CC BY
215
УДК 615.152.21:616.153.915-39
ЗНАЧЕНИЕ L-АРГИНИН-^ СИСТЕМЫ В ФОРМИРОВАНИИ КИСЛОРОДТРАНСПОРТНОЙ ФУНКЦИИ КРОВИ
А.Н. Глебов, В.В. Зинчук
Кафедра нормальной физиологии УО «Гродненский государственный медицинский университет»
Проводится анализ литературных и собственных данных о взаимодействии L-аргинин-NO системы и элементов крови, в частности, гемоглобина. Предполагается, что NO-зависимые механизмы модификации гемоглобина могут влиять на кислородтранспортную функцию крови при различных гипоксических состояниях.
Ключевые слова: L-аргинин-NO система, оксид азота, кровь, сродство гемоглобина к кислороду.
The analysis of literature and the obtained data of L-arginine-NO system and blood elements interaction in particular hemoglobin is being carried out. It is suggested that NO-dependent mechanisms of hemoglobin modification can affect the blood oxygen-carrying function in different hypoxia conditions.
Key words: L-arginine-NO system, oxide of nitrogen, blood, affinity of hemoglobin to oxygen.
Сродство гемоглобина к кислороду (СГК) определяет диффузию кислорода из альвеолярного воздуха в кровь, а затем на уровне капилляров в ткань [48]. Свойство гемоглобина обратимо связывать кислород является частным случаем общей закономерности взаимодействия протеинов с ли-гандами [27]. Субъединицы гемоглобина внутри тетрамера при переходе от R- к Т-конформации (т.е. R- и Т-состояния) обусловливают кооперативные свойства, проявляющиеся в S-образной форме кривой диссоциации оксигемоглобина. Такая форма кривой диссоциации оксигемоглобина (КДО) в обычных условиях обеспечивает процессы транспорта 02 кровью, облегчая ее максимальную окси-генацию при относительно низких р02 и деокси-генацию при относительно высоких р02, улучшая доставку требуемых количеств 02 в ткани при сравнительно малых величинах кровотока [49]. Механизм кооперативности основан на стереохимичес-кой перестройке контактов субъединиц на мобильной аллостерической поверхности в зависимости от степени оксигенации. Аллостерические регуляторы, такие как 2,3-дифосфоглицерат (2,3-ДФГ), С1-, Н+, связываясь с молекулой гемоглобина в Т-состоянии и облегчая соответственно высвобождение О2, проявляют свои эффекты при субэквивалентных количествах (т.е., когда их количество меньше, чем гемоглобина). Молекула гемоглобина, взаимодействуя с компонентами внутренней поверхности мембран эритроцитов, прежде всего с 43 кЭа цитоплазматическим фрагментом - белок полосы 3 (анионообменный белок АЕ1), изменяет сродство к О2: преимущественно связывает его при низких р02 и высвобождает при насыщении 2,3-ДФГ, что позволяет рассматривать данный элемент мембраны как аллостерический регулятор функ-
ции гемоглобина [28]. Представляет интерес изучение взаимодействия гемоглобина с N0, так как он имеет гораздо более высокое сродство к геми-ческой группе дезоксигемоглобина, чем О2 и СО, что позволяет предполагать его конкурирование с кислородом за соответствующие участки на молекулах частично оксигенированного гемоглобина
[46].
Сродство гемоглобина к кислороду определяется в значительной степени аллостерическим взаимодействием между гемоглобином и различными физиологическими модуляторами (Н+, 2,3-ДФГ, СО2 и др.), которые в совокупности на уровне клеточного компартмента крови образуют внутриэрит-роцитарную систему регуляции её кислородсвязы-вающих свойств. Исследования последних лет позволили предположить, что к факторам данной системы можно отнести монооксид азота (N0), образование которого происходит из аминокислоты L-аргинина под контролем фермента N0-^^ тазы и ряда кофакторов ^-аргинин-КО система). S-нитрозирование гемоглобина может быть сберегающим механизмом, обеспечивающим доставку N0 в области с низким рН или рО2. Взаимодействие N0 с гемоглобином ставит вопрос о пара-кринной и аутокринной функции N0. Транспорт N0 как гормона в организме ограниченно проявляется при физиологических условиях, но в полной мере реализуется при фармакологических (высоких) уровнях N0 [50].
