CC BY
60
одну из указанных лекарственных форм. Через 1 ч после нанесения основание хвоста в области метки сдавливали лигатурой и регистрировали динамику прироста объема хвоста в сроки через 1, 2, 3, 4 ч после наложения лигатуры. За 1 ч до снятия лигатуры препараты в указанных дозах наносили повторно. Лигатуру снимали и регистрировали инволюцию отека в динамике в сроки 1, 2, 3, 4 и 24 ч [3].
Исходные показатели не имели статистически достоверных различий. Максимальный отек, вызванный веностазом, развивается к 4-му часу после сдавливания. В контрольной серии он не исчезает в течение 24 ч.
2%-й гель троксевазина подавляет транссудацию в острый период веностаза через 4 ч после наложения лигатуры, усиливает резорбцию транссудата после снятия лигатуры (достоверные изменения отмечены через 2, 3 и 4 ч после ее снятия относительно контрольных экспериментов).
Традиционный гель подавляет транссудацию в острый период веностаза через 2 ч после наложения лигатуры относительно физиологического раствора и препарата сравнения - 2%-го геля троксевазина, а также усиливает процесс резорбции транссудата после снятия лигатуры (изменения отмечены через 2, 3 и 4 ч после ее снятия относительно 2%-го геля троксевазина), не изменяет интенсивность и динамику инволюции через 24 ч.
Липосомальный гель через 1 и 3 ч измерения подавляет развитие отека в острый период веностаза относительно контроля, через 4 ч относительно контроля, 2%-го геля троксевазина, и традиционного геля и ускоряет интенсивность и динамику его инволюции. После снятия лигатуры наблюдается достоверное усиление резорбции транссудата через 1 ч относительно физиологического раствора, 2%-го геля троксевазина, геля традиционного, через 2, 3 и 4 ч наблюдали достоверные сдвиги относительно физиологического раствора.
Таким образом, в ходе проведенного эксперимента более эффективно (на разных этапах) тормозит процесс транссудации и усиливает процесс резорбции транссудата при веностазе липосомальный гель с извлечениями из околоплодника ореха черного, цветков каштана конского, соцветий арники горной.
Механическую травму наносили грузом массой 0,7 кг с высоты 15,0 см по тыльной поверхности стопы крысы, находящейся под легким эфирным наркозом [3].
Пятигорская государственная фармацевтическая академия
У голодавших в течение 6 ч крыс с помощью онко-метра измеряли исходный объем лапки по голеностопный сустав. Лапку просушивали и наносили травму. Сразу после травмы на лапу (до голеностопного сустава) тонким слоем (не втирая) наносили изучаемые лекарственные формы. Повторно исследуемые препараты наносили через 4, 24, 48, 96 и 120 ч после травмы в указанных выше дозах [3].
Прирост объема лапки регистрировали в сроки через 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 24, 48 и 96 ч после нанесения травмы.
Как следует из полученных данных, травматический отек достигает максимума через 24 ч после нанесения травмы и не исчезает спустя 48 и 96 ч.
2%-й гель троксевазина подавляет интенсивность отека с 8-го часа наблюдения и до конца эксперимента относительно физиологического раствора.
Гель с извлечениями ореха черного, каштана конского, арники горной подавляет отек с 8-го по 48-й ч и через 120 ч после травмы относительно физиологического раствора и геля троксевазина. Через 96 ч наблюдается уменьшение отека относительно физиологического раствора.
Липосомальный гель подавляет развитие отека в ранние сроки после травмы через 3 ч относительно физиологического раствора и традиционной мази, через 4 ч относительно 2%-го геля троксевазина. После нанесения травмы через 5 ч отек уменьшается относительно физиологического раствора, 2%-го геля троксевазина, и традиционного геля. Достоверное уменьшение травматического отека относительно физиологического раствора и традиционной гелевой композицией наблюдали и в более поздние сроки (24, 48, 96 и 120 ч).
Таким образом, преимущество липосомального геля с фитокомпозицией ореха черного, каштана конского, арники горной перед препаратами сравнения заключается, прежде всего, в более раннем подавлении интенсивности травматического воспаления.
Литература
1. АлексееваЕ. // Рос. аптеки. 2004. № 5. С. 42-43.
