CC BY
124
экстрактов пустырника сердечного [6], шлемника байкальского [2] и мяты перечной [11]. По мнению многих авторов [12,15], выраженными антиоксидантными свойствами обладают халконы и проантоцианидины хмеля обыкновенного.
Таким образом, курсовоевведение экстракта «Анксиофит» на фоне хронической алкогольной интоксикации оказывает выраженное нейропротективное действие, нормализуя
ЛИТЕРАТУРА
1. Воронина Т.А., Середенин С.Б. Методические указания по изучению транквилизирующего (анксиолитического) действия фармакологических веществ // Руководство по экспериментальному (доклиническому) изучению новых фармакологических веществ. - М., 2005. - С.253-263.
2. Дамдинова Г.Х. Ноотропное действие экстракта шлемника байкальского: Автореф. дис... канд. мед. наук. - Улан-Удэ, 2001. - 20 с.
3. Королюк М.А., Иванова Л.И., Майорова И.Г. и др. Методы определения активности каталазы // Лабораторное дело. - 1988. - №6. - С.16-19.
4. Разуваева Я.Г., Николаев С.М., Кабачук Н.В., Нагаслаева
О.В. Анксиолитическое действие экстракта из соплодий Humulus lupulus (Canabaceae) // Растительные ресурсы. -2010. - Т. 46. Вып.4. - С.137-142.
5. Разуваева Я.Г., Николаев С.М., Кабачук Н.В., Нагаслаева
О.В. Влияние соплодий хмеля обыкновенного (Humus lupulus L.) на функциональное состояние нервной системы у белых крыс // Сибирский медицинский журнал (Иркутск). - 2010.
- № 1. - С.115-117.
6. Рыжикова М.А., Фархутдинов Р.Р., Зигидуллин Ш.З. Антиоксидантные свойства лекарственные растений, используемых в лечении сердечно-сосудистых заболеваний // I конгресс ассоциации кардиологов стран СНГ. - М., 1997.
- С.78.
7. Сергиенко В.И., Бондарева И.Б. Математическая стати-
поведенческие реакции в тестах «открытое поле» и ПКЛ и улучшая когнитивные функции мозга, за счет ингибирования перекисного окисления липидов и активации антиокси-дантной системы. В целом, «Анксиофит» по эффективности не уступает, а по отдельным показателям превосходит нейропротективное действие препарата сравнения - валерианы экстракта.
стика в клинических исследованиях. - М., 2006. - 256 с.
8. Стальная И.Д., Гаришвили Т.Г. Метод определения малонового диальдегида с помощью ТБК // Современные методы в биохимии. - М., 1977. - С.66-68.
9. Ушкалова А.В., Илларионова Т.С. Эффективность и безопасность антидепрессивных и седативных средств растительного происхождения // Фармация. - 2008. - №20. -С.10-14.
10. Шабанов П.Д., Калишевич С.Ю. Биология алкоголизма. - СПб., 1998. - 272 с.
11. Conforti F., Sosa S., Marrely M., Menichini F In vivo antiinflammatory and in vitro antioxidant activities of Mediterranean dietary plants // J. Ethopharmacol. - 2008. - Vol. 116. №1. - P.144-151.
12. Diaz M.N., Frei B., Vita J.A., Keaney J.F. Antioxidants and atherosclerotic heart disease // N. Engl. J. Med. - 1997. - Vol. 337.
- P.408-416.
13. Jeong J.O., An N.Y., Park S.H., Oh J.G. The anxiolytic-like effects of Scutellaria baicalensis using elevated plus-maze in rats // Kor. J. Pharmacogn. - 2004. - Vol. 35. - Р.22-27.
14. Lopez V., Martin S., Gomez-Serranillos M.P., Carretero M.E. Neuroprotective and neurochemical properties of mint extract // Phytother. Res. - 2010. - Vol. 24. №6. - P.869-874.
15. Zanoli P., Zavatti M., Rivasi M., Brusiani F., et al. Evidense that beta-acids fraction of hops reduced central GABAergic neurotransmission // J. Ethnopharmacol. - 2007. - Vol. 109. №1. -P.87-92.
