CC BY
13
Methods. Experiments conducted in accordance with international principles of the European Convention for the Protection of vertebrate animals used for experimental and other scientific purposes, according to the Law of Ukraine of 21.02.2006 № 3447-IV «On protection of animals from cruelty».
Research was conducted on white laboratory female rats weighing 200-250 g, which were divided into four groups. In each model animals experimental skin wounds without drugs were used as a control (first group). Wounds of rats of second group were treated only with 0,5% carbopol (universal solvent drugs to make them gel-like consistency, Carbopol 980). Animals of third group got 0,1% melanin (produced by Antarctic black yeast-like fungi Nad-soniella nigra, strain X1-M, and received by us microbiologically) dissolved in 0,5% carbopol for wounds' healing. Animals of fourth group without experimental skin wounds were used as an intact animals. Before the experiment, the rats were kept in quarantine and were marked by given them notches on ears. When animas were injured they were anesthetized by sodium thiopental (Biochemie GmbH / Austria), at a dosage of 50 mg/kg. Before the experiment epilation was performed in the shoulder-blade area. Model of full-thickness skin wound. Plate wounds are reproduced on epilated skin in anesthetized rats. To do this, skin is cut using surgical scalpel and forceps, 1 Ч 1sm2. Treatment begins immediately after wounds reproduction until healing.
Statistical processing of experimental results was carried out in «Statistica 10» (StatSoft, Inc.). Type of data distribution in groups was checked with Shapiro-Wilk test. As data were distributed normally (p > 0,05), two-way ANOVA was conducted to determine the significance of difference between means with Bonferroni post test. Difference between means was judged as statistically significant if p < 0,05. Mean and standard deviation (SD) were calculated for each group.
Results. Causing the rats of experimental wounds was caused by substantial unbalance of prooxydant-antioxy-dant homeostasis which fully was not restored even by the end of supervisions (30th days). Application of new pharmaceutical composition based on melanin for rats with experimental wounds already to the middle of research (15th days) stipulated complete normalization of peroxide oxygenation of lipids and renewal of activity of antioxidant enzymes in blood and skin of rats that was accompanied speed-up healing of wounds on the average on 7th days (or on 26%) as compared to the untreated rats of control group.
Keywords: full-thickness skin wound, oxidative/antioxidant balance, antioxidant enzymes, blood serum.
Рецензент — проф. Непорада К. С.
Стаття надшшла 12.01.2017 року
© Ткачук С. О., Лаповець Л. 6., Башта Г. В., Мартьянова О. I.
УДК 616.36-003.826+616.12-005.4)-07:616.155.3-097.36-07
Ткачук С. О., Лаповець Л. €., Башта Г. В., Мартьянова О. I.
ЗМ1НИ ВМ1СТУ 1НТЕРЛЕЙК1Н1В 1 в, 10 ПРИ СТЕАТОГЕПАТОЗ1 ТА 1ШЕМ1ЧНОМУ УРАЖЕНН1 М1ОКАРДА
Нацюнальний медичний ушверситет iM. Данила Галицького (м. Льв1в)
Дане дослщження е фрагментом планово! НДР «Вплив професмних шюдливостей та надмiрних доз алкоголю на особливост ключного nepe6iry i лабо-раторн показники кровi у хворих на токсичну кардю-мюпатю та гострi форми iшемiчноI хвороби серця», № державно! реестрацп 0101U009230.
Вступ. Збтьшення частоти метаболiчного синдрому, ожиршня, цукрового дiабету стало причиною значного почастшання випадюв стеатогепатозу або неалкогольно! жирово! хвороби печшки (НАЖХП) -одного з найпоширеыших хроычних захворювань печшки [6,9,10,11,13,17]. Патолопчы прояви стеатогепатозу варюють вщ стеатозу (fetty liver), неал-когольний стеатогепатит (НАСГ) до цирозу печшки (ЦП) i гепатоцелюлярно! карциноми [10,14,17]. Bi-домо, що стеатогепатоз може також прискорювати початок цукрового дiабету 2 типу (ЦД) i серцево-су-динних захворювань (ССЗ) [13,15,16]. Для ^е! патологи характерна резистентнють до шсулшу (IP), ожи-ршня i часто цукровий дiабет (ЦД) 2 типу [8,12,16].
