CC BY
24
fit disorders amounted to 12 (27.3%), marginal staining - 11 (25.0%). Patients of I and III groups presented with secondary caries: 2 cases (4.3%) and 1 (2.3%), respectively.
Conclusions. The obtained results make it possible to determine that the number of complications according to the certain clinical criteria was systematically and significantly higher in patients of the III group, where reinforced fluid nanophotocomposite with high-volume technique was used for caries-affected teeth restoration. The minimum number of disorders was determined in IV group of patients, where the teeth restoration was performed using modern approaches with one-stage polymerization of adhesive system and the first layer of the nanophotocomposite material.
Key words: teeth, restoration, nanophotocomposite, fluid photocomposite, clinical assessment.
Рецензент - проф. Н'дзельський М. Я.
Стаття наджшла 18.03.2018 року
DOI 10.29254/2077-4214-2018-1-2-143-373-378
УДК 616.314.17-008.1-06:616.441-008.61/64-06:616.155.34]-092.9
Щерба В. В., Корда М. М.
ФАГОЦИТАРНА I МЕТАБОЛ1ЧНА АКТИВН1СТЬ НЕЙТРОФ1Л1В КРОВ1 У ЩУР1В
З ПАРОДОНТИТОМ НА ФОН1 Г1ПЕР- ТА Г1ПОТИРЕОЗУ ДВНЗ «Терношльський державний медичний ушверситет iMeHi I. Я. Горбачевского МОЗ УкраУни» (м. Терношль)
Зв'язок публшацп з плановими науково-дослщ-ними роботами. Дослщження виконано в рамках комплексно! науковоТ роботи ДВНЗ «Терношльський державний медичний ушверситет 1меш 1.Я. Горбачевского МОЗ УкраТни» «Бюх1м1чш мехашзми по-рушень метабол1зму за умов надходження до ор-гашзму токсиканлв р1зного генезу», № державно! реестрацп 011би003353.
Вступ. В останн1 роки захворювання пародон-ту набули характеру глобально! медико-соц1ально! проблеми внаслщок Тх широкого поширення I не-сприятливого впливу на р1вень загального здоров'я населення. Запальш захворювання пародонту, на сьогодшшнш день, розглядають не лише як локаль-не запалення тканин, що оточують зуб, викликане м1крофлорою зубно! бляшки, але як I реакцш орга-н1зму на бактер1альну 1нфекц1ю [1].
Питання гормонально! регуляци запальних ре-акц1й в пародонт1 I особливост1 !х розвитку на тл1 дисфункцп щитовидно! залози залишаються недо-статньо вивченими. У запальних реакц1ях, що супро-воджують пошкодження тканин будь-якого Генезу, особливу роль в1д1грають кл1тини-ефектори запалення (пол1морфноядерн1 лейкоцити: нейтроф1ли та макрофаги), в1д функцюнально! активност1 яких за-лежить переб1г запального процесу [2].
За даними Бухарово! М.А. фагоцитам належить важливе значення у захист тканин I п1дтримц1 про-тим1кробно! резистентност1. Будучи неспециф1чними факторами захисту, вони не лише захоплюють I пе-ретравлюють м1кроорган1зми, а й мобшзують спе-циф1чн1 механ1зми резистентност макроорган1зму. Тому важливим в розумшш патогенезу пародонтиту е визначення функцюнального стану фагоцит1в, зо-крема нейтроф1л1в [3].
Метою нашого дослiдження було дослщити фа-гоцитарну та метабол1чну активн1сть нейтроф1л1в
KpoBi у щурiв з пародонтитом без супутньо! патологи i на фонi rinep- та ппотиреозу.
Об'ект i методи дослщження. Дослiди проведено на 48 безпородних статeвозpiлих бiлих щурах-самцях масою 180-200 г, яких утримували на стандартному рацюш вiваpiю.