Информация об авторах: 670047, г. Улан-Удэ, ул. Сахьяновой, 6, ИОЭБ СО РАН, ОБАВ, тел. (3012) 433463, e-mail: [email protected], Разуваева Янина Геннадьевна - старший научный сотрудник, к.б.н.; Торопова Анна Алексеевна -научный сотрудник, к.б.н.; Тумутова Эржена Чимитдоржиевна - аспирант; Николаев Сергей Матвеевич - заведующий, д.м.н., профессор; Верлан Надежда Вадимовна - декан, д.м.н., профессор; Убеева Ираида Поликарповна - профессор, д.м.н.;
Жигмитов Арсалан Амурович - аспирант.
© ТОРОПОВА А.А., БАТОЦЫРЕНОВА Э.Т., ОЛЕННИКОВ Д.Н., ТАНХАЕВА Л.М., ШАНТАНОВА Л.Н., НИКОЛАЕВ С.М. - 2012 УДК 615.322
АНТИОКСИДАНТНАЯ АКТИВНОСТЬ СУХОГО ЭКСТРАКТА ПОДЗЕМНЫХ ОРГАНОВ ASTRAGALUSMEMBRANACEUS И ЕГО ФРАКЦИЙ
Анна Алексеевна Торопова1, Эльвира Токтохоевна Батоцыренова1, Даниил Николаевич Оленников1,
Лариса Максимовна Танхаева1, Лариса Николаевна Шантанова1, Сергей Матвеевич Николаев 1,2 ('Институт общей и экспериментальной биологии СО РАН, г. Улан-Удэ, директор - д.б.н., проф. Л.Л. Убугунов, отдел биологически активных веществ, зав. - д.м.н., проф. С.М. Николаев; 2Иркутская государственная академия последипломного образования, ректор - д.м.н., проф. В.В. Шпрах, кафедра клинической фармакологии, зав. -
д.м.н., проф. Н.В. Верлан)
Резюме. Проведено исследование антиоксидантной активности сухого экстракта корней астрагала перепончатого (Astragalus membranaceus (Fish.) Bunge) и выделенных из него фракций с применением методов in vitro. Установлено, что сухой экстракт A. membranaceus обладает выраженной инактивирующей активностью в отношении радикалов ДФПГ, супероксид-радикалов и молекул оксида азота. Выявлено наличие Fe2+-хелатирук>щей активности и способности к защите биологического субстрата от перекисного повреждения.
Ключевые слова: Astragalus membranaceus, антиоксидантная активность, ДФПГ, супероксид-радикалы, оксид азота.
ANTIOXIDANT ACTIVITY OF EXTRACT FROM ASTRAGALUS MEMBRANACEUS UNDERGROUND PARTS AND ITS FRACTIONS
A.A. Toropova1, E.T. Batotsyrenova1, D.N. Olennikov1, L.M. Tankhaeva1, L.N. Shantanova1, S.M. Nikolaev1-2
('Institute of General and Experimental Biology SB RAS; 2Irkutsk State Medical Academy of Continuing Education)
Summary. The antioxidant activity of Astragalus membranaceus extract and its fractions using in vitro methods was investigated. It was found that the remedies shown expressed antioxidant activity, including inactivating of DPPH free radicals, superoxide-radicals and NO molecules. The Fe2+-chelating activity and the ability to protect a biological substrate against peroxidative damage has been revealed.
Key words: Astragalus membranaceus, antioxidant activity, DPPH, superoxide-radicals, nitrogen oxide.
Проблемы химической регуляции окислительного стресса и поиск биологически активных веществ, обладающих ан-тиоксидантной активностью, находятся в центре внимания исследователей различных направлений экспериментальной биологии и медицины [3]. В физиологических условиях окислительно-восстановительные процессы, обеспечивающие энергетические потребности клеток и утилизацию кислорода в тканях, контролируются регуляторными системами, поддерживающими сбалансированное взаимодействие реакций образования продуктов оксидации и антиокисли-тельных факторов. Нарушение этого взаимодействия, сопровождаемого активацией свободнорадикальных процессов и накоплением продуктов перекисного окисления липидов, рассматривается в качестве универсального механизма повреждения биологических мембран, лежащего в основе ряда патологических процессов [9].
Применение синтетических антиоксидантов часто осложняется побочными эффектами, поэтому все большее внимание уделяется природным, в частности растительным антиоксидантам, обладающим низкой токсичностью и отсутствием побочных эффектов при длительном приеме [3].
Объектом настоящего исследования является сухой экстракт подземных органов A. membranaceus и выделенных из него фракций.
Целью настоящей работы является определение антиок-сидантной активности сухого экстракта подземных органов A. membranaceus и его фракций в экспериментах in vitro.
