CC BY
51
УДК 615.07:547.655.6:543.422.7
РАЗРАБОТКА МЕТОДИКИ КОЛИЧЕСТВЕННОГО ОПРЕДЕЛЕНИЯ НАФТОХИНОНОВ В КОРНЯХ СИНЯКА РУССКОГО
© 2006 г. Ж.В. Дайронас
The technique of quantitative photocolorimetric definition of naphthoquinones in roots of Echium russicum in recalculation on shikonin is developed. The method is characterized by linearity and adequate accuracy.
Нафтохиноновый пигмент шиконин и его эфиры оказывают антибактериальное, противовирусное, противоопухолевое, ранозаживляющее и противовоспалительное действие [1]. Существуют методики количественного определения шиконина в корнях воробейника краснокорневого, основанные на извлечении шиконина органическим растворителем с последующей экстракцией раствором натрия гидроксида. Оптическую плотность окрашенного в синий цвет раствора определяют далее фотоколориметрическим или спектрофотометри-ческим методом [2, 3]. Однако, по данным литературы, шиконин в корнях синяка русского (БсЫиш гшБюиш .Т.Е вше1.) можно анализировать без дополнительной очистки раствором натрия гидроксида [4], что позволяет упростить методику количественного определения и избежать возможных потерь вследствие неполного экстрагирования. Поэтому цель нашей работы - разработка методики фотоколориметрического определения содержания шиконина в корнях синяка русского по собственной окраске пигментов.
Корни синяка русского были заготовлены на перевале Гумбаши (Карачаево-Черкесская Республика) в фазу плодоношения. Шиконин выделен по методике А.С. Романовой [4]. Подлинность и чистоту выделенного соединения оценивали с помощью хроматографии в тонком слое сорбента и спектрофотометрии. На хроматограмме обнаруживалось только одно пятно, по величине Ш- соответствующее шиконину. Спектр поглощения выделенного вещества полностью совпал со спектром поглощения раствора рабочего стандартного образца шиконина, предоставленного зав. лабораторией хемотаксономии академиком П.Г. Горовым (ТИБОХ, г. Владивосток).
Для определения максимума поглощения измеряли оптическую плотность раствора шиконина в хлороформе на фотометре КФК-3-01 в интервале длин волн 315600 нм с шагом 5 нм. В качестве раствора сравнения использовался хлороформ. По полученным значениям был построен график зависимости оптической плотности от длины волны. Оптическая плотность имела максимальную величину при 525 нм.
Далее готовили серию разведений шиконина в хлороформе с концентрациями растворов 0,008 %, 0,006 %; 0,004 %; 0,003 %; 0,002 %; 0,0015 % и 0,0010 %, измеряли их оптическую плотность, по полученным данным строили градуировочный график (рисунок). Для проверки характера зависимости оптической плотности от концентрации шиконина проводили анализ регрессии. В результате эксперимента было установлено, что между концентрацией шиконина и оптической плотностью наблюдается линейная зависимость. Это подтвердилось величиной достоверности аппроксимации
(Я2 = 0,99), при этом уравнение линии тренда имело вид у = 149,29х.
%
0,006
На основании полученных данных была разработана методика количественного определения шиконина и его производных в корнях синяка русского: около 0,2 г (точная навеска) измельчённого сырья помещали в колбу, приливали 10 мл хлороформа и нагревали 15 мин на водяной бане с обратным холодильником. Экстракцию повторяли дважды. Извлечения фильтровали через бумажный складчатый фильтр в мерную колбу объёмом 25 мл. Содержимое колбы доводили хлороформом до метки, перемешивали и измеряли оптическую плотность при длине волны 525 нм на фотометре КФК-3-01 относительно хлороформа в кювете с толщиной поглощающего слоя 3 мм. Концентрацию шиконина определяли по градуировочному графику. Содержание нафтохинонов в пересчёте на шиконин в абсолютно сухом сырье в % (Х) вычисляли по формуле: С-25-100 ~ l a {m-W)'
где С - концентрация испытуемого раствора, определенная по градуировочному графику, %; а - навеска сырья, г; W - влажность сырья, %; l - толщина кюветы, см.
По разработанной методике нами были проанализированы 6 навесок, взятых из одной пробы сырья. Статистическую обработку проводили с помощью программы Microsoft Excel с использованием критерия Стьюдента. Результаты эксперимента представлены в табл. 1.