Пiддослiдних тварин було подiлeно на так групи: I - контрольш тварини, яким вводили внутршньош-лунково 1% розчин крохмалю (n=12); II - тварини з моделлю пародонтиту. Щурам ще! групи протягом 2-х тижшв через день вводили в тканини ясен по 40 мтрол^в (1 мг/мл) лтополкахариду (ЛПС) E. Coli («Sigma-Aldrich», США») та внутршньошлунково 1% розчин крохмалю (n=12) [4]; III - щури з пародонтитом на фош гiпepтиpeозу. Для моделювання екс-периментально! пперфункцп щитоподiбно! залози тваринам щоденно внутpiшньошлунково вводили L-тироксин на 1% pозчинi крохмалю iз розрахунку 10 мкг/добу на 100 г маси протягом 21 доби (n=12) [5]. Починаючи з восьмо! доби експерименту щурам вводили в тканини ясен ЛПС протягом 2-х тижшв; IV - щури з пародонтитом на фош ппотиреозу. З метою моделювання експериментально! ппофункцп щито-подiбно! залози [5] тваринам щоденно внутршньош-лунково вводили мерказолш на 1% розчиш крохмалю iз розрахунку 1 мг/добу на 100 г маси протягом 21 доби (n=12). Починаючи з восьмо! доби експерименту щурам вводили в тканини ясен ЛПС протягом 2-х тижшв. Евтаназ^ щуpiв здшснювали шляхом крово-пускання за умов тiопeнтал-натpiевого наркозу на 22-у добу вщ початку дослщу.
Всi машпуляцп з експериментальними тварина-ми проводили iз дотриманням правил вiдповiдно до «бвропейсько! конвенцп про захист хребетних тварин, що використовуються для дослщних та iнших наукових цтей» [6].
Популяцш нейтрофiлiв кровi отримували за допомогою центрифугування на подвшному градieнтi щтьносл 1,077 i 1,093 фтолу-верографшу [7].
В якостi тест-системи для вивчення фагоцитарно'1 активностi нейтрофЫв використовували стандартнi частинки латексу для фагоцитозу (10% полiстирольна суспензiя) дiаметром 1,5 мкм («Диаэм», Росiя).
Клп"инну суспензiю нейтрофiлiв вносили у про-бiрку в кiлькостi 0,1 мл та шкубували при темпера-турi 37°С протягом 60 хв з 0,1 мл латексноТ суспензи. Поим готували на предметних скельцях мазки, ви-сушували, фiксували i фарбували 1% розчином мети-леновоТ синьки. У кожному мазку шдраховували 100 нейтрофшв [8].
Як показники фагоцитозу визначали: фагоцитар-ну активнiсть (ФА) за кшьшстю фагоцитуючих клiтин зi 100 пiдрахованих (%); фагоцитарний шдекс (Ф1)
- за кiлькiстю фагоцитованих частинок латексу, якi захопленi одшею клiтиною; фагоцитарне число (ФЧ)
- кшьмсть фагоцитованих частинок латексу на 100 пщрахованих клiтин.
Вираховували ФЧ та Ф1 за формулами: Ф1=к-сть фагоцитованих частинок латексу / ФА; ФЧ = к-сть фагоцитованих частинок латексу / 100.
Кисеньзалежну бактерицидну актившсть нейтро-ф^в кровi вивчали за допомогою тесту з штросишм тетразолieм (НСТ-тест) [8,9]. Розрiзняють два варiан-ти НСТ-тесту: спонтанний та активований. При постанову спонтанного НСТ-тесту фагоцити культивуються в присутност нiтросинього тетразолiю без попере-дньоТ активацп клiтин, при проведены шдукованого НСТ-тесту до середовища культивування додають активатор фагоцитарноТ реакци.
Показники фагоцитарно! активностi нейтрофiлiв KpoBi у щурiв з пародонтитом без супутньо! патологи i на фон rinep- та гiпотиреозу
(M±m, n=12)
Показник Група тварин
Контроль Пародонтит Пародонтит на тлi гiпеpтиpеoзу Пародонтит на тлi гiпoтиpеoзу
Суспензiя нейтрофiлiв KpoBi
Фагоцитарна активнiсть, % 67,75±1,47 84,92±1,97 Pj<0,001 77,0±1,67 р1<0,002 Р2<0,01 64,58±1,33 р1>0,05 p3<0,001 p4<0,001
Фагоцитарний шдекс 6,93±0,17 4,87±0,18 р1<0,001 6,00±0,13 р1<0,001 р1<0,001 3,81±0,19 р1<0,001 Р1<0,002 p4<0,001
Фагоцитарне число 4,68±0,09 4,12±0,15 p1<0,01 4,61±0,11 р1>0,05 Р2<0,05 2,45±0,13 р1<0,001 P1<0,001 p34<0,001
Приметки:
1. р1 - Bipor^Hicib вщмЫностей мiж контрольною групою i експериментальними трупами;
2. р2 - вiрогiднiсть вщмшностей мiж групою з пародонтитом i групою з пародонтитом на mi ппертиреозу;
3. р3 - вiрогiднiсть вiдмiнностей мiж групою з пародонтитом i групою з пародонтитом на mi ппотиреозу;
4. р4 - вiрогiднiсть вiдмiнностей мiж групою з пародонтитом на mi ппертиреозу i групою з пародонтитом на mi ппотиреозу.