2. Сернов Л.Н., Гацура В.В. Элементы экспериментальной фармакологии. М., 2000.
3. Фисенко В.Г. Руководство по экспериментальному (доклиническому) изучению новых фармакологических веществ. М., 2000.
26 мая 2006 г.
УДК 615.451.16:582.794.1].07.015
ХИМИЧЕСКИЙ СОСТАВ И ФАРМАКОЛОГИЧЕСКАЯ АКТИВНОСТЬ ЭКСТРАКТА ТРАВЫ КОРИАНДРА ПОСЕВНОГО
© 2006 г. З.М. Нерсесян, А.Ю. Пархоменко, В.Е. Погорелый, Л.М. Макарова, Э. Т. Оганесян
Was study chemical investigate of herb Coriander sativa showed the presence of different groups of compounds, such as phenolic compounds (flavonoids, coumarins, phenolcarbolic acids) amino acids, macro- and microelements, organic acids and polysaccharides. After carrying out of pharmacological screening of different fraction of Coriander sativa there was found that the spirituous extract brightly demonstrated the hypotensive action and reduced the heart rate.
Кориандр посевной (Coriandrum sativum L.) семейс- пользуется в медицине. Благодаря содержанию эфирно-тво Apiaceae (Umbellifirae) - зонтичные - широко ис- го масла, препараты из плодов данного растения при-
меняют как улучшающие пищеварение, возбуждающие аппетит, а также в качестве желчегонных средств. Они используются для лечения заболеваний гепетобилиар-ной системы, а также в качестве антисептического и болеутоляющего средства при гастритах и язвенной болезни желудка. Плоды входят в состав желчегонного и желудочного сборов [1]. В народной медицине народов Закавказья имеются рекомендации по применению травы кориандра в комплексе с кисломолочными продуктами в качестве гипотензивного средства.
На предварительном этапе нами был изучен аминокислотный, макро- и микроэлементный состав травы кориандра. Обнаружено 15 аминокислот, в том числе 5 незаменимых [2]. Для растения характерно высокое содержание фосфора, магния, кальция, натрия и калия.
В цветущей траве находится около 2,1±0,02 % флаво-ноидов, а в траве, собранной до цветения, - 0,6±0,01 %.
Полисахаридный комплекс представлен водорастворимыми полисахаридами (ВРПС), пектиновыми веществами (ПВ), гемицеллюлозой А (Гц А), Б (Гц Б). Для каждой из этих фракций установлен моносахаридный состав, где доминируют арабиноза, галактоза, ксилоза и рамноза. Во фракции ПВ обнаружена галактуроновая кислота [3].
Хроматографически идентифицированы яблочная, янтарная, винная и аскорбиновая кислоты.
Общеизвестно, что кориандр посевной является пищевым растением и возделывается в промышленных масштабах для сбора семян, зелёная же масса растения остаётся неиспользованной. В этой связи представляется целесообразным применение травы в качестве источника биологически активных веществ. Для решения этой задачи разработана технология получения суммарной субстанции и проведено её химическое и фармакологическое изучение.
Для выбора оптимальных условий технологического процесса осуществлялась экстракция сырья водным этанолом различной концентрации с последующим фармакологическим скринингом полученных извлечений. Установлено, что наибольшей активностью характеризуется извлечение, полученное экстракцией 40%-м водным этанолом, которое далее подвергалось химическому и фармакологическому исследованию. Эксперименты проводились с сухим экстрактом, полученным путём полного удаления растворителя.
Методом ВЭЖХ установлено, что полифенольные соединения представлены кумаринами (эскулин, эскуле-тин, умбеллиферон, скополетин, 4-оксикумарин и др.), флавоноидами (О-гликозиды, С-гликозиды и некоторые агликоны) и фенолкарбоновыми кислотами (феруло-вая, галловая). Следует отметить, что преобладающими компонентами являются галловая и феруловая кислоты, ориентин, хризоэриол, витексин и диосмин.
Из аминокислот в сухом экстракте в наибольшем количестве присутствуют аспарагин, глютамин и аргинин [2]. Для экстракта также характерно высокое содержание тех же микро- и макроэлементов, которые обнаружены в растении.
