CC BY
6
Гигиена питания
© КОЛЛЕКТИВ АВТОРОВ, 1991 УДК 616.992.28-022.38-055.26.07:618-053.11-092.9
В. А. Тутельян, Н. А. Криницкая, Л. И. Авреньева, Е. Э. Кузьмина, А. Б. Левицкая, Л. В. Крйвченко
ЭМБРИОТОКСИЧЕСКОЕ ДЕЙСТВИЕ МИКОТОКСИНА ДЕЗОКСИ НИВАЛЕНОЛА
(ВОМИТОКСИНА) НА КРЫС
Институт питания АМН СССР, Москва
Дезоксиниваленол (ДОН) — метаболит грибов рода Fusarium — относится к микотоксинам, представляющим реальную опасность для здоровья человека. ДОН обнаруживают в качестве природного загрязнителя практически во всех зерновых культурах в большинстве стран всех континентов. Для стран Европы средняя частота контаминации ДОН пшеницы составляет 60 %, кукурузы — 69%, ячменя — 24% [8, 9, 13]. В СССР в некоторых регионах ДОН обнаруживали в 100 % исследованных образцов пшеницы [7]. В отдельных случаях концентрация его в зерновых, явившихся причиной острых отравлений у людей, достигала 92 мг/кг [11]. Имеющиеся единичные исследования [10, 14] позволяют предположить, что ДОН обладает сильным эмбриотоксическим и тератогенным действием.
Цель настоящей работы — изучение влияния ДОН на внутриутробное и постнатальное развитие крыс. Исследования проводили в соответствии с рекомендациями ВОЗ [12].
В опытах использовали крыс-самок линии Ви-стар с исходной массой тела 200—250 г, содержащихся на общевиварном рационе. 1-й день беременности устанавливали по наличию сперматозоидов в вагинальных мазках самок после спаривания с самцами (2 самки + 1 самец). Все беременные самки были разделены на 5 групп (по 15—20 животных в каждой). Крысам ежедневно с 7-го по 15-й дни беременности внутрижелу-дочно вводили водный раствор ДОН. Крысы 1-й группы получали токсин в дозе 10 мг/кг мас-
сы тела, 2-й — 5 мг/кг, 3-й — 1 мг/кг, 4-й -0,2 мг/кг. Животные контрольной группы (5-й) — эквивалентные количества растворителя.
Для оценки токсического действия ДОН на беременную самку у крыс на 20-й день беременности исследовали морфологический состав периферической крови и лейкоцитарную формулу [3, 6]. У забитых на 21-й день беременности животных в сыворотке крови исследовали активность аланин- и аспартатаминотрансфераз (наборами «ВюМепеих») щелочной фосфатазы, а-маннозидазы, арилсульфатаз А и В [5], амилазы, содержание мочевины (наборами «СИета-ро1»). Для изучения эмбриотоксического действия ДОН на 21-й день беременности производили эвтаназию крыс и подсчитывали число живых эмбрионов, число резорбций, число желтых тел, общую эмбриональную смертность, постимплан-тационную смертность эмбрионов, длину и массу эмбрионов, массу плаценты, плацентарный коэффициент [4]. Наличие аномалий развития внутренних органов плодов выявляли методом сагиталь-ных срезов [2]. Состояние окостенения зачатков различных мэстей скелета оценивали по методу [1]. По 7 животных каждой группы оставляли до естественных родов. При наблюдении за развитием потомства учитывали массу тела новорожденных крысят, на 14-й, 21-й и 30-й дни жизни, сроки отлипания ушной раковины, появления шерстного покрова, прорезывания резцов, открытия глаз. Статистическую обработку полученных результатов проводили с использованием
Таблица 1
Влияние ДОН на показатели репродуктивной функции самок крыс (Ai±m)
Показатель Доза ДОН, мг/кг
10 5 1 0.2 0 (контроль)
Число живых эмбрионов Число желтых тел Число резорбций Масса эмбриона, г Длина эмбриона, см Масса плаценты, г Плацентарный коэффициент Общая эмбриональная смертность, % Постимплантационная смертность, % 0 14,0±0,9 12,9 100 92,3 11,4±0,4 11,5±1,4 1,0 3,07±0,17* 32,9±0,85* 0,47±0,04 0,15ч-0,01 10,4 7,9 10,4±0,5 П,4±0,9 1,0 3,91 ±0,09 36,6±0,46* 0,52±0,03 0,14 ±0,01 7,8 7,8 10,6± 1,2 14,6±0,2 1,4 2,81 ±0,12 37,5±0,37 0,54±0,04 0,14±0,01 20,8 11,1 12,2±1,0 13,4±0,8 0,2 4,13±0,17 38,4+0,27 0,53±0,02 0,13±0,01 10,8 1,7
Примечание. Здесь и в табл. 2 и 3 звездочка — достоверные различия с контролем (р<0,05).