При проведены спонтанного НСТ-тесту (СВ) кли тинну суспензш нейтрофшв вносили у пробiрку в кiлькостi 0,1 мл, додавали 0,1 мл 0,1% водного роз-чину штросинього тетразолiю та шкубували при тем-пературi 37°С протягом 40 хв з 0,1 мл фiзiологiчного розчину.
При проведены активованого НСТ-тесту (АВ) клп"инну суспензш нейтрофЫв вносили у пробiр-ку в ктькосл 0,1 мл, додавали 0,1 мл 0,1% водного розчину штросинього тетразолш та шкубували при температурi 37°С протягом 40 хв з 0,1 мл латексноТ суспензи.
Реакцш оцiнювали шляхом пiдрахунку 100 ней-трофiлiв на наявнiсть у цитоплазмi гранул i зерен ди-формазану. В цитоплазмi клiтин, позитивно реагую-чих з НСТ, зафiксовано випадшня гранул формазану фiолетово-синього кольору. В цитоплазмi негативно реагуючих з НСТ клп"ин гранули формазану були вщ-сутнi. Виводили вiдсоток диформазан-позитивних клп"ин (гранули барвника займають не менше % час-тини цитоплазми) у спонтанному тест та в активова-ному.
Для характеристики резервних можливостей оксиген-залежного метаболiзму визначали показник резерву (ПР) i коефiцieнт метаболiчноТ активаци (К). Вираховували ПР та К за формулами: ПР = АВ / СВ; К = АВ - СВ / АВ, де АВ - % диформазан-позитивних клп"ин в активованому тесп; СВ - % диформазан-по-зитивних клп"ин у спонтанному тесп.
Статистичну обробку цифрових даних здшсню-вали за допомогою програмного забезпечення Excel (Microsoft, США) та STATISTICA 6.0 (Statsoft, США) з ви-користанням непараметричних методiв оцшки одер-жаних даних. Для вах показнишв розраховували зна-Таблиця 1. чення середньоТ арифметичноТ вибiрки (M), Тт дисперсп i помил-ки середньоТ (m). Достовiрнiсть рiзницi значень мiж незалеж-ними кiлькiсними величинами визначали за допомогою крите-р№ Манна-УТтш. Змiни вважали статистично достовiрними при р<0,05.
Результати дослщжень та Тх обговорення. Результати наших дослiджень показали пщвищен-ня фагоцитарноТ активност ней-трофiлiв кровi у тварин iз змо-дельованим пародонтитом на 25,3% (p<0,001) вiдносно контрольно!' групи щурiв (табл. 1). При пщрахунку фагоцитарного iндекса - показника, що харак-теризуе поглинаючу здатшсть нейтрофiлiв, встановлено його зменшення у 1,4 раза (p<0,001). При цьому, фагоцитарне число - ктьшсть фагоцитованих частинок латексу на 100 шдрахо-ваних нейтрофЫв також досто-
вiрно зменшувалося на 12,0% вщносно контрольно! групи щурiв.
У щурiв з пародонтитом на тлi ппертиреозу фагоцитарна активнiсть нейтрофiлiв кровi зросла на 13,6% (р<0,002) вщ-носно контролю, проте була на 9,3% (р<0,01) нижчою вщнос-но тварин iз змодельованим пародонтитом без супутньо! патологи. При цьому, фагоци-тарний шдекс вiдносно контролю був нижчим на 13,4% (р<0,001), але перевищував даний показник тварин iз змо-дельованим пародонтитом без супутньо! патологи на 23,2% (р<0,001). Подiбна тенденцiя спостерiгалась i вiдносно фагоцитарного числа. Змши ФЧ вiд-носно контролю були недосто-вiрними, але вщносно тварин iз змодельованим пародонтитом без супутньо! патологи - на 11,9% вищими (р<0,05).
У щурiв з пародонтитом на тлi ппотиреозу фагоцитарна активнiсть нейтрофiлiв кровi вщносно контролю достовiрно не змiнилася, проте була на 23,9% (р<0,001) нижчою вщносно тварин iз змодельованим пародонтитом без супутньо! патологи та на 16,1% (р<0,001) нижчою у порiвняннi iз щурами з пародонтитом на тл гiпертиреозу. При цьому, фагоцитарний шдекс вщ-носно контролю був достодрно нижчим у 1,8 раза, вщносно тварин iз змодельованим пародонтитом без супутньо! патологи - у 1,3 раза, вщносно щурiв з пародонтитом на тл ппертиреозу - у 1,6 раза. Поди бна тенденщя спостерiгалась i вщносно змiн фагоцитарного числа.