Эритроцит не ограничивает взаимодействие гемоглобина с N0 в физиологических условиях. На модели кишечника, в которой создавалась окклюзия верхней брыжеечной артерии и оценивалось образование HbFe2+N0 и диэтилдитиокарбамата с железом, показано, что N0, высвобождаемый из
эндотелиальных клеток, диффундирует прежде всего не в ткань, а в кровь [24]. Реакция NO с ге-мической группой гемоглобина может быть частично ограничена гидрофобным компонентом клеточной мембраны, лимитируя процесс его диффузии в эритроцит [17]. NO переносится через клеточную мембрану посредством специального переносчика протеина AE1, или анион-обменника. Проницаемость эритроцитарной мембраны для NO сравнительно невысока, что может иметь значение для его реакции с гемоглобином [56]. Предполагается существование цитоскелетного барьера для диффузии NO, реализуемого через особые межбелковые поры в эритроцитарной мембране, пропускная способность которых регулируется и соответственно влияет на вход NO [40]. Скорость реакции NO с гемоглобином, находящимся в эритроцитах, в 800 раз меньше в сравнении с эквивалентным его количеством, находящимся в растворе [17]. В то же время есть мнение, что мембрана эритроцита не является барьером для NO и его производных и не лимитирует взаимодействие NO с гемоглобином [37].
В артериальной крови NO в реакции с оксиге-моглобином образует нитрат и метгемоглобин, а в венозной - нитрозилгемоглобин (HbFe2+NO), способный при высоких рО2 дезинтегрироваться с участием молекулярного кислорода до гемоглобина и NO3- [38]. Гемоглобин взаимодействует с NO через высокоаффинные Fe2+-связывающие участки на геме, его сродство к NO в 8000 раз выше, чем к О2. HbFe2+NO имеет шестикоординатную форму гемических групп [32]. Спектр ЭПР HbFe2+NO в растворе является суперпозицией спектров Х- и R-конформеров гемоглобина с преимущественным образованием Т-формы, которые обусловлены обратимыми переходами от сильного до слабого (Т) взаимодействия Fe2+-гем с гистидином [5]. Нитрозилгемоглобин характеризуется выраженным эффектом Бора, что может иметь особенно важное значение при ацидозе [58].
В глобиновой цепи гемоглобина N0 связывается в форме S-нитрозотиола, а именно S-нитрозоге-моглобина ^N0-^). Цистеин (93) р-белковой цепи идентифицировали как место связывания N0 с гемоглобином [25]. При очень больших концентрациях нитрозотиолов т уйго образуются и другие формы SN0-Hb, у которых нитрозилируется аминокислота цистеин в положении 12 и 104 р- и а-белковых цепей соответственно [36]. S-нитрози-лирование гемоглобина облегчает отсоединение N0 от гема и поступление его к гипоксическим тканям. SN0-Hb выступает в роли акцептора или
донора электронов, внося тем самым вклад в ре-докс-равновесие гема, однако значение этих функций минимально в условиях покоя [46].
Переход N0 от S-нитрозотиола на гемоглобин регулируется аллостерически и функционально зависит от присоединения О2. При связывании гемоглобина с О2 в лёгких его сродство для S-нитро-зотиола растёт, а при отдаче снижается, благодаря чему N0 высвобождается в ткани. Существует О2-зависимое равновесие между SN0-Hb и HbFe2+N0 (при отсутствии низкомолекулярных тиолов, например, цистеина, мишенью N0 является гем с Fe2+, а в его присутствии следует перенос N0-груп-пы на цистеиновый остаток р-глобина) [25]. Положение редокс-равновесия между SN0-Hb и HbFe2+N0 связано с аллостерическим состоянием гемоглобина. Большие концентрации нитрозиль-ного гемоглобина обнаруживаются в деоксигени-рованной крови, и наоборот [47]. Существует цикл связывания О2 и N0 в легких и их высвобождения на периферии.
Различные по происхождению молекулы N0 реагируют с SH-группами белков и, прежде всего, альбуминами с образованием долгоживущих комплексов RSN0, обладающих вазодилататорным действием. Среди этих соединений наиболее значимым является S-нитрозоглутатион. Внутри эритроцита существует равновесие между N0, связанным с тиолами в гемоглобине ^N0-®), и мембранным белком полосы 3, на которое влияет локальное р02, регулируя тем самым вазодилятацию в соответствии с метаболическими потребностями [52]. SH-группа S-нитрозотиола существенно защищает N0 от гашения присоединением к гему. Равновесие между HbFe2+N0 и SN0-Hb связано с конформацией белка: образование SN0-Hb облегчается в R-структуре, а HbFe2+N0 преимущественно образуется в Т-. Высвобождению N0 из тиолов способствуют дезоксигенация и окисление гема (Т-структура, высокоспиновая), что согласуется с термодинамическими особенностями его связывания [18]. Первичным аддуктом гемоглобина и N0, образуемого при дыхании N0, у нормальных индивидуумов является HbFe2+N0 и в небольшом количестве SN0-Hb [41]. Глутатион влияет на равновесие SN0-Hb и HbFe2+N0, что оказывает эффект на процессы оксигенации и деоксигенации крови в капиллярах малого и большого кругов кровообращения. N0, высвобождаемый из SN0-Hb в присутствии глутатиона, не вызывает заметных сосудистых эффектов в изолированном лёгком в связи с быстрым окислением N0 и образованием метгемоглобина [22]. Главным продуктом взаимо-
действия восстановленного глутатиона с SNO-Hb in vivo, вероятно, является HbFe2NO, за счёт чего происходит модификация СГК, сдвиг кривой диссоциации оксигемоглобина вправо. По мнению Gow A.J. et al. [55], взаимодействие NO с HbO2 не уничтожает его активность, а более того, обеспечивает его сохранение («гемоглобин рационально вводит новую химию, когда его насыщение кислородом высоко, лимитируя окисление NO и сохраняя его биоактивность»).
