CC BY
3
Юсупов М.М.
Андижанский государственный медицинский институт АЛКАЛОИДЫ BERBERIS. XXYI. ИССЛЕДОВАНИЕ
Аннотация: Из молодых побегов berberis amurensis rupr выделен амуренин (I) относяшийся к новому типу изохинолиновых алкалоидов. Химическими и спектральными методами установлено его строение.
Ключевые слова: Ллкалоид,ИК-спектр, ЯМР-спектр, масс-спектр, ПМР-спектр, Хлороформ-метанол, амуренин, УФ-спектр, Метилирование амуренина
Yusupov M.M.
Andijan State Medical Institute
АЛКАЛОИДОВ BERBERIS AMURENSIS RUPR
Annotation: Лтыгепт (I), which belongs to a new type of isoquinoline alkaloids, was isolated from the phenolic part of the sum of alkaloids in the roots of berberis amurensis rupr. Its structure has been established by chemical and spectral methods.
Keywords: Alkaloid, IR spectrum, NMR spectrum, mass spectrum, PMR spectrum, Chloroform-methanol, аmurеnin, UV spectrum, methylation of Amu^^n.
Из молодых побегов В. ашиге^Б Rupr., кроме ранее выделенных алкалоидов, получены берберрубин, оксиакантин, псевдопальматин и новое апорфиновое основание амуренин. На основании спектральных данных и химического превращения установлено его строение.
Berberis amurensis Rupr. относится к семейству ВегЬепёасеае и произрастает на Дальнем Востоке. Плоды, листья и корни этого растения издавна применяются в народной медицине при лечении гипертонии, заболевании печени, а также как кровоостанавливающее средство. В научной медицине настойка листьев применяется при маточном кровотечении /I/.
Ранее из этого растения быль выделены берберин, ятроррицин, пальматин, магнофлорин, бербамин и бербамунин /2-6/.
В настоящей работе приводятся результаты исследования алкалоидов молодых побегов В. аmurensis произрастающих в окрестностях села Барабаш (Приморский край, Хасанский район). Экстракцией этанолом изолировали 0,34 % суммы алкалоидов. Хроматографированием полученной суммы на колонке с силикагелем выделили берберин, берберубин, псевдопальматин, ятрорритцин и новое основание амуренин(!)
в виде хлоридов. Из третичных суммы алкалоидов выделили оксиакантин и бербамунин. Известные алкалоиды, выделенные из этого растения, идентифицировали путем сравнения физико - химических констант, спектральных данных, а также сравнением с подлинными образцами /7/. Среди них берберрубин, оксиакантин и псевдопальматин были выделены из данного растения впервые.
Амуренин(1) - оптически активное, кристаллическое основание, обладает фенольными свойствами, дает кристаллическое 0 -ацетилпроизводное (II). В ИК - спектре I имеются полосы поглощения при 3200 см~\ активный водород). 1470, 1580, 1610 см-/( бифенильная система) /6/. УФ - спектр I имеют максимумы при 265, 275, 305,( Ig E 4,23; 4,25; 4,16), характерные для монозамещенных апорфиновых алкалоидов в кольце D /8/.
При масс - фрагментации I, под электронным ударом, наряду с образованием ионов с m/z 326(М+), 325(M-I), 309(М-15), 296 268(М-58), образуется максимальный ион с m/z 58, что характерно для четвертичных апорфинов /9/. Данные спектров ПМР I и II, снятые в CD3 OD и отнесение сигналов протонов приводятся в таблице.
По значению химического сдвига трехпротонный синглет в спектре ПМР I при 3,60 и однопротонный синглет при 6,82 м.д. отнесены к C¡ — ОСН3 и СН3- H, соответственно. Сигналы трех ароматических протонов проявляются в виде АВС - системы. Метоксильная группа при 3,82 м.д. и гидроксильная группа может находиться при С-2, С-9 или С-10. Для установления расположения гидроксильной и метоксильной группы в кольцах А и Д мы сравнительно изучали спектры ПМР I и II, а также был измерен внутримолекулярний ядерный эффект Оверхаузера (ЯЭО), для о -ацетиламуренина (II), между метоксилами ароматическими и метиленовыми протонами.
При облучении радиочастотным полем метоксила при 3,82 м.д., наблюдался ЯЭО (18%) на уширенный синглет при 6,88 м.д., которые соответствуют расположению метоксила при положении С-2 и ароматического протона при С-3. Это подтверждается также увеличением интенсивности сигнала Н-3 на 76 % при мощном облучении области метиленовых протонов 2,90-3,85 м.д за счет ЯЭО и подавления малых КССВ от Н-4-протонов. Измерение ЯЭО (2%) от второго метоксила ( 3,60 м.д ) на ароматический дублет ( 7,95 м.д.: j=I,8 Гц) показала, что второй метоксил и дублетний ароматический протон находятся при положениях С-I и C-II соответственно. Величина константы j=I.8 Гц свидетельствует о мета-расположении ближайшего протона ароматической ABC- системы. Этим партнёром может быть только Н-9 протон. Сигнал этого протона представлен хорошо разрешенным дублет-дублетом при 6,96 м.д. с константами 8,5 Гц и I,8 Гц. Третий ароматический сигнал ABC системы проявляется при 7,35 м.д. с константами 8,5 Гц и I.0 Гц который соответствует Н-8 протону.
