CC BY
15
H. В. Лобастова, к. м. н. А. Н. Токарев, к.м.н. Н. Р. Куимова, профессор Я. Ю. Иллек, профессор Г. А. Зайцева
ХАРАКТЕРИСТИКА ИММУННЫХ НАРУШЕНИЙ У ДЕТЕЙ С БРОНХИАЛЬНОЙ АСТМОЙ В РАЗНЫЕ
ПЕРИОДЫ БОЛЕЗНИ
Кафедра детских болезней КГМА, лаборатория иммуногематологии КНИИГиПК
Введение
Бронхиальная астма у детей представляет со бой заболевание, развивающееся на основе хро нического аллергического воспаления бронхов, их гиперреактивности и характеризующееся пе риодически возникающими приступами затруд ненного дыхания и удушья в результате распро страненной бронхиальной обструкции, обуслов ленной бронхоконстрикцией, гиперсекрецией слизи, отеком стенки бронхов. В патогенезе бронхиальной астмы ведущее значение придает ся наследственно закрепленной функциональной недостаточности барьерных тканей респиратор ного тракта и повышенной способности к синте зу аллергических антител, высокой чувствитель ности бронхолегочного аппарата к медиаторам аллергического воспаления, сниженной чувстви тельности бета2-адренорецепторов к эндоген ным катехоламинам, изменениям иммунологи ческой реактивности 121. Вместе с тем, в литера туре имеются указания /1, 3/, что в патогенезе бронхиальной астмы важная роль принадлежит цитокинам, регулирующим все звенья иммунной системы и иммунный ответ организма. В этой связи представляют интерес данные, полученные при комплексном исследовании показателей кле точного и гуморального иммунитета, неспеци фической резистентности и уровней некоторых цитокинов в сыворотке крови у детей с бронхи альной астмой в разные периоды болезни.
Материал и методы исследования
Под наблюдением в Кировской областной детской клинической больнице находилось 95 детей в возрасте 5-14 лет, страдающих атопичес- кой бронхиальной астмой. У 63 пациентов диаг ностировалось среднетяжелое, а у 32 - тяжелое течение болезни. У группы детей со среднетяже- лым течением бронхиальной астмы длитель ность болезни колебалась от 2 до 10 лет, присту пы удушья возникали у них с промежутками от 2-3 недель до 1 месяца и продолжались от 30 минут до 2 часов. У группы пациентов с тяже лым течением бронхиальной астмы длитель ность болезни составляла от 5 до 10 лет и боль ше, приступы удушья возникали у них с частотой от 1 до 2 недель и чаще, продолжаясь от 3 часов и дольше. Проведенные ранее кожные скарифи-кационные пробы с бытовыми, эпидермальными и пыльцевыми аллергенами позволили выявить у всех наблюдаемых больных признаки поливален тной сенсибилизации организма.
У наблюдаемых больных бронхиальной аст мой при поступлении в стационар (в приступном периоде) и за 1-2 дня перед выпиской (в межпри- ступном периоде болезни) определяли относи тельное и абсолютное количество Т- и В- лимфо цитов (реакции спонтанного и комплементарно го розеткообразования), CD4- и CD8-лимфоци тов (метод непрямой иммунофлюоресценции с помощью моноклональных антител ИКО-86 и ИКО-31) в крови, исследовали уровни сыворо точных иммуноглобулинов (ИГ) G, А, М (метод радикальной иммунодиффузии с использовани ем моноспецифических антисывороток) и обще го иммуноглобулина Е в сыворотке (метод им- муноферментного анализа), концентрация цир кулирующих иммунных комплексов (ЦИК) в сыворотке крови (метод преципитации с раство ром полиэтиленгликоля), показатели фагоцитар ной активности нейтрофилов (ФАН), фагоци тарного индекса (ФИ) и НСТ-теста (с использо ванием частиц латекса); контрольную группу в этих исследованиях составили 532 ребёнка I-II групп здоровья. Наряду с этим, у наблюдаемых больных бронхиальной астмой определяли ме тодом иммуноферментного анализа содержание цитокинов в сыворотке - интерферона-альфа (ИФН-а), интерлейкина-1-бета (ИЛ-1(3) и факто ра некроза опухоли-альфа (ФНО-а); конт рольную группу в этих исследованиях составля ли 80 практически здоровых детей того же воз раста. Результаты исследований обрабатывали методом вариационной статистики.