Гемоглобин способен выполнять функцию депо NO в микроциркуляторной сети [53]. Предполагается существование транспортного и высвобождающего механизма О2 и NO в плодно-плацентарной циркуляции; О2 и NO диффундируют к фетально-му гемоглобину и высвобождаются на уровне тканей плода [20]. В сосудистой сети нитрозотиолы, образуемые при опосредуемом NO нитрозирова-нии тиолов, играют важную роль в транспорте, хранении и метаболизме NO [30]. Предполагается, что SNO-Hb действует как «аллостерически контролируемый буфер NO» [45], обменивающий свою NO-группу с тиолами среды, в том числе с глутатионом, и тем самым изменяет кровоток (выполняет роль критического фактора, определяющего доставку О2). Сравнительно стабильные вазо-активные соединения могут служить системой хранения NO. Депонирование оксида азота можно рассматривать как фактор адаптационной защиты; существует NO-индуцированная активация различных защитных факторов (белки теплового шока, простагландины, антиоксидантная система) [6]. Эндотоксемия резко повышает образование циркулирующих S-нитрозотиолов (через 5 часов после внутрибрюшинного введения крысам ЛПС уровень циркулирующего S-нитрозоальбумина возрастал примерно в 3,4 раза, а SNO-Hb - в 25 раз по сравнению с контролем) [31]. Содержание S-нит-розированного гемоглобина и альбумина в крови по данным разных авторов колеблется от 30-50 нМоль до 2,5-7 мкМоль, что может быть результатом эффекта присутствия в плазме NO2-, нестабильности SNO-Hb в присутствии гемоглобина [26]. В гемолизатах эритроцитов крыс с индуцированным стрептозотоцином диабетом был найден значимо больший уровень SNO-Hb, чем у контрольных крыс, что позволяет предполагать участие глико-зилированного гемоглобина в процессах S-нитро-зилирования, которое, в свою очередь, может нарушать функцию сосудов и участвовать в генезе диабетической микроангиопатии [23]. Обратимая секвестрация NO гемоглобином (через HbFe2+NO) играет важную роль в развитии ряда заболеваний
почек [47]. При трансплантации печени обнаружен максимум HbFe2+N0 через 60 минут после операции, что отражает его участие в ишемически-ре-перфузионных повреждениях [42]. Предполагается, что большая уязвимость зрелых внутриэритро-цитарных форм возбудителя малярии частично может быть опосредована через N0, его производные, а также их вклада в иммуноэффекторную функцию организма [54].
В тканях, сопровождающихся значительным стрессом (гипоксия), SN0-Hb может быть механизмом доставки N0 [46]. Повышенное высвобождение N0 из нитрозоформ при гипоксии снижает региональное сосудистое сопротивление [22], что является примером аллостерических свойств гемоглобина, которые улучшают транспорт О2 путём приведения в соответствие кровотока региональным потребностям в О2. Нитрозилирование гема и нитрозирование цистеина (93) в полипептидной цепи гемоглобина играют важную роль в транспорте и метаболизме N0 кровью. Образование SN0-НЬ может способствовать высвобождению N0 из гема [46]. Взаимодействие между N0 и гемоглобином важно для регуляции функций обеих молекул, однако при нахождении гемоглобина в плазме доминирующим становится гашение N0. Процессы деоксигенации SN0-окси-Hb в капиллярах обусловливают аллостерический переход гемоглобина (из R-состояния в Т-), что инициирует выход N0 [14]. При физиологическом дефиците кислорода в тканях гемоглобин за счёт конформационных изменений в положении цистеина (93) р-белковой цепи приводит местный кровоток в соответствие с кислородными потребностями [14].
Эритроциты, секвестрируя N0 в терминальных артериолах и капиллярах, уменьшают его участие в вазодилатации и тем самым, казалось бы, противодействуют реализации кислородтранспортной функции крови. Однако кислородзависимый характер равновесия между HbFe2+N0 и SN0-Hb обеспечивает соответствие кровотока с его потребностью, т.е. оптимальный баланс между потребностью в О2 и его доставкой.
