CC BY
108
Ветеринария
ЭПИЗООТОЛОГИЧЕСКИЕ И КЛИНИКОПАТОМОРФОЛОГИЧЕСКИЕ ОСОБЕННОСТИ ИНФЕКЦИЙ МОЧЕВЫВОДЯЩИХ ПУТЕЙ БАКТЕРИАЛЬНОЙ ЭТИОЛОГИИ У СВИНЕЙ
В.И. ПЛЕШАКОВА (фото),
доктор ветеринарных наук Л.И. ДРОЗДОВА (фото), доктор ветеринарных наук Т.И. ЛОРЕНГЕЛЬ, аспирант Е.В. КНЯЗЕВА,
ассистент, Уральская ГСХА, г. Екатеринбург
Ключевые слова: патология мочевыводящих путей свиней, травматические повреждения мочеполовых органов, морфологические и гистохимические исследования.
Антропогенное влияние на эволю-ционно сложившиеся биоценозы приводит не только к изменению эколого-биоценотических связей, но и оказывает влияние на нозологический профиль болезней животных. Так, давно известные инфекции либо исчезают, либо изменяют характер своего проявления. Кроме того, появились "новые" болезни, вызываемые патогенными, потенциально-патогенными микроорганизмами и даже сапрофита-ми [3]. В этой связи недооценка роли потенциально патогенных микроорганизмов в динамично меняющихся экологических условиях зачастую приводит к неправильной диагностике той или иной болезни.
Вместе с тем значительное количество болезней, регистрируемых в ветеринарной отчётности как незаразные, на практике имеют устойчивую стационарность и нередко проявляются энзоотически [3, 4].
Цель и методика исследований.
Патология мочевыводящих путей свиней, в особенности у свиноматок, в последнее время занимает значительный удельный вес в нозологическом сегменте инфекционных болезней животных. Так, по данным авторов, в странах с развитым свиноводством на долю инфекций мочевыводящих путей (ИМП) свиноматок приходится от 5% до 12% от всех регистрируемых болезней урогенитального тракта [6, 7, 8]. При этом экономический ущерб от ИМП свиноматок складывается из недополучения приплода, так как в большинстве случаев выбраковываются свиноматки репродуктивного возраста - от двух до четырех лет, потерь продуктивности и гибели животных [3,
4, 5, 6, 7]. Ряд исследователей указывают, что ИМП у свиноматок необходимо подразделять на две группы, а именно: неспецифические воспаления мочевыводящих путей животных,
обусловленные ассоциациями, патогенных и потенциально-патогенных микроорганизмов, и специфические, вызываемые уропатогенным микроорганизмом Actinobaculum suis. По данным литературы, наиболее часто (30-60% случаев) при неспецифических инфекциях мочевыводящих путей выделяют Е. соИ различных серотипов [7, 8]. Из других микроорганизмов встречаются Proteus spp., Streptococcus spp., Micrococcus spp., Klebsiella spp. Большинство исследователей указывают, что ИМП, обусловленные потенциально-патогенной микрофлорой, сопровождаются развитием уроцистита катарального характера и не приводят к поражению почек [7, 8].
Кроме того, учитывая сложность диагностики неспецифических ИМП свиней, связанную с особенностями течениями, клинического и патоморфологического проявления, полиэтиоло-гичностью, в ветеринарной практике они практически не диагностируются.
Специфическая ИМП свиней, обусловленная уропатогеном Actinobaculum (Corynebacterium, Eubacterium, Actinomyces) suis, известна зарубежным исследователям с конца 50-х годов прошлого столетия и регистрируется во многих странах [3, 4, 5, 8].
В Российской Федерации первое сообщение о выделении A. suis у свиноматок с патологией мочевыводящих путей опубликовано в 1998 году [4].
В дальнейшем, с целью изучения распространения ИМП у свиней и состава микрофлоры, клинико-патоморфологических изменений, нами в течение последних десяти лет было обследовано более сорока мелких, средних и крупных свиноводческих хозяйств с поголовьем от 150 голов до 150 тыс. свиней, расположенных в различных регионах Западной Сибири.
