CC BY
18
10. Абрамов А.В. Особенности экспрессии HIF-16 И HIF-Зб в гипоталамусе у крыс линии Вистар под влиянием прерывистой гипобарической гипоксии / А.В. Абрамов, В.А. Шаменко // Пологолiя. - 2017. - №2 (40). - С.156-162.
11. Шаменко В.А. Морфогистохимическая характеристика нейронов супраоптического ядра гипоталамуса крыс при действии прерывистой гипоксии / В.А. Шаменко // Ежемес. науч. ж. научн. Фонда «Биолог». - 2014. - № 4. - С. 29-32.
12. Kolesnik Yu.M. Effect of intermittent hypoxia trainings on the functional state of corticotropin releasing hormone- and в-endorphin-synthesizing neurons of the rat paraventricular nucleus of hypothalamus / Yu.M. Kolesnik, E.V. Kadzharyan, A.V. Abramov // International J. Physiology and Pathophysiology. - 2014. - V.5, №3. - Р. 1-7.
Реферат
ЕКСПРЕС1Я Б1ЛКА C-FOS В ППОТАЛАМУС1 ЩУР1В ПРИ БАГАТОДЕНН1Й Д1Т ПЕРЕРИВЧАСТОТ ППОКСИЧНОТ ППОКСИ
Абрамов А.В., Шаменко В.О., Колесник Ю.М.
Ключов1 слова: переривчаста ппокая, ппоталамус, б1лок c-Fos
В роботi дослiдженi особливостi експреси бiлка c-Fos - маркера активаци гена ранньоТ вiдповiдi c-fos в нейросекреторних ядрах ппоталамуса в умовах адаптаци органiзму до ппоксичноТ ппокси. Вста-новлено, що 15-денний цикл адаптацiТ до переривчастоТ ппокси (6000м) призводить до рiзноспрямо-ваних змш в крупноклiтинних нейронах паравентрикулярного (злкПВЯ) i супраоптичних (СОЯ) ядер. У ПВЯ збтьшуеться експресiя бтка c-Fos на 80 % i площа iмунореактивностi до бiлка на 42 %. А в СОЯ ц показники знижуються на 56 % i 25 %, вщповщно. У дрiбноклiтинних нейронах ПВЯ (ммПВЯ) також збiльшуeться експресiя бiлка cFos на 37 %. Через 10 дшв пiсля закiнчення гiпоксичних тренувань показники експреси бтка c-Fos практично не змшюються в злкПВЯ, вщновлюються до вихщних показни-мв в ммПВЯ i частково в СОЯ. Отриман результати свiдчать про стшке включення генiв ранньоТ вщ-повiдi c-fos в нейроендокринну вщповщь ПВЯ в механiзми адаптацiТ до ппоксичноТ ппокси i гальмуван-н функцюнальноТ' активностi нейросекреторних нейронiв СОЯ.
Summary
C-FOS PROTEIN EXPRESSION IN HYPOTHALAMUS OF RATS DURING LONG-TERM INTERMITTENT HYPOXIC HYPOXIA
Abramov A.V., Shamenko V.A., Kolesnik Yu.M.
Key words: intermittent hypoxia, hypothalamus, c-Fos protein
The features of expression of c-Fos protein known as a marker of immediate-early response gene c-fos activation in neurosecretory nuclei of the hypothalamus in conditions of organism adaptation to hypoxic hypoxia were studied in the work. It has been revealed that a 15-day cycle of intermittent hypoxia adaptation (6000 m) leads to multidirectional changes in large-cell neurons of paraventricular (PVN) and supraoptic (SON) nuclei. c-Fos protein expression is increased by 80% and the area of immunoreactivity to the protein by 42% in PVN, whereas these indicators are reduced by 56% and 25%, respectively, in SON. c-Fos protein expression is also increased by 37% in small-cell neurons of PVN. In 10 days after the end of the hypoxic exposure, c-Fos protein expression indices are not almost changed in large-cell neurons of PVN and restore to the initial values in small-cell neurons of PVN and partially in SON. The findings demonstrate the sustainable immediate-early response gene c-fos initiation in the neuroendocrine response of PVN to the mechanisms of hypoxic hypoxia adaptation and SON neurosecretory neurons functional activity inhibition.
УДК 616.37-018.1:616.379-008.64]-092.9 Абрамова Т.В., Колесник Ю.М., Иваненко Т.В.
