CC BY
53
46
Тема номера: ПУЛЬМОНОЛОГИЯ. АЛЛЕРГОЛОГИЯ
'4 (2З) октябрь 2GG7 г.
10. Hanifin J. M., Paller A. S., Eichenfield L. et al. US Tacrolimus Ointment Study Group. Efficacy and safety of tacrolimus ointment treatment for up to 4 years in patients with atopic dermatitis. J Am Acad Dermatol. — 2005 Aug; 53 (Suppl 2): 177-85.
11. Ashcroft D. M., Dimmock P., Garside R., Stein K., et al. Efficacy and tolerability of topical pimecrolimus and tacrolimus in the treatment of atopic de-
rmatitis: meta-analysis of randomized controlled trials. — Pediatrics. — 2005, Sep; 116: 3: 334-42.
12. Sugiura T., Goto K., Ito K., Ueta A., et al. Chronic zinc toxicity in an infant who received zinc therapy for atopic dermatitis. J. Dermatolog Treat. — 2005, Aug; 16: 3: 142-8.
Использование антибактериальных свойств хитозана при атопическом дерматите
С. Н. 1<УЛИКОВ, Д. А. ДОЛБИН, Ю. А. ТЮРИН, ФГУН Казанский НИИЭМ Роспотребнадзора
Стафилококки часто становятся причиной поражения кожных покровов у человека, в том числе играют значимую роль в развитии стафилодермий, экземы и раневых инфекций.
В нашей работе была исследована антибактериальная активность биогенного поликатиона — хитозана в отношении клинических изолятов стафилококков выделенных с кожи больных атопическим дерматитом.
Особенности структуры хитозана обуславливают ряд привлекательных свойств этого биополимера — гипоаллергенность, биодеградируемость, биосовместимость, иммуномодулирующие и сорбционные способности [2, 3]. Было показано, что хитозан проявляет и антибактериальную активность как в отношении грамотрицательных так и грамположительных бактерий [1]. Это позволяет использовать хитозан в медицинских целях в качестве составного компонента присыпок, гелей и мазевых форм при местном лечении инфицированных участков кожи.
В работе использовали крабовый хитозан со средневязкостной моллекулярной массой 700 кДа и степенью ацетилирования 15% (ЗАО Биопрогресс, г. Щелково) [4]. Культуру бактерий стафилококка инкубировали в течение 4 часов. Выращенные таким образом бактериальные культуры бактерий использовали в экспериментах на определение антибактериальной активности хито-зана. Для определения антибактериальной активности хитозана к 850 мкл 0,1 М натрий-ацетатному буферу с рН 6,0 добавляли 50 мкл раствора хитозана в том же буфере до конечной концентрации
0,01-0,001% (масса/объем). В опытные и контрольные (без хитозана) варианты добавляли по 100 мкл бактериальной суспензии. Смеси инкубировали 1 ч. После окончания инкубации количе-
ство живых клеток определяли методом высева на твердую питательную среду. По соотношению количества колоний в опытных и контрольных вариантах рассчитывали процент живых бактерий.
Было показано, что количество КОЕ в опыте на несколько порядков меньше, чем в контроле. Это позволяет рекомендовать хитозан как антимикробный агент для местной терапии кожных инфекций стафилококковой этиологии.
Следует отметить, что хитозан — это гетерополимер биологическая активность которого широко варьирует в зависимости от его физико-химических характеристик — молекулярной массы, степени ацетилирования, молекулярно массового распределения и др. Поэтому представляется перспективным получение более эффективных форм хитозана в отношении антибактериальной активности к стафилококкам, а также к другим патогенных и условно-патогенных микроорганизмам.
ЛИТЕРАТУРА
1. Герасименко Д. В., Авдиенко И. Д., Банникова Г. Е., Зуева О. Ю., Варламов В. П. / Прикладная Биохимия и Микробиология. — 2004. — Т. 40. — № 3. — С. 301-306.
2. Куликов С. Н., Чирков С. Н., Ильина А. В., Лопатин С. А., Варламов В. П. / Влияние молекулярной массы хитозана на его противовирусную активность в растениях. // Прикладная биохимия и микробиология. — 2006. — Т. 42. — № 2. — С. 224-228.
3. Хитин и хитозан: получение, свойства и применение. / Под ред. К. Г. Скрябина, Г. А. Вихоревой, В. П. Варламова. — М.: Наука, 2002, 368 с.