Эпизоотологические особенности ИМП изучали руководствуясь методи-
ческими указаниями по эпизоотологи-ческому исследованию [1, 2].
Материал для бактериологического исследования был получен от домашних свиней пород немецкий ландрас, дюрок и крупной белой в свиноводческих хозяйствах, а также животных, поступающих на мясокомбинаты или убойные пункты. Пробы -мочи от свиноматок и хряков (n = 2016) получали при спонтанном мочеиспускании.
А. suis культивировали на питательных средах: селективном глюкозо-кро-вяном агаре (СГКА), колумбийском кровяном агаре (ККА), тиогликолатном бульоне (ТГБ), молочно-глюкозном агаре (МГА). Для обнаружения A. suis в первичном материале использовали РНИФ. В зависимости от морфологических и культуральных свойств выделенные культуры пересевали на элективные среды: Эндо, Сабуро, ЖСА, КБА, МПБ с содержанием 6,5% NaCI. Посевы инкубировали в термостате ТС-80МУ 4.2 при 37оС в течение 2-6 суток с использованием как аэробных, так и анаэробных условий (Anaero Gen, Oxoid Ltd, Англия).
Морфологические и тинкториаль-ные свойства выделенных культур изучали при окраске мазков-препаратов по Граму, Цилю-Нильсену, Шефферу-Фултону, Романовскому-Гимзе, Ней-ссеру, с использованием светового микроскопа "Jenaval". Измерение микробных клеток проводили с помощью микрометра окулярного винтового (МОВ-1). Подвижность бактерии определяли методом "висячая капля" при +37оС.
Ферментативную активность выделенных культур изучали при посеве в среды Гисса. Биохимические характеристики A. suis определяли с помощью экспресс-системы Rapid id 32A (bio Marieux, Франция) кроме того, для диф-феринциации культур A. suis использовали рестрикционный анализ хромосомной ДНК в сочетании с ДНК-гибри-дизацией. Сходство профилей культур A. suis определяли по коэффициенту Жаккарда. Дендрограмма была создана с использованием метода UPGMA.
По результатам микроскопическо-
Pathology to urine of deducing ways of pigs, traumatic damages of urinogenital bodies, morphological and hostochemical researches.
го, бактериологического и биохимического исследований делали заключение о родовой и видовой принадлежности выделенных микроорганизмов, используя "Определитель бактерий Берджи" (1997) и "Определитель зоопатогенных микроорганизмов" (Сидоров М.А. и др., 1995).
Резистентность выделенных культур микроорганизмов к химиотерапевтическим средствам изучали дискодиффузионным методом.
Патогенность выделенных культур микроорганизмов изучали постановкой биологической пробы на белых мышах. Для эксперимента было сформировано семь групп, по шесть животных в каждой. Животных заражали внутри-брюшинно, взвесью односуточных агаровых культур, в дозе 1,0 ■ 109 и 1,5 ■ 109 м.т., в объеме 1 мл. Животным контрольной группы вводили внутрибрю-шинно физиологический раствор в том же объеме. Определение Ю50/мл проводили по методу Рида-Менча в модификации В.Л. Троицкого (1950).
Для изучения патогенных свойств культур A. suis проводили экспериментальное заражение свиноматок. У свиноматок изучали общеклинические данные, физико-биохимические, микроскопические показатели мочи, сыворотки крови, а также гематологические характеристики периферической крови с использованием общепринятых методик (Кондрахин И.П. и др., 1985).
Морфологические и гистохимические исследования проводили с использованием методов, описанных в справочных руководствах Г.Меркулова (1961 ), Э. Пирса (1962), Р Лилли (1962), X. Луппа (1980).
Статистическую обработку полученного цифрового материала проводили на ПК с использованием программы Microcoft Excel 97.