В результате фармакологического скрининга было выявлено, что экстракт обладает ноотропной и анти-стрессорной активностью при хронической адреналиновой интоксикации [4, 5]. Целесообразно было провести
дальнейшее изучение влияния экстракта кориандра на артериальное давление (АД) у нормотензивных бодрствующих крыс.
Исследуемые соединения вводились перорально в течение месяца в дозе 20 мг/кг в виде водного раствора. Контрольной группе вводили физиологический раствор в эквивалентном соотношении. Введение водного раствора экстракта в дозе 20 мг/кг приводит к снижению АД и в среднем на 30 день. Системное артериальное давление у животных составляет от 85 до 90 мм рт. ст.
Экспериментальная часть
Для получения сухого экстракта траву, собранную во время цветения, подвергали экстрагированию 40%-м спиртом этиловым в течение 1 ч с обратным холодильником на водяной бане при температуре 60-70 °С и постоянном перемешивании (кратность экстракции - 3; соотношение: сырьё - экстрагент - 1:7, 1:5, 1:5). Полученные извлечения фильтровали в горячем виде и соответственно объединяли. Растворитель удаляли под вакуумом. Полученный остаток выпаривали в фарфоровой чашке на водяной бане до сухого остатка.
Экспериментальная химическая часть
Качественный состав и количественное содержание минеральных элементов в золе определяли методом эмиссионного спектрального анализа на спектрофотометре ДФС-8-1 (Россия).
Анализ на содержание свободных и связанных аминокислот проводили в сухих спиртовых извлечениях на аминокислотном анализаторе АА-33 (Microtecha, Чехия) в стандартных условиях, обычно используемых для разделения белковых гидролизатов [1].
Определение полифенольных соединений проводили на высокоэффективном жидкостном хроматографе фирмы «GILSON» (Франция) (модель 305) с ручным инжектором RHEODYNE-7125 (USA) с последующей компьютерной обработкой результатов исследования, используя программу «МультиХром» для Windows. В качестве неподвижной фазы была использована металлическая колонка размером 4,6 х 250 мм PLATINUM EPS C18 100. В качестве подвижной фазы - метанол-вода-фосфорная кислота концентрированная, в соотношении 400:600:5. Анализ проводили при комнатной температуре. Скорость подачи элюента 0,5 мл/мин. Продолжительность анализа 170 мин. Детектирование проводилось с помощью УФ детектора «GILSON» UV/ VIS модель 151, при длине волны 254 нм.
Экспериментальная фармакологическая часть
Опыты проведены на белых беспородных крысах массой 200-300 г, возраст которых составлял 2-3 мес. Количество животных в каждой серии составляло 6 штук [6]. Животные выращены в стандартных условиях вивария, питомнике Пятигорской государственной фармацевтической академии.
Системное АД определяли монометрически [7]. Статистическую обработку результатов исследования проводили с использованием t-критерия Стьюдента. Изменения считали достоверно значимыми при наблюдении эффекта у 95 % оцениваемых животных (р < 0,05) [8].
Таким образом, экстракт травы кориандра характеризуется широким спектром биологически активных соединений и в дозе 20 мг/кг при пероральном курсовом введении снижает АД. Фармакологическое изучение фракции из травы кориандра дает основание для дальнейшего более углубленного исследования.
Литература
1. Комарова В.Л. Флора СССР. М.; Л., 1964. Т. 16. С. 36-40.
2. Нерсесян З.М. // Научное обозрение. 2005. № 4. С. 19-21.
Пятигорская государственная фармацевтическая академия
3. Нерсесян З.М. // Научное обозрение. 2006. № 2. С. 27-29.
4. Нерсесян З.М. // Научное обозрение. 2005. № 6. С. 25-28.
5. Нерсесян З.М. // Научное обозрение. 2005. № 6. С. 29-32.
6. Фисенко В.П. Руководство по экспериментальному (доклиническому) изучению новых фармакологических веществ. М., 2000.
7. Мурашев А.Н. Руководство по экспериментальной физиологии кровообращения. Саратов, 1992.
8. Беленький М.П. Элементы количественной оценки фармакологического эффекта. Л., 1963.
26 мая 2006 г.