Таблица 2
Влияние ДОН на развитие костной системы эмбрионов крыс
Показатель Доза ДОН. мг/кг
5 1 0,2 0 (контроль)
Число плодов
обследовано (всего) 24 22 20 20
с нарушением
абс. 14 5 3 1
% 58,3* 22,7* 15 5
Аномалии развития костной
системы
неполное окостенение
костей черепа
абс. 7 0 3 1
% 29,2* 0 15 5
отсутствие центров ос-
сификации грудины
абс. 13 5 3 0
о/ /о 54,2* 22,7* 15 0
укорочение хвостового
отдела позвоночника
абс. 14 5 1 0
о/ /о 58,3* 22,7 5 0
¿-критерия Стьюдента й ф-углового преобразования Фишера.
Первые клинические симптомы интоксикации (адинамия, диарея, кровянистые выделения из влагалища) отмечены у 8 из 9 беременных крыс 1-й группы на 7—8-й день введения токсина. Прирост массы тела животных этой группы был достоверно снижен и составлял 2,6±0,3 г/сут против 4,7±0,4 г/сут в контроле. У животных 2-й группы диарею наблюдали у 3 крыс, кровянистые выделения из влагалища у 6 из 13 крыс, незначительно уменьшался прирост массы тела. У крыс 3-й группы кровянистые выделения из влагалища отмечали только у 2 из 11 животных,-Не было обнаружено каких-либо клинических проявлений токсикоза у самок 4-й группы. У крыс, получавших максимальную дозу ДОН, достоверно снижалось общее количество эритроцитов, абсолютное и относительное содержание сегменто-ядерных нейрофилов до 81, 51 и 73 % от контроля соответственно и почти в 2 раза увеличивалось абсолютное содержание эозинофилов. В сыворотке крови крыс 1-й группы возрастала активность аланинаминотрансферазы, а-манно-
зидазы и арилсульфатаз на 51, 92 и 67 % соответственно, умеренно (на !1 %), но достоверно снижалось содержание белка. Не было обнаружено существенных изменений морфологического состава периферической крови и биохимических показателей крови у самок 2, 3 и 4-й групп.
При введении ДОН в дозе 10 мг/кг общая эмбриональная смертность составляла 100 %, количество резорбций на 1 самку — 12,9 против 0,2 в контроле (табл. 1). Постимплантацион-ная смертность, количество резорбций у крыс 2, 3 и 4-й групп были выше, чем в контрольной группе, но находились в пределах частоты спонтанных случаев. В дозе 5 мг/кг ДОН вызывал достоверное уменьшение массы тела и длины эмбриона соответственно на 26 и 14 %. Эмбрионы у 3 из 9 забитых самок этой группы были малоактивными. Незначительно (всего на 5%), но достоверно была уменьшена длина эмбрионов в 3-й группе. ДОН в дозе 0,2 мг/кг не оказывал какого-либо влияния на антропометрические показатели эмбрионов.
