЕЛОИДНЫХ ЛЕЙКОЗАХ МЕТОДОМ ФРАГМЕНТНОГО АНАЛИЗА
А.В. Виноградов, С. В. Сазонов
Место работы: ГАУЗ СО «Свердловская областная клиническая больница № 1», ГАУЗ СО «Институт медицинских клеточных технологий», ФГБОУ ВО «Уральский государственный медицинский университет» Минздрава России, Екатеринбург, Россия
Эл. почта: [email protected]
Цель: Определить частоту мутаций в генах FI-ТЗи NPM1 при острых миелоидных лейкозах (ОМЛ) методом фраг-ментного анализа.
Материалы и методы: Исследовали пробы костного мозга и периферической крови 23 больных ОМЛ, проходивших лечение в Свердловском областном гематологическом центре в 2020-2022 гг. С морфологическим вариантом М1 наблюдалось 3 пациента, М2-11, МЗ-4, М4-4, гибридный лейкоз (миело/ В-линейный) — 1. Средний возраст больных составил 58,9 лет. Детекцию внутренних тандемных дупликаций и мутаций в положении D835 кодирующей последовательности тирозинкиназ-ного домена гена FLT3, инсерций в кодирующей последовательности экзона 12 гена NPM1 проводили методом полимеразной цепной реакции с последующим фраг-ментным анализом.
Результаты: Мутации в гене FLT3 были обнаружены в 9 случаях (39,1 %) и были представлены преимущественно внутренними тандемными дупликациями (ITD, n = 8, 34,8 %), замена по позиции D835 тирозинкиназного домена определялась в 1 пробе (4,3 %). Уровень аллельной нагрузки при FLT3 ITD варьировал в диапазоне от 0,06 до 0,75 и составил в среднем 0,43. При этом в трех случаях он был низким (менее 0,15). Мутации в экзоне 12 гена NPM1 выявлены в 5 случаях (21,7 %), во всех случаях — в сочетании с FLT3 ITD. Средний уровень аллельной нагрузки по инсерциям NPM1 составил 0,70, варьируя в диапазоне от 0,47 до 0,88. Варианты ОМЛ, при которых выявлялись сочетание инсерций в гене NPM1 с FLT3 ITD были представлены ОМЛ с нормальным кариотипом: ОМЛ М1-1, ОМЛ М2-3, ОМЛ М4-1. Изолированные мутации FLT3 выявлялись при ОМЛ М4 с комплексными хромосомными аберрациями, ОМЛ М3 с t (15;17) (по одному наблюдению — FLT3 ITD и замена D835) и ОМЛ М2 c t (8;21). Средний возраст больных с двумя генными мутациями составил 62,8 лет, что было несколько выше, чем для изолированных повреждений гена FLT3 (50,5 лет).
Заключение: Таким образом, мутации в генах FLT3 и NPM1 являются частыми молекулярными событиями в онкогенезе острого миелоидного лейкоза, имеющими тенденцию к комбинированию. При этом цитоге-нетический и возрастной профиль больных неодинаков для изолированных мутаций FLT3 и при их сочетании с инсерциями в гене NPM1. Указанные генетические осо-
бенности необходимо учитывать при определении тактики индукции ремиссии и постремиссионного ведения больных ОМЛ.
ИММУНОФЕНОТИПИЧЕСКИЕ ХАРАКТЕРИСТИКИ В-ЛИМФОЦИТОВ У БОЛЬНЫХ ХРОНИЧЕСКИМ ЛИМФОЛЕЙКОЗОМ ПРИ МОНИТОРИНГЕ МИНИМАЛЬНОЙ ОСТАТОЧНОЙ БОЛЕЗНИ НА ЭТАПАХ ТЕРАПИИ
О.Н. Селютина1, Н.К. Гуськова1, И. Б. Лысенко1, Т.Ф. Пушка-рева1, Е.А. Капуза1, М.А. Бараненкова2, И.А. Камаева1
Место работы: 1. ФГБУ «НМИЦ онкологии» Минздрава России, Ростов-на-Дону, Россия; 2. ФГБОУ ВО «Ростовский государственный медицинский университет» Минздрава России, Ростов-на-Дону, Россия
Эл. почта: [email protected]
Цель: Изучить профиль экспрессии иммунофенотипиче-ских маркеров на В-лимфоцитах у больных ХЛЛ при мониторинге МОБ.
