CC BY
18
Генетический полиморфизм и цитогенетические изменения Т-лимфоцитов периферической крови у больных артритом, ассоциированным с иксодовым клещевым боррелиозом, в северных регионах Сибири
Ильинских Н.Н.1-3, Ильинских Е.Н.1 2, Зуевский В.П.4, Семенов А.Г.1
ФГБОУ ВО «Сибирский государственный медицинский университет» Минздрава России; 2ФГАОУ ВО «Национальный исследовательский Томский государственный университет» Минобрнауки России; 3ФГБОУ ВО «Томский государственный педагогический университет» Минобрнауки России; 4БУ ВО ХМАО - Югры «Ханты-Мансийская государственная медицинская академия» Минобрнауки России
'634050 Томск, Московский тракт, 2; 2634050 Томск, пр. Ленина, 36; 3634061 Томск, ул. Киевская, 60; 462 8011 Ханты-Мансийск, ул. Мира, 40
'Siberian State Medical University, Ministry of Health of Russia, Tomsk, Russia; 2National Research Tomsk State University, Ministry of Education and Science of Russia, Tomsk, Russia; 3Tomsk State Pedagogical University, Ministry of Education and Science of Russia, Tomsk, Russia; 4Khanty-Mansi State Medical Academy, Ministry of Education and Science of Russia, Khanty-Mansi Autonomous District-Yugra, Russia 12, Moskovsky Road, Tomsk 634050; 236, Lenin Prospect, Tomsk 634050; 360, Kievskaya St., Tomsk 634061; 440, Mir St., Khanty-Mansiysk 628011
Контакты: Николай Николаевич Ильинских; [email protected]
Contact: Nikolai Ilyinskikh; [email protected]
Поступила 07.07.17
Ранее нами были проведены исследования, которые продемонстрировали повышенный уровень цитогене-тических нарушений у больных иксодовым клещевым боррелиозом (ИКБ). Установлено также, что тяжесть клинического течения артрита, ассоциированного с ИКБ (АИКБ), зависит от наличия у больного определенных аллелей гена HLA-DRB1.
Цель настоящей работы заключалась в том, чтобы оценить связь между полиморфизмом гена HLA-DRB1 и цитогенетическими изменениями в Т-лимфоцитах периферической крови у больных АИКБ. Материал и методы. Проведено обследование 146 больных АИКБ, 100 клинически здоровых реконвалесцен-тов ИКБ (РИКБ), а также контрольной группы, состоящей из 98 здоровых доноров (ЗД) крови, не болевших в прошлом клещевыми инфекциями, с применением цитогенетических (микроядерный анализ цитокинез-блокированных Т-лимфоцитов периферической крови) и молекулярно-генетических (ПЦР-анализ полиморфизма гена HLA-DRB1) методов.
Результаты и обсуждение. Частота цитокинез-блокированных лимфоцитов с микроядрами у больных АИКБ была существенно выше, чем аналогичный показатель в группах РИКБ и ЗД (p<0,01), за исключением результатов, полученных в подгруппе больных АИКБ, имеющих аллель DRB1*10 (p>0,05). Наиболее высокие уровни лимфоцитов с микроядрами были у больных АИКБ с аллелью DRB1*17(03), а также *01, *04 по сравнению с соответствующими частотами в группах РИКБ и ЗД (p<0,001). В группе РИКБ наиболее значимое повышение частоты обнаружения лимфоцитов с микроядрами наблюдалось у лиц, имеющих аллели DRB1*01, DRB1*04 или *17(03). Вместе с тем нами не было выявлено никаких достоверных различий по числу лимфоцитов с микроядрами в группе ЗД в зависимости от аллелей гена HLA-DRB1 (p>0,05). Таким образом, было установлено, что больные АИКБ имели наиболее высокую частоту цитогенетических нарушений, за исключением лиц с аллелью DRB1*10.
