Гепаторотекторное действие производных тиазоло[5,4-b]индола Текст научной статьи по специальности «Фундаментальная медицина»

БИОЛОГИЧЕСКАЯ НАРКОЛОГИЯ

Резюме

На модели острого токсического поражения печени тетрахлорметаном у крыс изучали гепатопротекторную активность новых производных системы тиа-золо[5,4-Ь]индола, содержащих в своей структуре фрагмент изотиомочевины и обладающих противогипоксической активностью. Обнаружено, что все исследованные соединения проявляют гепатопротекторную активность, часто превышающую активность препарата сравнения эссенциале. Замещение одного протона в бензольном кольце атомом брома приводит к увеличению активности в различных соединениях на 13-39 %. Прямой корреляции с анти-гипоксической активностью не обнаружено. Марышева В.В., Гаврев А.И., Шабанов П.Д. Гепаторотекторное действие производных тиазоло[5,4Ь]индола. // Психофармакол. биол. наркол. — 2006. — Т. 6, № 4. — С. 1351-1354.

Ключевые слова

тиазоло[5,4-Ь]индол; изотиомочевина; тетрахлорметан; аланинаминотранс-фераза; аспартатаминотрансфераза

© В.В. МАРЫШЕВА, А.И. ГАВРЕВ, П.Д. ШАБАНОВ; 2006

Военно-медицинская академия им. С.М. Кирова МО РФ, кафедра фармакологии; акад. Лебедева ул., 6, Санкт-Петербург, 194044

ГЕПАТОРОТЕКТОРНОЕ ДЕЙСТВИЕ ПРОИЗВОДНЫХ ТИАЗОЛО^^ИНДОЛА

В продолжение изучения фармакологической активности конденсированных систем индола с триазином (I, н), пиримидином (ш), имидазолом (IV), которые обладают антигипоксической, актопротекторной, противовоспалительной и гепатопротекторной активностью [7—10], нами были получены соединения системы тиазоло[5,4-Ь]индола (V—VШ) (рис.), содержащие в молекуле изотиомочевину и была показана их высокая антигипоксическая активность на моделях гипобарической, гиперкапнической и гемической гипоксии [3, 4]. Антигипоксанты применяются при экстремальных состояниях различного генеза, поскольку тканевая гипоксия является неизбежным компонентом реакции организма на стрессорные воздействия любой природы. Вследствие этого целью исследования было изучение гепатотропного действия новых соединений.

МЕТОДИКА

Соединения V—VH синтезированы на кафедре фармакологии Военно-медицинской академии [2, 3].

Эксперименты проводили на беспородных крысах-самцах массой 150—180 г. Токсичность соединений (ЛД50) определяли по общепринятой методике, используя внутрибрюшинный способ введения [6].

Испытание гепатотропного действия проводили на беспородных белых крысах-самцах массой 150—200 г. Токсическое поражение печени вызывали подкожным введением 50 % раствора тет-рахлорметана в вазелиновом масле в дозе 0,4 мл/100 г массы в течение 4 суток ежедневно [2]. Параллельно с этим опытным группам животных ежедневно в течение 4 суток внутрибрюшинно вводили исследуемые соединения в виде тонкой суспензии с добавлением твина-80 в объеме 1 мл на животное, а контрольным — физиологический раствор. В каждую группу животных включали по 6—10 крыс. В качестве препарата сравнения использовали эссенциале в дозе 80 мг/кг [1]. Все соединения исследовали в экви-молярных дозах. Поскольку наибольшие морфологические и функциональные изменения наблюдаются на седьмой день от начала введения тетрахлорметана [11], материал для проведения биохимических исследований забирали именно в этот день.

Наиболее широко при диагностике заболеваний печени применяется определение активности аланинаминотрансферазы (АлАТ)

R

N

. (HCl)n

R2

.

N SR3

N

N SR

III

OH

N

N

Ac

Ry^\

V

N

1 \\

N

Ac

VII

NH2

(HBr)n

O

N

V

O

R1

N

H

II

N

Ac

IV

N

SR

(HCl)n

N

\X

N

SR3

N

1 ^

N

Ac

VI

4r2 ■ (HCl)n

-NH2 S • (HBr)n

Рис.

Структурные формулы изучаемых соединений:

V а: R = Н, п = 1; б: R = Н, п = 0; в: R = Вг, п = 1; г: R = Вг, п = 0; VI a: R = Н, п = 1; б: R = Н, п = 0; в: R = Вг, п = 1;

г: R = Вг, п = 0; VII a: R = Н; б: R = Вг

I

S

и аспартатаминотрансферазы (АсАТ), поскольку при таких заболеваниях в результате некроза гепатоци-тов эти ферменты освобождаются в кровеносное русло и их концентрация в сыворотке крови увеличивается [11]. Содержание в сыворотке крови АлАТ, АсАТ, общего билирубина, общего белка, глюкозы определяли на автоматическом биохимическом анализаторе ШасЫ 917.