Эритроциты несут примерно в 1000 раз больше N0, чем это требуется для регуляции кровотока или дилатации кровеносных сосудов [16]. Высвобождение нитрозотиолов в большом объеме (из гемоглобина) при каждом артериовенозном цикле несовместимо с жизнью, так как оно должно вызывать угрожающую для жизни гипотензию и шунтирование крови (регуляция кровотока требует лишь малых наномолярных количеств нитрозоти-олов); также это создавало бы в организме непере-
носимую метаболическую нагрузку. Гемоглобин регулирует вытеснение N0, а так как на кровоток влияют наномолярные уровни нитрозотиолов, его образование для расширения кровеносных сосудов и доставки О2 намного важнее, чем связанное с ним изменение оксигенации крови, которое может происходить лишь при его уровнях выше физиологических. Значение N0-соединений с гемоглобином необходимо оценивать через их эффект на СГК [2].
Различные соединения N0-производных с гемоглобином могут по-разному влиять на СГК всей крови [2]. Метгемоглобин и SN0-Hb повышают СГК, а HbFe2+N0 его снижает; соответственно, первые смещают кривую диссоциации оксигемог-лобина влево, а последний - вправо. N0 изменяет СГК через переход гемоглобина из конформаци-онного состояния R в Т, повышение уровня эрит-роцитарного метгемоглобина, образование нитро-зотиолов и дополнительных продуктов окисления гемоглобина [24]. р50 SN0-Hb имеет значение менее 10 мм рт. ст. [15], для раствора SN0-Hb (с 30% нитрозилированием цистеина (93) в р-белковой цепи) - 4,3±0,27 мм рт. ст. [42], а для HbFe2+N0 его величина составляет 39,6±1,5 мм рт. ст. [32]. L-ар-гинин и ингибитор N0-синтазы (№-нитро^-арги-нин) при лихорадке, индуцированной введением ЛПС, увеличивает р50станд с 33,7±1,1 до 37,1±1,3 мм рт. ст., что, в частности, обусловлено различными эффектами N0-производных гемоглобина на СГК. Высокие дозы нитроглицерина (источник N0) вызывают увеличение образования HbFe2+N0, коррелирующего с ростом значения р50 и соответствующим сдвигом кривой диссоциации оксиге-моглобина вправо [32]. В наших опытах у животных, получавших L-аргинин и подвергавшихся гипотермии, отмечается наименьший сдвиг кривой диссоциации оксигемоглобина влево [59]. Введение нитроглицерина внутрибрюшинно крысам приводило к увеличению метгемоглобина на 217,1% и р50 на 29,2%, а в условиях введения ли-пополисахарида и предварительного повышения СГК эти эффекты донора N0 усиливались [4]. После введения эндотоксина отмечалось уменьшение величины стандартного р50 на 10,9% (р<0,05) [1]. Развитие окислительного стресса у кроликов характеризовалось тем, что с учётом реальных значений рН, рС02 и температуры тела через 240 мин. после введения ЛПС реальное р50 возрастало на 9,6% (р<0,05), после введения ингибитора N0-^^ тазы при окислительном стрессе р50реал увеличивался на 42,1% (р<0,05), что отражает более выраженный сдвиг реальных кривых диссоциации ок-сигемоглобина вправо [60]. У больных серповид-
ноклеточной анемией, дышавших воздухом с низким содержанием N0 в течение 45 минут, а также при инкубации такой крови с N0 в течение 5 минут отмечались близкие изменения СГК (значение р50 уменьшалось примерно на 15%), у здоровых таких изменений не было, что, возможно, связано с малым объемом выборки [35]. Это предполагает единый механизм формирования кислородсвязы-вающих свойств крови с участием N0, реализуемый на эритроцитарном уровне. Обработка крови различными концентрациями N0 либо донорами N0 (соль Анжели и др.) повышает СГК, линейно коррелирующее с уровнем метгемоглобина, что предполагает ведущую роль последнего в модификации транспорта кислорода кровью [19].
При вдыхании воздуха, содержащего 80 проми-лей N0, уровень HbFe2+N0 возрастал в 10 раз до микромолярной области, а SNО-Hb существенно не изменялся и не имел значимых артериовеноз-ных градиентов [21]. Концентрация SN0-Hb и HbFe2+N0 в крови такова, что на каждые из этих дериватов приходится 1000 тетрамеров обычного гемоглобина, и это делает относительно малым их влияние на кислородсвязывающие свойства крови в обычных условиях [29], но при концентрациях N0 выше физиологических условий (при низком рН, добавлении инозитолгексафосфата, низкой температуре) это вполне возможно. Их влияние на модуляцию кислородсвязывающих свойств крови проявляется при высоких концентрациях (5 и более %), но в то же время их эффект может иметь важное значение для процессов газообмена на уровне капилляра [2, 59].
