CC BY
78
(не только описанных в статье, но и таких, как ячмень, пайза, капуста белокачанная, томаты, картофель, лен, соя и др.) говорят о большой перспективности продолжения исследований. СИ
Summary
In the article the results of genetic and biotechnological methods use in the development of new forms and cultivars of agricultural crops are stated: lupine yellow, winter triticale, oat, spring wheat, sandy sainfoin, winter rye, transgenic rapeseed with gene of chicken interferon. The basic directions and prospects of the further development of biotechnology in plant breeding are noted.
ff See: http://innosfera.by/2016/06/ Genetic-biotechnological_methods
Литература
1. Купцов Н.С., Такунов И.П.Люпин - генетика, селекция, гетерогенные посевы.-Брянск; Клинцы, 2006.
2. Шишлов М.П. и др. Роль современных селекционных и генетико-биотехнологическихметодов в создании исходного материала и сортов овса и ячменя // Материалы Междунар. науч.- практ. конф. «Принципы и методы оптимизации селекционного процесса сельскохозяйственных растений, 14-15 июля 2005, Жодино. С. 107-114.
3. Шишлова А.М. Преодоление постгамной несовместимости при межвидовых гетероплоидных (2х х 6х) скрещиваниях овса / А.М. Шишлова, И.А. Гордей, М.П. Шишлов // Генетика. Т. 29, №1. 1993. С. 91-98.
4. Шишлова А.М., Шишлов М.П. Создание новых форм голозерного овса на основе гетероплоидных (2х х 6х) скрещиваний // Материалы 8-й Междунар. науч.- практ. конф. Белорусского общества генетиков и селекционеров.-Мн., 2002. С. 185-187.
5. Шишлова А.М. Эффективность использования эмбрио-культуры in vitro при создании межвидовых гибридов овса / А.М. Шишлова и др. // Сельскохозяйственная биотехнология. II Международная научно-практическая конференция. Горки, 3-6 декабря 2001 г.- Горки, 2002. С. 323-325.
6. Зыкин В.А., Белан И.А., Козлова Г.Я., Колмаков Ю.В. Прогресс и регресс в селекции яровой мягкой пшеницы в условиях Западной Сибири // Селекция сельскохозяйственных культур. Омск, 1987. С. 56-61.
7. Чекель, Е.И. Эспарцет: особенности возделывания / Е.И. Чекель, С.В. Абраскова, В.В. Крицкая // Современные ресурсосберегающие технологии производства растениеводческой продукции в Беларуси: сб. науч. материалов, 2-е изд., доп. и перераб. / Науч.- практ. центр НАН Беларуси по земледелию.- Мн., 2007. С. 258-264.
8. Geiger, H.H. Hybrid rye and Heterosis / H.H. Geiger, Т. Miedaner // Genetics and Exploitation of Heterosis in Crops.- Madison, Wisconsin, USA, 1999. Р.439-450.
9. Geiger, H.H. Cytoplasmic male sterility in rye (Secale cereale L.) / H.H. Geiger, F.W. Schnell // Crop. Sci.- 1970. Vol. 10. P. 56-60.
10. УрбанЭ.П.Использование ЦМС Р-и G-типов в селекции и семеноводстве гетерозисных гибридов F1 озимой ржи (Secale cereale L.) / Урбан Э.П., Гордей С.И. // Земледелие и селекция в Беларуси. 2013. №49. С. 349-358.