Ключевые слова: иксодовый клещевой боррелиоз; HLA-DRB1; генетический полиморфизм; Т-лимфоциты; микроядерный анализ.
Для ссылки: Ильинских НН, Ильинских ЕН, Зуевский ВП, Семенов АГ. Генетический полиморфизм и цитогенетические изменения Т-лимфоцитов периферической крови у больных артритом, ассоциированным с иксодовым клещевым боррелиозом, в северных регионах Сибири. Научно-практическая ревматология. 2017;55(5):500-503.
GENETIC POLYMORPHISM AND CYTOGENETIC CHANGES IN THE PERIPHERAL BLOOD T-LYMPHOCYTES OF PATIENTS WITH ARTHRITIS ASSOCIATED WITH IXODES TICK-BORNE BORRELIOSIS IN THE NORTHERN REGIONS OF SIBERIA Ilyinskikh N.N.1-3, Ilyinskikh E.N.1' 2, Zuevsky V.P.4, Semenov A.G.1
The authors have previously conducted studies that demonstrate the increased level of cytogenetic disturbances in patients with Ixodes tick-borne borreliosis (ITB). The severity of arthritis associated with ITB (AITB) is also ascertained to depend on whether the patient has certain HLA-DRB1 alleles.
Objective: to assess the association between HLA-DRB1 gene polymorphism and cytogenetic changes in the peripheral blood T lymphocytes of patients with AITB.
Subjects and methods. 146 patients with AITB, 100 clinically healthy convalescents with ITB (CITB), and a control group of 98 healthy blood donors (HBDs) without a history of tick-borne infections were examined using cytogenetic (micronucleus analysis of cytokinesis-blocked peripheral blood T lymphocytes) and molecular genetic (PCR analysis of HLA-DRB1 gene polymorphism) methods.
Results and discussion. The frequency of cytokinesis-blocked lymphocytes with micronuclei in the AITB group was significantly higher than that in the CITB and HBD groups (p<0.01) with the exception of the results obtained in the subgroup of patients with AITB who had the DRB1*10 allele (p>0.05). The highest levels of lymphocytes with micronuclei were observed in AITB patients with the DRB1*17(03), *01, and *04 alleles as compared to those in the CITB and HBD groups (p<0.001). The CITB group showed the most significant increase in the detection rate of lymphocytes with micronuclei in people with the DRB1*01, DRB1*04, or *17(03) alleles.
At the same time, there were no significant differences in the number of lymphocytes with micronuclei in the HBD group, depending on the HLA-DRB1 gene alleles (p>0.05).
Thus, the patients with AITB had the highest frequency of cytogenetic disorders with the exception of individuals with the DRB1*10 allele.
Key words: Ixodes tick-borne borreliosis; HLA-DRB1; genetic polymorphism; T lymphocytes; micronucleus analysis. For reference: Ilyinskikh NN, Ilyinskikh EN, Zuevsky VP, Semenov AG. Genetic polymorphism and cytogenetic changes in the peripheral blood T-lymphocytes of patients with arthritis associated with Ixodes tick-borne borreliosis in the northern regions of Siberia. Nauchno-Prakticheskaya Revmatologiya = Rheumatology Science and Practice. 2017;55(5):500-503 (In Russ.). doi: http://dx.doi.org/10.14412/1995-4484-2017-500-503
Ранее проведенные нами исследования показали [1], что в острый период иксодового клещевого боррелиоза (ИКБ) у большинства больных наблюдается существенное увеличение частоты обнаружения Т-лимфоцитов периферической крови с цитогенетическими нарушениями, включая хроматидные аберрации, полиплоидию и анеу-плоидию. После проведенного курса антибиотикотерапии у большинства больных было отмечено снижение числа цитогенетически измененных клеток с последующей нормализацией в стадии реконвалесценции. Однако, как известно, ИКБ у некоторых больных приводит в дальнейшем к развитию артрита (АИКБ). Изучение HLA-антигенов и гаплотипов с помощью полимеразной цепной реакции (ПЦР) у пациентов, прошедших курс антибиотикотера-пии, выявило наличие положительной или отрицательной связи между риском артрита и некоторыми аллелями гена HLA-DRB1 [2, 3]. Установленные факты позволяют использовать эти HLA-антигены в качестве маркеров высокого риска АИКБ. В доступной литературе мы не нашли исследований, посвященных изучению зависимостей между уровнями цитогенетических нарушений и полиморфизмом гена HLA-DRB1 у больных АИКБ.