При внешнем осмотре у одного плода при дозе 5 мг/кг обнаружена пупочная грыжа. Наблюдалось некоторое повышение числа кровоизлияний во внутренние органы эмбрионов, умеренно выраженные гидронефрозы у крыс 2, 3 и 4-й групп, однако их количество находилось в пределах частоты спонтанных случаев. Отмечалось уплотнение ткани легких эмбрионов крыс, особенно выраженное во 2-й группе. Влияние ДОН на развитие костной системы было выражено в большей степени (табл. 2). В группе животных, получавших токсин в дозе 5 мг/кг, 58,3 % плодов имели единичные и множественные пороки развития — неполное окостенение костей черепа, полное или частичное отсутствие центров оссификации грудины, укорочение хвостового отдела позвоночника. У эбриона с пупочной грыжей, наряду с перечисленными, наблюдалось сращение ребер и сколиоз. При дозе 1 мг/кг дефекты скелета выявляли у 22,7 % плодов и нарушения носили менее выраженный характер. Частота костных дефектов при дозе 0,2 мг/кг не отличалась достоверно от контроля.
Результаты наблюдения за ранним постнаталь-ным развитием потомства представлены в табл. 3.
Таблица 3
Влияние внутриутробного воздействия ДОН на развитие крыс в раннем постнатальном периоде (М±т)
Показатель
Доза ДОН, мг/кг массы тела
5 1 0.2 0 (контроль)
8,5±1,6 11,0± 1,0 9,5±0,5 11,1 ±0,7
1,5 10 1,2 0,5
4,2 1,8 0 0
6,0±0,2* 5,9±0,3 5,9±0,2* 6,6±0,2
25,2±0,4 26,4±0,9 26,9±0,6* 24,8±0,6
37,9±0,2* 41,5±1,2 39,5±1,4* 43,3±0,6
88,9±2,3 83,3±1,2 96,2±3,1* 82,5±2,2
Число крысят в помете Мертворожденность, % Смертность в первые 7 дней жизни, % Масса тела крысят, г: новорожденных на 14-й день на 21-й день на 30-й день
Наибольший процент мертворожденности отмечали у животных 3-й группы, а смертность в первые 7 дней жизни была наивысшей в группе, получавшей ДОН в дозе 5 мг/кг. Не было обнаружено существенных различий в количестве крысят в помете ни в одной из опытных групп. Средняя масса тела новорожденных крысят 2-й и 4-й групп была ниже, чем в контрольной группе соответственно на 9 и 11 %. В этих же группах наблюдалось незначительное отставание роста крысят к 21-му дню жизни, однако к 30-му дню по массе тела крысята опытных групп не отличались от крысят контрольной группы или даже несколько превышали их. Отлипание ушных раковин, прорезывание резцов, появление шерстного покрова, открытие глаз происходило в сроки, соответствующие физиологическим нормам.
Таким образом, в результате проведенных исследований было установлено, во-первых, что максимальная доза ДОН, не оказывающая токсического действия на беременных самок-крыс линии Вистар при введении с 7-го по 15-й день беременности составляет 0,2 мг/кг массы тела, и во-вторых, что максимальная доза токсина, не оказывающая эмбриотоксического и тератогенного действия на крыс при введении в период органогенеза составляет 0,2 мг/кг. Полученные данные должны учитываться при разработке регламентов содержания ДОН в продовольственном сырье и пищевых продуктах.
Литература
1. Гофмеклер В. А. // Гиг. и сан,— 1969,— № 8.— С. 47—50.
2. Дыбан А. П., Баранов В. С., Акимова И. М. 11 Арх. анат.— 1970,— № 10.— С. 89—99.
3. Инструкция по определению гемоглобина крови геми глобинцианидным методом.— М., 1974.