11. http://bch.cbd.int/managementcentre/
Наталья Кухарчик,
руководитель отдела биотехнологии Института плодоводства НПЦ НАН Беларуси по картофелеводству и плодоовоще-водству,
доктор сельскохозяйственных наук, доцент
Биотехнологии
в плодоводстве Беларуси
Основные биотехнологические исследования в области плодоводства сосредоточены в нескольких научных организациях Национальной академии наук Беларуси. Темы Института плодоводства - оздоровление и размножение in vitro, создание свободных от вирусов (virus free) коллекций плодовых и ягодных культур, диагностика и молекулярная характеристика системных патогенов (вирусы, фитоплазмы), эмбриокульту-ра в селекции ранних сортов и получении межвидовых гибридов косточковых культур. Институт генетики и цитологии занимается паспортизацией сортов, выделением маркеров устойчивости к болезням. В Центральном ботаническом саду ведутся работы по размножению брусничных; на Гомельской и Брестской областных сельскохозяйственных опытных станциях (ОСХОС),
в Гродненском зональном институте растениеводства, а также в Белорусской государственной сельскохозяйственной академии - по размножению плодовых и ягодных культур, созданию оздоровленных коллекций.
Биотехнологические исследования в области культуры тканей и органов in vitro весьма перспективны и являются частью большого перечня технологических операций в сельском хозяйстве. В плодоводстве эта методика используется:
■ при освобождении от системных патогенов (вирусов, фито-плазм, бактерий), как отдельно, так и в комплексе с хемо- и термотерапией in vitro;
■ депонировании генотипов при нормальной и минимальной вегетации, создании коллекций сортов, форм и гибридов;
■ массовом размножении посадочного материала;
■ регенерации растений после криоконсервации;
■ ускоренном размножении единичных экземпляров хозяйственно полезных генотипов;
■ обмене растительным материалом с минимальными затратами на подтверждение карантинного соответствия.
Оздоровление плодовых и ягодных растений in vitro
В течение 1998-2015 гг. в отделе биотехнологии Института плодоводства изучалась
распространенность вирусов (методом иммуноферментного анализа) на основных промышленных плодовых и ягодных культурах (вишня, черешня, слива, алыча, яблоня, земляника садовая, смородина, крыжовник, малина, ежевика, голубика, брусника, клюква). Исследования были направлены не только на оценку общего фитосанитарного состояния насаждений. Основной целью мониторинга было выделение virus free растений для использования их в промышленном пи-томниководстве в качестве базовых супер-суперэлитных (ССЭ) клонов, пригодных для получения оздоровленного посадочного материала.
Кроме того, был выполнен блок работ по оздоровлению растений in vitro. Вирусные заболевания плодовых и ягодных культур являются хроническими и системными: однажды пораженный экземпляр остается неизлечимым в течение всей жизни и, как правило, все его органы инфицированы. Использование таких растений в качестве маточных при вегетативном размножении способствует массовому распространению болезней.
Сотрудниками отдела биотехнологии впервые установлена возможность оздоровления смородины черной, земляники садовой, малины, сортов и подвоев вишни и яблони белорусского сортимента от патогенных вирусов в культуре in vitro с использованием методов апикальных меристем, термо- и хемотерапии. Однако обнаружена высокая видовая и сортовая дифференциация по степени элиминации патогенов у плодовых и ягодных растений. Так, вирус RRV полностью исчезает при использовании апикальных меристем у земляники садовой и не удаляется у смородины черной. Эффективен этот метод при оздоровлении вишни от вируса кольцевой пятнистости малины RRV (81,1%),
смородины - от вируса огуречной мозаики (45,5%), земляники садовой в течение двух этапов терапии - от RRV, SLRV, TomRSV, (100%). Освобождение вишни от ApMV, PDV, смородины черной - от вирусов TBRV и SLRV наступает в 16,2; 19,2; 25,0 и 18,2% случаев соответственно.
Результативность термотерапии в культуре in vitro в элиминации сокопереносимых вирусов смородины черной несколько выше, чем культуры апикальных меристем (от TBRV - 42,6%, SLRV - 31,9%, CMV - 62,5%), однако повышенная чувствительность смородины к высоким температурам не позволяет рекомендовать этот метод для применения у большинства сортов. Опыты показали, что сочетание культуры in vitro и хемотерапии наиболее эффективно инактивирует вирусы. На основе выполненных исследований предложен и запатентован совместно с Институтом биоорганической химии НАН Беларуси способ оздоровления вишни от RRV новыми препаратами отечественного производства.