Одним из субстратов, необходимых для синтеза N0, является О2 (константа Михаэлиса для него в этой реакции лежит в физиологической области), что позволяет предполагать его лимитирующую роль для образования N0 [34]. При р02<30 мм рт. ст. ферментативный синтез N0 снижается [33]. О2 является важным фактором, определяющим активность N0-синтазы при гипоксии в тканях или в сосудистом русле. Её активность может ингибироваться гипоксией [57]. В гепатоцитах крыс выявлен механизм кислородной регуляции экспрессии гена индуцибельной изоформы N0-синтазы: низкое рО2 индуцирует синтез N0, что может иметь значение для формирования резистентности этих клеток к ишемическому повреждению [44]. Концентрация HbFe2+N0, судя по его ЭПР-спектроскопии в артериальной и смешанной венозной крови нормоксических и гипоксических овец при ингаляции N0, зависит от уровня О2 и N0. Существует выраженная отрицательная корреля-
ция между уровнем HbFe2+N0 и степенью насыщения крови кислородом [43]. Метаболический цикл N0 может активироваться при различных гипоксических состояниях, так как в условиях дефицита О2 восстановленные гемсодержащие белки переносят электроны на ионы N0^, восстанавливая их до N0 [7].
N0 взаимодействует с О2- с образованием пе-роксинитрита (мощного окислителя) [51], который может быть модификатором свойств гемоглобина через различные реакции [39]. Существуют два основных типа реакций пероксинитрита с гемоглобином - с гемом или аминокислотами полипептидных цепочек (тирозин, цистеин) [8]. В обычных условиях внутриэритроцитарный гемоглобин взаимодействует с нитрит-ионами с преимущественным образованием метгемоглобина, при окислительном стрессе - преимущественно с возникновением нитритного метгемоглобина, который способен реагировать с Н2О2, образуя, в частности, пероксинитрит, участвующий в лизисе эритроцитов [9]. 0N00- обусловливает прямое окисление железа, а также нитрование остатков тирозина на молекуле гемоглобина [12]. Гемоглобин может обеспечивать защиту от пероксинитрита, выполняя функцию внутриклеточного антиоксиданта. Его способность связывать N0 не только в результате образования комплексов с гемовым железом, но и путем образования комплексов с тиоловыми группами, обеспечивает защиту клеток и субклеточных структур от избыточного образования N0. Существует определенная связь между СГК и процессами его аутоокисления и окислительной модификацией. Гемоглобин выступает в роли редокс-активного соединения, осуществляющего псевдо-пероксидазный каталитический цикл, возникающий между Fe3+ и Fe4+ при поглощении гемоглобином Н202 [11]. Гемоглобин, регулируя содержание N0 в том или ином регионе организма, формирует определённый уровень прооксидантно-антиокси-дантного состояния. При нормальных физиологических условиях, когда количество образуемого N0 невелико, прооксидантные эффекты 0N00- и Н202 угнетаются антиоксидантной функцией N0. В условиях сдвига прооксидантно-антиоксидантного баланса, чрезмерного образования О2- и, соответственно, 0N00- и Н202 реализуется прооксидант-ный эффект N0 [10]. СГК, регулируя уровень N0, может вносить вклад в равновесие между ним и 02- в сосудистой сети [3].
N0 может модифицировать СГК через внутри-эритроцитарные механизмы регуляции, кислород-зависимый характер образования N0, регуляцию
сосудистого тонуса, действие пероксинитрита. Это может иметь важное значение для процессов газообмена за счет гетерогенности эндотелия по NO-образующей функции и особенностей объемного содержания крови в различных отделах сердечнососудистой системы (в терминальных артериолах и капиллярах) [2]. Анализ литературы и результаты выполненных нами исследований свидетельствуют о том, что L-аргинин-NO система может участвовать в формировании кислородтранспорт-ной функции крови. Предполагается, что NO-за-висимые механизмы модификации гемоглобина могут влиять на сродство гемоглобина к кислороду при различных гипоксических состояниях.
Данная работа выполнена частично благодаря финансовой поддержке Фонда фундаментальных исследований РБ (№ Б03-019).
Литература
1. Глебов А.Н. Кислородтранспортная функция крови и прооксидан-
тно-антиоксидантное состояние организма при окислительном стрессе /А.Н. Глебов, В.В. Зинчук // Весщ АН РБ. Сер. Мед.-бiял.нав. - 2002. - №2. - С.71-74.
2. Зинчук В.В. Участие оксида азота в формировании кислородсвя-зывающих свойств гемоглобина / В.В. Зинчук // Успехи физиол. наук. - 2003. - Т.34, №2. - С.33-45.
3. Зинчук В.В. Внутриэритроцитарные механизмы регуляции кисло-
родсвязывающих свойств при окислительном стрессе / В.В. Зинчук, А.Н. Глебов // Проблемы интеграции функций в физиологии и медицине. Мат. международ. конф. - Минск. ПЧУП: «Бизне-софсет», 2004. - С.145-147.
4. Зинчук В.В. Прооксидантно-антиоксидантное состояние организма при введении липополисахарида в условиях коррекции сродства гемоглобина к кислороду и Ь-аргинин-ЫО-системы / В.В. Зинчук // Бюллетень эксп. биологии и медицины. - 2001. - Т. 131, №1. - С.39-42.