Результаты проведённых исследований показали, что специфические уроциститы и пиелонефриты свиноматок, обусловленные A.suis, регистрируются у 7-10% от числа обследованных животных с клиническими признаками расстройства мочеполовой системы. В то же время неспецифические уроциститы и пиелонефриты, вызванные потенциально патогенной микрофлорой, отмечались у 19,8% свиноматок. Установлено, что во всех случаях ИМП подвержены свиноматки от двух лет и старше. При специфических уроциститах и пиелонефритах не установлено каких-либо сезонных особенностей. Вместе с тем для инфекций мочевыводящих путей, вызванных потенциально-патогенными микроорганизмами характерна весенне-осенняя сезонность. Необходимо указать, что у хряков регистрируется широкое бактерионосительство уропа-тогена A.suis (до 59,6%), при этом возбудитель локализуется в содержимом препуциального дивертикула и в сперме (85,7%).
В тоже время при бактериальном исследовании проб мочи у хряков выделить A.suis не удалось.
Анализ литературы и результаты собственных исследований позволяют предположить, что источником возбудителя специфической инфекции мочевыводящих путей являются хряки-производители, выделяющие микроорганизм во внешнюю среду с жидким содержимым препуциального дивертикула и спермой, а также больные свиноматки, моча и истечения из мочеполовых органов.
В тоже время при неспецифических ИМП у свиноматок механизм возникновения и течение эпизоотического процесса носит факторный характер. Так, проведённые нами исследования показали, что потенциально-патогенные микроорганизмы -возбудители неспецифических ИМП (E.coli, Staphylococcus spp., Streptococcus spp., Enterococcus spp., Proteus spp., Pseudomonas spp., Klebsiella spp.) при удовлетворительных зоогигиенических и ветеринарносанитарных условиях могут присутствовать как в организме свиней, так и в среде обитания животных, но при снижении естественной резистентности свиноматок, нарушениях кормления, несоблюдении зоогигиенических параметров содержания животных наблюдается возникновение и развитие эпизоотического процесса. Всё вышеуказанное нашло подтверждение в проведённых нами иммунобиологических и биохимических исследованиях, с учётом условий содержания и кормления свиноматок. Установлено, что у большинства свиноматок с ИМП в сыворотке крови наблюдается снижение количества общего белка и белковых фракций, а также бактериоцид-ной активности сыворотки крови на 18,6% - по сравнению со здоровыми животными. Кроме того, в сыворотке крови больных свиноматок происходит достоверное уменьшение фосфора неорганического до 5,21±0,21 мг %, снижение щелочного резерва до 41,2±1,02
об.% CO2, а также витамина A до 8,31 ±0,12 мкг %.
Нами установлено, что у свиноматок в 25,3% случаев неспецифические инфекции мочевыводящих путей протекают совместно с эндометритом, в 12,1% - с ММА и в 7,12% случаев отмечается сочетанное течение ИМП, эндометрита и ММА.
Проведенные нами бактериологические исследования показали, что у свиноматок с клиническими признаками ИМП степень бактеремии равна или превышает 105 КОЕ/мл. В микробиоценозе преобладали ассоциации бактерий. В большинстве проб изолировали E.coli (27,4%), Proteus spp. (18,9%), Staphylococcus spp. (16,4%), Klebsiella spp. (12,3%), Streptococcus pyogenes (8,3%). Так E.coli обнаруживали в ассоциации в 65,4%случаев, а в моно-
Ветеринария
культуре - 34,6%. Представителей рода Staphylococcus изолировали, как правило, в ассоциации (76,6%). Чаще других микроорганизмов в ассоциациях выделяли Enterobacter spp. (95,6%), Proteus spp. и Klebsiella spp. (94,4% и 94,3% соответственно), Citrobacter spp. (85,7%). Реже и только в ассоциации обнаруживали Streptococcus spp. (6,3%), Serratia spp. (4,2%), Enterococcus spp. (1,7%), Actinobaculum suis (1,4%), и Pseudomonas spp. (0,8 %).
Ассоциации выделяемых микроорганизмов разнообразны и в большинстве случаев представлены двумя, тремя родами и видами. Так, ассоциации E.coli + Proteus spp. составили 15,4%, Enterobacter spp. + Staphylococcus spp. - 5%, а Proteus spp. + Klebsiella spp. - 4,2%.