4. www.chitin.ru (сайт Российского хитинового общества).
Диагностика кишечных гельминтозов у пациентов с атопической патологией
Д. А. ДОЛБИН, Л. Р. СМИРНОВА, Ю. А. ТЮРИН, С. Н. КУЛИКОВ, ФГУН Казанский НИИЭМ Роспотребнадзора
Приходится констатировать, что в данный момент проблема распространенности кишечных паразитозов резко обостряется (3, 4, 6). Несмотря на то, что предложены методы ПЦР-диа-гностики кишечных гельминтозов и протозоозов, основными остаются именно копроскопические методы выявления данной группы заболеваний человека. Но, эти методы обладают рядом существенных недостатков: яйца ряда гельминтозов не удается выявить в миграционной стадии жизненного цикла; если в кишечнике паразитируют самцы и неполовозрелые самки; если в кишечнике паразитируют только самки, то выделяться будут
неоплодотворенные яйца, вносящие дополнительную путаницу в картину, наблюдаемую при микроскопировании, которые значительно снижают их эффективность.
Одним из путей улучшения диагностической эффективности гельминтоовоскопических (и шире — копроскопических) методов исследования является применение комбинированных способов диагностики гельминтозов и протозоозов, использующих флотационную систему, состоящую из нескольких ингредиентов [1, 2, 5].
На базе консультативно-диагностической поликлиники инфекционно-аллергических заболеваний ФГУН «Казанский НИ-
'4 (23) октябрь 2GG7 г.
Тема номера: ПУЛЬМОНОЛОГИЯ. АЛЛЕРГОЛОГИЯ
47
ИЭМ» проведено обследование комбинированными методами фекалий пациентов с подозрением на аскаридоз. Больные были направлены врачами-аллергологами, а также врачами-педиатра-ми с подозрением на глистную инвазию, среди них дети составили 43,3%, взрослые — 56,6%, всего обследовано 127 больных.
Взрослые больные предъявляли жалобы на уртикарные или пятнисто-папулезные высыпания (16,6%), часто в сочетании с отеками по типу Квинке, направлялись в поликлинику с диагнозом «Хроническая рецидивирующая крапивница», «Рецидивирующий дерматит». Часть больных (12,2%) была направлена с диагнозом «Атопическоий дерматит», 20% предъявляли жалобы на заложенность носа, периодический сухой кашель, приступы удушья и были направлены в поликлинику с диагнозом «Бронхиальная астма, аллергический ринит». Дети предъявляли жалобы на периодический сухой кашель (44,8%), кашель с мокротой (19,7%), приступы затрудненного дыхания (35,4%) и направлялись в поликлинику с диагнозом «Рецидивирующий обструктивный бронхит, бронхиальная астма», 33,4% с диагнозом «Атопический дерматит». Из анамнеза кроме основных, отмечены жалобы на пониженный аппетит, тошноту, рвоту, диспептические явления, боли в эпигастральной или околопупочной областях. У значительной части больных отмечались головные боли (44,8%), повышенная утомляемость (72,4%). Более чем у половины больных по анамнезу отмечался контакт с землей (в летнее и осеннее время проживали на даче). В 100% случаев у больных имелись признаки интоксикации. Со стороны внутренних органов — в 64,5% была выявлена гепато-мегалия, в 62,9% болезненность в области живота.
Больным проводилось комплексное обследование включающее: общий анализ крови, кожное тестирование (по показаниям), определение уровня общего (ИФА), и специфических (по показаниям) 1дЕ методом иммуноблотинга, определение антител класса 1дМ и в к антигенам лямблий, проводилось исследование кала на цисты лямблий (в нативном препарате и с использованием консерванта Сафаралиева). Всем больным было проведено комплексное исследование фекалий гельминтоовоскопическим комбинированным методом в нашей модификации, который
имеет большую диагностическую эффективность по сравнению с общепринятыми методами [1].
При использовании трехингредиентного комбинированного копроскопического метода, нам удалось существенно увеличить выявляемость яиц гельминтов и цист простейших, паразитирующих в кишечнике, а так же сократить количество повторных исследований необходимых для точного диагноза. При проведении обследования больные были разделены на 2 группы: 1-я — преимущественно респираторный синдром (47,2%); 2-я — преимущественно кожный синдром (52,8%). При кожном синдроме у 15 (22,3%), при легочном синдроме у 13 (21,6%) больных обнаружены яйца аскарид.
