CC BY
19УДК 618.145-007.61:612.621.3
О. М. Носенко1, К. П. Головатюк1, В. Е. Дорошенко2, Г. В. Рутинська1
ЕКСПРЕС1Я РЕЦЕПТОР1В ДО СТЕРОЩНИХ ГОРМОН1В В ЕНДОМЕТРП ПРИ ЙОГО НЕАТИПОВ1Й Г1ПЕРПЛАЗП ЯК ПРИЧИНА РОЗЛАД1В Ж1НОЧО1 ФЕРТИЛЬНОСТ1 ТА НЕВДАЧ ГОРМОНОТЕРАП11
1 Одесский национальный медицинский университет Министерства здравоохранения
Украины;
2Медичний центр ilaya (1лая), м. Кшв.
Summary. Nosenko O. M., Golovatyuk K. P., Doroshenko V. E., Rutinskaya G. V. EXPRESSION OF RECEPTORS TO STEROID HORMONES IN ENDOMETRIUM WITH ITS NON-ATIPICAL HYPERPLASIA AS THE CAUSE OF IMPAIRED WOMEN'S FERTILITY AND FAILURE OF HORMONOTHERAPY. - Odessa National Medical university, [email protected]; Medical Centre Ilaya, Kiev. In non-atypical hyperplasia of endometrium (GE) in women of reproductive age in 94,4% cases infertility is observed, in 31,5% - miscarriages. The aim of the study was to assess the status of the steroid receptor expression in the endometrium with its non-atypical hyperplasia in patients with impaired fertility. 72 women with GE and fertility disorders and 30 healthy women were examined. The expression of estrogen-a (RE-a) and progesterone (RP) receptors in the endometrium was determined by the immunohistochemical method on the day of the implantation window. It was found that at the non-atypical ET a significant increase in the expression of receptors to RE-a and RP in the endometrial glands is noticeably uneven in intensity and concentration, compared with the stroma, with an increase in the expression of RP. But in 27.78% of women with non-atypical GE there is a lack or traces of immune staining in the endometrial glands RE-a and in 15,28% - RP, in the stroma -41,67% and 45,83% respectively. The authors conclude that the violation of the expression of REa and RP in non-atypical GE can lead to violations of decidualization, implantation and placentation, as well as failure of hormone therapy.
Key words: non-atypical endometrial hyperplasia, fertility disorders, receptors for estrogens-a, receptors for progesterone, failure of hormone therapy.
Реферат. Носенко Е. Н., Головатюк Е. П., Дорошенко В. Э., Рутинская А. В. ЭКСПРЕССИЯ РЕЦЕПТОРОВ К СТЕРОИДНЫМ ГОРМОНАМ В ЭНДОМЕТРИИ ПРИ ЕГО НЕАТИПИЧЕСКОЙ ГИПЕРПЛАЗИИ КАК ПРИЧИНА НАРУШЕНИЙ ЖЕНСКОЙ ФЕРТИЛЬНОСТИ И НЕУДАЧ ГОРМОНОТЕРАПИИ. При неатипической гиперплазии эндометрия (ГЭ) у женщин репродуктивного возраста в 94,4% наблюдается бесплодие, в 31,5% - невынашивание беременности. Целью исследования стала оценка состояния стероидного рецепторного статуса эндометрия при его неатипической гиперплазии у пациенток с нарушениями фертильности. Обследовано 72 женщин с ГЭ и нарушениями фертильности и 30 здоровых женщин. Проведено определение экспрессии рецепторов эстрогенов-a (RE-a) и прогестерона (RP) в эндометрии иммуногистохимическим методом в день предполагаемого окна имплантации. Обнаружено, что при неатипической ГЭ наблюдается значимое, неравномерное по интенсивности и концентрации увеличение экспрессии рецепторов к RE-a и RP в железах эндометрия по сравнению со стромой, при этом преобладает повышение экспрессии RP. Но у 27,78% женщин с неатипической ГЭ наблюдается отсутствие или следы иммунного окрашивания в железах эндометрия RE-a и у 15,28% - RP, в строме - соответственно - у 41,67% и у 45,83%. Авторы делают вывод о том, что нарушение экспрессии RE-a и RP при неатипической ГЭ может приводить к нарушениям децидуализации, имплантации и плацентации, а также неудачам гормонотерапии.