Материалы и методы: В исследование включены 20 больных ХЛЛ в возрасте 66,4 ± 1,9 г. (мужчин 64,3 %, женщин 35,7 %), получивших лечение в ФГБУ «НМИЦ онкологии» в период 2019-2022 гг. Больные получили по 6 курсов иммунохимиотерапии (ИХТ) в режиме RB или FCR. До-, после 3 и 6 курса ИХТ выполнялось иммунофенотипи-рование аспирата костного мозга методом проточной цитометрии (Navios 10 / 3, Beckman Coulter, США). Использовались моноклональные антитела: CD45, CD19, CD5, CD10, CD1U, CD20, CD22, CD23, CD 25, CD38, CD43, FMC7, ZAP-70, CD3, kappa, lambda. Данные оценены в программе Statistica 13.0.
Результаты: В зависимости от профиля экспрессии им-мунофенотипических маркеров до лечения выделены 3 группы больных: I (2 чел.-10 %), у которых отсутствовала экспрессия CD38, ZAP-70, CD11c и CD25, уровень экспрессии FMC7 не превышал 0,2%, экспрессия классических для ХЛЛ маркеров стандартна; II (14 чел. -70 %) с вариабельной экспрессией CD25 и CD38 (0,4% — 47,6% и 0,0% — 57,5%, соответственно), отсутствием экспрессии ZAP-70 и CD11c, FMC7-не выше 1,6%, экспрессией остальных маркеров без особенностей; III (4 чел. — 20 %) с высокой экспрессией одновременно всех маркеров CD38 (57,5% — 69,2%), ZAP-70 (36,6% — 48,3%), CD11c (20,0% — 96,5%) и CD25 (64,9 % — 92,7%), FMC7 (13,6% — 88,6 %), стандартной экспрессией классических для ХЛЛ антигенов. После 3 курса ИХТ больные I гр. имели МОБ-негативный статус — в костном мозге клеток ХЛЛ < 0,01% (0%). Пациенты II гр. — количество МОБ от 0,90 % до 0,01% (0,48 ± 0,13 %), обращало внимание снижение экспрессии CD38 на клетках ХЛЛ (< 3 %) на этом этапе, экспрессия остальных марке-
ЗЛОКАЧЕСТВЕННЫЕ ОПУХОЛИ
Российское общество клинической онкологии
том I vol. 12 № 3s1 • 2G22
MALIGNANT TUMOURS
Russian Society of Clinical Oncology
ТЕЗИСЫ ПОСТЕРНЫХ ДОКЛАДОВ И ПРИНЯТЫЕ К ПУБЛИКАЦИИ
Онкогенетика
ров оставалась неизменной. В III гр. остаточная популяция клеток ХЛЛ > 1% (33,5 ± 7,84%), профиль экспрессии всех маркеров, выявленных в дебюте заболевания оставался неизменным. После 6 курса ИХТ медиана и стандартное отклонение количественной характеристики МОБ составили в I гр. 0%; во II — 0,42 ± 0,09 %, в III — 33,2 ± 8,07 %. Профиль экспрессии всех иммунофенотипических маркеров во II и III группах оставался неизменным в сравнении с 3 курсом ИХТ. Отличия в экспрессии иммунофенотипических маркеров у больных разных групп на всех этапах были статистически значимы (р < 0,05). Заключение: В-лимфоциты больных ХЛЛ с МОБ-нега-тивным статусом характеризовались отсутствием экспрессии маркерных молекул CD38, ZAP-70, CD11c, CD25, FMC7. С неудовлетворительным ответом на лечение ассоциируется высокая экспрессия одновременно всех указанных маркеров.
■ ОНКОГЕНЕТИКА
КЛИНИЧЕСКОЕ ЗНАЧЕНИЕ ЭКСПРЕССИИ DNMT3A, ДНРНК LINC00847 И МИКРОРНК MIR-1301 У ПАЦИЕНТОВ С РАКОМ ЖЕЛУДКА
Е.А. Ветчинкина1, И.В. Буре1, Е.Б. Кузнецова12, А.И. Калин-кин2, А.Э. Киселева1, Е.А. Алексеева1, М.В. Немцова1,2 Место работы: 1. ФГАОУ ВО «Первый МГМУ им. И.М. Сеченова Минздрава России» (Сеченовскийуниверситет), Москва, Россия; 2. ФГБНУ «Медико-генетический научный центр», Москва, Россия
Эл. почта: [email protected]
Цель: Провести исследование экспрессии DNMT3A, днРНК LINC00847 и микроРНК miR-1301 в операционных образцах РЖ и оценить их потенциал в качестве прогностических факторов.