Материалы и методы
Растительное сырье - подземные органы A. membranaceus было собрано в окрестности г. Улан-Удэ (сентябрь 2011 год). Для получения сухого экстракта A. membranaceus (СЭА) измельченное сырье экстрагировали этанолом 60-70%, спиртовое извлечение концентрировали до водного остатка и высушивали в вакууме. Для получения фракций сухой экстракт A. membranaceus суспендировали в воде в соотношении 1:10, полученную суспензию подвергали жидко-фазной экстракции гексаном, хлороформом, этилацетатом и бутанолом.
Антирадикальную активность определяли с применением DPPH-метода [8]. Антиоксидантную активность оценивали по степени влияния исследуемого фитосредства на динамику перекисной деградации р-каротина (CBA-метод) в системе олеиновая кислота-ДМС0-Н202 [7]; влияние исследуемого средства на связывание супероксидных анион-радикалов (О2--) - в неэнзиматической системе феназин ме-тосульфат/НАДН [5]; Бе2+-хелатирующую активность определяли фенантролиновым методом [4]; связывание молекул оксида азота (NO) - нитропруссидным методом [6]. Влияние A. membranaceus и его фракций на процесс перекисного окисления липидов (ПОЛ) изучали в модельной системе содержащей суспензию желточных липопротеидов (ЖЛП-метод). Величиной антиоксидантной активности считали концентрацию исследуемых фитосредств, необходимую для ингибирования (связывания) 50% реактивных частиц [2]. Все эксперименты проводили в трехкратной повторности.
В работе использовали ионол (Sigma) и аскорбиновую кислоту (АК) (Sigma). Спектрофотометрические исследования проводили на спектрофотометре UV-Vis-mini (Shimadzu) в кварцевых кюветах с толщиной поглощающего слоя 10 мм.
Корреляционный анализ проводили с применением пакета программ Advanced Grapher ver. 2.11 (Alentum Software Inc.), статистическую обработку - согласно рекомендациям [1].
ЛИТЕРАТУРА
1. Дерффель К. Статистика в аналитической химии. - М.,
Результаты и обсуждение
В модельных системах in vitro, в которых происходила генерация свободных радикалов, сухой экстракт A. membranaceus и его фракции проявляли выраженные анти-оксидантные свойства (табл. 1).
Установлено, что СЭА обладает антирадикальной активностью в отношении DPPH-радикала - IC50 = 60,0 мкг/мл. Наибольший вклад в проявление данного вида активности исследуемого фитосредства вносит хлороформная (IC50=52,1 мкг/мл) и этилацетатная фракции (IC50=58,1 мкг/мл).
Показано, что фитопрепарат проявлял способностью к защите биологического субстрата от перекисного повреждения (CBA-метод). Антиоксидантная активность сухого экстракта A. membranaceus, определенная методом CBA, составляет 20,1 мкг/мл. Для ионола (препарат сравнения) данный показатель составил 1,7 мкг/мл (IC50=1,7 мкг/мл). Антиоксидантная активность (СВА-метод) выделенных фракций возрастала в ряду: водная (IC50=15,3 мкг/мл) > хлороформная > этилаце-татная > бутанольная > гексановая (IC50 = 83,1 мкг/мл).
Сухой экстракт A. membranaceus и его фракции ингибировали образование ТБК-активных продуктов in vitro. Антиоксидантная активность исследуемых средств возрастает в ряду: хлороформная (IC50 = 153,4 мкг/мл) > бутанольная > этилацетатная > А. membranaceus > водная > гексановая (IC= 3466,0 мкг/мл).
При изучении влияния исследуемого средства и его фракций на ряд активных форм кислорода (О2И- и NO) и ионы Fe2+ выявлено, что сухой экстракт A. membranaceus обладает способностью к их инактивации. В эксперименте установлено, что исследуемое фитосредство обладает умеренной Fe2+-хелатирующей активностью (IC50=4,9 мг/мл).
В отношении к супероксид-анион радикалам наблюдалась умеренная выраженность действия СЭА (IC50=500,0 мкг/мл). Для препарата сравнения - аскорбиновой кислоты, данный показатель составил 101,0 мкг/мл. Данный вид активности исследуемого фитосредства обусловлен, вероятно, присутствием фенольных соединений, о чем свидетельствовал тот факт, что наибольшая О2И- - связывающая активность характерна для этилацетатной (фракции (IC50=430,0 мкг/мл).