Результаты
Исследования показали, что у группы боль ных со среднетяжелым течением атопической бронхиальной астмы в приступном периоде бо лезни (таблица 1) констатировалось уменьшение относительного количества Т-лимфоцитов (Р < 0,001) в крови, повышение концентрации ИГ G (Р < 0,001), А (Р < 0,01), М (Р < 0,001) и резко выраженное содержание ИГ Е (Р < 0,001) в сыворотке, снижение показателей ФАН (Р < 0,001), ФИ (Р < 0,001) и НСТ-теста (Р < 0,001), снижение уровня ИФН-а (Р<0,001) на фоне повышения средних уровней провоспа- лительных цитокинов в сыворотке крови - ИЛ-1|3 (Р < 0,001) и ФНО-а (Р < 0,001). Следует отме тить, что содержание ИЛ-1(3 в сыворотке в пре делах нормы регистрировалось у 25,4% больных этой группы, а повышенное содержание указан ного цитокина в сыворотке (75-1150 пкг/мл) - у 74,6% пациентов. Повышение уровня ФНО-а в сыворотке крови (110-930 пкг/мл) констатировалось у 19,1% больных со среднетяжёлым тече нием бронхиальной астмы, тогда как у боль шинства пациентов этой группы (80,9%) при сутствия этого цитокина в сыворотке не обна руживалось.
Похожие изменения показателей иммуноло гической реактивности выявлялись в приступ ном периоде болезни и у группы детей с тяжё лым течением атопической бронхиальной астмы (таблица 2). Так, у них регистрировалось умень шение относительного количества Т-лимфоци- тов (Р < 0,001 ) и CD8 - клеток (Р < 0,05 ) в кро ви, повышение содержания ИГ G (Р < 0,001), А (Р < 0,001) и М (Р< 0, 001), резко выраженное повышение уровня ИГ Е (Р < 0, 001) в сыворот ке, снижение ФАН (Р < 0,001), ФИ (Р < 0,001), значений НСТ-теста (Р < 0,001 ) и уровня ИФН-а (Р < 0,001), повышение средних уровней ИЛ-1 [3 (Р < 0,001) и ФНО-а (Р < 0,001) в сыворотке кро ви. При этом колебания уровня ИЛ-1(3 в преде лах нормы регистрировались у
34,4% пациентов, а высокое содержание этого цитокина в сыворотке крови (75-1100 пкг/мл) - у 65,6% больных. Присутствия в сыворотке крови ФНО-а не обна руживалось у 43,7% больных с тяжёлым течени ем бронхиальной астмы, у 37,6% пациентов со держание этого цитокина в сыворотке находи лось в пределах нормы, а у 18,7% больных было повышенным (100-300 пкг/мл.).
Во время пребывания в стационаре наблюда емые больные атопической бронхиальной аст мой получали комплексную терапию, которая назначалась с учётом тяжести течения и перио да болезни /2/.
С целью купирования приступа удушья у группы детей со среднетяжёлым течением забо левания применяли ингаляции беротека и перо- ральное введение эуфиллина. После купирова ния приступа им назначалась гипоаллергенная диета, антимедиаторные препараты (терфена, лоратадин, астемизол) в течение 5-7 дней, интал через спинхаллер, бромгексин внутрь, сеансы ультразвуковых ингаляций с эуфиллином, муко-литиками и гидрокарбонатом натрия, курс мик роволновой терапии на аппарате ДМ В-15 «Ро машка», витамины В,, В6, С. Для купирования приступа удушья у детей с тяжёлым течением бронхиальной астмы использовали внутривен ное введение преднизолона и эуфиллина, сердеч ных гликозидов. оксигенотерапию; после выве дения из приступа этой группе больных назнача лась гипоаллергенная диета, внутрь преднизо- лон коротким курсом на 3-5 дней, ингаляции бе- котида, бромгексин внутрь, АТФ, В,, В6, С, сеан сы ультразвуковых ингаляций с эуфиллином, муколитиками и гидрокарбонатом натрия, курс микроволновой терапии, индуктотермия на об ласть надпочечников. На фоне проводимой те рапии у больных констатировалось улучшение общего состояния, уменьшение и исчезновение клинических проявлений заболевания. Дети со среднетяжёлым течением бронхиальной астмы находились в стационаре в среднем 24,8+1,2 су ток, а дети с тяжёлым течением заболевания - 28,1+2,3 суток.
Перед выпиской из стационара у группы де тей со среднетяжёлым течением бронхиальной астмы (таблица 1) регистрировалось уменьше ние относительного количества Т-лимфоцитов (Р< 0,001) и СБ4-лимфоцитов (Р < 0, 05), отно сительного и абсолютного числа С08-клеток (Р < 0,01) в крови, высокие уровни сывороточных ИГ О (Р < 0,001), А (Р < 0,001) и М (Р < 0,001), рез ко выраженное повышение содержания ИГ Е (Р < 0,001) в сыворотке, снижение ФАН (Р < 0,001), ФИ (Р < 0,001) и значений НСТ-теста (Р < 0,001), снижение уровня ИФН-а (Р < 0,001), повышение средних уровней ИЛ-1р (Р < 0,001) и ФНО-а (Р < 0,01) в сыворотке крови. При этом нормальные уровни ИЛ-1р отмечались у 30,4%, а высокие уровни этого цитокина в сыворотке крови (75-1100 пкг/мл) - у 69,6% пациентов. Нормальные уровни ФНО-а в сыворотке крови регистрировались у 10,8% детей со среднетяжё лым течением бронхиальной астмы, высокие уровни (95-205 пкг/мл) - у 19,6%, тогда как от сутствие содержания ФНО-а в сыворотке отме чалось у 69,6% больных.