Мета дослщження. Виявити змши концентраци про- та протизапальних штерлейюыв (IL-1 в та 10) у
сироватц KpoBi хворих на стеатогепатоз при ii±ieMÎ4-ному ураженн мюкарда.
Об'ект i методи дослщження. В до^дження були включен хворi на стеатогепатоз та 1ХС (сте-нокардiя, постшфарктний кардюсклероз), що пе-ребували на л^ванн в комунальнм мюьюй кгмыч-нм лкарн швидко|' медично|' допомоги. Всього 131 патент у вщ 47-67 роюв (середнм вк 56,17±4,12 роюв), з них чоловкв 56,4%. ВЫх па^енпв було роз-подтено на 2 групи: перша група - хворi на стеатогепатоз (40 оЫб), в другу увмшли 50 хворих на стеатогепатоз з супутньою 1ХС.
Контрольну групу склали 30 здорових волон-терiв - студенев медичного уыверситету. Жирову шфтьтра^ю печшки дiагностували пщ час УЗД че-ревно|' порожнини (EUB-6000 сканер; Hitachi Medical Corporation, Япоыя). У до^дження не включали хворих з позитивними маркерами вiрусних гепати^в (HBsAg, antiHCV та ш.), хворих, як приймали гепа-тотоксичн препарати з приводу шших захворювань або зловживали алкоголем (>30 г/добу - чоловки i
>20 г/добу жшки), а також тих, що мали за-пальнi захворювання кишювника.
Визначення iнтерлейкiнiв проводилось за допомогою набору реагентiв фiрми «Вектор-Бест», Росiя [6]. Параметричнi данi подано як М±т, оскiльки розподiл даних у групах був нормальним, попарне апостерюрне порiв-няння груп виконували за допомогою крите-рiю Ньюмена-Кейлса, використовуючи пакет програм STATISTICA 6.0 (StatSoft, USA) [3,5].
Результати дослщження та 'Гх обгово-рення. В результат проведених дослiджень ми виявили вiрогiднi вiдмiнностi вмiсту ш-терлейюыв у сироватцi обстежуваних пац^ енпв (табл.).
У хворих на стеатогепатоз виявлено в^ рогiдне зростання вмюту IL-1ß на 69%, порiвняно з показниками контрольно! групи (р<0,05).
При наявност у хворих 1ХС, ускладнено! гепато-зом, рiвень IL-1 ß в сироватц кровi значно перевищуе показники контрольно! групи у 18 разiв та групи, в яку ввмшли хворi на стеатогепатоз без ускладнень, у 10 разiв (р<0,05).
IL-1 ß стимулюе гепатоцити, пщвищуе синтез бт-кiв гостро! фази та !х рiвень в сироватц кровi. Така активацiя продукци прозапального цитокшу IL-1 ß вказуе на провщну роль запального процесу в пато-генезi ураження печшки та розвитку iшемiчно! хво-роби серця [1,2,4,7].
Вмiст протизапального цитокшу IL-10 у групах пащен^в змшювався рiзнонаправлено. У 1 груп р^ вень IL-10 нижче контрольних показниюв у 1,7 рази (р<0,05). У 2 групi вмiст IL-10 в сироватц кровi перевищуе показники контрольно! групи в 1,4 рази, 1 групи - в 2,4 рази (р<0,05).
Величина стввщношення про- та протизапальних цитоюыв вказуе на переважання про- чи протизапального потен^алу при рiзних патолопчних процесах.
В контрольна групi переважае протизапальний
Таблиця.
