CC BY
28
© О.Д.Ягмуров, 1997
УД К 612.112.94:612.416:616.61 -008.64-036.12
О.Д.Ягмуров
ФУНКЦИОНАЛЬНАЯ АКТИВНОСТЬ ЛИМФОЦИТОВ СЕЛЕЗЕНКИ И ПЕРИФЕРИЧЕСКОЙ КРОВИ У БОЛЬНЫХ С ХРОНИЧЕСКОЙ ПОЧЕЧНОЙ НЕДОСТАТОЧНОСТЬЮ
O.D. Jagmourov
FUNCTIONAL STATE OF SPLENIC AND BLOOD LYMPHOCYTES IN PATIENTS WITH CHRONIC RENAL FAILURE
Кафедра патологической анатомии Санкт-Петербургского государственного медицинского университета им. акад. И.П.Павлова, Россия
РЕФЕРАТ
На аутопсийном материале 26 умерших больных от хронической почечной недостаточности (ХПН) проведено морфофункциональное исследование состояния иммунных органов и иммунологическое исследование популяционного состава и функциональной активности лимфоцитов селезенки, а также периферической крови. Оценивали активность нуклеиновых кислот, НАДН2-дегидрогеназы и 5'-нуклеотидазы. Показано, что гистологические и гистохимические изменения находят отражение в сдвигах популяционного состава лимфоцитов селезенки и периферической крови. Прогрессирование ХПН происходит на фоне глубокого угнетения про-лиферативной активности Т-лимфоцитов, усиления супрессорной активности иммунорегуля-торных клеток (Т-супрессоров) и нарушения популяционного состава клеток-эффекторов селезенки и периферической крови. Делается вывод о том, что снижение функциональной активности Т-лимфоцитов есть результат не только прямого действия на них токсических веществ, но и усиления активности Т-супрессоров.
Ключевые слова: хроническая почечная недостаточность, лимфоциты, ферменты, иммунология. ABSTRACT
Morphophysiological investigation of the state of immune organs and the ratio of the lymphocyte subsets as well as the functional state of splenic and blood lymphocytes were performed in the autopsy material of 26 patients who died from chronic renal failure. A histochemical analysis of nucleic acids, NADH2 dehydrogenaze and 5'-necleotidaze in the lymphoid tissue was made. Changes in the structure and enzyme activity of the lymphoid tissue were shown to correlate with the changes in the ratio of lymphoid subsets in the spleen and peripheral blood. A conclusion is drawn that decreased functional activity of T-lymphocytes results not only from direct action of azotemia but also from increased T-cell suppressor activity.
Key words: chronic renal failure, lymphocytes, enzymes, immunology.
ВВЕДЕНИЕ
Известно, что в основе возникновения и прогрессирования гломерулонефрита с последующим развитием хронической почечной недостаточности (ХПН) лежат нарушения иммунной системы.
Установлено, что эти нарушения зависят от функциональной активности Т- и В-лимфоци-тов [1—6].
Существующие в литературе данные дают возможность предположить наличие прямого влияния биологически активных веществ (БАВ), выделяющихся в кровь при ХПН, на функциональное состояние лимфоцитов органов иммуногенеза и периферической крови [3—6].
Это позволяет предположить, что ослабление функции иммунной системы при гломеру-лонефрите и его прогрессирование является результатом нарушения популяционного состава и функциональной активности лимфоцитов.
Целью настоящей работы явилось изучение популяционного состава и функциональной активности лимфоцитов селезенки и периферической крови у больных с ХПН.
МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ
Материалом служили кусочки селезенки и периферическая кровь больных, умерших от хронического гломерулонефрита. Всего ауто-псийный материал составил 26 наблюдений.
Материал был разделен на три группы. В первой группе, состоявшей из 10 человек, ХПН была представлена I степенью. Во второй и третьей группах, включавших равное количество наблюдений — 8 случаев, имелась ХПН II и III степени соответственно. Все больные были одинакового возраста (46—48 лет) и одного пола (мужчины).
Забор материала производили во время ранних вскрытий, осуществляемых в пределах 1 ч после констатации биологической смерти больного.
Гистологическое исследование органов иммунной системы (селезенка, пейеровы бляшки тонкой кишки, лимфатические узлы) с количественным анализом иммунокомпетентных клеток в Т- и B-зонах проводили на парафиновых срезах методом Автандилова при окраске гематоксилин-эозином и пикрофуксином по ван Гизону. Количественное гистохимическое исследование ферментативной активности клеток специфического звена и эндотелия синусоидов исследованных органов проводили методом цитофотометрии при постановке реакции на НАДН2-дегидрогеназу, 5'-нуклеотидазу, ЩФ,
нк, нэ.