Сухой экстракт A. membranaceus проявлял выраженную способностью к связыванию молекул NO (IC50=242,4 мкг/ мл), превосходящей таковую препарата сравнения - аскорбиновой кислоты (IC50=1140,0 мкг/мл).
Таким образом, полученные данные свидетельствуют о том, что сухой экстракт подземных органов A. membranaceus и его фракции обладают способностью к восстановлению биологических субстратов, проявляют выраженное антира-дикальное действие и ингибируют процесс перекисной деградации p-каротина. Результаты проведенных исследований дают основание рассматривать исследуемое фитосредство в качестве потенциального антиоксидантного средства, характеризующегося присутствием ряда биологически активных веществ, представителей классов фенольных соединений и полисахаридов.
1994. - 98 с.
2. Клебанов Г.И., Бабенков И.В., Теселкина Ю.О. и др.
Таблица 1
Антиоксидантная активность сухого экстракта Astragalus membranaceus и его фракций, IC50
Объект DPPH-метод, мкг/мл CBA-метод, мкг/мл ЖЛП-метод, мкг/мл Fe2+ мг/мл мкг/мл NO мкг/мл
СЭА 60,0±1,4 20,1±1,1 494,2±7,2 4,93±0,12 500,0+7,2 242,4 + 5,0
BF 277,1±4,2 57,0±2,1 182,2±5,7 2,84+0,11 714,0+8,1 > 5000
WF > 5000 15,3±0,8 1903,0±32,7 6,42±0,28 500,0+7,2 > 5000
HF > 5000 83,1±2,5 3466,0±41,3 - > 5000 401,0 + 11,0
CF 52,1±1,1 22,1±1,3 153,4±4,4 2,05+0,12 > 5000 993,1 + 32,8
EF 58,1±1,4 34,1±1,4 355,7±6,2 6,85+0,32 430,0+7,0 913,2 + 22,2
АК а 4,8±0,2 - 50,8±1,2 0,15+0,01 101,0+3,2 1140,0+34,2
Ионол а 45,1±1,4 1,7±0,1 - - - -
Примечания: БРРН-метод - антирадикальная активность в отношении ДФПГ«, СВА-метод -антиоксидантная активность в системе в-каротин-олеиновая кислота-Н2О2-ДМСО, ЖЛП-метод - антиоксидантная активность в отношении накопления ТБК-активных продуктов, Fe2+ - Fe2+-хелатирующая активность, О2'~ - связывание супероксид-анион радикала, N0 - связывание молекул оксида азота (II); Фракции: BF - бутанольная, WF - водная, ОТ - гексановая, CF - хлороформная, EF - этилацетатная; а - вещество сравнения.
Оценка антиокислительной активности плазмы крови с применением липопротеидов // Лабораторное дело. - 1988. - №5.
- С.59-62.
3. Костюк В.А., Потапович А.И. Биорадикалы и биоантиоксиданты. - Минск, 2004. - 174 с.
4. Оленников Д.Н., Зилфикаров И.Н., Торопова А.А., Ибрагимов Т.А. Химический состав сока каллизии душистой (Callisia fragrans Wood.) и его антиоксидантная активность (in vitro) // Химия растительного сырья. - 2008. - №4. - С.95-100.
5. Chen A.-S., Taguchi T., Sakai K., et al. Antioxidant activities of chitibiose and chititriose // Biol. Pharm. Bull. - 2003. - Vol. 26. №9. - P1326-1330.
6. Govindarajan R., Rastogi S., Vijayakumar M. Studies on the antioxidant activities of Desmodium gagenticum // Biol. Pharm. Bull. - 2003. - Vol. 26. №10. - P1424-1427.
7. Olennikov D.N., Tankhaeva L.M. Lamiaceae carbohydrates.
I. Pectinic substances and hemicelluloses from Mentha x piperita // Chem. Nat. Comp. - 2007. - Vol. 43. №5. - P501-507.
8. Seyoum A., Asres K., El-Fiky F.K. Structure-radical scavenging relationships of flavonoids // Phytochemistry. - 2006.
- Vol. 67. №18. - P2058-2070.
9. Valko M., Leibfritz D., Moncol J., et al. Free radicals and antioxidants in normal physiological functions and human disease // Int. J. Biochem. Cell Biol. - 2007. - Vol. 39. №1. - P44-84.