5. Изменение спектров ЭПР нитрозильных комплексов гемопротеи-нов крови при низкоинтенсивном тотальном облучении мышей / Е.М. Миль, В.В. Каспаров, В.И. Бинюков и др. // Радиационная биология. Радиоэкология. - 2000. - Т. 40, № 3. - С. 305-309.
6. Малышев И.Ю. Стресс, адаптация и оксид азота / И.Ю. Малышев,
Е.Б. Манухина // Биохимия. - 1998. - Т. 63, № 7. - С. 992-1006.
7. Меньщикова Е.Б. Оксид азота и NO-синтазы в организме млекопи-
тающих при различных функциональных состояниях / Е.Б. Мень-щикова, Н.К. Зенков, В.П. Реутов // Биохимия. - 2000. - Т. 65, № 4. - С. 485-503.
8. Стародубцева М.Н. Механизмы реакций гемоглобина с перокси-нитритом в водно-солевом растворе / М.Н. Стародубцева, С.Н. Черенкевич // Весщ АН РБ. Сер. Мед.^ял.нав. - 2003. - № 2. -С. 86-90.
9. Стародубцева М.Н. Повреждения эритроцитов, инициированные взаимодействием нитрит-ионов с гемоглобином / М.Н. Стародубцева, В.А. Игнатенко, С.Н. Черенкевич // Биофизика. - 1999. - Т. 44, № 6. - С. 1068-1072.
10.Alayash A.I. Hemoglobin-based blood substitutes and the hazards of blood radicals / A.I. Alayash // Free Rad. Res. - 2000. - Vol. 33. - P. 341-348.
11.Alayash A.I. Hemoglobin-based blood substitutes: oxygen carriers, pressor agents, or oxidants? / A.I. Alayash // Nature Biotechnology. -1999. - Vol. 17. - P. 545-549.
12.Alayash A.I. Peroxynitrite-mediated heme oxidation and protein modification of native and chemically modified hemoglobins / A.I. Alayash, B.A.B. Ryan, R.E. Cashon // Archives of Biochemistry and Biophysics . - 1998. - Vol. 349, №1. - P.65-73.
13.Biochemical characterization of S-nitrosohemoglobin effects on oxygen binding and transnitrosation / R.P. Patel, N. Hogg, N.Y. Spencer et al. // J. Biol. Chem. - 1999. - Vol. 274, № 22. - P. 15487-15492.
14.Blood flow regulation by S-nitrosohemoglobin in the physiological oxygen gradient / J.S. Stamler, L. Jia, J.P. Eu et al. // Scince. - 1997. -Vol. 276. - P.2034-2037.
15.Bonaventura C. Effects of S-nitrosation on oxygen binding by normal and sickle cell hemoglobin /C. Bonaventura, G. Ferruzzi, S. Tesh, R.D. Stevens // J. Biol Chem. -1999. - Vol. 274, №35. - P.2474-2478.
16.Carter T.D. Potency and kinetics of nitric oxide-mediated vascular smooth muscle relaxation determined with flash photolysis of ruthenium nitrosyl chlorides / T.D. Carter, N. Bettache, D. Ogden // Br. J. Pharmacol. - 1997. - Vol. 122. - P.971-973.
17.Diffusion-limited reaction of free nitric oxide with erythrocytes / X. Liu, M.J. Miller, M.S. Joshi et al. // J. Biol. Chem. - 1998. - Vol. 273, № 30. - P. 18709-18713.
18.Eaton W. Is cooperative oxygen binding by hemoglobin really understood? / W. Eaton, E.R. Henry, J. Hofrichter, A. Mozzarelli // Nat. Struct. Biol. - 1999. - Vol. 6. - P. 353-358.
19.Effect of nitric oxide and nitric oxide donors on red blood cell oxygen transport / B.W. Hrinczenko, A.I. Alayash, D.A. Wink et al. // Br. J. Haematol. - 2000. - Vol. 110. - P. 412-419.
20.Effect of nitric oxide on the transport and release of oxygen in fetal blood / M.E. Clementi, F. Orsini, M.E. Schinina et al. // Biochem. Biophys. Res. Commun. - 2003. - Vol. 302, №3. - P.512-519.
21.Effects of inhaled nitric oxide on regional blood flow are consistent with intravascular nitric oxide delivery / R.O. Cannon, A.N. Schechter, J.A. Panza et al. // J. Clin. Invest. - 2001. - Vol. 108, №2. - P. 279287.
22.Effects of S-nitrosation of hemoglobin on hypoxic pulmonary vasoconstriction and nitric oxide flux / S. Deem, M.T. Gladwin, J.T. Berg et al. // Am. J. Respir. Crit. Care. Med. - 2001. - Vol. 163, №5. -P. 1164-1170.
