ФИТОХИМИЧЕСКОЕ ИЗУЧЕНИЕ И РЕСУРСОВЕДЧЕСКАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА БУДРЫ ПЛЮЩЕВИДНОЙ ФЛОРЫ СТАВРОПОЛЬСКОГО КРАЯ
Попова О.И., Тираспольская С.Г., Алфимова Г.В., Меньков С.В.
Пятигорская государственная фармацевтическая академия, кафедра фармакогнозии, кафедра фармацевтической химии, г. Пятигорск
С каждым годом увеличивается число лекарственных препаратов, изготавливаемых из лекарственного растительного сырья. Объектом нашего исследования является будра плющевидная (БП) - Glechoma hederaceae L. (Nepeta glechoma ВепШ.) - многолетнее травянистое растение с лежачим ветвистым укореняющимся стеблем и приподнимающимися ветвями семейства яснотковых (Ьаш1асеае). Трава этого растения в виде отваров и настоев издавна применяется в народной медицине многих стран при заболеваниях легких, гастритах, гепатитах, болезнях горла и других[3].
Целью ресурсоведческой работы было выявление БП в составе растительных сообществ, анализ их постоянства и обилия в различных ассоциациях, что позволило бы дать рекомендации по организации заготовки травы БП. Наиболее продуктивные по обилию распространения и развитию сырьевой массы БП являются ассоциации предгорий и широколиственных лесов: боярышниково-черемуховые, боярышниково-шиповниковые, дубовокизиловые, осиннико-лещиновые. Подлесок и травянистый ярус включают в основном следующие виды растений: вероника лекарственная, земляника лесная, ландыш майский, купена лекарственная, некоторые виды ясменника и подмаренника, клевер луговой, чистотел большой, примула лекарственная, яснотка белая, герань лесная, шалфей луговой, различные виды лютика.
При определении запасов травы БП использовали современные ресурсоведческие методики (А.И. Шретер, И.Л. Крылова, 1986; А.В. Положий, Н.А. Панкратова, Е.Е. Тимошок, 1988). В результате проведенных исследований установлено, что эксплуатационный запас травы БП на обследованной территории Ставрополья составляет
0,12±0,01 т (воздушно-сухого сырья), коэффициент усушки - 0,60. Таким образом, запасы травы БП позволяют использовать ее в производстве фитопрепарата.
Биометрические характеристики образцов БП в различных местообитаниях приведены в таблице 1.
Таблица 1. Биометрические характеристики будры плющевидной в естественных условиях местообитания
При этом отмечено, что условия естественного обитания оказывают заметное влияние на сезонный ритм роста и развитие БП. Наиболее интенсивным ростом отличаются растения, обитающие по днищам и берегам периодически пересыхающих ручьев и водотоков. Условия ограниченного водоснабжения почвы отрицательно
Характеристика местообитания образца Высота растений, см Число цветоносных побегов у особи Число листьев на 1 стебле Длина листа, см Число почек возобновления Масса одного растения, г
- в лесу 27,2±0,79 5,11±0,16 22,0±0,96 3,20±0,08 5,30±0,40 27,32±1,30
- на опушке леса 25,3±0,60 3,82±0,20 18,2±0,30 2,71±0,06 4,61±0,12 24,14±0,42
- на берегу ручьев 30,1±0,52 4,10±0,17 20,5±0,40 3,50±0,16 6,01±0,25 30,81±1,63
- на каменистом склоне 18,1±0,75 2,22±0,05 14,8±0,25 1,82±0,08 7,32±0,18 18,70±0,08
- на днище пересыхающего ручья 32,5±0,38 6,10±0,22 32,4±0,30 3,70±0,18 5,42±0,98 37,11±0,96
влияют на ростовые процессы БП: уменьшаются размеры всех органов, облиственность стебля и количество цветоносных побегов.
Предварительно был проведен товароведческий анализ исследуемого сырья. Установлено, что содержание влаги составляет 10,8% (п = 3), общей золы - 12,4%, золы, нерастворимой в 10% растворе хлористоводородной кислоты - 2,2% [1, 2].
Для изучения химического состава травы БП были приготовлены водные и 70% спирто-водные извлечения. В водных извлечениях определяли углеводы, органические кислоты, аминокислоты и дубильные вещества. Наличие свободных сахаров подтвердили реакцией Бертрана. При нагревании на водяной бане равных объемов извлечения и реактива Фелинга выпадал осадок оранжево-красного цвета, что свидетельствует о наличии свободных сахаров. Хроматографией на бумаге в системе растворителей н-бутиловый спирт - кислота уксусная
- вода (3 : 1 : 1) установили наличие глюкозы, фруктозы и галактозы.
Связанные сахара определяли с реактивом Фелинга после предварительного гидролиза 5% серной кислотой (наблюдали выпадение оранжево-красного осадка). При добавлении к концентрированному водному извлечению из травы БП 96% этилового спирта выпадал осадок, свидетельствующий о наличии полисахаридов. Хроматографическое изучение химического состава полисахаридов после предварительного кислотного гидролиза показало наличие следующих сахаров: глюкозы, рамнозы, ксилозы, галактозы, а также глюкуроновой кислоты.
