CC BY
56
МАТЕРИАЛЫ КОНФЕРЕНЦИИ «ОТЕЧЕСТВЕННЫЕ ПРОТИВООПУХОЛЕВЫЕ ПРЕПАРАТЫ»
25
(руб), винкристину (вкр), циклофосфану (цф) и цисплати-ну (cPt) соответственно. Штаммы Р388/руб и Р388/вкр обладают генотипом и фенотипом МЛУ. Критерием эффективности служил общепринятый показатель ILS (the increasing of life span).
Результаты. Показано, что СНА-5 на 2 МЛУ-штаммах проявила исключительно высокую эффективность. На штамме Р388/руб, по результатам двух независимых экспериментов, при монотерапии СНА-5 64 % животных выживало, средняя продолжительность жизни (СПЖ) леченых животных превышала 50 сут, а показатель ILS составил 424 %. Комбинированная терапия СНА-5 с cPt на этом штамме также была высокоэффективной: 50 % мышей выживало, показатель ILS составил 394 %. На Р388/вкр при сочетании СНА-5 с цф ILS был 300 %, а СПЖ леченых животных была более 50 сут. В опытах по комбинированной терапии доза цф была ниже его терапевтической в 5 раз, а cPt — в 15 раз. Известна высокая токсичность этих препаратов, поэтому возможность их применения в уменьшенных дозах с более высоким эффектом позволит увеличить продолжительность лечения с б0льшим терапевтическим выходом. Штаммы Р388/цф и Р388/cPt оказались нечувствительными и к монотерапии СНА-5, и к комбинированной терапии с участием СНА-5.
Заключение. Таким образом, показана высокая эффективность ЦГК СНА-5 на экспериментальных МЛУ-опухолях in vivo.
Г.А. Гордина, О.И. Тарасова, И.Ю. Кубасова, А. В. Киселев, А.Е. Пастушенко ИНТЕЛЛЕКТУАЛЬНАЯ СОБСТВЕННОСТЬ ФГБУ «РОНЦ ИМ. Н.Н. БЛОХИНА» МИНЗДРАВА РОССИИ В 2G15 Г.
ФГБУ «РОНЦ им. Н.Н. Блохина» Минздрава России, Москва
Из 53 научных тем, запланированных в 2015 г., 10 (19 %) признаны охраноспособными. При этом доля охраноспособных тем в НИИ экспериментальной диагностики и терапии опухолей составила 35 %, в НИИ канцерогенеза — 17 % и в НИИ клинической онкологии — 6 %.
За этот же период из 64 тем аннотаций диссертаций охраноспособными оказались 12 (19 %). На соискание ученой степени доктора наук охраноспособные темы составили 43 %, а на соискание степени кандидата наук — 12 %. К концу 2015 г. поддерживались 66 патентов на изобретения: объектами 21 патента являлись химические соединения и композиции, обладающие противоопухолевой активностью; 21 патента — способы лечения и диагностики злокачественных опухолей; 18 патентов — клеточные линии меланомы для создания противоопухолевых вакцин; 2 патентов — устройство и 2 патентов — штаммы опухолевых клеток. Из числа поддерживаемых патентов 8 признаны перспективными и награждены дипломами Роспатента в номинации «100 лучших изобретений России».
Досрочно прекращено поддержание 4 патентов ввиду невозможного использования их в коммерческих целях.
За 2015 г. в отдел патентной и изобретательской работы РОНЦ им. Н.Н. Блохина научными сотрудниками было подано 20 заявок на изобретения. Из их числа 12 заявок
признаны не соответствующими критериям «изобретательский уровень» или «новизна».
В Роспатент подготовлены и поданы 6 заявок на изобретения, 3 из них выполнены по госконтракту. Объектами изобретений были: способ лечения, устройство, штамм, противоопухолевое средство.
За этот период получены 9 патентов на изобретения и 1 свидетельство на программу для ЭВМ. Объектами изобретений 3 патентов стали: способ диагностики, способ профилактики и способ лечения злокачественных опухолей; 4 патентов — противоопухолевое средство; 2 патентов — штамм опухолевых клеток. Два патента явились результатом совместных исследований с другими научными организациями — Красноярским государственным педагогическим университетом им. В.П. Астафьева и Институтом органического синтеза им. И.Я. Постовского Уральского отделения РАН.
В 2015 г. шесть клеточных линий меланомы (mel Si, mel Me, mel Kor, mel Mtp, mel Ibr, mel Gus), полученных в РОНЦ им. Н.Н. Блохина и получивших патенты, по контракту были реализованы в НИИ физико-химической биологии им. А.Н. Белозерского МГУ им. М.В. Ломоносова.