ФУНКЦИОНАЛЬНОЕ СОСТОЯНИЕ р-КЛЕТОК ПОДЖЕЛУДОЧНОЙ ЖЕЛЕЗЫ У КРЫС СО СПОНТАННОЙ ГИПЕРТЕНЗИЕЙ ^^ ПРИ ЭКСПЕРИМЕНТАЛЬНОМ ДИАБЕТЕ
Запорожский государственный медицинский университет
В работе исследованы параметры распределения панкреатических островков и р-клеток в поджелудочной железе у гипертензивных крыс линии SHR в условиях развития стрептозотоцинового диабета. С помощью количественного иммунофлюоресцентного метода в железе выявляли инсулин, анализировали площадь панкреатических островков, количество в них р-клеток, концентрацию в клетках иммунореактивного инсулина, удельные показатели распределения островков, р-клеток и инсулина на единицу площади железы. Установлено, что у крыс линии SHR наблюдается доминирование панкреатических островков площадью меньше 1500 мкм2 и исчезновение островков площадью больше 7500 мкм2, снижение удельного количества р-клеток (12,4% от показателя нормотензивных крыс линии Wistar) и содержания инсулина (в 3 раза по сравнению с крысами линии Wistar). Развитие диабета усиливает гибель р-клеток, при этом их численность снижается в 2 раза, а содержание инсулина в железе в 1,5 раза. Таким образом, индукция сахарного диабета у крыс с наследственной артериальной гипертензией усиливает ремоделирование инсулярного аппарата, что приводит к снижению синтеза инсулина в поджелудочной железе.
Ключевые слова: р-клетки, инсулин, артериальная гипертензия, диабет
Работа выполнена в соответствии с тематикой научно-исследовательских работ №0114Ш00966 и №0116U005352.
Метаболический синдром у пациентов характеризуется сочетанием гипертонической болезни и сахарного диабета, которые взаимно усиливают клиническую тяжесть течения отдельно взятых нозоло-гий [1]. Ранее нами было показано, что у 2/3 линейных крыс SHR с наследственной артериальной ги-пертензией отмечаются признаки нормогликемии и только для 1/3 животных характерна гипергликемия натощак [2]. Тем не менее, у гипертензивных животных с нормогликемией натощак отмечаются признаки ремоделирования панкреатических островков с уменьшением плотности популяции ß-клеток в железе [3,4]. В то же время, реакция инсулярного аппарата поджелудочной железы крыс с наследственной гипертензией на действие ß-цитотоксических факторов, приводящих к развитию диабета, ранее не была исследована.
Цель работы
Изучить особенности распределения ß-клеток у гипертензивных крыс линии SHR при развитии экспериментального стрептозотоцинового диабета.
Материалы и методы исследования
Исследование проведено на 25 самцах крыс линии Wistar (масса 232±7 г) и 30 крысах линии SHR (масса 306±5 г). Животные содержались в стандартных условиях вивария при естественном освещении без ограничения доступа к воде и пище. У 15 животных каждой линии моделировали сахарный диабет однократным внутрибрюшным введением стрептозотоцина (Sigma Chemical, США) в дозе 50 мг/кг. Концентрацию глюкозы определяли глюкозооксидазным методом, а инсулина - иммунофер-ментным методом в крови, взятой из хвостовой вены животных. Контрольных и экспериментальных крыс (на 28 день после введения стрептозотоцина) декапитировали под тиопенталовым наркозом (50 мг/кг). Поджелудочную железу фиксировали в растворе Буэна (20 часов) и после стандартной гистологической обработки заключали в парапласт (MkCormick, США). На микротоме Microm Н235 (Германия) готовили 5-микронные срезы из различных участков поджелудочной железы, которые после де-парафинизации и регидратации обрабатывали антителами к инсулину и вторичными антителами, коньюгиванными с FITC (Peninsula Lab. Inc., Великобритания).