Новейшие знания о патогенезе инфекционных агентов требуют биологической диагностики вирусов, непереносимых соком. Методом тестирований на древесных индикаторах установлено отсутствие ямчатости древесины (Stem pitting), эпинастия (Spy epinasty), истощения (Spy decline), пролиферации яблони (AP-MLO), размягчения древесины (RW-MLO). Определен перечень наиболее чувствительных индикаторов, адаптированных к условиям Беларуси: Malus sylvestris cv. R12740 7A - для диагностики хлоротической пятнистости листьев яблони (ACLSV), Lord Lambourne - для обнаружения мозаики яблони (ApMV), Malus sylvestris cv. Spy 227 - для выявления симптомов истощения (Spy decline), Malus sylvestris cv. Virginia Crab - для определения ямчатости древесины (Stem pitting).
Выполнен системный анализ распространенности вирусов на плодовых и ягодных растениях, результативности микроразмножения in vitro; результативности оздоровления от вирусов с использованием апикальных меристем, термотерапии и хемотерапии. По его итогам разработана и внедрена в питомниковод-ство Беларуси новая научно обоснованная схема получения высококачественного посадочного материала плодовых и ягодных культур, включающая обязательный мониторинг лабораторными методами наиболее опасных системных патогенов на всех этапах производства посадочного материала (26 вирусов), в том числе в маточных насаждениях, в процессе оздоровления, размножения и депонирования.
Коллекции
посадочного материала
Сотрудниками отдела биотехнологии Института плодоводства в соавторстве с коллегами из Института защиты растений, Гомельской ОСХОС разработаны технологии получения и хранения оздоровленного от системных патогенов посадочного материала смородины черной (2005), земляники садовой (2006), клоновых подвоев яблони (2006), вишни и сливы (2009), груши (2014), смородины красной (2006), аронии черноплодной (Aronia melanocarpa) и крыжовника (2013), винограда (2015); технологический регламент содержания и размножения оздоровленных маточников (2015).
По состоянию на 2015 г. в Институте плодоводства депонируется ССЭ 34 сортов яблони класса А - более 200 растений, свободных от вирусов ACLSV, ApMV, ASGV. При тестировании насаждений в течение 1999-2004 гг. вирус хлоротической пятнистости листьев яблони был обнаружен в среднем у 59,32%
растений, вирус бороздчато-сти яблони - у 15,38%, вирус мозаики яблони (ApMV) - не более чем в 3,50% случаев. По данным за 2012-2015 гг., ACLSV выявлен в среднем у 25,66% экземпляров, ASGV- 0,75%, ApMV - 0,38%. Снижение уровня инфицирован-ности обеспечено благодаря регулярному мониторингу насаждений и использованию для размножения здорового материала.
Коллекция груши в отделах селекции подовых культур и пи-томниководста насчитывает 15 сортов (45 деревьев), свободных от хлоротической пятнистости листьев яблони класса А. Из 49 протестированных в 2012 г. маточных растений только 3 оказались инфицированы вирусом ACLSV (6,12%). Зараженность в среднем по сортам в предыдущие годы исследований составляла 19,57%.
Слива и алыча крупноплодная представлены 21 сортом класса А (57 растений - сливы и 29 -алычи), свободным от вирусов PDV, PNRSV, PPV, ApMV, ACLSV. При последнем тестировании маточных насаждений был выявлен только 1 случай поражения вирусом некротической кольцевой пятнистости косточковых культур.
Вишен и черешен класса А предлагается 15 сортов (33 растения - вишни и 38 - черешни), свободных от вирусов PDV, PNRSV, PPV, ApMV, ACLSV, CLRV, RRV. При последнем тестировании маточных насаждений выявлено 11 растений, пораженных вирусом некротической кольцевой пятнистости косточковых культур (15,5%).
