CC BY
54
УДК 618.36:616.523:612.014.2
И.В. Довжикова
АКТИВНОСТЬ ЭНЕРГЕТИЧЕСКИХ ПРОЦЕССОВ В ПЛАЦЕНТЕ ПРИ ОБОСТРЕНИИ ГЕРПЕС-ВИРУСНОЙ ИНФЕКЦИИ
Дальневосточный научный центр физиологии и патологии дыхания СО РАМН (Благовещенск)
С помощью гистохимических методов выявлено снижение интенсивности работы сукцинат-дегидрогеназы и повышение активности, а-глицерофосфатдегидрогеназы в плаценте при. обострении герпес-вирусной инфекции во время беременности.
Ключевые слова: плацента, герпес, сукцинатдегидрогеназа, а-глицерофосфатдегидрогеназа
ENERGY PROCESSES ACTIVITY IN PLACENTA AT HERPES-VIRUS INFECTION RECURRENCE
I.V. Dovzhikova
Far Eastern Scientific Centre of Physiology and Pathology of Respiration, Siberian Branch of Russian
Academy of Medical Sciences, Blagoveshchensk
Using histochemical methods we found that succinate dehydrogenase activity was decreased, and a-glycerophosphate dehydrogenase activity was increased in placentas from patient with herpes-virus infection recurrence.
Key words: placenta, herpes, succinate dehydrogenase, a-glycerophosphate dehydrogenase
Герпес-вирусные инфекции способствуют развитию различных осложнений беременности [2, 5]. Мы считаем, что для успешного предупреждения и лечения формирующихся нарушений необходимо раскрытие всех патогенетических звеньев развивающейся патологии.
В последнее время существует тенденция на совместное исследование работы ферментов сук-цинат- и а-глицерофосфатдегидрогеназ. Одновременное изучение этих энзимов позволяет оценить энергетические процессы в клетке. Как известно, сукцинатдегидрогеназа (СДГ) принадлежит к так называемой сукцинатоксидазной системе ферментов, объединенных в цепь в митохондриях, она участвует в цикле лимонной кислоты и дает информацию об активности этого цикла. Энзим а-глицерофосфатдегидрогеназа (а-ГФДГ) отражает состояние другого резервного стимулятора
— а-глицерофосфатного шунта.
Целью нашей работы было изучение активности энзимов сукцинатдегидрогеназы и а-глицерофосфатдегидрогеназы в плаценте при беременности, осложненной герпес-вирусной инфекцией.
МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ
Материалом для исследования послужили 65 ворсинчатых хорионов, полученных при проведении медицинских абортов при сроке 5 — 12 недель развития от беременных с обострением хронической герпес-вирусной инфекции I типа (30 случаев) и не имевших такового (35 случаев — контрольная группа). Для исключения влияния других факторов помимо герпес-вирусной инфекции мы не включали женщин, имеющих другие острые и хронические инфекционные, соматические заболевания, а
также осложненный акушерско-гинекологический анамнез.
В определении типоспецифических антител класса М и G к вирусу простого герпеса I иммуно-ферментным методом использовали стандартные тест-системы ЗАО «Вектор-Бест» (Новосибирск, Россия) на аппарате спектрофотометр <^а^Бах 2100» (США).
Для изучения работы сукцинат- и а-глицерофосфатдегидрогеназ был применен метод с солями тетразолия для определения дегидрогеназ по прописи Z. Lojda et а1. (1965).
Количество образующихся продуктов реакции проводили путем подсчета на программе компьютерной цитофотометрии методом измерения на стандартную единицу площади 0,1 (зонд) в 100 различных точках объекта.
РЕЗУЛЬТАТЫ И ОБСУЖДЕНИЕ
Было проведено определение сукцинатдегидро-геназы — фермента, который окисляет янтарную кислоту в фумарат. В контрольной группе энзим выявлялся в синцитиотрофобласте и цитотрофо-бласте ворсинок различного калибра, начиная с 5-й недели беременности. Активность его увеличивалась до конца третьего месяца онтогенеза, особенно в синцитиальных узелках, что объясняется физиологическими причинами. Цитофотометриче-ский показатель интенсивности гистохимической реакции на СДГ на сроке 5 — 7 недель беременности составил 2,33 ± 0,067 усл. ед., на сроке 8 — 10 недель
— 3,56 ± 0,113 усл. ед., на сроке 11 — 12 недель — 4,90 ± 0,091 усл. ед.