Бактерицидну д^ нейтрофiлiв визначали за до-помогою тесту вiдновлення нiтросинього тетразол^, який базуеться на здатностi вщновлення поглинено-го фагоцитом розчинного барвника нпросинього тетразолiю в нерозчинний диформазан, який роз-подiляеться в цитоплазмi або на поверхнi фагоцитiв у виглядi гранул, зафарбованих у темно-синш колiр, пiд впливом супероксиданiону, що утворюеться в НДДФ-Н-оксидазнiй реакци. Цей тест вщображае сту-пiнь активаци оксиген-залежного механiзму бактерицидно! активност фагоцитуючих клiтин [8,9].
Кiлькiсть диформазан-позитивних кл^ин у спонтанному НСТ-тесп у тварин iз змодельованим пародонтитом збшьшилася на 32,8% (р<0,001), а у акти-вованому - на 40,1% (р<0,001) вiдносно контрольно! групи щурiв (табл. 2).
При цьому показник резерву доа^рно не зми нився. При пiдрaхунку коефiцiента метaболiчно! активаци встановлено його доа^рне зростання на 41,0%.
Таблиця 2.
Показники НСТ-тесту нейтрофiлiв KpoBi у щурiв з пародонтитом без супутньо! патологи i на фонi rinep- та гiпотиреозу (M± m, n=12)
Показник Група тварин
Контроль Пародонтит Пародонтит на ™i гiпеpтиpеoзу Пародонтит на ™i гiпoтиpеoзу
Суспензiя нейтрофшв KpoBi
К1льк1сть дифор-мазан-позитивних кл1тин в активованому тест1, % 29,08±1,38 40,75±1,49 p3<0,001 44,75±1,57 p3<0,001 Р2>0,05 30,58±0,96 p3>0,05 p3<0,001 p4<0,001
К1льк1сть дифор-мазан-позитивних кл1тин у спонтанному тест1, % 15,50±0,29 20,58±0,94 p3<0,001 26,50±0,76 p3<0,001 p2<0,001 19,17±0,50 p3<0,001 Р4>0,05 p4<0,001
Показник резерву 1,88±0,09 2,02±0,11 p3>0,05 1,70±0,07 p3>0,05 p2<0,05 1,60±0,05 p3<0,02 Р3<0,01 p >0,05
Коеф1ц1ент мета-бол1чно! активаци 28,54±1,41 40,24± 1,50 p3<0,001 44,15±1,58 p3<0,001 Р2>0,05 29,95±0,97 p3>0,05 p4<0,001 p <0.001
Приметки:
1. р1 - в1ропдн1сть в1дм1нностей м1ж контрольною групою I експериментальними групами;
2. р2 -в1ропдн1сть в1дм1нностей м1ж групою з пародонтитом I групою з пародонтитом на тл1 ппертиреозу;
3. р3 - в1ропдн1сть в1дм1нностей м1ж групою з пародонтитом I групою з пародонтитом на тл1 ппотиреозу;
4. р4 - в1ропдн1сть в1дм1нностей м1ж групою з пародонтитом на тл1 ппертиреозу I групою з пародонтитом на тл1 ппотиреозу.
6.В. Мокренко та П.Д. Шабанов моделювали за-пально-дегенеративне ураження м'яких тканин па-родонта у щурiв. На тлi запалення доа^рно збть-шувалося значення фагоцитарного числа на 26% i показника завершеност фагоцитозу - на 22%, при зниженш на 31% ктькосп нейтрофiлiв, що беруть участь у фагоцитозк Поряд з цим, показники спонтанного НСТ-тесту пщвищувалися на 63%, а активо-ваного - на 35% [10].
Результати дослщження показнишв спонтанного НСТ-тесту Т.М. Ахкамовою та ствавторами показали, що у вах хворих з хронiчним генерaлiзовaним пародонтитом вони були дост^рно вищими порiвняно зi здоровими особами, хоча i знижувалися в мiру збть-шення ступеня тяжкостi захворювання [11].