© О. М. Носенко, К. П. Головатюк, В. Е. Дорошенко, Г. В. Рутинська
Ключевые слова: простая неатипическая гиперплазия эндометрия, нарушения фертильности, рецепторы к эстрогенам-а, рецепторы к прогестерону, неудачи гормонотерапии.
Реферат. Носенко О. М., Головатюк К. П., Дорошенко В. Е., Рутинська Г. В. ЕКСПРЕС1Я РЕЦЕПТОР1В ДО СТЕРО1ДНИХ ГОРМОН1В В ЕНДОМЕТРП ПРИ ЙОГО НЕАТИПОВ1Й Г1ПЕРПЛАЗ11 ЯК ПРИЧИНА РОЗЛАД1В Ж1НОЧО1 ФЕРТИЛЬНОСТ1 ТА НЕВДАЧ ГОРМОНОТЕРАПП. При неатиповш г1перплазй' ендометрiя (ГЕ) у жшок репродуктивного вiку в 94,4 % спостертаеться безплщдя, в 31,5 % - невиношування вагiтностi. Метою дослщження стало оцiнка стану стеро!дного рецепторного статусу ендометрiя при його неатиповш гшерплази у пацiенток з порушеннями фертильностi. Обстежено 72 жшки з ГЕ i розладами фертильносп i 30 здорових жiнок. Проведено визначення експресй' рецепторiв естрогенiв-а (RE-а) i прогестерону (RP) в ендометри iмуногiстохiмiчним методом в день передбачуваного вiкна iмплaнтaцil. Виявлено, що при неатиповш ГЕ спостертаеться значуще, нерiвномiрне по iнтенсивностi та концентрацп зб№шення експресй' рецепторiв до RE-а i RP в залозах ендометрiя, шж в стромi, при цьому переважае тдвищення експресй' RP. Але у 27,78 % жшок з неатиповою ГЕ спостертаеться вiдсутнiсть або слщи iмунозабарвлення в залозах ендометрiя RE-а i 15,28 % - RP, в стромi - ввдповвдно 41,67% i 45,83 %. Автори роблять висновок, що порушення експресй' RE-а i RP при неaтиповiй ГЕ може приводити до порушень децидуaлiзaцil, iмплaнтaцil та плацентацп, а також невдач гормонотерапп.
Ключовi слова: проста неатипова гiперплaзiя ендометрiя, порушення фертильносп, рецептори до естрогешв-а, рецептори до прогестерону, невдaчi гормонотерапп.
Введення. Гiперплaзiя ендометрiю (ГЕ) - це передракова нефiзiологiчнa неiнвaзивнa пролiферaцiя ендометрiя, що призводить до збiльшення об'ему тканини ендометрiя зi змiнaми залозисто! архггектури (форма та розмiр) та сшвввдношення ендометрiaльнi залози до строми бшьше 1 : 1 [6]. Ввдповщно сучaснiй класифшацп, видiляють ГЕ без атипп та атипову ГЕ / ендометрю!дну iнтрaепiтелiaльну неоплaзiю [7]. Неатипова ГЕ представляе собою нормальний полмональний ендометрiй, який ввдповвдае на аномальш гормонaльнi впливи [3-7]. При неатиповш ГЕ у жшок репродуктивного в^ в 94,4 % спостертаеться безплщдя, в 31,5 % - невиношування ваптносп (22,6%) [1, 3]. Тому актуальним е вивчення рецепторного статусу ендометрiя при цiй патологи.
Метою дослщження стало оцiнкa стану стеро!дного рецепторного статусу ендометрiя при його неатиповш гшерплази у пащенток з порушеннями фертильносп.