Анализ иммунофлюоресцентной реакции проводили на флюоресцентном микроскопе Axiolmager-M2 (Carl Zeiss, Германия) с применением высокоэмиссионного светофильтра 38НЕ (лех=470/40 нм, лет=525/50 нм) (Carl Zeiss, Германия). Количественный анализ иммунофлюоресцентной реакции проводили с помощью системы цифрового анализа изображения AxioVision-4.8.2 (Carl Zeiss, Германия). Панкреатические островки классифицировали в зависимости от величины площади их поперечного сечения и выделяли единичные ß-клетки, маленькие (площадью <1500 мкм2), средние (площадью 1500 - 3500 мкм2), большие (площадью 3500 - 7500 мкм2) и гигантские (площадью >7500 мкм2) островки [5]. Концентрацию иммунореактивного инсулина в ß-клетках вычисляли как десятичный логарифм отношения интенсивности флюоресценции секреторных гранул к неспецифической флюоресценции ацинарной ткани железы и выражали в условных единицах флюоресценции (ЕИФ). Содержание инсулина в поджелудочной железе рассчитывали как произведение концентрации инсулина, площади иммунореактивного материала в клетке и удельного количества ß-клеток (с учётом представительства островков различных типов) и выражали в единицах ЕИФ на 1 см2 площади среза железы. Исследовали не менее 5 см2 суммарной площади срезов поджелудочной железы у каждого животного.
Экспериментальные данные обрабатывали пакетом программ для статистического анализа EXCEL 2003 (Microsoft Corp.) с интегрированной программной надстройкой Attestat [6]. Данные с непрерывным распределением представляли в виде средней величины и ошибки средней (M±m), а дискретно распределённые данные (количество клеток, островков) - в виде медианы (Me) и межквар-тильного размаха (Q^Q3). Достоверность различий между экспериментальными группами оценивали с помощью t-критерия Стьюдента (для непрерывно распределённых и данных с нормальным распределением) и W-критерия Уилкоксона (для дискретно распределённых данных), считая различия достоверными при р<0,05.
Результаты и их обсуждение
Как следует из данных, приведенных в таблице 1, контрольные животные линии SHR при наличии нормогликемии натощак отличались более высокими показателями иммунореактивного инсулина в крови и значением индекса НОМА. При этом 28-дневное развитие диабета у них приводило к закономерной гипергликемии, показатели которой, тем не менее, были на 35 % ниже, чем у крыс линии Wistar с диабетом. Это приводило к некоторому уменьшению индекса НОМА, который все равно оставался выше трех единиц.
Табл. 1.
Показатели артериального давления и биохимическая характеристика диабета у экспериментальных животных, M±m I Группа животных | Систоли-ческое АД, | Глюкоза крови натощак, | Инсулин крови натощак, | Индекс НОМА |
Том 17, Випуск 4 (60) частина 2
мм рт. ст. ммоль/л мкМЕ/мл
контроль 105,0±1,1 # 3,94±0,09 # 8,61±0,41 # 1,43±0,08 #
Wistar, диабет 108,0±1,5 # 17,69±1,11 *# 5,99±0,34 *# 2,74±0,14 *#
SHR, контроль 155,7±0,9 * 4,73±0,10 * 10,99±0,37 * 5,80±0,49 *
SHR, диабет 140,4±1,1 *# 11,45±0,89 *# 6,25±0,46 *# 3,60±0,48 *#
Примечание: достоверность отличий р<0,05 (Ыкритерий Стьюдента) по сравнению с контрольными группами Wistar (*) и SHR (#).
Табл. 2.
араметры распределения панкреатических островков на 1 см2 площади среза поджелудочной железы у экспериментальных животных, Ме ^1 ч Q3)
Тип островков Wistar, контроль Wistar, диабет SHR, контроль SHR, диабет
Единичные р-клетки 3 (3ч5) 12 (6ч17) * 14 (7ч15) * 19 (11ч26) *
Маленькие 98 (75ч131) 75 (69ч85) 88 (66ч102) 69 (45ч93)
Средние 67 (61ч76) 23 (20ч27) * 11 (7ч15) * 7 (5ч8) *#
Большие 31 (21ч38) 12 (11ч13) * 3 (1ч6) * 4 (1ч7) *
Гигантские 22 (14ч32) 7 (5ч9) * 0 0
Всего (М±т) 231±3 132±1* 112±1 * 98±2 *#
Примечание: в таблицах 2-4 указана достоверность отличий р<0,05 ^-критерий Уилкоксона) по сравнению с контрольными группами Wistar (*) и SHR (#).