У щурiв з пародонтитом на тл гiпертиреозу кть-мсть диформазан-позитивних клiтин у активованому НСТ-тесп зросла на 53,9% (р<0,001) вщносно контролю, проте цi змши були статистично недоа^рни-ми вщносно тварин iз змодельованим пародонтитом без супутньо! патологи. У спонтанному НСТ-тесп даний показник зрк бтьш виражено - на 71,0% (р<0,001) вiдносно контролю та на 28,8% (р<0,001) вiдносно тварин iз змодельованим пародонтитом без супутньо! патологи. При цьому коефщент мета-болiчно! активаци доа^рно не змiнився вiдносно тварин iз змодельованим пародонтитом без супутньо! патологи, а показник резерву виявився на 15,8% доа^рно меншим.
У щурiв з пародонтитом на тл гiпотиреозу кть-кiсть диформазан-позитивних клп"ин у активованому НСТ-тестi вщносно контролю достовiрно не змшила-
ся, проте була на 24,9% (p<0,001) нижчою вщносно тварин i3 змодельованим пародонтитом без супутньо!' патологи та на 31,7% (p<0,001) нижчою у порiв-няннi i3 щурами з пародонтитом на тл гiпертиреозу. У спонтанному НСТ-тестi даний показник зрк на 23,7% (p<0,001) вiдносно контролю, достовiрно не змшив-ся вiдносно тварин i3 змодельованим пародонтитом без супутньо!' патологи та був на 27,7% (p<0,001) ниж-чим у порiвняннi iз щурами з пародонтитом на тл ппертиреозу. При цьому показник резерву виявився на 14,9% дост^рно меншим вщносно контролю, на 20,8% меншим вщносно тварин iз змодельованим пародонтитом без супутньо!' патологи та достодрно не змшився у порiвняннi iз щурами з пародонтитом на тл ппертиреозу. Коефщент метаболiчно!' актива-цй' у щурiв з пародонтитом на тл гiпотиреозу був на 25,6% (p<0,001) меншим вiдносно тварин iз змодельованим пародонтитом без супутньо!' патологи та на 32,2% (p<0,001) меншим у порiвняннi iз щурами з пародонтитом на тл гiпертиреозу.
У розвитку пародонтиту, як i будь-якоТ шшоТ за-пальноТ патологи, важлива роль належить клiтинним механiзмам захисту, перш за все фагоцитуючим кли тинам — нейтрофiлам i макрофагам. Змши функци ональноТ та метаболiчно!' активностi нейтрофiлiв кровi, отриманi у нашому дослiдженнi, узгоджують-ся iз даними науковцiв, якi спостерiгали зниження функцюнальних резервiв фагоцитуючих клiтин як у тканинах пародонту, так i у кровi за умови ппо- та ппертиреозу. Так, Н.Н. Маянська та ствавтори [2] проводили визначення функцюнальноТ активност нейтрофiлiв кровi у штактних щурiв i у щурiв з екс-периментальною дисфункцieю щитоподiбно!' залози. Результати спонтанного тесту з штросишм тетразоли ем показали, що кiлькiсть диформазан-позитивних клiтин у щурiв з гiпотиреозом було приблизно такою ж, як i у штактних щурiв, проте функцюнальш резер-ви (за шдексом стимуляцй) у них були нижчк Таке ж зниження рiвня функцiональних резервiв, але на тл пiдвищення нестимульованоТ бiоцидностi нейтрофи
Дослiдження оксиген-залежноТ бiоцидностi ней-троф^в периферичноТ кровi у щурiв iз запаленням, що перебiгаe на тл гiпотиреозу, показало зниження iнтенсивностi рестраторного вибуху в полiморфноя-дерних лейкоцитах. У вс термiни експерименту зна-чення як спонтанного, так i стимульованого НСТ-тесту були нижчими у порiвняннi з тваринами, у яких за-пальний процес протiкав на тл еутиреозу [12].
Одночасне зниження показнишв спонтанного й активованого НСТ-теслв вказуе на ураження бакте-рицидних систем фагоципв. Вiдомо, що руйнащя по-глинених мiкробiв i вiрусiв фагоцитами вiдбуваeться iз залученням оксиген-залежних механiзмiв, в ре-зультатi ди на поглинений об'ект супероксид-анiонiв, пероксиду водню, синглетного кисню, гiдроксильних радикалiв, утворення яких вiдбуваeться в результат активаци метаболiчних процесiв у клп"иш. Зниження бактерицидно!' активностi фагоцитiв здатне приводи-ти до виживання бактерш, Тх розмноженню i хрошза-ци запального процесу [13].