Цель настоящей работы заключалась в том, чтобы оценить связь между полиморфизмом гена HLA-DRB1 и цитогенетическими изменениями в Т-лимфоцитах периферической крови у больных АИКБ.
Материал и методы
Проведено обследование 146 больных АИКБ, 100 клинически здоровых реконвалесцентов ИКБ (РИКБ), а также контрольной группы, состоящей из 98 здоровых доноров (ЗД) крови, не подвергавшихся укусам иксодовых клещей и не болевших в прошлом клещевыми инфекциями, с применением цитогенетических (микроядерный анализ в цитокинез-блокированных Т-лимфоцитах периферической крови) и молекулярно-генетических (ПЦР-ана-лиз полиморфизма гена HLA-DRB1) методов.
Взятие образцов венозной крови для ПЦР и цито-генетического анализа частоты микроядер (МЯ) в цитокинез-блокированных Т-лимфоцитах периферической крови было проведено при поступлении больных АИКБ в стационар. В большинстве случаев это были лица, имеющие подострую стадию болезни через 2—3 мес после начала заболевания. Этот срок начала АИКБ наиболее характерен для Сибирского региона [4]. Группа РИКБ включала лиц, перенесших острый ИКБ, которые получили курс антибиотикотерапии и не имели спустя 3 мес каких-либо клинических проявлений заболевания, включая артрит. До поступления в стационар заболевшие пациенты самостоятельного лечения химиопрепа-ратами и антибиотиками не проводили. Средний возраст больных АИКБ составлял 46,3±3,8 года, в группе РИКБ - 42,8±2,2 года, а в группе ЗД - 49,2±4,2 года. У всех обследованных групп были определены 13 групп аллелей гена HLA-DRB1 [DRB1*01, *04, *07, *08, *09, *10, * 11 (05), *12(05), *13(06), *14(06), *15(02), *16(02), *17(03)]. Определение аллелей гена HLA-DRB1 осуществляли методом ПЦР с помощью наборов реагентов Biotest (Германия) [5]. Анализ частоты МЯ в цитокинез-блокированных Т-лимфоцитах периферической крови проводили в соответствии с методикой и рекомендациями M. Fenech [6]. В каждый культуральный флакон, содержащий 2 мл культуральной среды, добавляли 180 мкл
лейкоцитарной взвеси и 25 мкг фитогемагглютинина-М («Панэко», Россия) с последующим культивированием в течение 44 ч при 37 °C. Затем в каждый флакон вносили 25 мкл цитохалазина B (Sigma, США) и продолжали культивирование еще 24 ч, после чего получали препараты, которые окрашивали по Романовскому—Гимзе. Анализ проводили при увеличении х1000 с помощью микроскопа Carl Zeiss (Германия) с учетом предложений, изложенных Ф.И. Ингель [7]. У каждого обследованного индивидуума анализировали не менее 1000 цитокинез-бло-кированных двуядерных лимфоцитов. Анализировали наличие одного или более МЯ, а нуклеоплазменные мосты или протрузии не учитывали. В настоящем исследовании принимали участие лица русской национальности, проживающие на севере Томской и Тюменской областей, которые не подвергались рентгенологическим обследованиям в течение 3 мес до взятия материала, а также работающие и проживающие в условиях, не представляющих существенную опасность в отношении содержания в окружающей среде генотоксикантов. У каждого больного диагноз ИКБ ставился на основе эпидемиологических и клинических данных, сведений в анамнезе о присасывании клеща, наличии кольцевидной мигрирующей эритемы и положительных результатов иммуноферментного анализа (ИФА) на наличие IgM и IgG к боррелиям ИКБ в сыворотке крови (ЗАО «Век-тор-Бест», Россия). У некоторых больных АИКБ проведена ПЦР для обнаружения ДНК боррелий в синовиальной жидкости. Для того чтобы исключить микст-инфекцию клещевого энцефалита, был использован ИФА с определением антигена вируса, а также IgM и IgG к вирусу клещевого энцефалита в сыворотке крови с помощью диагностических тест-систем ЗАО «Вектор-Бест» (Россия). У каждого обследованного были получены анкетные данные (национальность, возраст, пол, место работы, профессия и др.) и информированное согласие на проведение настоящего исследования, которое соответствовало требованиям Хельсинкской декларации Всемирной медицинской ассоциации «Этические принципы проведения научных медицинских исследований с участием человека» с поправками 2013 г. и «Правилами клинической практики в Российской Федерации», утвержденными Приказом Минздрава России от 19.06.2003 г. №266.