В целях стимулирования изобретательской деятельности авторы 9 патентов изобретений и свидетельства на программу ЭВМ были отмечены денежными премиями.
A.А. Горчаков, С. В. Кулемзин, О.Ю. Волкова, К.О. Баранов, С.В. Гусельников, А.М. Сократян,
B. В. Кузнецова, А. В. Таранин ХИМЕРНЫЕ АНТИГЕННЫЕ РЕЦЕПТОРЫ ДЛЯ АДАПТИВНОЙ Т-КЛЕТОЧНОЙ ТЕРАПИИ ФГБУН ИМКБ СО РАН, Новосибирск
Введение. Впечатляющие результаты терапии онкоге-матологических заболеваний с использованием аутологич-ных CAR Т-клеток (клеток с поверхностной экспрессией химерного антигенного рецептора) стимулируют активное распространение этой технологии для борьбы и с другими типами рака. Поскольку эффективность и безопасность адаптивной Т-клеточной терапии критически зависят от выбора белка-мишени, дизайн антигенраспознающей части рецептора является одной из наиболее приоритетных задач.
Цель исследования — изучение функциональности CAR с различным модульным составом и специфичностью антигенраспознающей части.
Материалы и методы. В работе использована панель лентивирусных конструкций, кодирующих CAR против 6 опухолеассоциированных белков человека — PSCA, PSMA, CD20, VEGFR2, CEA, IGF-1R, причем помимо общепринятых scFv-CAR, были получены принципиально новые варианты, названные нами Fn-CAR. Их антигенраспозна-ющая часть основана на диверсифицированном домене Fn3-ram фибронектина человека (Fn3), за счет чего могут достигаться высокая аффинность связывания, низкая им-муногенность, стабильность и возможность комбинирования нескольких Fn-доменов в мультимодульные полиспецифичные структуры. Функциональность конструкций в контексте CAR T-клеток была протестирована с помощью проточной цитометрии на моделях in vitro.
№1 I том 15 I 2016
РОССИЙСКИЙ БИОТЕРАПЕВТИЧЕСКИЙ ЖУРНАЛ
26 МАТЕРИАЛЫ КОНФЕРЕНЦИИ «ОТЕЧЕСТВЕННЫЕ ПРОТИВООПУХОЛЕВЫЕ ПРЕПАРАТЫ»
Результаты. Обнаружено, что полученные scFv- и Fn- MRT = 9,6—13,7 ч (MRT = 9,11 ч). Избиратель* J Аимпила ' ' v контроля ' ' г CAR Т-клетки специфически активируются в присутствии ная тропность1251-Аимпила выявлена для МЖ, легких, целевых клеток-мишеней. Показано, что активационная желчного пузыря, кожи и почек с показателями тканевой способность CAR зависит от использованных промотор- доступности (fT = АиСткани / AUC ови) от 1,15 до 2,33, в слу-ных, шарнирных и сигнальных составляющих. Создана чае остальных органов (мышца — почки) fT = 0,3—0,8. платформа для оценки цитотоксичности CAR T-клеток Для репродуктивных органов выявлены гендерные разли-in vitro и in vivo и для создания биспецифических CAR. чия в динамике накопления при близких значениях пара-Заключение. Проведенный анализ свидетельствует метров fT = 0,55 (самцы) и 0,63 (самки). Накопление о том, что возможности дизайна CAR могут быть значи- 1251-Аимпила в МЖ происходит от 1 до 9 ч, пик накопления — тельно расширены за счет использования альтернативных 6 ч и характеризуется высоким показателем fT = 1,43. антигенраспознающих модулей, а также их комбинаций Выводится 1251-Аимпила преимущественно через почки. друг с другом и с scFv. Это должно обеспечить б0льшую Активный процесс выведения завершается к 9 ч. Кумуля-гибкость CAR-платформы, широту охвата белков-мише- тивная экскреция метки за 48 ч составила 89,79 %, в том ней, а также возможность настройки аффинности и селек- числе с мочой вывелось 69,04 % и с калом 20,75 %. тивности CAR. Заключение. Таким образом, биораспределение метки Работа выполнена при финансовой поддержке программы фун- при пероральном введении 125I-Аимпила отличается изби-даментальных научных исследований по теме 0310-2015-0006и гран- рательной тропностью к ткани МЖ, легких, желчного пу-та РФФИ № 15-04-05749. зыря, кожи и почек с максимальным накоплением через 6 ч и тендерными различиями (выше — у самок). Троп-Е.Ю. Григорьева1, С.А. Цуркан2, Г. Б. Смирнова1, ностью к ткани МЖ можно объяснить более высокую чув-Ю.