Иммунологическое исследование популяци-онного состава суспензии селезенки и периферической крови проводили путем выявления
пролиферативной и супрессорной активности лимфоцитов. Т-лимфоциты разделяли на тео-филлин-чувствительные (Т-супрессоры) и тео-филлин-резистентные (Т-хелперы). Способность лимфоцитов к пролиферации под действием поликлональных активаторов-митогенов оценивали в реакции бласттрансформации (РБТ). Пролиферативную активность лимфоцитов — спонтанную и стимулированную фитоге-магглютинином — ОРГА (10 мкг/мл) оценивали по включению Н-тимидина.
Пролиферативную активность клеток гуморального иммунитета оценивали с применением митогена — липополисахарида В.coli (LPS — В.coli). Супрессорную активность лимфоцитов, как спонтанную, так и индуцированную конканавалином А (Кон-А) (25 мкг/мл), оценивали с помощью теста по подавлению включения Н-тимидина в тест-культуре, стимулированной ФГА.
Математическую обработку полученных данных проводили на персональном компьютере с помощью применения профилированного программного пакета.
РЕЗУЛЬТАТЫ
При гистологическом изучении выявили, что при прогрессировании ХПН у больных с
Микроскопические изменения селезенки при хроническом гломерулонефрите. а — атрофия фолликулов белой пульпы селезенки с развитием периартериального склероза.; б — делимфотизация Т-зависимой зоны белой пульпы селезенки с увеличением количества макрофагов. Ув.: а — 120; б —400.
Функциональная активность лимфоцитов периферической крови у больных с I, II и III степенью ХПН
Степень ХПН Пролиферативная активность (имп/мин) Супрессорная активность (имп/мин)
Т-митоген (ФГА, Кон-А) В-митоген (ЛПС B.coli) Спонтанная Индуцированная
1 И III Норма 2673,7±450,9 1752,3±356,2 1114,2±282,8 6000,0-12 000,0 1150,0+339,1 1047,0±194,1 920,5+180,2 2000,0-4000,0 26,6±4,5 24,8+6,4 29,3±6,8 10,0-20,0 76,9±6,9 84,0±5,2 89,0±8,2 30,0-60,0
гломерулонефритом наблюдается выраженное уменьшение клеток-эффекторов стромы иммунных органов, усиление процессов склерозирования с одновременной атрофией фолликулов специфической паренхимы селезенки (рисунок, а). При этом уменьшение объема специфической паренхимы иммунных органов коррелировало с нарастанием ХПН.
Глубокие изменения сосудистого русла и клеточного состава иммунных органов сопровождались развитием делимфатизации Т- и B-зависимых зон (рисунок, б). В селезенке и лимфатических узлах при ХПН III степени уменьшается количество клеток-эффекторов (лимфоциты, плазмоциты) с одновременным накоплением макрофагов в Т-зависимой зоне стромы этих органов.
При гистохимическом изучении выявили глубокие нарушения ферментативных процессов эндотелия синусоидов и клеток специфической паренхимы изученных органов. Про-грессирование ХПН сопровождается резким угнетением белково-синтетических процессов (НК) с одновременной активацией ферментов энергообеспечения и трансэндотелиального транспорта (НАДН2; 5'-нуклеотидаза). Выявленные гистологические и гистохимические изменения в изучаемых органах коррелировали с изменениями популяционного состава и функциональной активности лимфоцитов. Иммунологическое изучение лимфоцитов селезенки и периферической крови показало, что уже при ХПН I степени "происходит резкое изменение их функционального состава клеточного и гуморального иммунитета. Происходило усиление супрессорной активности лимфоцитов не только селезенки, но и периферической крови. Это сопровождалось значительным подавлением пролиферативного ответа лимфоцитов на Т- и B-клеточные митогены (таблица). Для лиц, страдавших ХПН II степени, было характерным резкое повышение спонтанной и Кон-А индуцированной супрессорной активности лимфоцитов селезенки. При этом отмечалось снижение спонтанного включения Н-тимидина лимфоцитами периферической крови. Угнетение пролиферативной активности лимфоцитов проявлялось снижением ответа их на Т-клеточ-
ный митоген — ФГА. Нарастание интоксикации организма при III степени ХПН сопровождалось глубоким угнетением пролиферативной активности лимфоцитов как селезенки, так и периферической крови в отношении Т(ФГА и Кон-А)- и В(ЛПС)-клеточных митогенов. При этом сопоставление супрессорной и пролиферативной активности лимфоцитов выявляло разнонаправленность их реакции на поликло-нальные митогены.