Статистическую обработку осуществляли с использованием пакета статистических программ Statistica 10.0. Частоты наблюдаемых цито генетических нарушений рассчитывали в программе The EH Software Program (Rockefeller University, Нью-Йорк). Все количественные показатели исследования обрабатывали с применением t-критерия Стьюдента для независимых выборок, поскольку тестирование закона распределения при помощи критерия Колмогорова—Смирнова не выявило отличий от нормального. Различия сравниваемых результатов (М+m, где М — выборочное среднее арифметическое, m — ошибка среднего арифметического) считались достоверными при достигнутом уровне значимости p<0,05 [8].
Результаты
Полученные нами данные свидетельствуют о статистически значимых различиях частоты лимфоцитов с микроядрами в зависимости от наличия в генотипе не-
Частота обнаружения лимфоцитов с МЯ в периферической крови, %, М±т
Аллели гена Группа АИКБ (n=146) Группа РИКБ (n=100) Группа ЗД (контроль; n=98)
HLA-DRB1 частота n частота n частота n
DRB1*01 7,13±1,22## 15 2,43±0,51AA 9 0,41±0,22 11
DRB1 *04 10,25±1,81##* 8 1,82±0,32AA 8 0,23±0,14 8
DRB1*07 5,64 ±0,94" 28 0,46±0,23 11 0,13±0,13 9
DRB1 *08 2,32±0,85## 5 0,43±0,16 6 0,35±0,26 4
DRB1 *09 3,95±0,74## 5 0,57±0,34 7 0,36±0,12 5
DRB1*10 1,22±0,33 4 0,92±0,68 5 0,57±0,27 4
DRB1*11(05) 9,76±1,45### 12 0,11±0,05 12 0,44±0,26 8
DRB1*12(05) 2,31±0,36# 7 0,44±0,23 5 0,27±0,18 6
DRB1*13(06) 6,44±0,87## 10 0,48±0,25 13 0,12±0,14 15
DRB1*14(02) 2,27±0,62' 3 0,13±0,06 4 0,05±0,02 4
DRB1*15(02) 4,23±0,72## 32 0,16±0,10 9 0,33±0,21 11
DRB1*16(02) 3,66±0,61## 8 0,59±0,31 6 0,31±0,18 6
DRB1*17(03) 14,81±2,23### 9 2,61±0,22AAA 5 0,52±0,22 7
Примечание. Статистически значимые различия показателей групп пациентов с АИКБ и РИКБ отмечены знаком (#), а групп РИКБ и ЗД - знаком (Л) с использованием одного, двух или трех символов при р<0,05, р<0,01 или р<0,001 соответственно.