23.Enhancement of S-nitrosylation in glycosylated hemoglobin / J. Padron, C. Peiro, E. Cercas et al. // Biochem. Biophys. Res. Commun. - 2000. - Vol. 271, №1. - P.217-221.
24.Experimental evidence suggesting that nitric oxide diffuses from tissue into blood but not from blood into tissue / A.V. Kozlov, B. Sobhian, G. Costantino et al. // Biochim. Biophys. Acta. - 2001. - Vol. 1536, №23. - P. 177-184.
25.Functional coupling of oxygen binding and vasoactivity in S-nitrosohemoglobin / T.J. McMahon, A.E. Stone, J. Bonaventura et al. // J. Biol. Chem. - 2000. - Vol. 275, №22. - P. 16738-16745.
26.Gladwin M.T. Nitric oxide's reactions with hemoglobin: a view through the SNO-storm / M.T. Gladwin, J.R. Lancaster, B.A. Freeman, A.N. Schechter // Nat. Med. - 2003. - Vol. 9, № 5. - P. 496-500.
27.Hsia C.C.W. Mechanisms of disease: Respiratory function of hemoglobin / C.C.W. Hsia // New England J. of Medicine. - 1998. -Vol. 338, №4. - P.239-247.
28.Human erythrocyte membrane band 3 protein influences hemoglobin cooperativity / Y. Zhang, L.R. Manning, J. Falcones et al. // J. Biol. Chem. - 2003. -Vol. 278, № 41. - P. 39565-39571.
29.Jia L. S-nitrosohaemoglobin: a dynamic activity of blood involved in vascular control / L. Jia, C. Bonaventura, J. Bonaventura, J.S. Stamler // Nature. - 1996. - Vol. 380. - P. 221-226.
30.Jourd'heuil D. Dynamic state of S-nitrosothiols in human plasma and whole blood / D. Jourd'heuil, K. Hallen, M. Feelisch, M.B. Grisham / / Free. Radic. Biol. Med. - 2000a. - Vol. 28, №3. - P. 409-417.
31.Jourd'heuil D. S-nitrosothiol formation in blood of lipopolysaccharide-treated rats / D. Jourd'heuil, L. Gray, M.B. Grisham // Biochem. Biophys. Res. Commun. - 2000b. - Vol. 273, №1. - P. 22-26.
32.Kosaka H. Physiological role of nitric oxide as an enhancer of oxygen transfer from erythrocytes to tissues / H. Kosaka, A. Seiyama // Biochem. Biophys. Res. Commun. - 1996. - Vol. 218, №3. - P.749-752.
33.Kourembanas S. Hypoxia induces endothelin gene expression and secretion in cultured human endothelium / S. Kourembanas, P. A. Marsden, L.P. McQuillan, D.V. Faller // J. Clin. Invest. - 1991. - Vol. 88, №3. - P. 1054-1057.
34.LeCras T.D. Nitric oxide production in the hypoxic lung / T.D. LeCras, I.F. McMurtry // Am. J. Physiol. - 2001. - Vol. 280, №4. - P. L575-L582.
35.Low concentrations of nitric oxide increase oxygen affinity of sickle erythrocytes in vitro and in vivo / C.A. Head, C. Brugnara, R. Martinez-Ruiz et al. // J. Clin. Invest. - 1997. -Vol.100, №5. - P. 1193-1198.
36.Mamone G. In vitro formation of S-nitrosohemoglobin in red cells by inducible nitric oxide synthase / G. Mamone, N. Sannolo, A. Malorni, P. Ferranti // FEBS. Lett. - 1999. - Vol. 462, №3. - P.241-245.
37.May J.M. Nitrite uptake and metabolism and oxidant stress in human erythrocytes / J.M. May, Z.C. Qu, L. Xia, C.E. Cobb // Am. J. Physiol. Cell. - 2000. - Vol. 279. - P. C1946-C1954.
38.Metabolism and excretion of nitric oxide in humans / A. Wennmalm, G. Benthin, A. Edlund et al. // Circ. Res. - 1993. - Vol. 73. - P. 11211127.
3 9.Minetti M. Peroxynitrite induces long-lived tyrosyl radical in oxyhemoglobin of red blood cells through a reaction involving CO2 and a ferryl species / M. Minetti, G. Scorza, D. Pietraforte // Biochemistry. - 1999. - Vol. 38. - P.2078-2087.
40.Modulation of nitric oxide bioavailability by erythrocytes / K.T. Huang, T.H. Han, D.R. Hyduke et al. // Proc. Natl. Acad. Sci. USA. - 2001. -Vol. 98, № 20. - P. 11771-11776.
41 .Nitric oxide donor properties of hydroxyurea in patients with sickle cell disease / M.T Gladwin, J.H. Shelhamer, F.P. Ognibene et al. // Br. J. Haematol. - 2002. - Vol. 6, № 2. - P. 436-444.