Вмют iнтерлейкiнiв 1 ß, 10 в сироватцi KpoBi хворих на стеатогепатоз та iшемiчну хворобу серця (M ±
m)
IL-1ß, пг/мл IL-10, пг/мл IL-1ß / IL-10
Контроль 1,6 ± 0,1 3,2 ± 0,2 0,6 ± 0,04
Стеатогепатоз 2,71 ± 0,2* 1,88 ± 0,1* 1,44 ± 0,1*
Стеатогепатоз + 1ХС 29,26 ± 0,02*# 4,57 ± 0,2*# 6,40 ± 0,2*#
потенцiал. У Bcix групах обстежених хворих перева-
Л1тература
Примiтки:
1) * - в1рог1дн1сть в1дм1нност1 показниюв у поршняны i3 показниками контрольно! групи (р<0,05);
2) # - в1ропднють в1дм1нност1 показник1в у пор1внянн1 i3 показниками групи хворих на НАЖХП (р<0,05).
жав прозапальний потен^ал. Так, у 1 групi стввщно-шення IL-1ß / IL-10 перевищуе контролы-ii показники в 2,4 рази (р<0,05), у 2 групi в 10,7 разiв (р<0,05).
Спiввiдношення дослщжуваних цитокiнiв у 2 групi перевищуюты показники 1 групи у 4,4 рази (р<0,05).
Отриманi результати дозволяюты диференцюва-ти патологiчнi стани за вмютом та спiввiдношенням про- та протизапальних цитоюыв, що свiдчиты про рiзний патогенез [12]. Висновки
1. Жирове ураження печшки (стеатогепатоз) су-проводжуеться зростанням прозапального цитою-нового потен^алу.
2. При стеатогепатозi, ускладненому 1ХС, проза-палынi цитокiновi реакци у 4,4 рази бiлыш виражеы, нiж при неускладненому.
Перспективи подальших досл1джень. Запа-лення вiдiграе ключову ролы у розвитку iшемiчно! хвороби серця. Подалыш дослiдження будуты спря-мованi на вивчення прогностично! та дiагностично,|, ролi бiомаркерiв запалення, !х зв'язку з лiпiдним спектром кровi та iнсулiнорезистентнiстю у хворих на стеатогепатоз.
1. Александрова Ю.Н. О системе цитокинов / Ю.Н. Александрова // Педиатрия. - 2007. - № 3. - С. 124-128.
2. Бережная Н.М. Цитокиновая регуляция при патологии: стремительное развитие и неизбежные вопросы / Н.М. Бережная // Цитокины и воспаление. - 2007. - Т. 6, № 2. - С. 26-34.
3. Боровиков В. STATISTICA: искусство анализа данных на компьютере. Для профессионалов / В. Боровиков. - С-Пб: Питер, 2001. - 656 с.
4. Бухтиарова Т. Роль цитокинового звена в воспалительном процессе / Т. Бухтиарова, З. Омельяненко, В. Хоменко // Вюник фармакологи та фармацп. - 2008. - № 9. - С. 22-26.
5. Зайцев В.М. Прикладная медицинская статистика / В.М. Зайцев, В.Г. Лифляндский, В.И. Маринкин. - Астана: Фолиант, 2006. - 432 с.
6. ПоЫбник з лабораторноУ iмунолопУ / [Л.6. Лаповець, Б.Д. Луцик, Г.Б. Лебедь, В.М. Аюмова, С.О. Зубченко]. - Львiв, 2008. - 292 с.
7. Симбирцев А.С. Роль цитокинов в регуляции физиологических функций иммунной системы / А.С. Симбирцев // Физиология и патология иммунной системы. - 2004. - № 10. - С. 3-10.
8. Adams L.A. The natural history of nonalcoholic fatty liver disease: a population-based cohort study / L.A. Adams, J.F Lymp, J.St. Sauver // Gastroenterology. - 2005. - Vol. 129 (1). - P. 113-121.
9. Bedogni G. Prevalence of and risk factors for nonalcoholic fatty liver disease: the Dionysos nutrition and liver study / G. Bedogni, L. Miglioli, F. Masutti // Hepatology. - 2009. - Vol. 42 (1). - Р. 44-52.