которых аллелей гена НЬЛ-БЯЫ (см. таблицу). Частота лимфоцитов с МЯ у больных с АИКБ была статистически значимо выше, по сравнению с аналогичными показателями в группах РИКБ и ЗД (р<0,05). Исключение составили результаты, полученные в подгруппе больных АИКБ, имеющих аллель DRB1*10 (р>0,05). Интересно отметить, что носители аллели DRB1*10 практически резистентны к цитогенетическим изменениям при инфицировании боррелиями. Все же у них имелись признаки развития артрита, хотя и слабо выраженного, по сравнению с течением этого заболевания у других пациентов данной группы, в связи с чем, по-видимому, можно говорить о протективной роли этой аллели в развитии АИКБ. Наиболее высокий уровень лимфоцитов с МЯ был у больных АИКБ с аллелью DRB1*17(03). В группе РИКБ наиболее значимое повышение частоты лимфоцитов с МЯ наблюдалось у лиц, имеющих аллели DRB1*01, DRB1*04 или DRB1*17(03). Вместе с тем нами не было выявлено никаких различий по числу лимфоцитов с МЯ в группе ЗД в зависимости от аллелей гена НЬЛ-БЯт (р>0,05).
Обсуждение
В настоящем исследовании на первом месте по частоте находится аллель HLA-DRB1*15, являющаяся, по данным ряда исследований, наиболее распространенной в популяциях славянского происхождения [9]. За ней в порядке убывания частот следуют аллели HLA-DRB1*07 и HLA-DRB1*01. Сниженная частота наблюдаемых цитогенетических аберраций была характерна для носителей аллелей HLA-DRB1*14, DRB1*12 и DRB1*08, имеющих высокую встречаемость в популяциях сибирских монголоидов. По-видимому, представители этого этноса имеют повышенную резистентность к ИКБ. В соответствии с мнением многих исследователей, имеется четко выраженный полиморфизм развития симптоматики артрита у больных с Лайм-боррелиозом, при этом показано, что продукты генов НЬЛ взаимодействуют с поверхностно-специфичными рецепторами Т-лимфоцитов и это способствует активации ответа иммунной системы
хозяина [10-12]. В нашем исследовании установлена корреляционная зависимость между частотой Т-лимфо-цитов с МЯ у больных АИКБ и наличием у них HLA-DRB1*17(03) (r= 0,86; р<0,001) или HLA-DRB1*04 (r=0,76; p<0,01). Преимущественное поражение болезнью Лайма носителей этих аллелей отмечено также в исследовании L. Kovalchuka и соавт. [3], а наличие ассоциации с HLA-DRB1*04 было подтверждено, в частности, A.C. Steere и соавт. [2]. В настоящем исследовании самый низкий уровень Т-лимфоцитов с МЯ был у носителей носителей аллели HLA-DRB1*10, страдающих АИКБ. В данной подгруппе он не отличался от контроля. Некоторые исследователи находят низкий риск развития хронических форм болезни Лайма именно у носителей этой аллели [3], но в других работах протективную роль отводят аллели HLA-DRB1*11 [2, 12]. Результаты настоящего исследования свидетельствуют о том, что низкий уровень цитогенетических нарушений у носителей аллели HLA-DRB1*11 действительно отмечается у РИКБ. Имеется предположение о наличии толерантности Т-лимфоцитов к боррелиям из-за наличия у этой бактерии антигенной мимикрии, обеспечивающей восприимчивость или резистентность организма к инфекции [13-15]. Частоты аллелей HLA различаются у разных этнических групп населения [10, 11]. Несопоставимость результатов исследований протективности иммуногенетических маркеров, возможно, также связана с циркуляцией различных видов и генотипов боррелий в различных регионах. Защита организма от цитогенетических последствий инфекции, обеспечиваемая HLA-системой, по-видимому, связана с активностью иммунного ответа лимфоцитов [16]. Ранее нами было показано, что стимуляция Т-лимфоцитов ведет к существенному снижению числа цитогенетически дефектных клеток, тем самым обеспечивается восстановление цитогенетического гомеостаза после перенесенного человеком инфекционного заболевания [17]. Было высказано предположение, что, как только боррелии попадают в суставы или другие органы и ткани, развивается перекрестный иммунный ответ, направленный как против микроорганизма, так и против собственной со-
единительной ткани человека у лиц с HLA-DRB1, что приводит к аутоиммунным нарушениям [18]. Известно, что повышение уровня антинуклеарных антител — одна из причин возникновения цитогенетически аберрантных соматических клеток в организме человека [19, 20]. Не исключено, что развитие аутоиммунного процесса происходит интенсивнее у лиц с определенными вариантами аллелей гена HLA-DRB1 и это определяет существенные различия в цитогенетических последствиях ИКБ.
