CC BY
23
«Дни иммунологии в СПб 2017» Immunology Days in St. Petersburg 2017
Медицинская Иммунология Medical Immunology (Russia)/Meditsinskaya Immunologiya
ВЛИЯНИЕ ГЕПАРИНА НА УРОВЕНЬ ФАКТОРА РОСТА ЭНДОТЕЛИЯ СОСУДОВ В ПЛАЗМЕ КРОВИ У БОЛЬНЫХ С ОСТРЫМ КОРОНАРНЫМ СИНДРОМОМ, НАПРАВЛЕННЫХ НА ЧРЕЗКОЖНОЕ КОРОНАРНОЕ ВМЕШАТЕЛЬСТВО
Сенькина Е.И.1, Богомолов А.Н.1, Мешкова М.Е.2, Тишко В.В.2, Малахова Е.А.2
1 СПбГБУЗ «Александровская больница», Санкт-Петербург, Россия
2 Военно-медицинская академия, Санкт-Петербург, Россия
Введение. Широкое внедрение в клиническую практику стентирования коронарных артерий достоверно улучшает прогноз у больных ишемической болезнью сердца (ИБС), однако до 30% успешно выполненных процедур осложняется развитием рестеноза внутри стента (РВС). Значительную роль в этом процессе играет фактор роста эндотелия сосудов (VEGF-A). При возникновении острой ишемии миокарда, в частности — острого коронарного синдрома (ОКС) с последующим выполнением стентирования зачастую наблюдается интенсивная экспрессия VEGF-A и патологический ангиогенез, приводящий к быстрой васкуляризации и росту формирующейся над стентом неоинтимы. Стабильно высокий уровень VEGF-A отмечается в первые 7-10 дней после имплантации стента, после чего наблюдается постепенное его снижение до исходного в течение 2-3 недель. Согласно литературным данным, после планового стентирования больных стабильной ИБС резкое нарастание VEGF-A ассоциируется с высоким риском развития РВС. В настоящее время исследователями предпринимается попытка оценить прогностическую значимость VEGF-A в развитии рестеноза у больных ОКС.
Цель. Изучить динамику VEGF-A в плазме крови у больных ОКС до и после выполнения коронарного стен-тирования.
Материалы и методы. Исследованы образцы плазмы крови 51 пациента с ОКС в возрасте от 40 до 75 лет (средний возраст — 60,5±8,5 лет), непосредственно до и после выполнения коронарного стентирования. Все пациенты были разделены на 2 группы по принципу назначения гепарина на догоспитальном этапе: первая группа включила 31 пациента, которым за 30-45 мин до проведения стентирования вводился гепарин в дозе 5000 Ед, вторую группу составили 20 человек, которые по различным причинам перед стентированием гепарин не получили (самообращение, сомнения врачей СМП в диагнозе). Для определения концентрации VEGF-А в сыворотке крови использовали метод иммуноферментного анализа (тест-система фирмы eBioscience, Bender MedSystems, Австрия). Средние значения исследуемых показателей представлены медианой и ошибкой среднего. Сравнение статистической значимости различий производилась при помощи приложения XLSTAT критерием Манна—Уитни.
Результаты и обсуждение. Уровень VEGF-A в плазме крови пациентов из первой группы перед выполнением коронарного стентирования был низким и составил 22,6±16,2 пг/мл, что обусловлено эффектами гепарина на VEGF-A (его блокада). На следующие сутки после стентирования было отмечено резкое нарастание уровня VEGF-A в этой группе до 545±247 пг/мл, ввиду отмены гепарина и перевода пациентов на двойную анти-агрегантную терапию. Во второй группе достоверного
различия уровней VEGF-A до и после стентирования не получено из-за отсутствия догоспитальной гепариниза-ции (356±179 пг/мл и 659±264,2 пг/мл соответственно; р = 0,9). Различия уровней VEGF-A в двух группах до выполнения стентирования было достоверным (р < 0,001).
Заключение. На основании полученных результатов и литературных данных следует отметить, что у больных с ОКС до проведения чрескожных коронарных вмешательств исследование уровня VEGF-A для оценки риска развития рестеноза нецелесообразно, так как блокирующий эффект гепарина не позволяет получить достоверные результаты данного показателя в отличие от больных стабильной формой ИБС, не получающих гепарин перед реваскуляризацией. В то же время следует рассмотреть возможность кратковременного применения низкомолекулярных гепаринов после проведения коронарного стентирования у пациентов с высоким риском развития рестеноза в стенте или после баллонной ангиопластики.
ХРОНИЧЕСКАЯ ИШЕМИЯ ГОЛОВНОГО МОЗГА: ВЗАИМОСВЯЗЬ ИММУННЫХ НАРУШЕНИЙ И ИЗМЕНЕНИЙ СТРУКТУРНО-ФУНКЦИОНАЛЬНЫХ СВОЙСТВ ЭРИТРОЦИТОВ
Суняйкина О.А., Шульгинова А.А., Гаврилюк В.П., Быстрова Н.А.