Развитие диабета у крыс линии Wistar закономерно приводило к деструкции р-клеток и ремодели-рованию самих островков (табл. 2): удельное количество панкреатических островков уменьшалось практически в 2 раза за счет снижения доли островков площадью сечения менее 1500 мкм2. При этом доля единичных р-эндокриноцитов в поджелудочной железе увеличивалась в 2,8 раза. Сравнительный анализ распределения панкреатических островков в поджелудочной железе у половозрелых 6-месячных животных линии Wistar и SHR детально был проанализирован в нашей предыдущей публикации [3,4] и свидетельствовал о том, что количество островков у гипертензивных крыс линии SHR в 2 раза меньше, чем у нормотензивных крыс линии Wistar, а в ткани железы исчезали гигантские островки площадью сечения более 7500 мкм2. В то же время, развитие диабета у гипертензивных крыс линии SHR вызывало лишь незначительное, на 12 % (р<0,001), снижение удельной численности островков без существенного изменения структуры их распределения по площади.
Экспериментальный диабет приводил к снижению удельного количества р-клеток в поджелудочной железе крыс линии Wistar на 83 % (р<0,001) за счет преимущественной деструкции больших и гигантских панкреатических островков (табл. 3). При этом в железе в 2,3 раза возрастала плотность популяции единичных р-эндокриноцитов. Особенности ремоделирования инсулярного аппарата у крыс линии SHR приводили к тому, что численность р-эндокриноцитов в поджелудочной железе у крыс линии SHR составляла лишь 12,4±0,1% от количества р-клеток у контрольных крыс линии Wistar, или на 29 % ниже (р<0,001), чем у крыс линии Wistar с диабетом. Формирование стрептозотоцинового диабета у гипертензивных крыс сопровождалось дальнейшим сокращением популяции р-клеток в поджелудочной железе, численность которых снижалась на 47 % (р<0,001) по сравнению с контрольными крысами линии SHR.
Табл. 3.
Плотность распределения р-клеток на 1 см2 площади среза поджелудочной железы у экспериментальных животных, Ме ^1 ч Q3)
Тип островков Wistar, контроль Wistar, диабет SHR, контроль SHR, диабет
Единичные р-клетки 5 (4ч7) 12 (6ч19) * 15 (10ч17) * 22 (12ч32) *
Маленькие 556 (502ч837) 294 (256ч354) * 380 (296ч445) * 239 (181ч297) *#
Средние 563 (450ч664) 261 (254ч312) * 196 (155ч216) * 95 (60ч128) *#
Большие 2281 (1382ч2919) 298 (214ч361) * 238 (199ч282) * 88 (69ч107) *#
Гигантские 2790 (1144ч5224) 316 (228ч325) * 0 0
Всего (М±т) 6738±174 1166±11 * 833±8* 443±8 *#
Табл. 4.
Содержание иммунореактивного инсулина (ЕИФ) на 1 см2 площади среза поджелудочной железы у экспериментальных животных, М±т
SHR, диабет
Тип островков Wistar, контроль Wistar, диабет SHR, контроль
Единичные ß-клетки 18,9±Q,2 71,7±1,4 * 52,Q±Q,6 * 1Ю,1±5,6 *#
Маленькие 534,3±2,7 461,6±3,2 * 411,5±1,8 * 423,5±5,9 *#
Средние 3211,7±7,Q 1685,2±6,Q * 1Q32,1±Q,7 * 500,2±0,5 *#
Большие 194,3±5,2 94,2±9,9 * 42,3±7,5 * 21,7±Q,1 *#
Гигантские 283,3±21,5 1Ю,6±7,8 * Q Q
Всего (M±m) 4242,5±4,1 2423,3±3,2 * 1537,9±1,2 * 1Q55,5±1,3 *
Определение содержания иммунореактивного инсулина в ткани поджелудочной железы позволило оценить функциональный резерв инсулин-синтезирующей железы (табл. 4). Было отмечено, что уменьшение популяции ß-эндокриноцитов при диабете у крыс линии Wistar сопровождалось снижением содержания инсулина в поджелудочной железе на 43 % (p<Q,QQ1) в сочетании с уменьшением концентрации гормона в крови на 3Q % (p<Q,QQ1). Количество инсулина снижалось во всех функционирующих островках, и только за счет роста популяции единичных инсулин-иммунопозитивных клеток количество синтезируемого ими инсулина увеличивалось в 3,8 раза. У гипертензивных крыс линии SHR за счёт снижения пула ß-эндокриноцитов удельное содержание инсулина в железе было примерно в 3 раза меньше, чем у нормотензивных крыс линии Wistar, хотя уровень гомона в крови был на 28 % выше (p<Q,Q1), чем у крыс линии Wistar. При этом следует отметить, что у контрольных животных линии SHR содержание иммунореактивного инсулина в железе было всего лишь на 36 % больше (p<Q,QQ1), чем у крыс линии Wistar с диабетом. Развитие стрептозотоцинового диабета у гипертензивных крыс линии SHR характеризовалось дальнейшим истощением резерва инсулина в организме, содержание которого в поджелудочной железе уменьшалось на 32 %, а концентрация гормона в крови на 43 % по сравнению с контрольной группой животных линии SHR.