ЛИТЕРАТУРА
1. Il'inskikh EN, Il'inskikh IN, Semenov AG. Cytogenetics aberrations in peripheral blood mononuclear cells in acute Lyme borreliosis patients. Cytol Genet. 2013;47(1):44-52.
doi: 10.3103/S0095452713010027
2. Steere AC, Klitz W, Drouin EE, et al. Antibiotic-refractory Lyme arthritis is associated with HLA-DR molecules that bind a Borrelia burgdorferi peptide. J Exp Med. 2006;203(4):961-71.
doi: 10.1084/jem.20052471
3. Kovalchuka L, Eglite J, Zalite M, et al. The frequency of HLA-DR alleles in patients with tick-borne disease from Latvia. Res J Infect Dis. 2014;2(4):216-22. doi: 10.7243/2052-5958-2-4
4. Усольцева ОН, Горяев ЮА, Малов ИВ. Роль Лайм-боррелиоза в структуре ревматических заболеваний
в Иркутской области. Научно-практическая ревматология. 2002;40(4):130-6 [Usol'tseva ON, Goryaev YuA, Malov IV. The role of Lyme borreliosis in the structure of rheumatic diseases in the Irkutsk region. Nauchno-Prakticheskaya Revmatologiya = Rheumatology Science and Practice. 2002;40(4):130-6 (In Russ.)].
5. Klitz W, Maiers M, Spellman S, et al. New HLA haplotype frequency reference standards: high-resolution and large sample typing of HLA DR-DQ haplotypes in a sample of European Americans. Tissue Antigens. 2003;62(4):296-307.
doi: 10.1034/j.1399-0039.2003.00103.x
6. Fenech M. The in vitro micronucleus technique. Mutation Research. 2000;455(1-2):81-95. doi: 10.1016/S0027-5107(00)00065-8
7. Ингель ФИ. Перспективы использования микроядерного теста на лимфоцитах крови человека, культивируемых
в условиях цитокинетического блока. Часть I. Пролиферация клеток. Экологическая генетика. 2006;3(3):7-19 [Ingel' F I. Prospects for using a micronucleus test on human lymphocytes cultured under the cytokinetic block conditions. Part I. Cell proliferation. Ekologicheskaya Genetika. 2006;3(3):7-19 (In Russ.)].
8. Боровиков ВП, Боровиков ИП. Статистический анализ
и обработка данных в среде Windows. Москва: Филинъ; 1997. 608 с. [Borovikov VP, Borovikov IP. Statisticheskii analiz i obrabot-ka dannykh v srede Windows [Statistical analysis and data processing in the Windows environment]. Moscow: Filin; 1997. 608 p.].
9. Хромова HA, Болдырева МН, Гуськова ИА и др. Изучение особенностей распределения аллелей DRB1 локуса
и трехлокусных гаплотипов среди представителей восточнославянских популяций. Медицинская генетика. 2006;5(6):21-5 [Khromova HA, Boldyreva MN, Gus'kova IA, et al. A study of the distribution of the locus DRB1 alleles and triplicate haplotypes among representatives of East Slavic populations. Meditsinskaya Genetika. 2006;5(6):21-5 (In Russ.)].