Курский государственный медицинский университет, Курск, Россия
Введение. Ранее проведенные нами исследования выявили иммунные нарушения и изменения содержания и соотношения белков и липидов мембраны эритроцитов при хронической ишемии мозга (ХИМ), однако в литературе не освещены вопросы патогенетической роли эритроцитов в возникновении и развитии ХИМ во взаимосвязи с иммунными нарушениями.
Цель и задачи. Установление взаимосвязи между иммунными нарушениями и изменениями белково-липид-ного спектра мембраны эритроцитов при хронической ишемии мозга I стадии.
Материалы и методы. Под наблюдением находились 23 пациента в неврологическом отделении БМУ «Курская областная клиническая больница» с I стадией ХИМ на фоне гипертонической болезни II стадии в возрасте 50,2±5,1 лет. Иммунные нарушения оценивали по показателям в циркулирующей крови функционально-метаболической активности нейтрофилов, уровню в плазме крови цитокинов, компонентов комплемента. Мембраны эритроцитов выделяли из 10 мл гепаринизированной крови методом G.T. Dodge, липиды мембран определяли с помощью тонкослойной хроматографии, а белки методом электрофореза по методу U.K. Laemmli.
Результаты. В плазме крови больных ХИМ до начала лечения установлено повышение концентрации провос-палительных цитокинов: TNFa, IL-1ß, IL-6, IL-8, IL-17, IL-18 и противовоспалительных: IL-4, IL-10 и IL-1ra. У больных с ХИМ перед началом лечения в плазме крови выявлено снижение содержания С3 и С5-компонентов комплемента, С1-ингибитора, повышение компонентов С3а и С5а, уровень С4 и ингибитора фактора Н остался в пределах нормы. У больных ХИМ определяется отсутствие изменений по сравнению со здоровыми донорами показателей активности и интенсивности фагоцитоза, увеличение НСТ-спонтанного. При ХИМ до лечения
2017, Т. 19, Специальный выпуск 2017, Vol. 19, Special Issue
Иммунология заболеваний сердечно-сосудистой системы Immunology of cardiovascular system diseases
установлено снижение в эритроцитарной мембране уровня а- и ß-спектрина соответственно на 10,7 и 9,0%, анкирина на 25,2%, паллидина на 22,7%, белка полосы 4,5 на 36,4%, дематина на 26,7%, глицеральальдегид-3-фосфатдегидрогеназы (Г-3-ФД) на 9,6% при повышении содержания анионтранспортного белка (АТБ) на 9,9%, актина на 17,0%, тропомиозина на 37,7% при нормальном уровне белка полосы 4.1 и глутатион^-трансферазы (Г-S-T). При поступлении в клинику у больных ХИМ выявлено снижение в эритроцитарной мембране содержания фосфатидилхолина (ФХ) на 27,1%, фосфатидилэ-таноламина (ФЭ) на 18,8%, фосфатидилинозитола (ФИ) на 23,5%, глицерофосфолипидов на 9,4%, сфингомие-лина (СМ) на 34,6%, фосфолипидов на 12,5%, эфиров холестерола (ЭХ) на 16,3%, холестеринов на 7%, повышение уровня лизофосфатидилхолина (ЛФХ) на 39,0%, триацилглицеролов (ТАГ) на 34,7%, неэстерифициро-ванных жирных кислот (НЭЖК) на 24,4%, при нормальном содержании фосфатидилсерина (ФС), холестерола (Х) и моно- и диацилглицеролов (МАГ, ДАГ). Анализируя матрицу множественной корреляции Спирмена между изучаемыми показателями иммунного статуса и белково-липидного спектра мембран эритроцитов установлены положительные и отрицательные достоверных связи, наиболее выраженные из которых между концентрацией IL-6 и представительности анкирина (p = 0,91) и глутатион^-трансферазы (p = 0,91), сфингомиелина (p = 0,93); уровнем С3а и представительностью дематина (p = 0,92) и фосфатидилинозитола (p = 0,88); уровнем фактора Н и представительностью анионтранспортного белка (p = 0,93).
Заключение. Полученные результаты свидетельствуют о том, что при ХИМ I стадии наблюдаются выраженные изменения иммунного статуса и белково-липидного спектра мембран эритроцитов. Нарушения иммунного статуса и белково-липидного спектра мембран эритроцитов тесно связаны между собой, что обуславливает взаимообусловленность данных звеньев гомеостаза в патогенезе ХИМ, что необходимо учитывать при разработке эффективных методов лечения у данной категории пациентов.