Mamepim i методи
Основну групу I склали 72 жшки репродуктивного вшу з неатиповою ГЕ. Контрольну групу К склали 30 умовно здорових жшок з регулярним овуляторним менструальним циклом (МЦ), що обстежувалися в програмах ,3PT. Всiм жiнкaм виконували трaнсвaгiнaльну ехографшв динaмiцi МЦ з допплерiвськiм картуванням i визначенням кутнезалежних iндексiв (пульсацшний iндекс, iндекс резистентностi, систоло-дiaстолiчне сшввщношення) кровотоку в маткових, аркуатних, ращальних, базальних та спiрaльних aртерiй. Пстероскошя виконувалася на 22-й день МЦ в день передбачуваного вшна iмплaнтaцil.
Отриманий гiстологiчний мaтерiaл фiксувaли в 10% розчиш холодного нейтрального форматну протягом 24 годин. Пiсля депдратацп мaтерiaл заливали у високо очищений парафш з полiмерними добавками (Richard-Allan Scientific, США) при t< 60°С. Визначення стеровдних рецепторiв проводили на депарафшзованих i депдратованих зрiзaх товщиною 5 мкм проводили iмуногiстохiмiчним (1ГХ) методом з використанням тест-систем «Pakocytomation En Vision» (США), пероксидази хр^ по iнструкцiях фiрми. Використовували мишиш моноклонaльнi aнтитiлa (МАТ) до рецепторiв естрогенiв-а (RE-а) (клон 1D5, «DAKO», Дaнiя), рецепторiв прогестерону (RP) (клон 16&SAN27, «Novocastra»). Для вiзуaлiзaцil пстолопчно1 структури ендометрiя 1ГХ препарати дофарбовували гематоксилшом Майера та вмiщувaли в канадський бальзам. Для оцiнки експресй рецеш^в розраховували iндекс iмунореaктивностi за формулою IRS = SI х PP, де IRS -шдекс iмунореaктивностi, SI - оптична шгенсивнють фарбування, PP - ввдсоток позитивно
пофарбованих ядер. Вивчення препарапв в свгт проводили на дослвдницькому мшроскот Olympus AX70 (Япошя) з цифровою вщеокамерою Olympus DP50, з персональним комп'ютером. Мжрофотографування i морфометричне вивчення препаралв виконувалося з використанням програми ANALYSIS Pro 3.2 (Softlmaqinq, Нiмеччина) ввдповвдно до pекoмендацiй виробника програмного забезпечення. Статистична обробка отриманих даних проводилася за допомогою програми EXCEL на кoмп'ютеpi IBM PC/AT Pentium.
Результати та Их обговорення
Середнш вш ж1нок з ГЕ склав 31,94±0,23 рок1в, контролю - 32,05±0,37 (p>0,05). Пацieнтки не вiдpiзнялиcя за антропометричними даними, характером менструально! функци, соматичним та iнфекцiйним анамнезом. Серед жшок групи I у 40 (55,56%) cпocтеpiгали безплщдя i у 32 (44,44%) - невиношування вагiтнocтi.
Aналiз даних ехографи ендoметpiя показав, що у пащенток з неатиповою ГЕ була збтшена товщина М -ехо пopiвнянo з контролем на 7-й день МЦ в 1,51 раза (p<0,05) (9,52±0,23 проти 6,31±0,15 мм, p<0,01), а на 22-й день - в 1,33 (16,43±0,21 проти 12,14±0,26 мм, p<0,015). У гpупi I при допплерографп ендoметpiя вiдмiчали зниження iндекcу пульсативности, iндекcу pезиcтентнocтi кровотоку та cиcтoлo-дiаcтoлiчнoгo вiднoшення в маткових та ращальних аpтеpiях, i в бшьшосп випадк1в реестрували iнтpаендoметpiальний кровоплин (рис. 1).
17-11-2016-0012
20 У50 0R123 УК10 Дав.90 Frq Общ. 8.0см РВУ50 0.60кНгФ1 УК8
GAMETA Ml 1.2 17-11-2016
VR5-9/11/11/2016, онбу/fr юнг ТИм0.4 14:29:31
V 2
Рис. 1 Кольорова допплерограма матки пацiентки з гiпеpплазiею ендoметpiя на 5-у добу МЦ з ендoметpiальним кровоплином.
Отриманi результати за наявшсть допплерiвcькоl реестрацп iнтраендометрiального кровоплину при ГЕ спiвпадають з даними дослщження В.Г. Дуб1н1но!, К.М. Bi3ip (2016) [2]. Виявленi змши кровотоку можуть лежати в ocTOBi порушень фертильностi.