10. Browning J.D. Prevalence of hepatic steatosis in an urban population in the United States: impact of ethnicity / J.D. Browning, L.S. Szczepaniak, R. Dobbins // Hepatology. - 2004. - Vol. 40 (6). - P. 1387-1395.
11. Charlton M.R. Frequency and outcomes of liver transplantation for nonalcoholic steatohepatitis in the United States / M.R. Charlton, J.M. Burns, R.A. Pedersen // Gastroenterology. - 2011. - Vol. 141 (4). - Р. 1249-1253.
12. Correlation between interleukin-10 and in situ necrosis and fibrosis suggests a role for interleukin-10 in the resolution of the granulomatous response of tuberculous pleurisy patients / T. Barbosa, S. Arruda, M. Chalhoubetal [et al.] // Microbes. Infect. -2006. - Vol. 8, № 3. - P. 889-897.
13. Dam-Larsen S. Final results of a long-term, clinical follow-up in fatty liver patients / S. Dam-Larsen, U. Becker, M.B. Franzmann // Scand. J. Gastroenterol. - 2009. - Vol. 44 (10). - P. 1236-1243.
14. Ekstedt M. Long-term follow-up of patients with NAFLD and elevated liver enzymes / M. Ekstedt, L.E. Franzi^n, U.L. Mathiesen // Hepatology. - 2006. - Vol. 44 (4). - P. 865-873.
15. Georgescu E.F Therapeutic options in non-alcoholic steatohepatitis (NASH). Are all agents alike? Results of a preliminary study / E.F Georgescu, M. Georgescu // J. Gastrointestin. Liver Dis. - 2007. - Vol. 16 (1). - P. 39-46.
16. Marchesini G. Nonalcoholic fatty liver, steatohepatitis, and the metabolic syndrome / G. Marchesini, E. Bugianesi, G. Forlani // Hepatology. - 2003. - Vol. 37 (4). - P. 917-923.
17. Misra V.L. Nonalcoholic fatty liver disease and cardiovascular risk / V.L. Misra, M. Khashab, N. Chalasani // Curr. Gastroenterol. Rep. - 2009. - Vol. 11 (1). - P. 50-55.
УДК 616.36-003.826+616.12-005.4)-07:616.155.3-097.36-07
ЗМ1НИ ВМ1СТУ 1НТЕРЛЕЙК1Н1В 1в, 10 ПРИ СТЕАТОГЕПАТОЗI ТА 1ШЕМ1ЧНОМУ УРАЖЕНН1 М1ОКАРДА
Ткачук С. О., Лаповець Л. €., Башта Г. В., Мартьянова О. I.
Резюме. Обстежено 90 хворих, яких було розподтено на 2 групи: 1 група - хворi на стеатогепатоз (40 оЫб), 2 група - 50 хворих на стеатогепатоз з супутньою 1ХС. У хворих на стеатогепатоз та стеатогепатоз з супутньою 1ХС виявлено вiрогiдне зростання вмюту IL-1 в. Вмют протизапального цитоюну IL-10 у групах па^ен^в змшювався рiзнонаправлено. У 1 груп рiвень IL-10 нижче контрольних показниюв. У 2 груп вмют IL-10 в сироватц кровi перевищуе показники контрольно! групи та 1 групи. В контрольна груп переважае протизапальний потен^ал. У вЫх групах обстежених хворих переважав прозапальний потен^ал. Отриман результати дозволяють диференцтвати патолопчы стани за вмютом та стввщношенням про- та протиза-пальних цитоюыв, що свщчить про рiзний патогенез.
Ключовi слова: стеатогепатоз, iшемiчна хвороба серця, штерлейкш IL-1 в, Ытерлейкш IL-10.
УДК 616.36-003.826+616.12-005.4)-07:616.155.3-097.36-07
ИЗМЕНЕНИЯ СОДЕРЖАНИЯ ИНТЕРЛЕЙКИНОВ 1в, 10 ПРИ СТЕАТОГЕПАТОЗЕ И ИШЕМИЧЕСКОМ ПОВРЕЖДЕНИИ МИОКАРДА
Ткачук С. О., Лаповец Л. Е., Башта Г. В., Мартьянова О. И.