Вторая часть коллекции создана с использованием оздоровления от вирусных патогенов методами культуры апикальных меристем и хемотерапии in vitro, которые применялись при получении безвирусных клонов сортов вишни, сливы и ягодных культур и клоновых подвоев плодовых культур.
Выращиваются in vitro корне-собственные свободные от 7 вирусов (PDV, PNRSV, CLRV, PPV, ApMV, ACLSV, RpRSV) растения-регенеранты 6 сортов вишни (Новодворская, Ласуха, Гриот белорусский, Ровесница, Ливенская, Вянок), а также 2 сортов сливы (Даликатная, Венгерка белорусская) и 1 - алычи (Комета), свободных от PDV, PNRSV, PPV, ApMV, ACLSV.
Для земляники садовой закладка ССЭ маточных насаждений проводится ежегодно, поскольку срок ее эксплуатации не превышает двух лет. При диагностике вирусных болезней выделяются растения, свободные от ArMV, RRV, SLRV, TBRV, TomRSV. В 2010-2015 гг. вирусные патогены на землянике садовой не выявлены. По состоянию на весну 2016 г. оздоровленный маточник насчитывает более 20 сортов (более 2300 экземпляров) районированных и для научных исследований: Альфа, Вента, Вима Занта, Данге, Дачница, Деснянка кокинская, Дукат, Зен-га Зенгана, Кимберли, Классика, Кокинская заря, Кокинская поздняя, Кокинская ранняя, Красный берег, Лорд, Русич, Сельва, Сла-вутич, Соловушка, Фестивальная, Фламинго, Царица и др.
Для смородины черной, красной и крыжовника при выделении ССЭ растений диагностируется 7 вирусов: BCRV, ArMV, RRV, SLRV, TBRV, TomRSV, CMV. Вирус реверсии смородины черной при первичной диагностике определяется визуально, затем с помощью
ПЦР, остальные вирусы - методом иммуноферментного анализа (рис. 1).
Репозитарий смородины черной составляет 27 сортов, районированных и для научных исследований; смородины красной и белой - 7 сортов; крыжовника - 8. Всего 465 ССЭ экземпляра: смородины черной -164, красной - 69, крыжовника - 232.
Получены в культуре in vitro растения, свободные от вирусов, и создана ССЭ коллекция клонов (509 шт.) 19 сортов малины и 1 -ежевики.
В результате тестирования и размножения in vitro заготовлен посадочный материал и заложены оздоровленные маточники в защищенном грунте и in vitro сортов винограда: Маршал Фош, Бианка, Платовский, Кристалл, Агат донской.
Маточные насаждения позволили произвести in vitro оздоровленный посадочный материал и реализовать питомнико-водческим хозяйствам Беларуси и России ССЭ и СЭ саженцы земляники садовой, смородины черной и красной, малины, ежевики, крыжовника, рябины, аронии черноплодной, брусничных культур, клоновых подвоев плодовых (рис. 2).
Минеральное питание растений
Сотрудниками отдела разработаны методики размножения вишни, земляники садовой, смородины черной и красной,
Рис. 1
Выращивание ССЭ растений крыжовника и смородины в защищенном грунте
Рис. 2
Размножение в культуре in vitro земляники садовой, рябины, клоновых подвоев яблони, крыжовника, аронии
черноплодной, голубики
крыжовника, малины летней, ремонтантной и ежевики, клоновых подвоев яблони, груши, вишни, сливы и др.
Для оптимизации продуктивности совместно с Институтом физико-органической химии НАН Беларуси проведен ряд исследований по оценке минерального питания растений-регене-рантов в культуре in vitro. Предложена методика пробоподготов-ки для получения качественных и количественных показателей содержания ионов и элементов в образцах питательных сред и реге-нерантов с использованием атом-но-эмиссионной спектрометрии, CHNS-анализатора и ионной хроматографии. Определена структура потребления элементов питания и накопления их в растениях (при выращивании на искусственных питательных средах in vitro и на ионообменном субстрате в ходе адаптации). Отмечена высокая сходимость результатов, что определяет возможность применения разработок при анализе потребностей в удобрениях.