Висновки
1. Важливу роль у патогенезi запалення паро-донта вiдiграe дисфункцiя фагоцитозу — пщвищення фагоцитарноТ активностi нейтроф^в кровi з одно-часним зменшенням Тх поглинаючоТ здатностi. Пщ-вищення показникiв спонтанного та активованого НСТ-тесту за умови експериментального пародонтиту вказують на активацш оксиген-залежних мехашз-мiв кiлiнгу фагоцитiв та Тх бактерицидну властивiсть.
2. Дисбаланс тиреоТдних гормонiв за умови експериментального пародонтиту виражено впливае на функцюнальну та метаболiчну активнiсть фагоцитiв кров^ особливо при гiпотиреозi, що вказуе на висна-ження метаболiчних резервiв цих клiтин та порушен-ня процесу фагоцитозу.
Перспективи подальших дослщжень. У перспек-тивi плануеться продовжити дослiдження функцю-нального стану фагоциив за умови експериментального пародонтиту на тл дисфункцй щитоподiбноТ залози.
л1в, було встановлено у тварин з ппертиреозом.
Лiтepатуpа
1. Nikolaeva AV, Makarenko OA. Izuchenie stepeni destruktivnikh izmenenii v tkaniakh parodonta pri modelirovanii parodontita u belykh krys-samok razlichnykh vozrastnykh periodov. Klinichna ta eksperymentalna patolohiia. 2016;15(58):74-8. [in Russian].
2. Maianskaia NN, Rymar SS, Maianskaia SD. Osobennosti techeniia vospalitelnogo protcessa u krys s eksperimentalnym gipo- i gipertireozom. Kazanskii meditcinskii zhurnal. 2013;94(5):71-4. [in Russian].
3. Bukharova MA, Korobeinikova TS. Rol fagotcitov v patogeneze parodontita. Materialy XV mezhdunarodnoi studencheskoi nauchno-prakticheskoi konferentcii. Cheboksary: TSNS «Interaktiv plyus»; 2017. s. 39-42. [in Russian].
4. Moyseeva EH. Metabolicheskiy gomeostaz i imunnaya reaktivnost organizma v dinamike vospaleniya v tkanyakh parodonta (eksperimental'noye issledovaniye) [avtoreferat]. Moskva: 2008. 45 s. [in Russian].
5. Ratushnenko VO. Funktsionalna rol tiol-dysulfidnoi systemy pry eksperymentalnomu hipo- i hipertyreozi. Odeskyi medychnyi zhurnal. 2010;2(118):17-20. [in Ukrainian].
6. European convention for the protection of vertebrate animals used for experimental and other scientific purposes: Council of Europe. Strasbourg: 1986; 123. 52 p.
7. Neyko YeM, Herych PR, Ostrovskyi MM, Tomashchuk LM. Kysenzalezhni funktsii fahotsytiv u khvorykh na khronichne obstruktyvne zakh-voriuvannia lehen. Zdobutky klinichnoi i eksperymentalnoi medytsyny. 2010;1:100-4. [in Ukrainian].
8. Gordienko GI, Borodina TM, Dudina TA, Samsygina GA. Issledovanie poglotitelnoi i metabolicheskoi aktivnosti neitrofilov perifericheskoi krovi u detei rannego vozrasta. Pediatriia. 2003;5:1-11. [in Russian].
9. Gromov SA, Lipatova LV. Diagnostika kliniko-neiroimmunologicheskikh narushenii u bolnykh epilepsiei s sindromom entcefalopatii, ikh im-munokorrektciia i lechenie: metodicheskie rekomendatcii. Sankt-Peterburg: 2010. 27 s. [in Russian].
10. Mokrenko EV, Shabanov PD. Lechenie vospalitelno-degenerativnykh porazhenii miagkikh tkanei parodonta s ispolzovaniem immunomodu-liatorov. Rossiiskii mediko-biologicheskii vestnik imeni akademika I.P. Pavlova. 2015;4:21-9. [in Russian].
11. Akhkamova TM, Bulgakova AI, Medvedev YuA, Valeev IV. Sostoianie mestnogo immuniteta rotovoi polosti v usloviiakh kompleksnoi terapii khronicheskogo generalizovannogo parodontita. Bashkirskii meditcinskii vestnik. 2007;2:83-6. [in Russian].
12. Vokhmintceva LV, Rymar SS. Kislorodzavisimaia biotcidnost neitrofilov u krys s vospaleniem v parodonte, protekaiushchim na fone gipotire-oza. Vestnik VolGMU. 2009;3(31):63-6. [in Russian].
