CC BY
35
ГИСТОХИМИЧЕСКОЕ ВЫЯВЛЕНИЕ УГЛЕВОДНЫХ КОМПОНЕНТОВ В СЛИЗИСТОЙ ВЛАГАЛИЩА КРОЛЬЧИХ И КОРОВ ПОД ВЛИЯНИЕМ ПОЛОВЫХ
ГОРМОНОВ
Е.А. ТОМИТОВА (фото),
кандидат ветеринарных наук, доцент, преподаватель кафедры анатомии, гистологии и патоморфологии,
А.П. ПОПОВ,
доктор ветеринарных наук, профессор, ректор, Бурятская ГСХА им. В.Р. Филиппова
Ключевые слова: половые гормоны, сиалогликопротеины, влагалище, прогестерон, фолликулин, эстрогены, гликоген.
Цель и методика исследований
Целью настоящей работы явилось выяснение содержания углеводных компонентов (гликогена, нейтральных, кислых сульфатированных и сиалогли-копротеинов) в слизистой влагалища крольчих и коров под воздействием половых гормонов.
Данная работа является одним из разделов диссертационной работы «Морфофункциональная характеристика половой системы крольчих, коров и ячих в различные периоды полового цикла под влиянием экзогенных половых гормонов и при беременности».
Предварительно поставленные эксперименты на крольчихах были перенесены на более высокопродуктивных животных, таких как коровы.
Материал для гистологического и гистохимического исследования из влагалища фиксировался в 10%-ном растворе нейтрального формалина, жидкости Карнуа, нейтральной фиксирующей смеси А.Л. Шабадаша и заключался в парафин. Для изучения гистоморфологии де-парафинированные срезы окрашивались гематоксилин-эозином, а также по Ван-Гизону в оригинальной прописи. Гликоген и другие ШИК-положительные вещества выявляли по методу А.Л. Шабадаша. Для дифференциации гликогена от других
ШИК-положительных веществ срезы перед окраской подвергались обработке амилазой слюны. Для обнаружения нейтральных гликопротеинов учитывали ШИК-реакцию после предварительной обработки срезов фенилгидразином [2]. Кислые группы углеводных компонентов выявляли основным коричневым [5], аль-циановым синим при рН 2,7 и рН 1,0, то-луидиновым синим при рН 4,6 [1]. Для выяснения содержания углеводных компонентов у крольчих сформировали пять групп: 1-я - контрольная, 2-я - с трёхкратным введением фолликулина и убоем на 4-й день, 3-я - с трёхкратным введением фолликулина и убоем на 7-й день, 4-я - с двукратным введением прогестерона и убоем на 4-й день, 5-я - с трёхкратным введением фолликулина и двукратным введением прогестерона и убоем на 7-й день; у коров - четыре группы: 1 -я - контрольная, 2-я - с введением фолликулина, 3-я - с введением прогестерона, 4-я - с введением прогестерона на фоне фолликулина и убоем на 8-й день.
Результаты исследований
Эпителий, выстилающий слизистую оболочку влагалища контрольных крольчих, простой низкостолбчатый (28,2+1,10 мкм) во весь период исследования.
Наибольшей высоты эпителий вла-
670024, Республика Бурятия, г. Улан-Удэ, ул. Пушкина, 8;
. тел. 8 (3012) 44-22-63, 8-9148339489, e-mail: [email protected],
8 (3012) 44-26-11_______________
галища крольчих достигал в 4-й группе -эпителий становится высокостолбчатым (34,8+2,14 мкм; рис. 1).
У коров слизистая влагалища представлена однослойным столбчатым эпителием (43,8+3,20 мкм), наиболее высоким в 4-й группе (58,5+2,35 мкм; рис. 2).
Следует отметить, что толщина эпителиального пласта и морфологические изменения, происходящие в нём, зависят от физиологического состояния животного.
В настоящее время установлено, что у грызунов в стадию течки происходит усиленный рост эпителия, ороговение поверхностных слоев и слу-щивание ороговевших клеток в просвет влагалища.
Существует два мнения об изменениях, которые происходят в эпителии слизистой оболочки влагалища у сельскохозяйственных животных.
У овец незадолго до овуляции отмечается процесс ороговения поверхностных слоев эпителия слизистой оболочки влагалища.
Sexual gormones, sialoglicoprotein, vagina, progesterone, folliculin, oestrogen, glycogen.
Вторая группа исследователей [1] не наблюдала процесса ороговения в поверхностных слоях клеток эпителия влагалища во время эстрального цикла.
Результаты наших исследований согласуются с данными второй группы
исследователей, которые считают, что полного ороговения в поверхностных слоях клеток эпителия влагалища не происходит. Вагинальные изменения вызываются овариальными гормонами, причём эстрогены стимулируют рост
Ветеринария
эпителия, а прогестерон обуславливает ослизнение (муцинификацию) вагинального эпителия [4].
Повышение содержания гормонов в крови сопровождается утолщением эпителиального пласта влагалища, усилением слущивания клеток и уменьшением содержания лейкоцитов.
Цитологическая картина влагалища овец меняется в зависимости от содержания эстрогенов в организме. Повышение уровня эстрогенов ведёт к увеличению количества клеточных слоёв во влагалище, и, наоборот, уменьшение эстрогенов приводит к десквамации поверхностных слоев эпителия [3].
Толщина эпителиального пласта влагалища в течение всего периода исследования как у контрольных, так и у подопытных животных изменяется.
В контрольной и 3-й группах крольчих гликоген выявляется в апикальных участках эпителиоцитов, а во 2-й и 5й группах гликоген отмечается по всей цитоплазме эпителиоцитов, в клетках соединительной ткани, в секрете, в интиме кровеносных сосудов и в мышечных клетках.