Молекулярно-
генетические
исследования
С 2010 г. начаты работы по молекулярно-генетическим исследованиям наиболее патогенных вирусов. Дана оценка четырех вирусов, поражающих плодовые и ягодные культуры в нашей стране, установлена генетическая вариабельность белорусских изолятов.
Впервые в результате молеку-лярно-генетических исследований секвенированы: геном изоля-тов вируса кустистой карликовости малины (К.ББУ) из Беларуси (БУ1, ВУЗ, БУ8, БУ22), 8 нуклео-тидных последовательностей помещены в международную базу данных (ЕМБЬ/ОепБапк) с присвоением идентификационных номеров (БК.687349-52, БК.687354-7); участок З'-некоди-руемой области РНК-2 вируса реверсии черной смородины (БК.У) из смородины черной сорта Память Вавилова; фрагменты генома изолятов вируса мозаики яблони
(ApMV) из сортов яблони, выращиваемых в Беларуси; 6 областей генома мРНК белорусских изо-лятов вируса Шарки (PPV) сливы (BY33, BY154, BY155, BY181-3), 2 полных генома вируса (BY101, BY181), которые помещены в международную базу данных (EMBL/ GenBank) с присвоением им идентификационных номеров (HQ840519-24, HQ840517-18).
В результате сравнительного анализа нуклеотидных последовательностей белорусских изолятов вируса Шарки сливы и представленных в базе данных GenBank референс-штаммов (PPV-D, PPV-M, PPV-Rec, PPV-EA, PPV-W, PPV-C) выделено три штамма: D, Rec и SoC. Наиболее распространен D-штамм, полученный из растений Prunus sp. Поражение вишни и черешни данным вирусом выявлено в Беларуси впервые, что свидетельствует о расширении спектра повреждаемых PPV культур и потенциально опасно для промышленных насаждений в стране.
Филогенетический анализ нуклеотидных последовательностей показал: все изоляты RBDV группировались в зависимости от вида растения, из которого они были получены, были родственны другим изолятам из малины и отличались от выделенных из винограда; корреляции между группированием изоля-тов из малины и их географическим происхождением не обнаружено; кластерирование изоля-тов BRV не зависело от их географического происхождения или конкретного растения; изоляты ApMV группировались независимо от происхождения или экземпляра растения, изоляты вируса из Беларуси были родственны выделенным в Польше, Чехии и Бразилии из розы, груши и яблони; изоляты вируса Шарки группировались в зависимости от штамма вируса, штаммы М, D, Rec и W образовывали отдельные кластеры, белорусские изоляты
формировали отдельную группу совместно с представителями PPV-C штамма вируса, к С-штам-му относятся две группы изоля-тов: SoC и SwC (впервые выделенные из растений вишни и черешни соответственно).
Определены пары праймеров для массового мониторинга вирусов RBDV, BRV, ApMV, PPV методом ПЦР.
Сотрудничество в области биотехнологий
Совместно с лабораторией иммунологии и вирусологии Научно-практического института садоводства, виноградарства и пищевых технологий в Молдове произведены антитела к двум изолятам вируса Шарки сливы для ИФА методом DAS ELISA: штаммам С (С №43 Молдова) и D (М №38 Молдова). Наибольшая разрешающая способность была характерна для антител, выделенных из изолята С №43. Оптическая плотность образцов превышала показатели отрицательного контроля в 4-17 раз.