Материалы и методы: В исследование включены 62 парных образца операционного материала РЖ и прилежащих морфологически нормальных тканей, а также 5 секционных образцов здоровой ткани желудка. Выделение тотальной РНК проводили с использованием Trizol (Life Technologies), получение кДНК методом обратной транскрипции с использованием набора MiScript II RT Kit (Qiagen), оценку уровня экспрессии проводили с использованием ПЦР в реальном времени и набора MiScript SYBR Green PCR Kit (Qiagen). Статистический анализ был выполнен с использованием Statistica 13.1, компьютерного алгоритма mirDIP и критериев Манна-Уитни и Краскела-Уоллиса, t-крите-рия Стьюдента. Значения р < 0,05 считались статистически значимыми.
Результаты: Анализ с использованием компьютерного алгоритма т№1Р предсказал, что днРНК иЫС00847 и микроРНК т1к-1301 являются возможными регуляторами РЫИТЗА. При сравнении экспрессии РЫИТЗА в секционных здоровых образцах желудка с опухолевой и морфологически нормальной тканью пациентов с РЖ обнаружены статистически достоверные различия (р = 0,003) и (р < 0,001) соответственно. Для ИЫС00847 и т1к-1301 результаты оказались статистически не значимы. Для поиска клинически значимых маркеров РЖ мы провели анализ ассоциаций экспрессии РЫМТЗА, ИЫС00847 и т1к-1301 в опухоли и морфологически нормальной ткани с клиническими характеристиками пациентов. Выявлено, что экспрессия гена РЫМТ3А достоверно повышена в опухоли (р = 0,018) и прилежащей морфологически нормальной ткани пациентов (р = 0,005) при недифференцированном типе РЖ. Экспрессия т1к-1301 достоверно снижается в зависимости от распространенности первичной опухоли, при Т4 экспрессия достоверно ниже, чем в Т1-3 (р = 0,045). Статистически значимых различий экспрессии ИЫС00847 у пациентов с различными клиническими характеристиками не выявлено. При сравнении других показателей (пола, общей выживаемости, 5-летней выживаемости, клинической стадии, наличия или отсутствия перстневидных клеток и отдаленных метастазов) установить статистически значимых различий не удалось. Заключение: Полученные данные дифференциальной экспрессии в здоровых тканях и тканях РЖ для РЫМТ3А и т1к-1301 позволяют предположить их потенциальную прогностическую значимость при РЖ. Работа выполнена при финансовой поддержке Российского научного фонда (грант № 20-75-10117).
МОЛЕКУЛЯРНО-ГЕНЕТИЧЕСКОЕ СЕКВЕНИРОВАНИЕ НЕЙРОЭНДОКРИННЫХ ОПУХОЛЕЙ ЖЕЛУДОЧНО-КИШЕЧНОГО ТРАКТА
А.В. Андросова1,2, Р.В. Орлова1,2, М.Г. Гордиев4, А.К. Иванова2 Н.П. Беляк12, С.И. Кутукова23
Место работы: 1. ФГБОУ ВО «Санкт-Петербургский государственный университет» Санкт-Петербург, Россия; 2. СПбГБУЗ «Городской клинический онкологический диспансер», Санкт-Петербург, Россия; 3. ФГБОУВО «Первый Санкт-Петербургский государственный медицинский университет им. академика И.П. Павлова», Санкт-Петербург, Россия; 4. «Лечебно-диагностический центр Международного института биологических систем имени Сергея Березина», Санкт-Петербург, Россия Эл. почта: [email protected]
Цель: Оценить молекулярно-генетические особенности нейроэндокринных опухолей ЖКТ
Материалы и методы: Всего протестировано 30 опухолевых блоков пациентов с НЭО ЖКТ методом секвени-
ЗЛОКАЧЕСТВЕННЫЕ ОПУХОЛИ Российское общество клинической онкологии
том / vol. 12 № 3s1 • 2022
MALIGNANT TUMOURS
Russian Society of Clinical Oncology