Резюме. Обследовано 90 больных, которые составляли 2 группы: 1 группа - больные стеатогепатозом (40 человек), 2 группа - 50 больных стеатогепатозом, осложненным ИБС. В обеих группах больных выявлено достоверное возрастание содержания IL-1 в. Содержание противовоспалительного цитокина IL-10 в группах пациентов изменялось по-разному. В 1 группе уровень IL-10 ниже контрольных показателей. Во
2 группе содержание IL-10 в сыворотке крови превышает показатели контрольной группы и 1 группы. В контрольной группе повышен противовоспалительный потенциал. Во всех группах обследованных больных более выражен провоспалительный потенциал. Полученные результаты позволяют дифференцировать патологические состояния по содержанию и соотношению про- та противовоспалительных цитокинов, что свидетельствует об отличиях в их патогенезе.
Ключевые слова: стеатогепатоз, ишемическая болезнь сердца, интерлейкин IL-1 в, интерлейкин IL-10.
UDC 616.36-003.826+616.12-005.4)-07:616.155.3-097.36-07
CHANGES IN INTERLEUKINS 1в, 10 AT STEATOHEPATOSIS AND ISCHEMIC MYOCARDIAL INJURY Tkachuk S., Lapovets L., Bashta H., Martyanova O.
Abstract. Increase the frequency of metabolic syndrome, obesity, diabetes caused significant rising incidence steatohepatosis - one of the most common chronic liver disease.
Objective. To detect changes in the concentration of pro- and anti-inflammatory interleukins (IL 1в and 10) in blood serum of patients with steatohepatosis and schemic myocardial injury.
The study included 131 patient with steatohepatosis and concomitant coronary heart disease (angina pectoris, postinfarction cardiosclerosis). All patients were divided into 3 groups: group 1 - patients with steatohepatosis (40 persons), group 2 included 50 patients with steatohepatosis and with concomitant coronary artery disease, group
3 - patients (41 people) steatohepatosis as with concomitant coronary artery disease and type 2 diabetes (DM2). 30 healthy volunteers served as control. Determination of interleukin was carried using a set of reagents company «Vector-Best», Russia. For the statistical analysis used the software package STATISTICA 6.0 (StatSoft, USA).
In patients with steatohepatosis revealed significant increase of IL-1 в content on 69% compared with this in the control group (p<0.05).
In patients with coronary heart disease complicated by hepatosis, the level of IL-1 в in blood serum was significantly higher than this in control group at 18 times and the group, which included patients with steatohepatosis but without complications, 10 times (p<0.05). Such increase activation of proinflammatory cytokine IL-1 в indicates the leading role of inflammation in the pathogenesis of coronary heart disease.
The content of anti-inflammatory cytokine IL-10 in patients was changing multidirectional. In group 1 IL-10 levels were below than control at 1.7 times (p<0.05). In group 2 content of IL-10 in blood serum was higher than the
control group at 1.4 times, in group 1 - at 2.4 times (p<0.05). The value of the pro- and anti-inflammatory cytokines ratio indicates the predominance of pro- or anti-inflammatory potential in various pathological processes.
The value of the ratio of pro- and anti-inflammatory cytokines indicates the predominance of pro- or antiinflammatory potential in various pathological processes.
In the control group prevails anti-inflammatory potential. In all groups of patients dominate proinflammatory potential. So, in group 1 ratio IL-1 в / IL-10 exceeds above that of control at 2,4 times (p<0.05) in group 2 - at 10.7 times (p<0.05).
Ratio studied cytokines in group 2 was higher than that in group 1 at 4.4 times (p<0.05).