13. Saveleva NN. Fagotcitarnaia aktivnost neitrofilov krovi u patcientov s khronicheskim generalizovannym parodontitom I-II stepeni tiazhesti na fone parazitozov. Vestnik VGMU. 2016;15(4):80-7. [in Russian].
ФАГОЦИТАРНА I МЕТАБОЛ1ЧНА АКТИВН1СТЬ НЕЙТРОФ1Л1В КРОВ1 У ЩУР1В З ПАРОДОНТИТОМ НА ФОН1 Г1ПЕР- ТА Г1ПОТИРЕОЗУ Щерба В. В., Корда М. М.
Резюме. Метою нашого дослщження було дослiдити фагоцитарну та мeтаболiчну активнiсть нейтрофiлiв KpoBi у щурiв з пародонтитом без супутньоУ патологи i на фонi rinep- та ппотиреозу.
Дослiджeння проведено на 48 безпородних статевозрших бiлих щурах-самцях, яких було подтено на такi групи: I - контрольш тварини; II - тварини з моделлю пародонтиту; Ill - щури з пародонтитом на фош ппер-тиреозу; IV - щури з пародонтитом на фош ппотиреозу. Визначали кисеньзалежну бактерицидну актившсть нейтроф^в кpовi та показники фагоцитозу.
Встановлено пiдвищeння фагоцитарно!' активност нeйтpофiлiв кpовi та зменшення ïx поглинаючоУ здат-ностi у тварин iз змодельованим пародонтитом вiдносно контрольно! групи на 25,3% (p<0,001) та 1,4 раза (p<0,001) вiдповiдно. Ктьшсть диформазан-позитивних клiтин у спонтанному НСТ-тест у тварин iз змодельованим пародонтитом дост^рно збiльшилася на 32,8%, а у активованому - на 40,1% вщносно контрольно! групи. При шдрахунку коeфiцieнта мeтаболiчноï активаци встановлено його дост^рне зростання на 41,0%.
У щуpiв з пародонтитом на тл гiпотиpeозу кiлькiсть диформазан-позитивних кл^ин у активованому НСТ-тeстi вщносно контролю достовipно не змiнилася, проте була на 24,9% нижчою вщносно тварин iз змодельованим пародонтитом без супутньоУ патологи та на 31,7% нижчою у поpiвняннi iз щурами з пародонтитом на тл гiпepтиpeозу. При цьому показник резерву виявився на 14,9% доа^рно меншим вiдносно контролю, на 20,8% меншим вщносно тварин iз змодельованим пародонтитом без супутньоУ патологГ! та доа^рно не змшився у порГвнянш ¡з щурами з пародонтитом на тл гiпepтиpeозу. Коeфiцieнт мeтаболiчноï активаци у щур!в з пародонтитом на тл гiпотиpeозу був на 25,6% (p<0,001) меншим вщносно тварин ¡з змодельованим пародонтитом без супутньоУ патологи та на 32,2% (p<0,001) меншим у пор!внянш ¡з щурами з пародонтитом на тл гiпepтиpeозу.
Ключовi слова: пародонтит, ппертиреоз, гiпотиpeоз, нeйтpофiли.
ФАГОЦИТАРНАЯ И МЕТАБОЛИЧЕСКАЯ АКТИВНОСТЬ НЕЙТРОФИЛОВ КРОВИ У КРЫС С ПАРОДОНТИТОМ НА ФОНЕ ГИПЕР- И ГИПОТИРЕОЗА Щерба В. В., Корда М. М.
Резюме. Целью нашего исследования было исследовать фагоцитарную и метаболическую активность нейтрофилов крови у крыс с пародонтитом без сопутствующей патологии и на фоне гипер- и гипотиреоза.
Исследование проведено на 48 беспородных половозрелых белых крысах-самцах, которые были разделены на следующие группы: I - контрольные животные; II - животные с моделью пародонтита; III -крысы с пародонтитом на фоне гипертиреоза; IV - крысы с пародонтитом на фоне гипотиреоза. Определяли кислородзависимую бактерицидную активность нейтрофилов крови и показатели фагоцитоза.
Установлено повышение фагоцитарной активности нейтрофилов крови и уменьшение их поглощающей способности у животных с смоделированным пародонтитом относительно контрольной группы на 25,3% (p<0,001) и 1,4 раза (p<0,001) соответственно. Количество диформазан-положительных клеток в спонтанном НСТ-тесте у животных с смоделированным пародонтитом достоверно увеличилась на 32,8%, а в активированном - на 40,1% относительно контрольной группы. При подсчете коэффициента метаболической активации установлено его достоверный рост на 41,0%.