Результаты проведённых экспериментальных исследований показали различную степень патогенности выделенных культур, так для E.coli Ю50/МЛ. составила 0,5109 м.т./мл., Proteus vulgaris Ю50/МЛ. 2,0109 м.т./ мл., Staphylococcus aureus Ю50/МЛ.
0,51 09 м.т./мл., Klebsiella pneumoniae Ю50/МЛ. 1,75109 м.т./мл., Streptococcus pyogenes Ю50/МЛ. 1,25109 м.т./ мл., Citrobacter freundii Ю50/МЛ. 2,5109 м.т./мл. В то же время при заражении лабораторных животных взвесью культур Actinobaculum suis в концентрациях 1,0-1,5109 м.т./мл гибель животных не регистрировали.
В то же время введение свиноматкам суспензии A. suis с помощью кате-тора в мочевой пузурь сопровождалось развитием уроцистита геморрагического типа (67%), а у 12% -
развитием пиелонефрита.
Результаты проведенных исследований показали, что как при экспериментальном, так и при спонтанном заражении ИМП обусловленные A. suis и потенциально-патогенной микрофлорой могут протекать как остро, так и хронически.
При остром течении в большинстве случаев каких либо характерных клинических симптомов не наблюдали, проявлялись отдельные патогномич-ные признаки, а именно: мутные примеси в моче, чаще всего слизисто-гнойного характера, незначительная гематурия. Наши наблюдения показали, что у молодых свиноматок (до 2-х лет) при остром течении возможно выздоровление. При хроническом течении ИМП, обусловленных A. suis отмечали болезненность при мочеиспускании, гематурию, шаткую походку и дрожь. В тяжелых случаях наблюдали выраженную гематурию, диурию, пиурию и лихорадку. У животных развивалась кахексия, они стояли со сгорбленной спиной. В то же время при ИМП неспецифической этиологии лихорадку наблюдали не всегда. В моче больных свиноматок регистрировали лейкоцитурию и про-теинурию.
Необходимо отметить, что у сви-
номаток с неспецифической ИМП соотношение монокультур и ассоциаций микроорганизмов изменялось в зависимости от формы течения болезни. Так, при хроническом течении из проб мочи были выделены, в основном, культуры бактерий, состоящие из двух, трех видов или родов, при остром - в основном, монокультуру.
Проведенные патогистологические и гистохимические исследования показали, что для уроциститов и пиелонефритов свиноматок, обусловленных A. suis при подостром течении инфекции характерны изменения со стороны мочевого пузыря - очаговый геморрагический, гнойно-геморрагический уроцистит, в почках катарально-геморрагический пиелонефрит, а при хроническом течении в мочевом пузыре развивался восходящий гнойно-геморрагический, или гнойно-некротический процесс, в почках - очаговый гнойногеморрагический нефрит, в единичных случаях интра - и экстракапиллярный гломерулонефрит. Для неспецифических уроциститов и пиелонефритов свиноматок, обусловленных потенциально-патогенной микрофлорой, характер патоморфологических изменений зависит от количественного и качественного состава микробиоценоза.
Так, инфекция, обусловленная одним или двумя возбудителями, сопровождается катаральным, катарально-геморрагическим воспалением мочевого пузыря, мочеточников и почечной лоханки, при ассоциации микроорганизмов - гнойным, гнойногеморрагическим.
Выводы. Анализ Анализ литературы и проведенные нами наблюдения показали, что профилактика инфекций мочевыводящих путей свиноматок должна предусматривать проведение как общих, так и специальных ветеринарно-санитарных мероприятий. Важный момент в повышении устойчивости свиноматок к ИМП - профилактика послеродовых осложнений и повышение резистентности организма животных.
Для санации свиноматок с целью профилактики заболеваний мочеполовых органов и молочной железы свиноматкам рекомендуется за два-три дня до опороса инъецировать пролонгированные антимикробные препараты широкого спектра действия.