У группы пациентов с тяжёлым течением за болевания перед выпиской из стационара (таб лица 2) констатировалось уменьшение относи тельного количества Т-клеток (Р < 0,001) и СБ8- лимфоцитов (Р <0,05) в крови, повышение уровней ИГ О (Р < 0,001), А (Р < 0,05), М (Р < 0,001) и Е (Р < 0,001), снижение показателей ФАН (Р < 0,001), ФИ (Р < 0,001), НСТ-теста (Р < 0,02) и уровня ИФН-а (Р < 0,001), повышение средних уровней ИЛ-1р (Р < 0,001) и ФНО-а (Р < 0,001) в сыво ротке крови. Нормальные уровни ИЛ-1(3 в сыво ротке крови обнаруживались у 19,0%, а высокие уровни (80-1000 пкг/мл) - у 81,0% пациентов. Нормальные уровни ФНО-а в сыворотке регис трировались перед выпиской из стационара у 14,3% пациентов с тяжёлым течением бронхи альной астмы, высокие уровни (62-1000 пкг/мл) - у 19,0%, тогда как у 66,7% пациентов присут ствия в
сыворотке крови этого цитокина не вы являлось.
Таблица 1
Показатели иммунологической реактивности у группы больных со среднетяжелым течением бронхиальной астмы (М±ш)
Показатели Здоровые дети Больные бронхиальной астмой:
в приступ ном периоде, п=63 В межприступном периоде, п=46
Популяции и субпопуляции лимфоцитов в крови: п=532
Т -лимфоциты,% 53,2010,68 46,4911,25* 46,0711,33*
Т-лимфоциты, 109/л 1,21 ±0,05 1,3210,15 1,1710,10
В-лимфоциты, % 28,2010,43 28,5111,05 27,7310,80
В- лимфоциты, 109/л 0,6710,02 0,80+0,09 0,6910,06
индекс Т -л/В-л 1,8910,15 1,6410,12 1,67+0,20
СБ4-лимфоциты,% 49,2011,32 47,5911,95 45,01 + 1,52*
С04-лимфоциты, 109/л 0,5910,02 0,6310,07 0,52+0,04
СБ8-лимфоциты,% 25,4710,96 23,2511,31 21,88+0,86*
С08-лимфоциты,109 /л 0,3110,01 0,3110,03 0,25+0,02*
индекс СБ4/СБ8 2,0710,09 2,0510,15 2,10+0,10
Иммуноглобулины в сыворотке:
ИГ О, г/л 9,4410,18 10,9410,39* 11,03+0,47*
ИГ А, г/л 1,1010,05 1,4110,10* 1,3210,14*
ИГ М, г/л 1,1710,05 1,7810,17* 1,61+0,11*
ИГ Е, МЕ/мл 164141 12871146* 1257+198*
ЦИК в сыворотке, ед. опт. пл. 0,07610,003 0,08110,005 0,075+0,006
Показатели фагоцитоза:
ФАН, % 69,1311,24 52,8412,45* 63,96+0,81*
ФИ 10,6710,18 8,6510,39* 8,36+0,12*
НСТ-тест, % 19,1710,75 13,4110,70* 14,55+0,48*
Цитокины в сыворотке: п=80
ИФН-а , пкг/мл 18,7210,81 8,5011,75* 6,95+1,16*
ИЛ-lp , пкг/мл 16,2611,13 472,75130,81* 425,10133,12*
ФНО-а , пкг/мл 8,0611,02 98,40125,03* 96,75131,63*
Примечание: * - Р<0,05-0,001 Заключение Литература
Грачёва JI. А. Цитокины в онкогематологии. - Москва, «Алтус», 1996. - 168 с.
Национальная программа «Бронхиальная астма у детей. Стратегия лечения и профилактика» // Москва, - 1997. - 96 с.
Spinozzi F. Cellular mechanisms in the pathogenesis of bronchial asthma // Immunology Today. - 1995. - v. 16. -№ 8. - p. 407-408.