У крыс с пародонтитом на фоне гипотиреоза количество диформазан-положительных клеток в активированном НСТ-тесте относительно контроля достоверно не изменилось, однако было на 24,9% ниже относительно животных с смоделированным пародонтитом без сопутствующей патологии и на 31,7% ниже по сравнению с крысами с пародонтитом на фоне гипертиреоза. При этом показатель резерва оказался на 14,9% достоверно ниже относительно контроля, на 20,8% меньше относительно животных с смоделированным пародонтитом без сопутствующей патологии и достоверно не изменился по сравнению с крысами с пародонтитом на фоне гипертиреоза. Коэффициент метаболической активации у крыс с пародонтитом на фоне гипотиреоза был на 25,6% (p<0,001) меньше относительно животных с смоделированным пародонтитом без сопутствующей патологии и на 32,2% (p<0,001) меньше по сравнению с крысами с пародонтитом на фоне гипертиреоза.
Ключевые слова: пародонтит, гипертиреоз, гипотиреоз, нейтрофилы.
PHAGOCYTIC AND METABOLIC ACTIVITY OF BLOOD NEUROFILS IN RATS WITH PERIODONTITIS ON THE BACKGROUND OF HYPER- AND HYPOTHYROIDISM Shcherba V. V., Korda M. M.
Abstract. In recent years, periodontal disease has become of the global medical and social problem due to their widespread and adverse effects on the overall health of the population. Inflammatory periodontal disease are considered not only as a local inflammation of the tissues surrounding the tooth, caused by the microflora of the plaque, but also as the body's response to bacterial infection.
The aim of our study was to investigate the phagocytic and metabolic activity of blood neutrophils in rats with periodontitis without concomitant pathology and combined with hyperthyroidism and hypothyroidism.
The study was conducted on 48 white male rats, which were divided into the following groups: I - control animals; II - animals with the model of periodontitis; III - rats with periodontitis and hyperthyroidism; IV - rats with periodontitis and hypothyroidism. As indices of phagocytosis, phagocytic activity, phagocytic index and phagocytic number were determined. Oxygen dependent bactericidal activity of blood neutrophils was studied using nitrosin tetrazolium test (NST-test).
The increase of phagocytic activity of blood neutrophils (by 25.3%; p<0.001) and decrease by 1.4 times (p<0.001) of their absorption capacity in animals with simulated periodontitis was found. The number of diphorosa-positive cells in the spontaneous NST-test in animals with simulated periodontitis significantly increased by 32.8% and in the activated group by 40.1% relative to the control group. When calculating the metabolic activation factor, its reliable increase was set by 41.0%.
In rats with periodontitis, against the hypothyroidism, the phagocytic activity of blood neutrophils relative to control has not significantly changed, but it was by 23.9% (p<0.001) lower relative to animals with simulated periodontitis without concomitant pathology and by 16.1% (p<0.001) lower in comparison with rats with periodontitis and hyperthyroidism. The number of dyroxant-positive cells in the activated NST-test in this group of animals did not significantly change with respect to control, but was by 24.9% lower for animals with simulated periodontitis without concomitant pathology and by 31.7% lower compared to rats with periodontitis and hyperthyroidism. At the same time, the reserve indicator was by 14.9% significantly lower in relation to control, and by 20.8% less in relation to animals with simulated periodontitis without concomitant pathology and did not significantly change compared with rats with periodontitis and hyperthyroidism. The metabolic activation coefficient in rats with periodontitis and hypothyroidism was by 25.6% (p<0.001) lower in animals with simulated periodontitis without concomitant pathology and by 32.2% (p<0.001) less in comparison with rats with periodontitis and hyperthyroidism.
Thus, inflammation, subject to experimental periodontitis, runs on the background of altered phagocytosis, whose dysfunction is accompanied by an increase in the phagocytic activity of neutrophils and a simultaneous decrease in their absorbing capacity. The increase in the parameters of the spontaneous and activated NST-test under the condition of the experimental periodontitis indicates activation of oxygens-dependent mechanisms of phagocyte killing and their bactericidal property.
The imbalance of thyroid hormones in the condition of experimental periodontitis significantly affects the functional and metabolic activity of phagocytes, especially in hypothyroidism, which indicates the depletion of metabolic reserves of these cells and the violation of the process of phagocytosis.
Key words: periodontitis, hyperthyroidism, hypothyroidism, neutrophils.
Рецензент - проф. Ткаченко I. М.
Стаття надшшла 25.02.2018 року