Установлены закономерности по накоплению макро- и микроэлементов у здоровых и пораженных вирусом реверсии растений смородины черной (BСRV): устойчивое (до 2,5 раз) превышение концентрации Р и К во всех органах как в период покоя, так и при активной вегетации; избыток Р, Са и К в древесине однолетнего побега в полном покое и в фазе активного роста; снижение концентрации микроэлементов (Mg, B, Fe, Cu, Zn, Na) во всех органах растений в период покоя (содержание Mn и Zn в древесине однолетнего побега у зараженных растений уменьшается в 2,7 и 1,8 раза соответственно, в вегетативных и галловых почках содержание Mn падает в 2,9 и 3,7 раза, Zn - в 1,2 и 2,1 раза). Исследования проведены совместно с Институтом физико-органической
химии НАН Беларуси. Разработаны рекомендации по диагностике и оздоровлению смородины черной от BCRV.
Сотрудниками отдела биотехнологии предложена методика диагностики основных вирусных инфекций плодовых и ягодных культур, в которой описаны вирусы, способы отбора образцов для тестирования зараженности растений, лабораторные методы тестирования. Диагностика осуществляется с использованием методов иммуноферментного анализа (ИФА, DAS-ELISA) и ПЦР (IC-RT-PCR), представлено 26 вирусных патогенов.
Совместно с биологическим факультетом БГУ разработаны Методические указания по предотвращению распространения и ликвидации очагов карантинного заболевания - бактериального ожога и Методические рекомендации по диагностике и молекулярной дифференциации бактерий Erwinia amylovora, возбудителя бактериального ожога плодовых культур.
На основании искусственного заражения патогенными бактериями Erwinia amylovora Е3 и Pseudomonas syringae pv. syringae дифференцированы по степени устойчивости к болезнетворным бактериям сорта и клоновые подвои яблони, а также сорта груши.
Биотехнологические методы широко применяются в первую очередь в селекции плодовых культур на устойчивость к патогенам, где необходимо как использование генетически отдаленных форм для привлечения генов устойчивости, так и сбор в культуре in vitro коллекции патогенов для изучения их биологии и проведения искусственного заражения.
Одна из важнейших задач современной селекции вишни и черешни - создание сортов, проявляющих иммунность к кокко-микозу (Blumeriella jaapii (Rehm)
Arx.). Разработана методика определения устойчивости вишни: выделение Blumeriella jaapii (Rehm) Arx. в чистую культуру; его ПЦР-идентификация; получение моноспоровых изолятов, споровой суспензии для инокуляции; культивирование in vitro; искусственное заражение растений ex vitro и оценка симптомов заболевания; проведение RAPD-анализа, оценка результатов ПЦР на основе прайме-ра OL28. Предполагается двусторонняя диагностика устойчивости к коккомикозу с использованием искусственного заражения и метода RAPD и PCR. Все работы проводятся в лабораторных помещениях, что обеспечивает экологическую безопасность.
Эмбриокультура изолированных зародышей in vitro впервые изучалась в Беларуси Н.В. Кухарчик и М.С. Кастриц-кой. Разработанные схемы изоляции в культуру in vitro и стерилизации характеризуются высокой повторяемостью результатов и позволяют культивировать гибридные зародыши родов Prunus L. и Cerasus Mill. разной степени дифференциации. Показана возможность регенерации микрорастений вишни из зародышей слабодифференцирован-ных, находящихся на поздней глобулярной стадии (5,2% реге-нерантов), а также из выделенных из опавших плодов (10,4%). Установлено, что при выращивании in vitro в роде Cerasus Mill. отмечается поливариантность развития эмбрионов. Наиболее перспективно, с точки зрения клонирования гибридных реге-нерантов in vitro, сочетание эм-бриокультуры и вегетативного размножения на последующих пассажах. Получен генетически разнообразный материал в родах Prunus L. и Cerasus Mill. для дальнейшего использования в селекции, выделены перспективные гибриды черешни раннего срока созревания и межвидовые
соответственно. Аналогичные результаты получены в маточных и производственных посадках малины и смородины черной. Так, сорт смородины Церера, полученный in vitro, по урожайности превышает традиционно размноженный на 3,3 кг с одного куста, или в 2,4 раза (урожайность 22,7 и 9,4 т/га соответственно).