ФАГОЦИТАРНАЯ АКТИВНОСТЬ МАКРОФАГОВ И СУРФАКТАНТ ЛЕГКИХ В ДИНАМИКЕ НЕПОЛНОЙ ГЛОБАЛЬНОЙ ИШЕМИИ МОЗГА
Трушникова Р.В., Лукина С.А.
ФГБОУ ВО «Ижевская государственная медицинская академия», Ижевск, Россия
Введение. Развитие дизрегуляционной нейросомати-ческой патологии значительно усугубляет тяжесть состояния пациентов с ишемическим поражением мозга. Летальность в ранние сроки (первые 30 дней) ишемического инсульта достигает 34,6% (Скворцова В.И. и соавт., 2006). Частой причиной смерти больных является дыхательная недостаточность на фоне развития застойных пневмоний, респираторного дистресс-синдрома (Сон А.С. и соавт., 2010). Важнейшим адаптационным механизмом респираторного отдела легких является сурфактант, который наряду с антиателектатической функцией обеспечивает локальные иммунорегуляторные эффекты (Phelps D.S., 2001). Известно об активирующем влиянии белка SP-A сурфактанта на альвеолярные макрофаги, процессы фагоцитоза и киллинга (Kishore U. et al., 2006). Основные
липиды сурфактанта, напротив, обеспечивают супрес-сорные эффекты (Yoshida M. et al., 2004).
Цель. Изучение фагоцитарной активности альвеолярных макрофагов и состояния сурфактантной системы легких в динамике ишемического поражения мозга.
Материалы и методы. Опыты выполнены на половозрелых крысах-самцах в соответствии с этическим кодексом по проведению медико-биологических исследований. Неполную глобальную ишемию головного мозга моделировали путем билатеральной окклюзии общих сонных артерий (Щербак Н.С., 2011). Исследования проводили через сутки (n = 12), 10 дней (n = 16) и 3 недели (n = 10) от начала эксперимента. В качестве контроля выступали ложнооперированные животные (n = 11). Получали бронхо-альвеолярные смывы. Определяли содержание фосфолипидов, холестерина, активность фосфолипазыА в исследуемом материале. Изучали поверхностно-активные свойства сурфактанта, определяя поверхностное натяжение (ПН) смывов в цикле сжатие-растяжение мономолекулярной пленки, расчитывая индекс стабильности (ИС) альвеол. Оценивали эндопульмональную цитограм-му, определяли фагоцитарную активность макрофагов по поглощению монодисперсных частиц латекса. Об интенсивности свободно-радикальных реакций судили по концентрации малонового диальдегида и активности катала-зы в гомогенате легочной ткани. Статистический анализ выполнен на основе программного обеспечения «SPSS 17 for Windows». Сравнение параметров в группах с учетом характера распределения выборки проводили непараметрическим U-критерием Манна—Уитни.
Результаты. Было установлено, что через сутки от начала эксперимента (летальность 37%) в составе бронхо-альвеолярных смывов возросло содержание макрофагов (р < 0,01), с увеличением доли фагоцитирующих клеток (р < 0,001), повышением активности свободно-радикальных реакций в легочной ткани (р < 0,01). Изменения метаболизма сурфактанта характеризовались увеличением оборота фосфолипидов с повышением их продукции (р < 0,01) и катаболизма (р < 0,001). ПН бронхо-аль-веолярных смывов возросло, ИС альвеол уменьшился (р < 0,001). Выявленные нарушения поверхностной активности сурфактанта могли быть обусловлены детер-гентным влиянием лизосоединений на выстилающий комплекс альвеол при высокой интенсивности реакций фосфолипазного гидролиза (р < 0,001). На десятый день эксперимента (летальность 57%) содержание макрофагов в бронхо-альвеолярных смывах уменьшилось, снизился фагоцитарный индекс и фагоцитарное число (р < 0,001). Через 3 недели (летальность — 83%) отмечали прогреди-ентное уменьшение фагоцитирующих клеток в составе бронхо-альвеолярных смывов и их активности (р, р1 р2 < 0,001). При этом продукция фосфолипидов сурфактанта к 3 неделе уменьшилась (р, р1 < 0,01), ИС альвеол понизился в 1,9 раз (р, р1 р2 < 0,01). Активность ПОЛ и фофолипазыА2 прогредиентно нарастали и к 3 неделе достигли максимальных значений (р, pt p2 < 0,001). Выявленные изменения фагоцитарной активности альвеолярных макрофагов и метаболизма липидов сурфактанта могут быть результатом гормональных сдвигов в условиях стресс-индуцированной реакции организма, а также следствием дизрегуляционных расстройств в условиях ишемического поражения мозга.
Заключение. Уменьшение фагоцитарной активности макрофагов легких наряду с ухудшением поверхностно-активных свойств выстилающего комплекса альвеол от-