Для оценки активности вычисляли отношение соответствующего показателя контрольной группы животных к показателю опытной группы. Таким образом, влияние соединений на концентрацию АлАТ и АсАТ характеризовали коэффициентами К^ и КАс. Величины КАл более чувствительны к изменению химического строения, чем величины КАс. Для интегральной оценки мы характеризовали соединения величиной, названной нами КЗ, которую вычисляли как среднеарифметическую величину: КЗ = (К + КАс)/2.

Полученные результаты обрабатывали статистически с использованием 1-критерия Стьюдента.

РЕЗУЛЬТАТЫ ИССЛЕДОВАНИЯ

И ИХ ОБСУЖДЕНИЕ

Соединения V—VH были исследованы на гепатот-ропную активность на модели поражения печени крыс тетрахлорметаном, данные экспериментов приведены в табл. 1 и 2. Из всех биохимических показателей крови наиболее информативными оказались показатели АлАТ и АсАТ, остальные показатели (общий билирубин, глюкоза, общий белок) менялись незначительно (табл. 1). Все соединения обладают способностью уменьшать активность обоих ферментов, проявляют заметное гепатотропное действие (табл. 2), при этом сами соединения по исследованной острой токсичности можно отнести к разряду умеренно и малотоксичных веществ [5]. Следует отметить действие соединений VIб—г: они понижают оба ферментных показателя ниже уровня действия препарата сравнения эссенциале; Vв, г понижает АлАТ; VПб понижает АсАТ ниже уровня действия пре-

Таблица 1

Изменение биохимических показателей в сыворотке крови крыс на 7-й день токсического действия тетрахлорметана

Группы животных Число животных Доза, мг/кг АлАТ, мкмоль/л мин АсАТ, мкмоль/л мин Общий билирубин, мкмоль/л Глюкоза, моль/л Общий белок, г/л

Интактные 10 - 15О,О ± 47,1 279,2 + 56,6 1,08 0,93 6,2О ± О,91 67,01 ± 5,69

СС14 8 - 421,3 75,71 442,2 ± 42,61 2,07 0,97 6,74 ± 1,4В 69,90 ± 7,29

СС14 + + эссенциале 9 ВО 1В9,9 51,В2 294,О + 65,9 1,76 1,43 6,В9 ± 1,45 66,17 ± 4,31

СС14 + Vа 6 67,6 2О4,В 69,В 3ОВ,2 ± 24,В2 1,60 1,34 5,55 ± 4,6О 61,66 ± 4,60

СС14 + Vб 6 53,9 3О3,5 ± 59,1 352,О + 4О,1 1,60 0,46 6,41 ± 1,21 71,67 ± 3,90

СС14 + Ув 10 ВВ,5 162,9 63,В2 299,9 + 69,5 1,61 0,83 6,В3 ± 1,52 63,08 ± 5,84

СС14 + Уг 10 71,О 167,9 35,33 31О,6 + ВО,2 2,08 1,12 6,7О ± О,93 69,60 10,92

СС14 + У1а 6 67,5 226,4 146,О 333,6 + 54,1 1,54 0,32 6,2В ± 1,24 66,21 ± 4,34

СС14 + У1б 10 5О,О 1В6,О 5О,32 291,9 + 61,5 1,81 0,82 6,77 ± О,65 66,00 ± 5,83

СС14 + У1в 9 В4,6 19О,6 33,42 279,В ± 54,72 2,20 0,90 7,74 ± 1,3В 65,00 10,14

СС14 + У1г 10 67,1 163,3 43,О3 252,4 ± 4О,73 1,62 0,71 6,1В ± О,В6 66,33 ± 5,13

СС14 + У11а 6 67,7 325,В ± 69,7 339,3 + 57,3 1,69 0,54 6,9В ± 1,26 70,12 ± 4,28

СС14 + У11б 6 В4,В 247,6 ВО,В 2В6,3 73,4 1,03 0,31 6,73 О,ВО 69,70 4,14

Примечание: 1 — р < 0,05 по отношению к интактным животным; 2 — р < 0,05 по отношению к затравленным животным (воздействие СС14); 3 — р < 0,01 по отношению к затравленным животным (воздействие СС14).