Таблица 1
Результаты количественного определения нафтохинонов
Навеска, г А Х, % Метрологические характеристики
0,2126 0,476 1,37
0,1896 0,445 1,44 X = 1,42
0,2053 0,490 1,46 S- = 0,0354
0,1967 0,455 1,42 Ах = 0,0372
0,1992 0,470 1,45 £ = ±2,62 %
0,2003 0,454 1,39
Как следует из данных табл. 1, доверительный интервал средней величины при принятом уровне значимости а = 0,05 (Р = 95 %) составил 1,42±0,0372. Относительная погрешность определения не превышает ±5 %.
Для оценки точности метода были подготовлены пробы сырья величиной 80, 90, 100, 110 и 120 % по отношению к декларированной величине в аналитическом методе (т.е. навеска измельчённого сырья составляла
0,16; 0,18; 0,20; 0,22 и 0,24 г). Теоретическое содержание шиконина в отдельных пробах устанавливали на основании перерасчёта средней величины (Х = 1,42 %) на миллиграммы. Подобным образом был произведен расчёт результатов, полученных во время анализа.
На основании теоретического и обозначенного содержимого был определен процент регенерации. Полученные результаты представлены в табл. 2.
Таблица 2
Оценка соответствия теоретических и практических результатов
Навеска, г Теоретическое содержание нафтохинонов, мг Определённое содержание нафтохинонов, мг Регенерация, %
0,1634 2,31 2,29 98,97
0,1860 2,64 2,67 101,14
0,2053 2,91 2,92 100,34
0,2211 3,14 3,11 99,18
0,2450 3,48 3,55 102,01
Как следует из данных табл. 2, разработанная методика отличается достаточной точностью.
Литература
1. Papageorgiou V.P. et al. // СИеш. 1999. № 111.
Р. 280-311.
Пятигорская государственная фармацевтическая академия
УДК 615.668.584
©
Заболевания, возникающие вследствие врожденной или приобретенной недостаточности клапанного аппарата вен и характеризующиеся наличием отека, боли и трофических расстройств мягких тканей разной степени выраженности, объединяют термином «хроническая венозная недостаточность».
Предотвратить развитие симптомов венозной недостаточности можно с помощью своевременной профилактики. С этой целью используют венотонизирующие лекарственные средства. В настоящее время флебопро-текторы местного действия представлены в основном импортными объектами, некоторые из них получены с использованием растений.
Нами предложен состав, проведены технологические исследования, разработана оценка качества вено-тонизирующих, капилляроукрепляющих гелей с фито-композицией ореха черного, каштана конского, арники горной в традиционной и липосомальной форме.
Цель фармакологических исследований по выявлению специфического действия гелевых композиций - сравнительное изучение влияния липосомального и традиционного гелей с извлечениями ореха черного, каштана конс-
2. ТарееваН.В., РомановаА.С., Баньковский А.И. // Фармация. 1969. № 6. С. 48-51.
3. Бычкова Т.П. и др. // Биоорганическая химия. 1993. Т. 19. № 10. С. 1008-1012.
4. Романова А.С., Тареева Н.В., Баньковский А.И. // Химия природных соединений. 1967. № 1. С. 71.
9 июня 2006 г.
кого на развитие и инволюцию отека, вызванного острым венозным застоем в хвосте крысы, на развитие отека лапки крысы, вызванного механической травмой [1].
Объекты анализировали при наружном применении у животных в дозе максимально технически наносимой, т.е. изучаемая доза составила 500 мг на 200,0 г массы животного.
Экспериментальные животные - белые половозрелые беспородные крысы-самцы массой 230-250 г содержались в стандартном режиме вивария ПятГФА. Температура окружающего воздуха 22±2 °С, 12-часовая синхронизированная смена светового периода; комбинированный корм и воду животные получали ad libitum.
Контроль - физиологический раствор.
Препараты сравнения - 2%-й гель троксевазина.
Полученные в результате экспериментов данные обрабатывали статистически с использованием компьютерной программы «Ехсе1» [2].
Веностаз с последующим развитием отека осуществляли методом H.J. Nordmann [3]. У крыс с помощью онкометра измеряли исходный объем хвоста до метки у его основания. Хвост просушивали и наносили на него
ИЗУЧЕНИЕ ВОЗМОЖНОСТИ ИСПОЛЬЗОВАНИЯ ФИТОКОМПОЗИЦИИ НА ОСНОВЕ РАСТЕНИЙ ВЕНОТОНИЗИРУЮЩЕГО ДЕЙСТВИЯ
2006 г. Н.Н. Камова
The purpose of pharmacological researches, on revealing specific ointments, comparative studying influence of ointment with liposomes and traditional gels with extraction of a nut black, a chestnut, mountain on development of the hypostasis caused by sharp venous stagnation in a tail of a rat, on development of a hypostasis of a paw of the rat, caused by a mechanical trauma was.