42.Nitric oxide level profile in human liver transplantation / S. Battista, G. Mengozzi, F. Bar et al. // Dig. Dis. Sci. - 2002. - № 3. - P. 528534.
43.Nitrosyl hemoglobin in blood of normoxic and hypoxic sheep during nitric oxide inhalation / Y. Takahashi, H. Kobayashi, Tanaka N. et al. / / Am. J. Physiol. - 1998. - Vol. 43. - P. H349-H357.
44.Oxygen regulation of rat hepatocyte iNOS gene expression / C. Vargiu, S. Belliardo, C. Cravanzola et al. // J. of Hepatology. - 2000. - Vol. 32, № 4. - P.567-573.
45.Perutz M.F. Blood. Taking the pressure off / M.F. Perutz // Nature. -1996. - Vol. 380, № 6571. - P. 205-206.
46.Relative role of heme nitrosylation and beta-cysteine 93 nitrosation in the transport and metabolism of nitric oxide by hemoglobin in the human circulation / M.T. Gladwin, F.P. Ognibene, L.K. Pannell et al. / / Proc. Natl. Acad. Sci. USA. - 2000. - Vol. 97, № 18. - P.9943-9948.
47.Reversible sequestration of nitric oxide by hemoglobin during hemodialysis in end-stage renal disease / E.S. Kang, D.E. Miles, M.T. Tevlin et al. // American J. of the Med. Sciences. - 2001. - Vol. 321, № 2. - P. 113-123.
48.Samaja M. Blood gas transport at high altitude / M. Samaja // Respiration.- 1997. - Vol. 64. - P.422-428.
49. Samaja M. Oxygen transport in blood at high altitude: role of the hemoglobin-oxygen affinity and impact of the phenomena related to hemoglobin allosterism and red cell function / M. Samaja, T. Crespi, M. Guazzi, K.D. Vandegriff // Eur. J. Appl. Physiol. - 2003. - № 90. -P. 351-359.
50.Schechter A.N. Hemoglobin and the paracrine and endocrine functions of nitric oxide / A.N. Schechter, M.T. Gladwin // New Engl. J. Med. -2003. - Vol. 349, № 4. - P.402-405.
51.Squadrito G.L. The formation of peroxynitrite in vivo from nitric oxide and superoxide / G.L. Squadrito, W.A. Pryor // Chem. Biol. Interact. -1995.- Vol. 96.- P. 203-206.
52.Stamler J.S. S-Nitrosothiolos in the blood. Roles, amounts, and methods of analysis / J.S. Stamler // Circ. Rec. - 2004. - № 94. - P. 414-417.
53.Stepuro I. Glutathione oxidation under the action of sodium nitrite on hemoglobin / I. Stepuro, N. Chaikovskaya, T. Piletskaya, A. Solodunov // Pol. J. Pharmacol. - 1994. - Vol. 46. - P.601-607.
54.TaylorRobinson A.W. The sequestration hypothesis: an explanation for the sensitivity of malaria parasites to nitric oxide-mediated immune effector function in vivo / A.W. TaylorRobinson // Med. Hypotheses. -2000. - Vol. 54, № 4. - P.638-641.
55.The oxyhemoglobin reaction of nitric oxide / A.J. Gow, B.P. Luchsinger, J.R. Pawloski et al. // Proc. Natl. Acad. Sci. USA. - 1999. - Vol. 96, № 16. - P.9027-9032.
56.Vaughn M.W. Erythrocyte consumption of nitric oxide: competition experiment and model analysis / M.W. Vaughn, K.T. Huang, L. Kuo, J.C. Liao // Nitric. Oxide. - 2001. - Vol. 5, № 1. - P. 18-31.
57.Whorton A.R. Regulation of nitric oxide synthesis by oxygen in vascular endothelial cells / A.R. Whorton, D.B. Simonds, C.A. Piantadosi // Am. J. Physiol. - 1997. - Vol. 16. - P.L1161-1166.
58.Yonetani T. Electron paramagnetic resonance and oxygen binding studies of alpha-Nitrosyl hemoglobin. A novel oxygen carrier having no-assisted allosteric functions / T. Yonetani, A. Tsuneshige, Y. Zhou, X. Chen // J. Biol. Chem. - 1998. - Vol. 273. - P.20323-20333.
59.Zinchuk V.V. Blood oxygen transport in rats under hypothermia combined with modification of the L-arginine-NO pathway / V.V. Zinchuk, L.V. Dorokhina // Nitric. Oxide. - 2002. - Vol. 6, № 1. - P. 29-34.
60.Zinchuk V.V. Body prooxidant-antioxidant state under the oxidative stress combined with a modification of L-arginine-NO pathway / V.V. Zinchuk, A.N. Glebov // International conference «Reactive oxygen and nitrogen species, antioxidants and human health». - Smolensk, 2003. - P. 34.