УДК 615.322:547.548
ИЗУЧЕНИЕ ФЕНОЛЬНЫХ СОЕДИНЕНИЙ ИЗ ТРАВЫ СОЛЯНКИ ДРЕВОВИДНОЙ МЕТОДОМ ВЫСОКОЭФФЕКТИВНОЙ ЖИДКОСТНОЙ ХРОМАТОГРАФИИ
© 2006 г. И.Б. Петросян
Phenolic compounds from herb of Salsola dendroides were isolated, identified and measured quantitatively for the first time. Quantitative content of flavonoids is offered as quality factor for the herb.
Изучение растений отечественной флоры является важным направлением в осуществлении поиска биологически активных веществ. Все возрастающему вниманию к лекарственным растениям способствует большое число случаев непереносимости ряда синтетических препаратов, побочные явления при их применении и иногда возникновение так называемой «лекарственной болезни». Растительные же препараты более близки природе человека, лучше им переносятся и могут применяться длительное время.
В последние годы заметно вырос интерес к представителю рода Salsola - солянке холмовой - Salsola collina Pall. Illustr. Этот вид содержит значительно меньше алкалоидов, чем солянка Рихтера (0,03 % в солянке холмовой и 0,7-3,1 % - Рихтера), и произрастает в Сибири, применяется в традиционной китайской и тибетской медицине. Как показали проведенные исследования, основной фармакологической активностью обладает комплекс веществ, получаемый из надземной части солянки холмовой, содержащий флавоноиды и азотистые основания, а также каротиноиды, стерины, сапонины, липиды, аминокислоты и микроэлементы [1].
На основе надземной части солянки холмовой были предложены биологически активные добавки (БАД) салсоколлин и лохеин, представляющие собой различные типы фитокомплексов. Приводятся данные об их гепатозащитной активности, мембраностабилизирую-щем и антинекрозогенном действии [2].
Солянка древовидная (Salsola dendroides Pall.) широко произрастает на территории Северного Кавказа и представляет интерес для изучения как местный аналог солянки холмовой. Согласно литературным данным и нашим собственным предварительным исследованиям, трава солянки древовидной имеет сходный состав с холмовой.
Из всех групп биологически активных веществ, содержащихся в солянке, наиболее фармакологически активными считаются четвертичные азотистые основания и фенольные соединения [3]. Именно поэтому объ-
ектом исследования стало подробное изучение состава фенольных соединений, содержащихся в траве солянки древовидной. Это исследование проводится впервые.
Изучение качественного состава фенольных соединений травы солянки проводили на высокоэффективном жидкостном хроматографе (ВЭЖХ) фирмы «GILSTON», модель 305, Франция. Инжектор ручной, модель RHEODYNE 7125 USA, с последующей компьютерной обработкой результатов исследования с помощью программы «Мультихром» для Windows.
В качестве неподвижной фазы использована металлическая колонка размером 4,6 х 250 мм PLATINUM EPS С 18 100, размер частиц - 5 микрон.
В качестве подвижной фазы - метанол - вода - фосфорная кислота концентрированная, в соотношении 400:600:5. Анализ проводился при комнатной температуре. Скорость подачи элюента 0,5 мл/мин. Продолжительность анализа 60 мин. Детектирование проводилось с помощью УФ-детектора «GILSTON» UV/VIS модель 151, при длине волны 254 нм.
Трава солянки древовидной измельчалась до размера частиц, проходящих сквозь сито с диаметром отверстий 2 мм (ГОСТ 214-83 ).
Около 10,0 г измельченной травы помещали в колбу вместимостью 250 мл, прибавляли по 50 мл спирта этилового 70%-го, присоединяли к обратному холодильнику и нагревали на кипящей водяной бане в течение 1 ч с момента закипания спиртоводной смеси в колбе. После охлаждения смесь фильтровали через бумажный фильтр в мерную колбу объёмом 100 мл и доводили спиртом этиловым 70%-м до метки. 10 мл полученного раствора помещали в мерную колбу вместимостью 100 мл и доводили 70%-м спиртом этиловым до метки (исследуемый раствор).
Параллельно готовили серию 0,05%-х растворов сравнения в 70%-м спирте этиловом: кверцетина, лютеолина, лютеолин-7-глюкозида, галловой кислоты, кофейной кислоты, хлорогеновой кислоты, коричной кислоты, гиперози-