Для получения здорового посадочного материала заложены ССЭ маточные насаждения на площади 6,14 га. В том числе 3,5 га: 13 сортов малины, 26 -земляники садовой, 3 - смородины красной, 9 - черной, 2 - крыжовника; 1,0 га: клоновых подвоев яблони, вишни, сливы, груши; 1,64 га: маточно-черенковый сад семечковых и косточковых растений. За период 2005-2015 гг. произведено саженцев класса «А»: смородины черной - 59 265 шт., земляники садовой - 196 300, малины - 82 590, смородины красной - 1 500, крыжовника - 200, клоновых подвоев - 103 100, саженцев косточковых и семечковых культур - 13 115 шт.
В Брестской ОСХОС в 2005 г. также проводились аналогичные исследования продуктивности земляники садовой. По всем основным показателям оздоровленные in vitro экземпляры превосходят традиционно выращенные: превышение урожайности в 1,8
Рис. 3 Гибрид
черешни 95/11-31, полученный in vitro
гибриды Prunus L. от разнохро-мосомных скрещиваний для селекции на зимостойкость (рис. 3).
Отел биотехнологии Института плодоводства реализует и передает для НИР сортовой посадочный материал в культуре in vitro всех плодовых и ягодных культур, имеющихся в коллекции, как для учреждений Беларуси, так и в другие страны (Грузия, Иран, Казахстан, Китай, Латвия, Литва, Молдова, Польша, Россия, Таджикистан, Украина). По результатам исследований опубликовано более 250 научных работ, 3 монографии, защищено 8 кандидатских и 1 докторская диссертация.
Тиражирование оздоровленного посадочного материала
В Гомельской ОСХОС работа в области биотехнологии началась в 2005 г. с полевого опыта по изучению продуктивности посадки земляники садовой в насаждениях, заложенных по традиционной технологии, а также оздоровленным материалом. Установлено, что среднее количество плетей и дочерних розеток на одно выращенное традиционным способом растение составило 10,5 и 14,6 шт., после культуры in vitro - 14 и 22,9 шт.
раза, средней массы ягоды - в 1,3 раза, количества стандартной рассады - в 1,7 раза.
Отработана система получения in vitro, содержания и ухода за адаптированными клоновыми подвоями (яблони, груши, сливы) в условиях защищенного грунта. Заложен маточник клоновых подвоев яблони в открытом грунте. Разработаны элементы технологии содержания и размножения оздоровленных (ССЭ, СЭ, Э) маточников клоновых подвоев яблони, груши и сливы класса А для юго-западной зоны Республики Беларусь. По результатам тестирования методами ИФА и ПЦР заложен маточно-черенковый сад сортов яблони.
В лаборатории микрокло-нального размножения отдела садоводства Гродненского зонального института растениеводства НАН Беларуси на основе фитосанитарного отбора созданы свободные от вирусов посадки клоновых подвоев сливы (ВПК-1 и 140-2, 16 шт.); яблони (57-545, 5 шт.; 54-118, 2 шт.; 62396, 4 шт.), а также сортов яблони и груши (47 шт.). Маточные растения используются для дальнейшего размножения in vitro и получения посадочного материала. Ведется работа по микроразмножению клоновых подвоев яблони (54-118, 62-396, 10613); вишни и черешни (ВСЛ-2, Измайловский).
Таким образом, полученные в Институте плодоводства результаты исследований в области биотехнологии плодовых и ягодных культур позволили перевести производство посадочного материала на безвирусную основу, создать свободные от системных патогенов ССЭ маточные насаждения районированного в Беларуси сортимента, разработать стандарты класса «А», соответствующие рекомендациям Европейской и Средиземноморской организации по карантину и защите растений. СИ