4. Методы экспериментального исследования по установле нию порогов действия промышленных ядов на генератив ную функцию с целью гигиенического нормирования Метод, рекомендации / Саноцкий И. В., Фоменко В. И. Сальникова Л. С. и др.— М., 1978.
5. Покровский А. А., Тутельян В. А. Лизосомы,— М. 1976.
6. Предтеченский В. Б. Руководство по клиническим и лабо раторным исследованиям.— М., 1960.
7. Соболев В. С., Эллер К. И., Пименова В. В. и др. // Вопр. питания,— 1990,— № 1.— С. 68—71.
8. Тутельян В. А., Кравченко Л. В. Миксггоксины.— М. 1985.
9. Gareis /И., Bauer ]., Enders С., Gedek В. // Fusarium Mycotoxins, Taxon and Pathogenicity.— Amsterdam, 1989.— P. 441—472.
10. Khera K. S., Arnold D. L„ Whalen C. et al. // Toxicl appl. Pharmacol.— 1984,— Vol. 74,— P. 345—356.
11. Luo Xueyrin // International IUPAC Symposium on Mycotoxins and Phycotoxins, 7-th: Proceedings.— Tokyo, 1988.— P. 97—98.
12. Principles for Evaluating Health Risks to Progeny Associated with Exposure to Chemicals During Pregnancy (WHO ENC 30).— Geneva, 1984.
13. Scott P. M. // Trichothecene Mycotoxicosis: Pathophysiologic Effects.- 1989.— Vol. 1.— P. 1—26.
14. Wang J., Xu D. U Acta mycol. sin.— 1986,— Vol. 5.— P. 52—62.
Поступила 14.08.89
Summary. Study of embryotoxic action of deoxynivalenol in levels of 0.2, 1,5, 10 mg/kg from 7 to 15 day of rat pregnancy was worked up. The 0.2 mg/kg determined as a maximal acceptable dose without toxic effects.
© КОЛЛЕКТИВ АВТОРОВ. 1991
УДК 614.778:634.8:632.95 ]: |613.2:663.236]-07
В. А. Ажогина, Т. И. Гугучкина, Н. М. Агеева
ВЛИЯНИЕ ОСТАТКОВ ПЕСТИЦИДОВ НА ЖИРНОКИСЛОТНЫЙ СОСТАВ ЛИПИДНОГО
КОМПЛЕКСА ВИНОГРАДНОГО СОКА
Северо-Кавказский зональный НИИ садоводства и виноградарства, Краснодар; Краснодарский политехнический институт
Известно, что пищевая ценность продукта определяется его способностью удовлетворять потребности человеческого организма в жизненно необходимых веществах. В продуктах переработки винограда важная роль принадлежит липидному комплексу. Установлено, что жирные кислоты со средней длиной цепи (Сб—С12) оказывают влияние на букет вина, в частности ответственны за каприловый или жирно-мыльный тон [6]. Октановая и декановая кислоты оказывают инги-бирующее действие на микроорганизмы и могут использоваться в санитарно допустимых дозах для биологической стабилизации [2]. Летучие спирты, непредельные углеводороды, эфиры, альдегиды, образующиеся при окислении жирных кислот, обусловливают появление в среде различных привкусов [5].
В связи со все более широким применением пестицидов в сельском хозяйстве увеличивается вероятность попадания их в продукты питания, в частности в виноград и продукты его переработки. Вследствие этого представляет большой практический и научный интерес механизм взаимодействия пестицидов с липидной группой виноградной ягоды. С этой целью был проведен опыт на виноградном соке.
В сок из белых и красных сортов винограда вносили пестициды фозалон, метафос и кель-тан, наиболее широко применяемые в настоящее время на виноградниках. Общую фракцию ли-пидов извлекали из объекта по методу Фол-ча [4]. Разделение жирных кислот осуществляли на хроматографе «Хром-5» на фазе ДЭГС с программированием температуры от 180 до 210 °С