А. Борисова1, Е.М. Трещалина1 ствительность рака МЖ человека in vivo, обнаруженную ОСОБЕННОСТИ ФАРМАКОКИНЕТИКИ при терапии Аимпила ранее. АФП-СОДЕРЖАЩЕГО КОМПЛЕКСА АИМПИЛА ПРИ ПЕРОРАЛЬНОМ ВВЕДЕНИИ Н.Я. Гридина, Н.Г. Драгунцова, О.И. Веселова, 1ФГБУ«РОНЦим. Н.Н. Блохина» Минздрава России, Москва; О.Н. Величко, А. Д. Белоусова, А. П. Колисниченко 2ООО «ФНЦ«ФармАксесс», Москва ПЕРСПЕКТИВЫ ПРИМЕНЕНИЯ ВЕРАПАМИЛА Введение. Потенциальный пероральный таргетный В НЕОАДЪЮВАНТНОЙ ТЕРАПИИ препарат Аимпила представляет собой нековалентный ЗЛОКАЧЕСТВЕННЫХ ГЛИОМ комплекс, состоящий из индуктора апоптоза и транспорт- ГУ «Институт нейрохирургии им. акад. А. П. Ромоданова ного белка а-фетопротеина (АФП). В эксперименте Аим- НАМНУкраины», Киев, Украина пила активен на подкожных ксенографтах опухолей чело- Введение. Исследование механизма действия отечест-века с рецепторами АФП, растущих у иммунодефицитных венного препарата верапамила свидетельствует о возмож-гибридных мышей линии Balb/c nude. Поэтому для изуче- ности применения этого препарата в целях профилактики ния элементов фармакинетики использованы близкород- возникновения рецидивов в отдаленном послеоперацион-ственные мыши Balb/c nude+. ном периоде у больных со злокачественными глиомами Цель исследования — получение данных по распреде- головного мозга. Проведены исследования верапамила, лению и выведению меченого 1251-Аимпила после одно- блокатора кальциевых каналов, на опухолеассоциирован-кратного перорального введения мышам Balb/c nude+. ное воспаление (ОАВ), которое является основным пато-Материалы и методы. Изучение проводили на здоровых генетическим фактором усиления роста и прогрессии глиом мышах обоего пола после однократного введения в желу- головного мозга. На системном уровне ОАВ активизирует-док 1251-Аимпила в разовой дозе 20 мг/кг (радиоактивность ся в результате некротической гибели клеток глиом и реа-32,0—34,6 МБк/кг для самок и самцов соответственно). лизуется через снижение уровня трансмембранного потен-В контрольной группе животные получали стерильную циала, которое опосредуется повышением уровня агрегации воду для инъекций. Распределение 1251-Аимпила исследо- клеток крови. Изменения уровня агрегации клеток крови вали с помощью прямой радиометрии образцов органов под воздействием верапамила, вероятно, связано с проли-(репродуктивные, печень, почки, легкие, селезенка, кожа, феративной активностью лимфоцитов, что также может мышцы, тонкий кишечник, желчный пузырь, щитовидная способствовать ускорению роста глиом. железа и молочная железа (МЖ) у самок) и тканей (кровь, Цель исследования — изучение механизма взаимосвязи сыворотка). Органы выделяли при аутопсии через 0,25; 0,5; уровня агрегации клеток крови с пролиферативной актив-1; 3; 6; 9; 24 и 48 ч. Уровень радиоактивности измеряли ностью лимфоцитов in vitro. на счетчике гамма-излучения WIZARD 2480 («Perkin Elmer», Материалы и методы. Впервые был применен метод США). Результаты рассчитывали на 1 г ткани/органа. определения агрегации клеток крови, использующий фи-Стандартные радиометрические показатели образцов конт- зическое явление поверхностного плазмонного резонанса ролировали с помощью соответствующих стандартов. (ППР). Образцы клеток крови больных со злокачествен-Результаты. Показано, что при пероральном введении ными глиомами разделяли на аликвоты по 200 мкл. Перед мышам 1251-Аимпила определяется во всех органах и тка- началом исследований на ППР-анализаторе в образцы нях. Максимальная концентрация достигается через 30— крови добавляли по 20 мкл верапамила. В целях подбора 60 мин, в крови — 10—11 % метки. В печени, легких, коже наиболее оптимальных концентраций верапамила, увели-и МЖ регистрируется максимальное время удержания чивающих или уменьшающих уровень агрегации клеток
№1 / том 15 / 2016 РОССИЙСКИЙ БИОТЕРАПЕВТИЧЕСКИЙ ЖУРНАЛ