Необходимо строго соблюдать гигиену опоросов, проводить тщательную механическую обработку станков, использовать средства, обладающие гигроскопическими, дезинфицирующи-
Ветеринария. Антибиотики
ми свойствами.
Bo-избежании передачи возбудителя специфического уроцистита и пиелонефрита через сперму хряков-про-изводителей целесообразно применять искусственное осеменение свиноматок с предварительным бактериологическим исследованием спермы и при необходимости её санации.
Таким образом, результаты проведенных исследований свидетельствуют о том, что специфические и неспецифические инфекции мочевыводящих путей относительно широко распространены среди свиноматок (10% и 19,8% соответственно) в свиноводческих хозяйствах Западно-Сибирского региона. Главным этиологическим фактором при специфическом уроцистите и пиелонефрите является A. suis, а при неспецифических - E.coli и ассоциации потенциально-патогенных микроорганизмов (Staphylococcus spp., Streptococcus spp., Proteus spp., Klebsiella spp.).
Факторами, предраспологающими к развитию ИМП, являются ослабление резистентности организма супоросно-сти свиноматок, неудовлетворительные условия кормления и содержания, а также травматические повреждения мочеполовых органов.
Литература
1. Бакулов И.А. Некоторые результаты исследований по проблеме эпизоотологического прогнозирования // Труды ВИЭВ. -Т.55. - М., 1989. -С. 11-15.
2. Бакулов И.А. Законы и категории эпизоотологии // Вестник Рос. Акад. с.-х. наук, 1994, №1. - С. 44-46.
3. Бакулов И.А., Колычев Н.М., Плешакова В.И. Новый взгляд на этиопатогенез инфекций мочевыводящих путей свиней // Вестник Российской академии сельскохозяйственных наук. - 2001. - №5. - С. 73-75.
4. Плешакова В.И. Уроциститы и пиелонефриты у свиней, обусловленные Actinobaculum suis (Corynebacterium, Eubacterium, Actinomyces suis) // Ветеринария Сибири. - 2001. - №5. - С. 32-39.
5. Pleschakowa V., Leibold W., Amtsberg G. Et ol., Studies on the prevalence of Actinobaculum suis in boars of breeding herds in the region Omsk (Russian Federation) by indirect immunolluorescence technique. Dtsch. Tierarztl. Wschr, 2004, 111. p. 67-69.
6. Carr J., Walton J.R., Jnvestigations of the pathogenetic properties of Eubacterium suis (Corynebacterium suis) Jn: 11th Corgn. Jut. Pig Vet. Soc., Lausanne. Proc., 1990. p. 121-122.
7. Jones J.E.T. Cystitis und Pyelonephritis lei Sanen // Dtsch. Tierarztl. Wochen, 1980, 87.
8. Carr J., Walton J.R. The microflora of the porcine urinary tract in cases of cystitis and pyelonephritis. Jn: 12 th Congr. Jut. Pig Vet. Soc., Den Haag. Proc., S 374.
ВЕТЕРИНАРНО-САНИТАРНАЯ ОЦЕНКА МЯСА ЖИВОТНЫХ И ПТИЦЫ, СОДЕРЖАЩЕГО АНТИБИОТИКИ
О.И. КАЛЬНИЦКАЯ,
кандидат ветеринарных наук, доцент,
Московский государственный университет прикладной биотехнологии, г. Москва
Ключевые слова: антибиотики, контроль качества, сырьё животного происхождения.
В Российской Федерации действуют санитарно-эпидемиологические правила и нормативы "Гигиенические требования безопасности и пищевой ценности пищевых продуктов" (СанПиН 2.3.2.107801), где четко регламентируется содержание ряда антибиотиков в сырье и про-
дуктах животного происхождения.
Лабораториям для практической работы на сегодняшний день требуются легко доступные экспресс-методы с высокой чувствительностью и удовлетворительными метрологическими характеристиками, которые позволили бы
Û
обнаруживать остаточные количества антибиотиков в сырье и продуктах животного происхождения.
Разработка и применение различных современных методов анализа антибиотиков гарантируют выпуск
Antibiotics, quality assurance, raw material of an animal origin.