10. Wang P, Hilton E. Contribution of HLA alleles in the regulation of antibody production in Lyme disease. Front Biosci. 2001;6:10-6. doi: 10.2741/A586
Прозрачность исследования
Исследование не имело спонсорской поддержки. Авторы несут полную ответственность за предоставление окончательного варианта рукописи в печать.
Декларация о финансовых и других взаимоотношениях
Все авторы принимали участие в разработке концепции статьи и в написании рукописи. Окончательная версия рукописи была одобрена всеми авторами. Авторы не получили гонорар за статью.
11. Crandall H, Dunn DM, Ma Y, Wooten RM. Gene expression profiling reveals unique pathways associated with differential severity of Lyme arthritis. J Immunol. 2006;177(11):7930-42.
doi: 10.4049/jimmunol.177.11.7930
12. Ананьева ЛП, Барскова ВГ, Конева ЛА и др. Поражение суставов при иксодовых клещевых боррелиозах (Лаймской болезни). Вестник Российской академии медицинских наук. 2003;(7):42-7 [Anan'eva LP, Barskova VG, Koneva LA et al. The defeat of the joints with ixodid tick-borne borreliosis (Lyme disease). Vestnik Rossiiskoi akademii meditsinskikh nauk = Bulletin of the Russian Academy of Medical Sciences. 2003;(7):42-7
(In Russ.)].
13. Singh SK, Girschick HJ. Lyme borreliosis: from infection to autoimmunity. Clin Microbiol Infect. 2004;10(7):598-614. doi: 10.1111/j.1469-0691.2004.00895.x
14. Klein J, Sato A. The HLA system. Second of two parts. N Engl J Med. 2000;343(11):782-6.
doi: 10.1056/NEJM200009143431106
15. Shin JJ, Glickstein LJ, Steere AC. High levels of inflammatory chemokines and cytokines in joint fluid and synovial tissue throughout the course of antibiotic-refractory Lyme arthritis. Arthritis Rheum. 2007;56(4):1325-35. doi: 10.1002/art.22441
16. Drouin EE, Glickstein L, Kwok WW, Nepom GT. Human homologues of a Borrelia T cell epitope associated with antibiotic-refractory Lyme arthritis. MolImmunol. 2008;45(1):180-9.
doi: 10.1016/j.molimm.2007.04.017
17. Ильинских НН, Ильинских ИН, Бочаров ЕФ. Цитогенетический гомеостаз и иммунитет. Новосибирск: Наука; 1986. C. 324 [Il'inskikh NN, Il'inskikh IN, Bocharov EF. Tsitogeneticheskii gomeostaz i immunitet [Cytogenetic homeostasis and immunity]. Novosibirsk: Nauka; 1986. P. 324].
18. Ананьева ЛП, Насонова ВА. Клиническая характеристика суставного синдрома при иксодовых клещевых боррелиозах. В кн.: Клещевые боррелиозы: Материалы научно-практической конференции. Ижевск; 2002. C. 49-52 [Anan'eva LP, Nasonova VA. Clinical characteristics of articular syndrome with ixodid tick-borne borreliosis. In: Kleshchevye bor-reliozy (Tick-borne borreliosis): Proceedings of scientific conference. Izhevsk; 2002. P. 49-52].
19. Ильинских НН. Уровень хромосомных нарушений при некоторых заболеваниях, сопровождающихся развитием аутоиммунных процессов. Клиническая медицина. 1980;(5):44-7 [Il'inskikh NN. The frequency of chromosomal abnormalities in certain diseases, accompanied by the development of autoimmune processes. Klinicheskaya Meditsina. 1980;(5):44-7 (In Russ.)].
20. Ilyinskikh N, Ilyinskikh I, Ilyinskikh E. Infectious mutagenesis (Cytogenetic effects in human and animal cells as well as immunoreactivity induced by viruses, bacteria and helminthes). Saarbrucken: LAP LAMBERT Academic Publishen; 2012. P. 216.