THE CHARACTERISTICS OF IMMUNE DISTURBANCES IN CHILDREN WITH BRONCHIAL ASTHMA IN
DIFFERENT PERIODS OF THE DISEASE N.V. Lobastova, A.N. Tokarev, N.R. Kuimova, Y.U. Illek, G.A. Zaitseva
The changes of cell and humoral links of the immunity, levels of cytokines in serum of blood and nonspecific resistance were revealed in children with moderate and severe forms of atopic bronchial asthma in attack and interattack periods. The results of investigations substantiate the usage of immunomodulators in complex treatment of patients, because the immunomodulators have immunecorrective, detoxicative and antiinflam- mational effects and regulate production of cytokines.
Данные, полученные в ходе исследований, сви детельствуют о том, что у детей со среднетяжёлым и тяжёлым течением атопической бронхиальной астмы в приступном периоде болезни отмечались изменения иммунологической реактивности в виде относительной недостаточности клеточного звена иммунитета, повышения уровней сывороточных иммуноглобулинов основных классов и гиперим- муноглобулинемии Е, снижения показателей не специфической резистентности организма; вместе с тем у большинства больных отмечалось повыше ние уровня интерлейкина-1-бета и у ряда больных повышение уровня фактора некроза опухоли - альфа в сыворотке крови. Аналогичные иммунные нарушения сохранились у обеих групп детей с бронхиальной астмой и в межприступном перио де болезни, что свидетельствует о «готовности» организма больных к возникновению приступа под влиянием разнообразных факторов. Результа ты собственных исследований могут служить ос нованием для включения в комплексное лечение детей со среднетяжёлым и тяжёлым течением ато пической бронхиальной астмы иммуномодулято- ров нового поколения (имунофан, полиоксидоний, иммуномодулин), которые, наряду с иммунокор- ригирующим, дезинтоксикационным и противо воспалительным действиями, обладают способно стью регулировать продукцию цитокинов. Ука занные препараты в отличие от других иммуномо- дуляторов можно назначать в остром периоде бо лезни, они не вызывают развития побочных реак ций и осложнений, не имеют противопоказаний к применению.
Таблица 2
Показатели иммунологической реактивности у группы больных с тяжелым течением бронхиальной астмы (М±т)
П о казатели Здоровые дети Больные бронхиальной астмой:
в приступном периоде, п = 32 В межприступном периоде, п = 2 1
Популяции и субпопуляции лимфоцитов в крови: п = 53 2
Т -л и м ф о ц и ты ,% 5 3,20± 0,68 46,10 + 2,04* 47,561 1 ,1 3*
Т- лимфоциты,10® /л 1,21 ±0,05 1,23 + 0,1 1 1,3110,08
В-лимфоциты, % 2 8,2 0 ± 0,4 3 27,68+ 1,09 27,421 1,41
В- лимфоциты, 109/л 0,6 7 ± 0,02 0,7 5 ± 0,0 8 0,6610,05
индекс Т -л/В-л 1,8 9± 0,1 5 1,6 7 ± 0,1 8 1,7310,08
С Б 4 - л и м ф о ц и т ы ,% 49,20± 1,32 46,78 + 2,75 44,5712,63
С Б 4-л им ф о циты , 1 0«/л 0,5 9 ± 0,02 0,5 7 ± 0,0 5 0,58 + 0,03
С Б 8 - л и м ф о ц и т ы , % 2 5,4 7 ± 0,9 6 21,71 + 1,31* 22,261 1,05*
С Б 8 - л и м ф о циты , 1 0®/л 0,3 1 ± 0,0 1 0,27 + 0,02 0,2910,02
индекс СБ4/СБ8 2,0 7 ± 0,09 2,1 5 + 0,21 1,9710,18
Иммуноглобулины в сыворотке:
И Г О , г/л 9,44 ± 0,1 8 1 0,5 4± 0,3 4 * 10,4710,28*
И Г А , г/л 1,10±0,05 1,55±0,1 4* 1,5710,21*
И Г М , г/л 1,1 7± 0,0 5 1,9 5 ± 0,2 3 * 2,1010,26*
И Г Е, М Е/мл 164 ± 41 1 562±218* 1459+241 *
ЦИК в сыворотке, ед. опт. п л. 0,076± 0,003 0,079±0,008 0,08010,009
Показатели фагоцитоза:
Ф А Н , % 69,1 3± 1,24 5 1,54± 3,0 1 * 62,00+ 1 ,35*
Ф И 1 0,67 ± 0,1 8 8,24±0,55* 8,2510,24*
Н СТ-тест, % 1 9,1 7± 0,75 13,4310,93* 16,71 + 0,66*
Цитокины в сыворотке: п = 80
И Ф Н -а , пкг/мл 18,72 + 0,81 5,1 3 ± 0,08 * 5,6710,29*
И Л -1Р , пкг/мл 1 6,26+ 1,1 3 429,60143,23* 477,53 + 56,24*
ФНО-п , пкг/мл | 8,06± 1,02 | 5 1,601 1 2,80* | 104,47+37,76* |
Примечание: * - Р<0,05-0,001.