The obtained results allow to differentiate pathological states through content and ratio of pro- and antiinflammatory cytokines, indicating about different pathogenesis. Conclusions
1. Fatty liver injury (steatohepatosis) accompanied by increased proinflammatory cytokine potential.
2. At steatohepatosis complicated by coronary heart disease, inflammatory cytokines reaction is in 4.4 times more pronounced than at uncomplicated.
Prospects for further research. Inflammation plays a key role in the development of coronary heart disease. Further research will be used to study the prognostic and diagnostic roles of inflammation biomarkers, their connection with lipid profile and insulin resistance in patients with steatohepatosis.
Keywords: steatohepatosis, coronary heart disease, interleukin IL-1 в, interleukin IL-10.
Рецензент - проф. Костенко В. О. Стаття надшшла 08.02.2017 року
© Фафула Р. В., Онуфрович О. К., бфремова У. П., Наконечний Й. А., Воробець З. Д. УДК 616.699-002:612.616.2.015.11
Фафула Р. В., Онуфрович О. К., Ефремова У. П., Наконечний Й. А., Воробець З. Д.
ШТЕНСИВНЮТЬ ПРОЦЕС1В Л1ПОПЕРОКСИДАЦП У СПЕРМАТОЗОИДАХ ЧОЛОВ1К1В 13 ПОРУШЕННЯМ ФЕРТИЛЬНОСТ1
Льв1вський нацюнальний медичний ушверситет iMeHi Данила Галицького (м. Льв1в)
Робота е фрагментом НДР Львiвського нацю-нального медичного уыверситету iм. Данила Галицького «Дослщження функцюнально-метаболiч-них резервiв стрес^мггуючих систем оргаызму за екстремальних умов з метою виявлення ефектив-них способiв 1х корекци», № державно! реестраци 011111000121.
Стаття мютить результати дослщжень НДР «Мо-лекулярно-бюлопчы регуляторы мехаызми пору-шення заплщнювально! здатност сперматозо!дв i розробка нових iмунобiохiмiчних методiв дiагности-ки фертильност у чоловшв», проведених за грантом Президента Укра!ни (розпорядження № 97/2016-рп вщ 13.04.2016).
Вступ. Загальновщомо, що порушення балансу мiж активнiстю прооксидантних чинниюв та ефек-тивнiстю систем антиоксидантного захисту при-зводить до накопичення продукпв втьнорадикаль-ного пероксидного окиснення (втьних радикалiв та активних форм кисню) та розвитку оксидативного стресу, який е потенцмною передумовою у розвитку патолопй рiзного ^енезу [3,4,21]. Вщомо, що про-дукти вiльнорадикального пероксидного окиснення лт^в (ПОЛ) виступають бюмаркерами ушкоджен-ня, оскiльки за !х вмiстом можна оцiнити штенсив-
нють перебiгу вiльнорадикальних процесiв. Пер-винн продукти ПОЛ е речовинами нестмкими, якi досить швидко руйнуються з утворенням вторинних стабтьних продуктiв лтопероксидацп. Серед них одним iз найбтьш чутливих маркерiв пероксидного окиснення лт^в та оксидативного стресу е малоно-вий дiальдегiд (МДА) - продукт окиснення полшена-сичених жирних кислот, який утворюеться в результат !х деградацi! активними формами кисню (АФК). Також, актуальнють вивчення втьнорадикальних процесiв обумовлена !х важливою патогенетичною роллю як потужного фактора мембранодеструкци та розвитку мебранопатм.
Сперматозо!ди особливо чутливi до пперокси-дацi! внаслщок наявностi в складi !х мембран висо-ко! концентрацi! полiненасичених жирних кислот i через неможливiсть репараци ДНК. Полiненасиченi жирнi кислоти е головними мшенями процесiв п-пероксидацп, якi ведуть до зниження в'язкост та iнших структурних перебудов спермальних мембран [10,14]. Оксидативний стрес сперматозо!дв тюно пов'язаний iз порушенням !х сперматогенезу, рухливостi, акросомно! реакцп та процесу взаемодi! сперматозо!д-яйцеклiтина, що веде до зниження !х фертилiзацiйно! здатностi [8,13].