Малая константа (1,0 Гц ) Н-8 протона возникает от взаимодействия с Н-7 протонами метиленовой группы. Это подтверждается увеличением интенсивности сигнала Н-8 протона на 62% при мощном облучении области метиленовых протонов за счет подавления малой константы от Н-7 протонов и ЯЭО.
Следовательно, ацетил замещенным положением в цикле Д является С- I 0-углерод, при котором располагается гидроксильная группа а амуренине (I).
Сигналы ^метильных групп находятся при 3,00 и 3,36 м.д они представляют собой два слабоуширенных синглета.
Смещение в слабое поле сигналов ароматический протонов в цикле Д при переходе от спектра I к II также соответствует вышеописанному расположению заместителей. Для дублетов при 7,72; 7,11; 6,65 м.д. сдвиг в слабое поле равен 0,23; 0,24 и 0,31 м.д соответственно, а для синглета при 6,82 м.д. сдвиг в слабое поле лишь на 0,06 м.д.
Ранее было показано, что в апорфиновых алкалоидах знак удельного вращения определяет абсолютную конфигурацию /8/. Следовательно в амуренине асимметрический центр при С-6а имеет R-конфигурацию.
При ионизирующем напряжении 60-70 ЭВ и температуре К0-П0, ПМР - на спектрометре Bs-567 A Tesla ( ЧСФР) в дейтерометаноле. Химические сдвиги приведены относительно внутреннего этанола ГМДС в сигма-шкале.
Для ТСХ использовали марки LS 5/40 (ЧСФР) для колочной хроматографии - силикагель марки КСК с размерами частиц П5-160 мм и системы растворителей: I) хлороформ-метанол (9:1. 4:1) ; 2) хлороформ-метанол-конц. НС1 (50:50:0.1) ; 3) хлороформ-этанол (4:1).
ЭКСТРАКЦИЯ МОЛОДЫХ ПОБЕГОВ В. AMURENSIS RUPR.
1240 г измельченных молодых побегов трехкратно экстрагидровали этонолом. Обьединенные спиртовне экстракты упарили. густой остаток обработали 5%-ным раствором соляной кислоты. Кислый раствор фильтровали двухкратно промыли эфиром. Затем подщелочили 25%-ным раствором аммиака до pH 9 и алкалоыди последовательно извлекали эфиром, хлороформ и смесью хлороформ с этанолом (4:1). После отгонки растворителей получили 0,68 г эфирной, 2,11 г хлороформной суммы и 1,34 г суммы четвертичных алкалоидов. Общая суммы алкалоидов составляет 0,34 % от веса сухого растения.
РАЗДЕЛЕНИЕ СУММЫ АЛКАЛОИДОВ
0,68 г эфирной суммы хроматографировали на колонке с силикагелем (20г). Алкалоицы элюировал хлороформ и смесью хлороформа с метанолом в разлычних соотношениях. При элюировании смесью хлороформ -метонолом (97:3) выделили 0,23 г оксиакантина, а при 96:4 - 0,34 г бербамунина.
2,I5 г хлороформной суммы хроматографировали на колонке с силикагелем аналогично эфирой суммы. При этом выделили 0,72 г берберина, 0,14 г псевдопальматина. 0,24 г берберрубина, 0,12 г ятроррицина и 0,0V г амуренина в вице хлорид.
Разделением четвертичной суммы, алкалоидов на колонке с силикагелем аналогично хлороформной суммы, выделили дополнительно 0,31 г берберина, 0,2б г ятроррицина и 0,12 г псевдопальматина в виде хлорид.
Aмуренин хлорид. Т.пл.194-195 (ацетон). /а/ D-164 (c. 0,03. СН3ОН). A^m^POBAHHE AMyPEHKH ХЛOPИДA К 0,04 г амуренина хлорида добавили 2 мл уксусного ангидрид и 0,5 мл придина. Смесь кипятили до полного растворения основания. Затем упарили на водяной бане досуха. К остатку прибавили 5 мл ацетон и нагревали до полного растворения. При охлаждении выпали бородавчастые кристаллы 0-ацетил амуренина хлорида (II). Т.пл.1б8-187. Ma^: м/z 26S (M+). 3б7, 359, 352, 325, 58(100). ИК: 17б0 см -I).
Использованные источники: l^OTm^^^^ ресурсы, под ред. Федорова A.A., Наука,Ленинград, 2005, с.2б.
2.Тоmita M., Kugo T. // J.Pharm. Soc. Japan. 19S5. V.75. P.753 C.A. 19S5. 49. 13597.
3. ^mita M., Kugo T. // J.Pharm. Soc. Japan. 19S7. V.77. P.1075 C.A. 199S. 52. 5429.
4.Юсуфбеков Х.Ю., Хусаинова X.M., Садыков Ю.Д., Aкнaзaров O.A., Порндина Т. В., Докл.
AH Тaдж.CCP. 2005. 28. V12.
5.Васильева В.Д., Найдович Л.Н. // фармация, 2012, № 4, с.33.
6. ^mita M., Kugo T. // Pharm Bull (Japan) 200б. № 4, P.121 C.A. 200V. V.51. P.4645.
7.Юсупов M.M., Каримов A., Левкович MX., Aбдуллaев Н.Д., Шакиров P. // Химия природ.
соедин., 2002 в печ.
8.Исраилов ИА.,Каримова С.У., Юнусов M.C., Юнусов С.Ю. // Химия природ,
соедин., 2000, № 3, с.279.
9.Guinaudeau H., Leboeuf M., Cave A. // Lloydia, 1995, V.38, № 4. P.2V5.