ОБСУЖДЕНИЕ
Полученные данные свидетельствуют о существенной роли функциональной активности лимфоцитов в развитии и прогрессировании хронической почечной недостаточности. Как показали результаты, имеются определенная закономерность и различия в популяционном составе клеток-эффекторов селезенки и периферической крови при хронической почечной недостаточности. Известно, что лимфоциты осуществляют физиологическую регенерацию ткани, в том числе пролиферацию клеток нефрона [1, 3, 5, 6]. Можно предположить, что снижение пролиферативной активности лимфоцитов будет влиять на скорость развития лимфатических и некробиотических изменений в прогрессировании хронической почечной недостаточности. Особенно важным, в связи с этим, является то, что снижение пролиферативной активности лимфоцитов на нашем материале сопровождалось усилением функциональной активности Т-супрессоров. Вероятнее всего, это можно объяснить функцией Т-супрессоров по обеспечению спада пролиферативной волны в регенерирующем органе. Если в условиях нормы в организме имеет значение соотношение лимфоцитов со стимулирующими и подавляющими свойствами, то при развитии патологии, когда нарушается физиологическая регенерация ткани почек из-за общего снижения функциональной активности популяции лимфоцитов, ответственных за нее, это соотношение резко меняется. Усиление функциональной активности Т-супрессоров возможно связано и с попыткой подавить пул активированных быстроделящихся Т-лимфоци-тов, способных продуцировать ИЛ-6 с последу-
ющей цитокиновой стимуляцией пролиферации мезангиальных клеток и склерозированием гло-мерулярного аппарата нефрона.
Таким образом, повышение функциональной активности Т-супрессоров в условиях прогрессирования хронической почечной недостаточности может иметь положительное значение, направленное на попытку замедлить процессы склерозирования и поддержать репара-тивную регенерацию клеток нефрона. Однако одной этой функции лимфоцитов не хватает для замедления темпа прогрессирования почечной недостаточности.
ЗАКЛЮЧЕНИЕ
Таким образом, выявляется определенная закономерность в развитии и прогрессировании хронической почечной недостаточности. Найденные изменения в популяционном составе и функциональной активности лимфоцитов при хронической почечной недостаточности позволяют предположить, что снижение пролифера-тивной активности лимфоцитов связано не только с прямым воздействием БАВ, но и, вероятно, с усилением иммунорегуляторных клеток (Т-супрессоров) на другие популяции лимфоцитов.
Исследование показало, что изменения, найденные в селезенке и периферической крови, носят однонаправленный характер и находят свое отражение в нарушении популяцион-ного состава лимфоцитов.
ЛИТЕРАТУРА
1. Бабаева А.Г., ШуткоА.Н., Ракитянская И.А. идр. Кинетика субпопуляций лимфоидных клеток в селезенке мышей в ранние сроки после односторонней нефроэктомии // Арх. пат,—1993.—Т. 55, № 1,—С. 62—64.
2. Бабаева А.Г. Прошлые, настоящие и будущие проблемы лимфоидной регуляции пролиферации нелимфоидных клеток // Бюл. экспер. биол.—1995.—№ 9,—С. 230—234.
3. Рябов С.И., Ракитянская И.А., Шутко А.Н. Почки и система иммунитета.— Л.: Наука, 1989.—150 с.
4. Рябов С.И., Ракитянская И.А., Шутко А.Н., Шатини-на Н.Н. Концепция морфообразовательной функции лимфоцитов и ее значение для практики // Общая биология. Проблемы адаптации биологических систем к экстренным факторам. Доклады МОИП,—М„ 1991.—С. 62—65.
5. Рябов С.И., Ракитянская И.А., Никитина Н.А. Новое о патогенезе хронического гломерулонефрита // Тер. арх.— 1994,—Т. 66, № 12,—С. 33-36.
6. Horii Y., Muzaguchi A., Iwano М. et al. Involvement of IL-6 in mesangial proliferative glomerulonephritis // J. Immunol.— 1989.—Vol. 143.—P. 3349—3955.