Таким образом, примененный нами подход позволил с минимальными затратами увеличить диагностическую эффективность копроскопической диагностики такого важного паразитарного заболевания как аскаридоз у пациентов с атопической патологией.
литература
1. Долбин Д. А., Лутфуллин М. Х., Латыпов Д. Г. Сравнительная эффективность различных гельминтоовоскопических методов диагностики при неоаскаридозе телят. // РАН. Основные достижения и перспективы развития паразитологии. — 2004. — С. 163-164.
2. Латыпов Д. Г., Лутфуллин М. Х. и др. Модифицированный гельмин-тоовоскопический метод для диагностики трематодозов крупного рогатого скота. // Тр. ВИГИСа. — 2003. — Т. 39. — С. 136-145.
3. Онищенко Г. Г. Эпидемиологическая обстановка в Российской Федерации и основные направления деятельности по ее стабилизации. // Мат. к докл. на VIII Всероссийском съезде эпидемиол., микробиол. и паразитол.: Москва, 26-28 марта 2002 г. — М., 2002.
4. Покровский В. И., Онищенко Г. Г. и др. Эволюция инфекционных болезней в России в ХХ веке. — М., «Медицина», 2003. — С. 599-616.
5. Сафиуллин Р. Т. Сравнительная эффективность копроскопических методов диагностики гельминтозов свиней и их усовершенствование на основе стандартизации. // Тр. ВИГИСа. — 2001. — Т. 37. — С. 149-159.
6. Сергиев В. П., Лобзин Ю. В. и др. Паразитарные болезни человека (протозоозы и гельминтозы). — С.-Петербург, «Фолиант», 2006. — С. 2-444.
Выявление антигенов плесневых грибов рода А$регд111и$ с помощью амперометрических иммуноферментных сенсоров
Е. В. ХАЛДЕЕВА, Н. И. ГЛУШКО, С. А. ЛИСОВСКАЯ, ФГУН Казанский НИИЭМ Роспотребнадзора, Казань
Плесневые грибы рода АБре^ПиБ нередко выявляются при культуральных исследованиях проб, отобранных из наружных слуховых проходов, носовых пазух, а также при исследовании мокроты. При этом АБре^ПиБ (итндаШБ является основным возбудителем инвазивного аспергиллеза, наиболее часто поражающего бронхолегочную систему, а АБре^ПиБ тдег способен вызывать различные заболевания ЛОР-органов, а также нередко выделяется в ассоциациях с другими возбудителями микозов. В то же время, доказать этиологическую роль грибов в каждом конкретном случае достаточно сложно, поскольку плесневые грибы нередко рассматривают как контаминацию, вследствие распространенности их спор в окружающей среде.
Основу успешной терапии аспергиллеза составляют ранняя диагностика и своевременное назначение эффективных анти-микотиков. Однако диагностика этого заболевания затруднена, вследствие низкой эффективности микологических и гистологических исследований, и как следствие — необходимости проведения дополнительных, весьма сложных и дорогостоящих исследований (компьютерная томография и рентгенография лег-
ких, бронхоскопия, биопсия очагов поражения). Подтверждением инвазивного процесса является присутствие в крови антигена соответствующего гриба. Однако существующие тесты выявляют совокупность антигенов АБре^ИиБ Брр., и позволяют достоверно определять антиген лишь у больных с тяжелыми формами аспер-гиллеза.
В связи с этим разработка чувствительного и селективного способа определения антигенов АБре^ПиБ (итндаШБ и АБрег-gillus тдег является достаточно актуальной задачей. Одним из способов решения этой проблемы является использование имму-ноферментных сенсоров, позволяющих проводить быстрое, чувствительное и селективное определение биологически активных веществ, в том числе антигенов патогенных грибов [1-3].
Цель работы: разработка амперометрических иммунофер-ментных сенсоров (ИФС) для определения антигена (Аг) плесневых грибов АБре^ПиБ тдег и АБре^ПиБ (читндаШБ. Разработанные ИФС состояли из биочувствительной части, включающей совместно иммобилизованные антитела (Ат) против АБре^ПиБ тдег или АБре^ПиБ (итндаШБ и ферментную метку (холинэстеразу),