Информация об авторах: 670047, г. Улан-Удэ, ул. Сахьяновой, 6, ИОЭБ СО РАН, ОБАВ, тел. (3012) 433463, e-mail: [email protected], Торопова Анюта Алексеевна - научный сотрудник, к.б.н; Батоцыренова Эльвира Токтохоевна
- аспирант; Оленников Даниил Николаевич - старший научный сотрудник, к.фарм.н.; Танхаева Лариса Максимовна -старший научный сотрудник, к.фарм.н.; Шантанова Лариса Николаевна - заведующий лабораторией, д.б.н., профессор; Николаев Сергей Матвеевич - заведующий отделом, д.м.н., профессор.
СЛУЧАИ ИЗ ПРАКТИКИ
© ВАЛУЕВА И.В., КИРГИЗОВА О.Ю. - 2012 УДК: 617.7-007.681-089:615.821.2
ВЛИЯНИЕ РЕФЛЕКСОТЕРАПИИ НА ФУНКЦИИ ЗРИТЕЛЬНОЙ СИСТЕМЫ У БОЛЬНЫХ ГЛАУКОМОЙ ПОСЛЕ ОПЕРАТИВНОГО ЛЕЧЕНИЯ
Ирина Викторовна Валуева, Оксана Юрьевна Киргизова (Иркутская государственная медицинская академия последипломного образования, ректор - д.м.н., проф.
В.В. Шпрах, кафедра рефлексотерапии и традиционной китайской медицины, зав. - д.м.н. О.Ю. Киргизова)
Резюме. В статье представлены результаты использования методов рефлексотерапии у 86 больных с первичной открытоугольной глаукомой 2-3 стадии (средний возраст больных составил 57,4±0,27 лет после антиглаукоматоз-ных операций. Показана высокая эффективность комплексного рефлексотерапевтического лечения у больных с первичной открытоугольной глаукомой. Отдаленные результаты обследований выявили стойкость эффекта в течение 3-6 месяцев после проведённого курса иглорефлексотерапии, длительность которого зависит от стадии заболевания и сопутствующей патологии.
Ключевые слова: офтальмология, глаукома, рефлексотерапия.
THE EFFECT OF ACUPUNCTURE ON THE FUNCTION OF VISUAL SYSTEM IN THE PATIENTS AFTER SURGICAL TREATMENT OF GLAUCOMA
I.V. Valueva, O. Y. Kirgizova (Irkutsk State Medical Academy of Continuing Education)
Summary. The paper presents the results of the use of acupuncture methods in 86 patients with primary open-angle glaucoma after antiglaucoma surgery. We show the high efficiency of integrated acupuncture treatment in patients with primary open-angle glaucoma. The remote results of examination revealed durability of effect within 3-6 months after conducted course of acupuncture, which duration depends on a stage of a disease and accompanying pathology.
Key words: ophthalmology, glaucoma, reflexology.
В настоящее время достигнуты значительные успехи в хирургическом и консервативном лечении глаукомы. Однако, даже при нормализации офтальмотонуса, в силу особенностей течения глаукомного процесса, в большинстве случаев продолжается снижение зрительных функций [4,12,13]. Традиционная консервативная терапия не обеспечивает адекватного кровоснабжения зрительного нерва и профилактику ухудшения зрительных функций более чем у половины больных с нормализованным внутриглазным давлением (ВГД). Особенно высокий процент прогрессирования заболевания отмечается, как правило, у больных пожилого и старческого возраста с сопутствующей патологией, особенно с сердечно-сосудистыми заболеваниями [5,6].
Эти проблемы может решать адекватная медицинская реабилитация больных после оперативного лечения. Наиболее распространенные методы реабилитации - это лекарствен-
ная терапия и физиотерапия [2,3].
Высокий рост аллергизации больных, побочные действия, а также недостаточная эффективность некоторых лекарственных препаратов, применяемых для улучшения гемодинамических и зрительных функций, приводят к более широкому внедрению в клиническую практику немедикаментозных методов лечения.
Однако методы физиотерапии, несмотря на признанную эффективность, тоже имеют существенные ограничения. Большинство применяемых факторов, являясь мощными физическими раздражителями, способствуют активной регенерации в области фильтрационной подушки прооперированного глаза. Это может нарушать нормализацию внутриглазного давления и способствовать снижению зрительных функций.
Методом, свободным от всех перечисленных ограниче-