При вивченнi експреси рецепторiв стеро1дних гормонiв в ендометри у групi К в перюд передбачуваного вiкна iмплантацil виявлено, що шльшсть iмунореактивних клiтин до МАТ до RE-a в залозах варшвала вiд 7,01 до 21,20 %, в c^Mi - вiд 24,49 до 97,20 % i в середньому склала вiдповiдно 14,68±0,65 % i 51,19±3,36 %; до RP - в залозах коливалася ввд 10,60 до 29,78 %, в c^Mi - вiд 38,20 до 96,70 % i в середньому дорiвнювала вiдповiдно 24,16±0,81 % i 61,56±2,87 %.
У пацiенток з ГЕ шльшсть iмунореактивних клiтин до МАТ к RE-a в залозах варшвала ввд 0,00 до 77,70 %, в cтромi - вщ 0,00 до 61,40% i в середньому склала вщповщно 32,54±2,39 % (p<0,01) i 24,72±1,58 % (p<0,01) (рис. 2А, 2В); до RP - в залозах коливалася ввд 0,00 до 88,00 %, в cтромi - вiд 0,00 до 66,00 % i в середньому дорiвнювала вiдповiдно 48,46±1,95 % (p<0,01) i 36,98±1,63 % (p<0,01) (рис. 2Б, 2Г).
t r* v i -л
> 4
r i?
* S W' * 'Lji m „
> JSfe «Ç
&JL ЬЛ 1 \ i <
EST' Шшк
с1 ♦
"^/эдшМ
wlVit
(33
1 ijH
V
У
J i №
л*
и
: к 4 Ч Г
•Л I »
м » '
i
«ri
fVCi
<
U'
%
-1
Г
v^-
¿i £ * Ml А Ж9
. Á R
Pис. 2 Вiд вiдсyтностi до штенсивно1' нерiвномiрна експрес1я рецепторiв RE-a (А) i RP (Б) та ввдсутшсть iмyнозабарвлення клiтин МАТ до RE-a (В) та RP (Г) в залозаx i в стромi ендометрш на 22-й день МЦ. 1ГХ-забарвлення МАТ до RE-a та RP. х400.
Слiд зазначити, що рiвень 1RS стероïдниx рецепторiв при ГЕ широко варшвав як y рiзниx залозаx, i в рiзниx дiлянкаx строми ендометрiя. Ввдзначено мозащизм iмyнозабарвлення i значне коливання ввдсотка позитивниx клiтин i iнтенсивностi фарбyвання як y рiзниx пацiенток, так i в межаx одного випадку, як в залозаx, так i в строш. Найчастiше xарактер розподшу позитивниx клiтин 6ув нерiвномiрний, вiдрiзнявся за iнтенсивнiстю забарвлення i за кшъктстю iмyнозабарвлениx клiтин в окремт залозаx (див. рис. 2 А, 2Б).
В окремиx спостереженняx у ж1нок з ГЕ вщзначалося осередкове забарвлення епiтелiю залоз з високою штенсивтстю в дiлянкаx багатошаровосп епiтелiальниx клiтин при iнодi повнш вiдсyтностi забарвлення в залозаx з однорядним епiтелiем. У частини пащенток спостерiгали виражене порушення стану рецепторного апарату ендометрiя з вiдсyтнiстю або слдами iмyнозабарвлення рецепторiв в залозаx до RE-a - в 27,78 % випадкаx i до RP - в 15,28 % (рис. 2В i 2Г), в стромi - ввдповщно 41,67% i 45,83 %.