Таблица 2

Коэффициенты защиты при токсическом поражении печени крыс тетрахлорметаном и при гипоксии, ЛД50 изучаемых соединений

Группы животных Кз Коэффициенты защиты при гипоксии ЛД5О, мг/кг

гипобарической гемической

Интактные - - - -

СС!4 - - - -

СС14 + эссенциале 1,В7 - - -

СС!4 + Vа 1,75 1 ,В9 1,ОО >1 ООО

СС!4 + Vб 1,32 1,2О 1,ОО 556 ± 45

СС!4 + Vв 2,О3 1,63 1,ОО 3О9 ± 29

СС!4 + Vг 1,97 1,17 1,ОО 195О ± 1ВО

СС!4 + VIа 1,59 1,3О 1,67 447

СС!4 + VIб 1 ,В9 1 ,В9 1,ВО 1 42О ± 1 1 О

СС!4 + VIв 1,9О 1,33 1,ОО В42± 142

СС!4 + VIг 2,17 1 ,В3 1,5О 3В9О ± 37О

СС!4 + VIIа 1,3О 1,67 1,ОО >1 ООО

СС!4 + VIIб 1,62 1,67 1,ОО >1 ООО

парата сравнения. По защитным свойствам соединения можно расположить в следующий ряд: VIr > 1354 >Vb > Vr > >VIb > >VI6 > эссенциале (в порядке убывания активности).

Сравнение защитных свойств исследуемых веществ по двум видам активности — гепатотропной и антигипоксической (табл. 2) — не выявило прямой корреляции между этими активностями.

Надо отметить, что в рассматриваемых структурах большую активность проявили соединения, у которых один протон в бензольном кольце был замещен на атом брома. Наличие брома увеличивало активность от 13 % (в случае соединений Va и Vb) до 39 % (в случае соединений V6 и Vr).

Больших различий между действием солей и оснований не выявлено.

ВЫВОДЫ

1. Производные тиазоло[5,4-Ь]индола обладают выраженной гепатотропной активностью. Соединения VI6—r и Vb, г обладают активностью, превышающей активность препарата сравнения эссенциале.

2. Для исследованных соединений не обнаружено зависимости между высокой антигипоксической и гепатотропной активностью.

3. Структуры V и VI являются перспективными для поиска и создания гепатопротекторов.

ЛИТЕРАТУРА_________

1. Венгеровский А.И., Чучалин В.С., Паулс О.В. // Бюл. эксперим. биол. и мед. — 1987. — № 8. — С. 192-195.

2. Воспроизведение заболеваний у животных для экспериментально-терапевтических исследований. / под ред. Н.В. Лазарева. — Л.: Медгиз, 1954.

3. Марышева В.В., Торкунов П.А., Шабанов П.Д. и др. 2-амино-4-ацетилтиазоло[5,4-Ь]индола, защищающий организм от гипоксии и токсического отека легкого. Патент РФ № 2188824. // Бюл. изобр. — 2002. — № 25. — С. 382.

4. Марышева В.В., Шабанов П.Д. // Эксперим. и клин. фармакол. — 2005. — Т. 68, № 1. — С. 67-70.

5. Основы промышленной токсикологии. / под ред. Н.А. Толоконцева и В.А. Филатова. — Л.: Медицина, 1976.

6. Прозоровский В.Б. Практическое пособие по ускоренному определению средних эффективных доз и концентраций биологически активных веществ. — Байкальск, 1994.

7. Томчин А.Б., Вележева В.С., Шустов Е.Б. // Хим.-фарм. журн. — 1998. — № 2. — С. 7-10.

8. Томчин А.Б., Кропотов А.В. // Хим.-фарм. журн. — 1998. — № 1. — С. 22-26.

9. Томчин А.Б., Урюпов О.Ю., Жукова Т.И и др. // Хим.-фарм. журн. — 1997. — № 3. — С. 19-27.

10. Томчин А.Б., Урюпов О.Ю., Смирнов А.В. // Хим.-фарм. журн. — 1997. — № 12. — С. 6-11.

11. Slater T.F. Biochemical studies of liver injury. — London-New York-San Francisco: Acad. Press,1978. — Р. 1-45.

Marysheva V.V., Gavrev A.I., Shabanov P.D. Hepatoprotective action of thiazolo[5,4b]indole derivatives. // Psychopharmacol. Biol. Narcol. — 2006. — Vol. 6, N 4. — P. 1351-1354. Department of Pharmacology, Military Medical Academy; 6, acad. Lebedev str., Saint-Petersburg, 194044

Summary: The hepatoprotective activity of new thiazolo[5,4b]indole derivatives, containing isothiourea group in the structure and possessing antihypoxic properties, was studied in the model of toxic damage of liver with tetrachlormethane in rats. All the compounds studied revealed hepatoprotective activity equal of more than drug of choice essenciale. The substitution of one proton in benzol ring with brom led to the increase of activity by 13-39 % in various compounds. There was no correlation between hepatoprotective and antihypoxic activity.

Key words: thiazolo[5,4b]indole; isothiourea; tetrachlormethane; alanine aminotransferase; aspartat aminotransferase

электронная копия статьи — http://www.elibrary.ru, © Архив (стоимость коммерческого доступа в режиме full text — 55 руб./год)