Повышение содержания гликогена у коров отмечается в 3-й и 4-й группах. Он выявляется в цитоплазме эпителиоцитов, в миоцитах, в клетках соединительной ткани.
О наличии гликогена во влагалищном эпителии в течение эстрального цикла указывали многие авторы. Накопление гликогена в эпителии влагалища у морских свинок в период течки способствует выживанию сперматозоидов в половых путях самки. По мнению [1], гликоген служит пластическим материалом для образования кератина. Присутствие гликогена во влагалище свиньи отражает функциональное состояние его ткани, в зависимости от которого поступающие углеводы могут откладываться в виде гликогена. По нашим данным, у подопытных животных отмечается относительно большее содержание гликогена и усиленная пролиферация эпителиального пласта за счёт плоских клеток у коров, а это говорит об активных обменных процессах, протекающих в эпителии (рис. 3).
Нейтральные гликопротеины способны создавать подвижные адсорбционные поля, которые предохраняют слизистую оболочку от самых разнообразных инфекционных начал и надёжно защищают от действия физических и химических агентов. К сожалению, наши результаты мы не можем сравнить с данными других авторов, так как подобных исследований о влиянии экзогенных половых гормонов на гистохимические изменения во влагалище (в частности, о содержании нейтральных гликопротеинов) в доступной нам литературе мы не встречали. По нашим данным, нейтральные гликопротеины выявляются в апикальных участках эпителиоцитов контрольной группы крольчих, отмечается снижение содержания нейтральных гли-
Рисунок 2. Эпителий влагалища коров 4-й группы. Гематоксилин-эозин
Рисунок 3. Эпителий влагалища коров. ШИК-реакция
Рисунок 4. Эпителий влагалища коров. Альциановый синий при рН 2,7
копротеинов в 4-й группе и незначительное отрывистое расположение этих компонентов в 5-й группе животных.
У коров содержание нейтральных гликопротеинов относительно равномерное во всех группах.
Результаты наших исследований свидетельствуют, что у контрольных крольчих и у крольчих 2-й, 3-й и 4-й групп сульфатированные гликопротеины выявляются по апикальному краю эпите-лиоцитов. В 5-й группе животных эти компоненты выявлены в надъядерных участках эпителиальных клеток, в секрете, а в некоторых клетках эпителия -по всей цитоплазме. У коров наибольшее содержание сульфатированных гликопротеинов выявлено в 4-й группе, где животным инъецировался прогестерон на фоне фолликулина.
Увеличение содержания сиаловых кислот отмечается во 2-й и 5-й группах крольчих, где применялись в виде инъекций фолликулин и прогестерон на фоне фолликулина. В этих группах сиалогли-копротеины выявлены не только в
надъядерных участках, но и по всей цитоплазме. Сиалогликопротеины отмечаются во всех группах коров, но особенно много их выявлено в 3-й и 4-й группах коров в цитоплазме эпителиальных клеток (рис. 4), в собственно слизистой, в интиме кровеносных сосудов, в мышечных клетках. О наличии сульфатированных и сиалогликопротеинов в эпителии влагалища сельскохозяйственных животных сообщают [6]. На наличие си-аловых кислот во влагалищном эпителии грызунов указывают [2, 5]. Сиалог-ликопротеины благодаря высокой вязкости и химическим свойствам, обусловленными особенностями углеводного компонента, участвуют в транспорте веществ, действуют как смазочные вещества и факторы биологической защиты. Кислые сульфатированные гликопротеины обладают наиболее выраженными протекторными свойствами и защищают клетки генеративной зоны эпителия. Содержание сиаловых кислот в стенке влагалища крыс в проэструсе было незначительно выше, чем в эст-
Ветеринария
русе и диэструсе. Введение прогестерона вместе с эстрадиолом вызывало увеличение содержания сиаловых кислот в стенке влагалища у овариоэкто-мированных крыс. Сиалогликопротеины являются защитным барьером на пути проникающей инфекции. Они препятствуют распространению инфекции в половых путях самок после коитус и родов.
Выводы
В заключение можно сказать, что под воздействием экзогенных половых гормонов в слизистой оболочке влагалища происходят значительные гистохимические изменения, наиболее выраженные во 2-й, 4-й и 5-й группах крольчих, у коров - в 3-й и 4-й группах. Экзогенным введением фолликулина и прогестерона можно корректировать различные физиологические состояния организма самок. Происходит накопление биологически активных веществ, таких как гликоген, нейтральные и кислые сульфати-рованные, сиалогликопротеины и повышение высоты эпителия под влиянием прогестерона и фолликулина.
Литература
1. Игумнов Г. А. Углеводы в половом тракте коров // Сборник работ Бурятского отделения ВНОАГЭ. Улан-Удэ, 1969. Вып. 1.
2. Spiser S. S. Specific staining of sulfate groups with alcian blue at low pH // Histochem. and Cytochem. 1956. V. 4. № 5. P. 407-413.
3. Sanger V. L., Engle P. N., Bell D. S. The vaginal cytologe of the ewe during oestrus cycle // Jour. of veterinary research. 1958. V. XIX. P. 71.
4. Техвер Ю. Т. Гистология мочеполовых органов и молочной железы домашних животных. Тарту, 1968.
5. Шубич М. Г., Могильная Г. М. Гликопротеины и протеогликаны. Принципы их гистологического анализа // Арх. АГЭ. 1979. № 8. С. 92.
6. Wrobell K. H. Histologiche and ultrastructurelle untersuchungen am vaginal epithel des Rindes. J. Anat., Histol., Embryol. 1985. Вып.
15. № 4. С. 303. —