Наявшсть експресп RP призводить до зниження ризику персистенцй' I прогреси ГЕ пiсля прогестиново1' терапп, мае клiнiчний i бiологiчний змют. ГЕ стимулюеться естрогенами. Хоча складний меxанiзм дй' прогестинiв на молекулярному рiвнi неввдомий, прогестини можуть потенцшвати регресiю ГЕ через антагонiзм естроген^ндуковано1' пролiферацiï за раxyнок зниження синтезу RE-a та I або сприяння ферментативному перетворенню естрадiолy в естрон [9]. Прогестини також можуть д1яти через естроген-незалежнi шляxи. Щ можливi бiологiчнi ефекти прогестинiв вимагають наявностi RP. Слабка експресiя RP може вдентифщувати неопластичну субпопуляцш ендометрiальниx клiтин, сxильнy до стiйкостi до прогестишв [9], i поясняти невдачi гормонально1' терапп. Ця
думка шдтверджуеться даними метааналзу C.C. Gunderson et al. (2012) [8], за результатами якого показано, що лише 77,7 % пащенток з ГЕ демонструють вщповщь на гормональну терашю.
Висновки
1. Для кожно! пащентки характерна своя iндивiдуальна експресiя рецепторiв статевих гормонiв в ендометрп при його пперплази.
2. Порушення рецепторного статусу ендометрiя при неатиповiй пперплази ендометрiя характеризуються нерiвномiрною експресiею рецепторiв до статевих стерощв як у рiзних пацiенток, так i в рiзних залозах i дiлянках строми, як в рiзних залозах, так i в межах одше1 залози, тобто характерна моза!чшсть експреси рецепторiв до стеро!дних гормонiв, що грае безпосередню роль в порушеннях децидуалiзацil, iмплантацil та плацентаци i приводить до порушень фертильностг
3. При неатиповш пперплази ендометрiя спостерiгаеться значуще збiльшення порiвняно iз здоровими жшками експреси рецепторiв до RE-a i RP в залозах ендометрiя, чим в стромi, при цьому переважае пвдвищення експреси RP. Але у 27,78 % жшок з неатиповою гiперплазiею ендометр1я спостерiгаеться вiдсутнiсть або слвди iмунозабарвлення в залозах ендометр1я RE-a i 15,28 % пащенток до RP, в стромi -вщповщно 41,67% i 45,83 %, що може привести до невдач л^вання таких пащенток гормональними препаратами.
Лтература:
1. Гюльмамедова И. Д. Значение эндометриального фактора при лечении бесплодия методами вспомогательной репродукции. Вестник неотложной и восстановительной медицины. 2008; 9(4): 496-500.
2. Дубшша В.Г., Вiзiр К.М. Стан маткового кровотоку при пперплази ендометр1я у жшок репродуктивного вжу. Здоровье женщины. 2016; 7: 141-143.
3. Носенко Е.Н., Саенко А.И., Постолюк И.Г. Рецепторный статус эндометрия у бесплодных женщин с неудачными попытками вспомогательных репродуктивных технологий. Таврический медико-биологический вестник. 2013; 16(2); 2 (62): 80-82.
4. Павловская М.А. Гиперплазия эндометрия у женщин фертильного возраста: клиника, диагностика, патогенез и возможности терапии. Журнал Гроденского государственного медицинского университета. 2015; 2(50):123-7.
5. Чумак З.В., Зелинский А. А., Шаповал Н. В., Истерин Н. С. Оценка гормонально-рецепторного статуса и пролиферативной активности гиперплазированного эндометрия. Одеський медичний журнал. 2014; 2: 66-70.
6. Chandra V, Kim JJ, Benbrook DM, Dwivedi A, Rai R. Therapeutic options for management of endometrial hyperplasia. J Gynecol Oncol. 2016; 27(1): e8. doi: 10.3802/jgo.2016.27.e8.
7. Emons G, Beckmann MW, Schmidt D, Mallmann P. New WHO Classification of Endometrial Hyperplasias. Geburtshilfe Frauenheilkd. 2015 Feb; 75(2): 135-136. doi: 10.1055/s-0034-1396256. 2Trimble CL, Method M, Lu K, et al. Management of Endometrial Precancers. Obstet Gynecol. 2012; 120(5): 1160-1175.
8. Gunderson CC, Fader AN, Carson KA, Bristow RE.Oncologic and reproductive outcomes with progestin therapy in women with endometrial hyperplasia and grade 1 adenocarcinoma: a systematic review. Gynecol Oncol. 2012;125(2):477-82. doi: 10.1016/j.ygyno.2012.01.003.