Таким образом, полученные данные свидетельствуют о том, что развитие наследственной артериальной гипертензии у крыс линии SHR сопровождается ремоделированием инсулярного аппарата поджелудочной железы и проявляется изменением цитоархитектоники панкреатических островков, истощением пула ß-эндокриноцитов и резерва иммунореактивного инсулина в железе. В определенной мере характер распределения панкреатических островков у взрослых крыс линии SHR в значительной мере соответствовал картине, которая наблюдается у 1-месячных крыс линии Wistar с физиологической гестацией и у половозрелых крыс линии Wistar, испытавших хронический пренаталь-ный стресс [5]. Ранее было установлено, что с возрастом у крыс линии SHR прогрессирует истощение пула ß-клеток [7]. Возможно, что усиление дизрегуляции симпатической иннервации панкреатических островков [8,9] и нарушение микроциркуляции [1Q], характерные для гипертонической болезни, существенно ограничивают возможность восстановления пула эндокриноцитов при действии на организм ß-цитотоксических факторов. Нельзя исключить и роль эпигенетических механизмов, приводящих к снижению массы ß-клеток в поджелудочной железе гипертензивных крыс, и связанных с увеличением синтеза белка p16Ink4a - ингибитора деления ß-эндокриноцитов [11]. В свою очередь, действие факторов, приводящих к ремоделированию панкреатических островков при гипертонической болезни, усугубляет структурную дезинтеграцию и функциональную дизрегуляцию эндокринного аппарата поджелудочной железы, вызванную сочетанным действием ß-цитотоксических факторов окружающей среды.
Выводы
1. Формирование наследственной артериальной гипертензии у крыс линии SHR сопровождается ремоделированием инсулярного аппарата поджелудочной железы, приводящим к уменьшению пула ß-клеток в 8 раз и снижению содержания иммунореактивного инсулина в железе в 3 раза, по сравнению с нормотензивными крысами линии Wistar.
2. Развитие стрептозотоцинового диабета у крыс линии SHR усугубляет ремоделирование инсулярного аппарата и приводит к дальнейшему истощению пула ß-эндокриноцитов и синтезируемого ими инсулина в поджелудочной железе и снижению концентрации гормона в периферической крови.
Перспективы дальнейших исследований связаны с изучением реакции глюкагон-синтезирующего аппарата поджелудочной железы крыс линии SHR при развитии диабета.
Литература
1. Roglic G. Mortality attributable to diabetes: Estimates for the year 2Q1Q / G. Roglic, N. Unwin // Diabetes Research and Clinical Practice. - 2Q1Q. -V.87, №1. - Р. 15-19.
2. Gancheva O.V. Metabolic disturbances in hypertensive rats / O.V. Gancheva, Yu.M. Kolesnik, T.V. Abramova [et al.] // Clinical Pharmacy. - 2Q13. -Т.17, №4. - С. 56-58.
3. Abramova T.V. The distribution of the islets of Langerhans in pancreas of euglycemic spontaneously hypertensive rats / T. V. Abramova // Патолопя. - 2Q16. - №1(36). - С. 19-21.
4. Abramova T.V. The features of beta-cells organization in the pancreas of spontaneously hypertensive rat (SHR) / T.V. Abramova, Yu.M. Kolesnik // Патолопя. - 2Q16. - №3(38). - С. 4-8.
5. Абрамов А.В. Особенности влияния хронического пренатального стресса на структурно-функциональную организацию бета-эндокриноцитов / А.В. Абрамов, М.А. Тихоновская, Ю.М. Колесник // Клтчна та експериментальна патолопя. - 2QQ4. - №2, ч. 1. - С. 176-179.
6. Гайдышев И.П. Решение научных и инженерных задач средствами Excel, VBA и C/C++ / И. П. Гайдышев. - СПб: БХВ-Петербург, 2QQ4. - 5Q4 с.
Том 17, Випуск 4 (60) частинаИ
7. Грекова Т.А. Влияние пренатальной гипергликемии на морфофункциональное состояние эндокринного аппарата поджелудочной железы самцов крыс в возрастной динамике / Т. А. Грекова // Запорожский медицинский журн. - 2010. - Т. 12, №4. - С. 12-15.