Анализ плацент беременных, перенесших герпес-вирусную инфекцию, показал, что интенсивность реакции на сукцинатдегидрогеназу в
этих случаях падала. При 5 — 7-недельном сроке развития цитофотометрический показатель достоверно (р < 0,001) снизился до 1,08 ± 0,034 усл. ед., при 8 — 10-недельном — до 1,63 ± 0,098 усл. ед., при 11 — 12-недельном — до 1,97 ± 0,078 усл. ед.. Этот энзим цикла Кребса непосредственно связан с цепью переноса электронов. Два электрона ФАДН2 прямо переносятся на атомы железа фермента, а конечным акцептором этих электронов служит молекулярный кислород. Специфическими активаторами фермента служат АТФ и восстановленная форма убихинона, который в митохондриях играет роль непосредственного акцептора электронов от сукцинатдегидрогеназного комплекса. Ввиду вышесказанного уменьшение интенсивности гистохимической реакции на СДГ свидетельствовало о снижении данного пути энергетического обеспечения.
Фермент а-глицерофосфатдегидрогеназа выявлялся в ворсинчатых хорионах контрольной группы, также начиная со второго месяца беременности, в синцитиотрофобласте и цитотро-фобласте ворсин. Энзиматическая активность гистохимической реакции на этом сроке цитофотометрически оценивалась в 1,88 ± 0,011 усл. ед. По мере прогрессирования беременности интенсивность обмена а-ГФДГ немного повышалась до 2,02 ± 0,006 усл. ед. при 8—10-недельной стадии развития и до 2,26 ± 0,004 усл. ед. при 11 — 12 неделях гестации. В ворсинчатых хорионах, выделенных от женщин, перенесших во время беременности обострение герпес-вирусной инфекции, при проведенном нами гистохимическом исследовании отмечалось усиление интенсивности гистохимической реакции на а-глицерофосфатдегидрогеназу. Цитофотометрически ее содержание при регистрации титра антител класса IgG к вирусу простого герпеса 1 : 12800 достоверно (р < 0,001) повысилось до 2,59 ± 0,095 усл. ед. на сроке беременности 5 — 7 недель, до 3,19 ± 0,049 усл. ед. на сроке 8 — 10 недель, до 4,97 ± 0,101 усл. ед. на сроке 11 — 12 недель.
Причин для такого повышения может быть названо несколько. В работах зарубежных исследователей было показано, что активации связывания а-глицерофосфатдегидрогеназы с акцептором способствует оксид азота. Кроме того, было выяснено, что это связывание активируется супероксидными радикалами [6]. В наших работах по изучению
влияния герпес-вирусной инфекции на плаценту было зафиксировано увеличение интенсивности работы NO-синтазы и содержания перекисей жирных кислот [1, 4]. Данные явления могут объяснять обнаруженное нами усиление активности а-ГФДГ.
Кроме этого, изменение активности а-глицерофосфатдегидрогеназы при беременности, осложненной герпесом, может отразиться и на течении других процессов, в которых принимает участие глицерофосфат, таких, как липидный обмен, работа рецепторного аппарата и др. [3].
ВЫВОДЫ
В результате наших исследований установлено повышение активности а-глицерофосфат-дегидрогеназы и снижение интенсивности работы сукцинатдегидрогеназы, свидетельствующее о том, что в плаценте при обострении герпес-вирусной инфекции во время беременности энергетическое обеспечение идет в основном по альтернативному пути.
ЛИТЕРАТУРА
1. Довжикова И.В. Гистохимическая характеристика активности НАДФН-диафоразы (маркера NO-синтазы), аденилат- и гуанилатциклаз в плаценте при беременности, осложненной герпесвирусной инфекцией // Бюллетень физиологии и патологии дыхания. — 2003. — Вып. 15. — С. 14—19.
2. Кицак В.Я. Вирусные инфекции беременных: патология плода и новорожденных. — Коль-цово : РМАПО МЗРФ, 2004. - 84 с.
3. Климов А.Н., Никульчева Н.Г. Обмен липидов и липопротеидов и его нарушения. - СПб. : Питер Ком, 1999. — 512 с.
4. Луценко М.Т. и др. Фетоплацентарная система при герпесной инфекцию. — Благовещенск, 2003. — 200 с.
5. Anzivino E. Herpes simplex virus infection in pregnancy and in neonate: status of art of epidemiology, diagnosis, therapy and prevention // Virology J. — 2009. — Vol. 6, N 40. — Режим доступа : http:// www.virologyj.com/content/6/1/40/abstract.
6. Marin P. et al. Oxygen free radicals enhance the nitric oxide-induced covalent NAD + -linkage to glycerol-3-phosphate dehydrogenase // Biochem. J. — 1995. — Vol. 309, N 3. — P. 891 —898.
Сведения об авторах
Довжикова Инна Викторовна - к.б.н., старший научный сотрудник лаборатории механизмов этиопатогенеза и восстановительных процессов дыхательной системы при НЗЛ Дальневосточного научного центра физиологии и патологии дыхания СО РАМН (675000, г Благовещенск, ул. Калинина, 22; тел.: 8 (4162) 33-12-27, 8 (914) 394-44-03; e-mail: megapolis_5000@ mail.ru, [email protected]).