9. Upson K, Allison KH, Reed SD et al. Biomarkers of progestin therapy resistance and endometrial hyperplasia progression. Am J Obstet Gynecol. 2012; 207(1): 36.e1-36.e8. doi: 10.1016/j.ajog.2012.05.012.
References:
1. Gulmamedova ID. Importance of the endometrial factor in the treatment of infertility by methods of assisted reproduction. Herald of urgent and reconstructive medicine. 2008; 9 (4): 496-500.
2. Dubinina VG, Vizir KM Condition of uterine blood flow in hyperplasia of endometrium in women of reproductive age. Health of a woman. 2016; 7: 141-143.
3. Nosenko OM, Sayenko AI, Postoluk I.G. Receptor status of endometrium in infertile women with unsuccessful attempts of assisted reproductive technologies. Taurian Medical and Biological Journal. 2013; 16 (2); 2 (62): 80-82.
4. Pavlovskaya MA. Hyperplasia of the endometrium in women of fertile age: clinic, diagnosis, pathogenesis and treatment options. Journal of the Grodno State Medical University. 2015; 2 (50): 123-7.
5. Chumak ZV, Zelinsky AA, Shapoval NV, Isterin NS Estimation of the hormonal-receptor status and proliferative activity of hyperplastic endometrium. Odessa medical journal. 2014; 2: 66-70.
6. Chandra V, Kim JJ, Benbrook DM, Dwivedi A, Rai R. Therapeutic options for management of endometrial hyperplasia. J Gynecol Oncol. 2016; 27(1): e8. doi: 10.3802/jgo.2016.27.e8.
7. Emons G, Beckmann MW, Schmidt D, Mallmann P. New WHO Classification of Endometrial Hyperplasias. Geburtshilfe Frauenheilkd. 2015; 75(2): 135-136. doi: 10.1055/s-0034-1396256. 2Trimble CL, Method M, Lu K, et al. Management of Endometrial Precancers. Obstet Gynecol. 2012; 120(5): 1160-1175.
8. Gunderson CC, Fader AN, Carson KA, Bristow RE.Oncologic and reproductive outcomes with progestin therapy in women with endometrial hyperplasia and grade 1 adenocarcinoma: a systematic review. Gynecol Oncol. 2012;125(2):477-82. doi: 10.1016/j.ygyno.2012.01.003.
9. Upson K, Allison KH, Reed SD et al. Biomarkers of progestin therapy resistance and endometrial hyperplasia progression. Am J Obstet Gynecol. 2012; 207(1): 36.e1 -36.e8. doi: 10.1016/j.ajog.2012.05.012.
Работа поступила в редакцию 25.08.2017 года.
Рекомендована к печати на заседании редакционной коллегии после рецензирования
УДК 616-006-036.66-053.4-071:4-071:616-036.82:615.838
Г. А. Шаповалова
КЛ1Н1ЧНА ХАРАКТЕРИСТИКА Д1ТЕЙ З ОНКОЛОГ1ЧНИМИ ЗАХВОРЮВАННЯМИ, ЩО ЗНАХОДИЛИСЬ НА РЕАБ1Л1ТАЦП В УМОВАХ ДИТЯЧОГО САНАТОР1Ю м. ТРУСКАВЕЦЬ
ДУ «Украшський науково-дослвдний шститут медично! реабштаци та курортологи МОЗ
Украши», м. Одеса
Summary. Shapovalova G. A. CLINICAL FEATURES OF CHILDREN WITH ONCOLOGICAL DISEASES WHO HAD REHABILITATION IN CHILDREN SANATORIUM OF TRUSKAVETS. - Ukrainian Research Institute of Medical Rehabilitation and Balneology", Odessa. - e-mail: nymba. [email protected]. Urgency of the research: the comorbid pathology in the children at remission of oncodiseases is numerous and it requires differential approach during health resort treatment. The objective: to gloss clinically over the children with oncological diseases who had been rehabilitated in children sanatorim of Truskavets. Methods: general clinical examination, definition of leukocytal intoxication index (LII), cardiac output, nonspecific adaptive response (NAR), psychological testing. Results: boys and girls (equally) of
© Г. А. Шаповалова