8. Cabrera-Vasquez S. Remodelling sympathetic innervation in rat pancreatic islets ontogeny // S. Cabrera-Vasquez, V. Navarro-Tableros, C. Sanchez-Soto [et al.] // BMC Developmental Biology. - 2009. - V.9, №34. Р. 1-11.
9. Nekrep N. Signals from the neural crest regulate beta-cell mass in the pancreas / N. Nekrep, J. Wang, T. Miyatsuka, M. German // Development. -2008. - V.135, №12. - Р. 2151-2160.
10. Iwase M. The pancreatic islets in spontaneously hypertensive rats: islet blood flow and insulin production. / M. Iwase, S. Sandler, P. Carlsson [et al.] // European J. Endocrinology. - 2001. - V.144, №2. - Р.169-178.
11. Avrahami D. Epigenetic regulation of pancreas development and function / D. Avrahami, K. Kaestner // Sem. Cell Develop. Biol. - 2012. - V.23, №6. -Р. 693-700.
Реферат
ФУНКЦЮНАЛЬНИЙ СТАН р-КП1ТИН ПЩШПУНКОВОТ ЗАЛОЗИ У ЩУР1В З1 СПОНТАННОЮ ППЕРТЕНЗ1СЮ (SHR) ПРИ
ЕКСПЕРИМЕНТАЛЬНОМУ Д1АБЕТ1
Абрамова Т.В., Колесник Ю.М., 1ваненко Т.В.
Ключовi слова: р-штини, шсулЫ, артерiальна гiпертензiя, дiабет
В робот1 дослщжеы параметри розподту панкреатичних остр1вц1в i р-кл1тин в пщшлунковш залоз1 у ппертензивних щурiв лшп SHR в умовах розвитку стрептозотоцинового дiабету. За допомогою ктькю-ного iмунофлюоресцентного методу в залозi виявляли шсулш, аналiзували площу панкреатичних ост-рiвцiв, ктькють в них р-штин, концентрацш в клп"инах iмунореактивного шсулшу, питомi показники розподту ос^в^в, р-кл^ин i шсулшу на одиницю площi залози. Встановлено, що у щурiв л1нй" SHR спостер^аеться домiнування панкреатичних острiвцiв площею менше 1500 мкм i вщсутнють острiвцiв площею бiльше 7500 мкм2, зниження питомо'Г кiлькостi р-клiтин (12,4 % вщ показника нормотензивних щурiв лшп Wistar) i вмiсту шсулшу (в 3 рази в порiвняннi з щурами л i н i' Wistar). Розвиток дiабету поси-люе загибель р-клiтин, при цьому 'х чисельнiсть знижуеться в 2 рази, а вмют iнсулiну в залозi в 1,5 рази. Таким чином, шдук^я цукрового дiабету у щурiв зi спадковою артерiальною гiпертензiею пiдсилюе ремоделювання шсулярного апарату, що призводить до зниження синтезу шсулшу в пщшлунковш за-лозк
Summary
FUNCTIONAL STATUS OF р-CELLS IN PANCREAS OF SPONTANEOUSLY HYPERTENSIVE RATS WITH EXPERIMENTAL DIABETES
Abramova T.V., Kolesnik Yu.M., Ivanenko TV.
Key words: р-cells, insulin, arterial hypertension, diabetes mellitus
This study is devoted to investigating the parameters of pancreatic islets and beta-cells distribution in pancreas of spontaneously hypertensive rats (SHR) under streptozotocin-induced diabetes mellitus. Quantitative immunofluorescence method was applied to detect insulin in the gland, to determine the area of pancreatic islets and the number of beta-cells in them, to assess the concentration of immunoreactive insulin in the cells, as well as to evaluate the relative indices of islets distribution, beta-cells and insulin per unit of gland area. The results obtained have demonstrated the dominance of pancreatic islets less than 1500 ^m2 in area and disappearance of islets more than 7500 ^m2 in area, decrease in beta-cells specific quantity (12.4 % of normotensive Wistar rats) and insulin content in SHR (3 times in comparison with Wistar rats). Diabetes development potentiates beta-cells death and hereby their population decreases by 2 times, and insulin content in gland decreases by 1.5 times. Thus, diabetes mellitus induction in rats with hereditary arterial hypertension intensifies the insular apparatus remodeling that leads to decrease in insulin synthesis in the pancreas.