Материалыг XI международного конгресса «Здоровье и образование в XXI веке» РУДН, Москва, 2010
Содержание органических кислот и аминокислот в траве БП определяли методом ТСХ на пластинках «Силуфол» и <^огЬШ» в системе растворителей спирт этиловый 96% - раствор аммиака 25% (16 : 4,5). Проявители - раствор бромкрезолового зеленого (органические кислоты) и раствор нингидрина (аминокислоты). В результате проведенных исследований было установлено, что трава БП содержит аскорбиновую, янтарную, винную и лимонную кислоты, а состав аминокислот представлен валином, фенилаланином, метионином, лизином и аспарагиновой кислотой.
Наличие дубильных веществ подтверждали химическими реакциями, положительными из которых оказались следующие: с железоаммониевыми квасцами (образуется черно-зеленое окрашивание), с раствором желатина (появляется муть, исчезающая при добавлении избытка реактива), с раствором антипирина (образуется аморфный осадок), что свидетельствует о наличии конденсированных дубильных веществ.
Приготовленное 70% спирто-водное извлечение использовали для обнаружения фенольных соединений. С помощью химических реакций и хроматографии на бумаге в системе растворителей: 15%, 30% кислота уксусная; бензол - этилацетат - кислота уксусная (50 : 50 : 1), свидетелей - 1% растворов кверцетина и рутина, проявителей
- 2% раствора алюминия хлорида и УФ-света (254 нм) были обнаружены 6 веществ, отнесенных к флавоноидным гликозидам (этилацетатная фракция). В гидролизатах последних обнаружены агликоны: кверцетин и кемпферол. Наличие имеющихся у нас стандартных образцов позволило идентифицировать в траве БП кверцетин и рутин. Далее определяли количественное содержание биологически активных соединений травы БП по методикам, описанным для этих веществ в ГФ XI и ГФ XII [1, 2]. Приводим некоторые из них. Количественное определение флавоноидов в спиртовом извлечении проводили методом дифференциальной спектрофотометрии, использующей реакцию взаимодействия флавоноидов с алюминия хлоридом. Аналитическая длина волны - 410 нм. В качестве стандартного образца использовали рутин [1, 2]. Количественное содержание дубильных веществ в водном извлечении определяли методом перманганатометрии с индикатором индигосульфокислотой. Расчет содержания дубильных веществ проводили в пересчете на танин [2]. Полученные результаты приведены в таблице 2.
Таблица 2. Результаты количественного определения биологически активных соединений травы будры плющевидной (п = 6)_________________________________________________________________________________
Название биологически активных соединений Полисахарид ы Кислота аскорбиновая Сумма органических кислот Флавоноидо в в пересчете на рутин Дубильных веществ в пересчете на танин
Результаты определения, % 5,74±0,17 0,1±0,01 2,23±0,11 2,14±0,12 8,75±0,31
Таким образом, определены запасы травы БП в Ставропольском крае. Подтверждено, что масса произрастающей травы достаточна для использования ее в производстве фитопрепарата. Разработаны методики анализа биологически активных веществ травы БП, позволяющие объективно оценивать ее качество.
ЛИТЕРАТУРА
1. Государственная фармакопея СССР. - XI изд. - М., 1987; 1990. - 2 вып.
2. Государственная фармакопея РФ. - 12-е изд. - М.: Издательство «Научный центр экспертизы средств медицинского применения», 2008. - Ч. 1. - 704 с.
3. Носаль М.А., Носаль И.М. Лекарственные растения и способы их применения в народной медицине. - Минск, 1997. - 258 с.
4. Сборник научных тезисов и статей «Здоровье и образование в XXI веке». 2009. Т. 11. № 4.
5. Сборник научных тезисов и статей «Здоровье и образование в XXI веке». 2008. Т. 10. № 4.
6. Сборник научных тезисов и статей «Здоровье и образование в XXI веке». 2007. Т. 9. № 4.
7. Сборник научных тезисов и статей «Здоровье и образование в XXI веке». 2006. Т. 8. № 4.
8. Сборник научных тезисов и статей «Здоровье и образование в XXI веке». 2005. Т. 7. № 4.
9. Сборник научных тезисов и статей «Здоровье и образование в XXI веке». 2004. Т. 6. № 4.
10. Сборник научных тезисов и статей «Здоровье и образование в XXI веке». 2003. Т. 5. № 4.
11. Сборник научных тезисов и статей «Здоровье и образование в XXI веке». 2002. Т. 4. № 4.
12. Сборник научных тезисов и статей «Здоровье и образование в XXI веке». 2001. Т. 3. № 4.
13. Сборник научных тезисов и статей «Здоровье и образование в XXI веке». 1999. Т. 2. № 4.
14. Электронный сборник научных трудов «Здоровье и образование в XXI веке». 2009. Т. 11. № 12.
15. Электронный сборник научных трудов «Здоровье и образование в XXI веке». 2008. Т. 10. № 12.
16. Электронный сборник научных трудов «Здоровье и образование в XXI веке». 2007. Т. 9. № 12.
17. Электронный сборник научных трудов «Здоровье и образование в XXI веке». 2006. Т. 8. № 12.
18. Электронный сборник научных трудов «Здоровье и образование в XXI веке». 2005. Т. 7. № 12.
19. Электронный сборник научных трудов «Здоровье и образование в XXI веке». 2004. Т. 6. № 12.
20. Электронный сборник научных трудов «Здоровье и образование в XXI веке». 2003. Т. 5. № 12.
21. Электронный сборник научных трудов «Здоровье и образование в XXI веке». 2002. Т. 4. № 12.
Материалыг XI международного конгресса «Здоровье и образование в XXI веке» РУДН, Москва, 2010