CC BY
145
УДК 637.073:53.08
Жидкостной сцинтилляционный анализатор молока с лазерным спектральным калибровочным позиционированием на базе флуоресцентного спектрофотометра
Панкратов Сергей Кириллович, практикант e-mail: pankrater@bk.ru
ФГБУН «Институт химической физики им. Н.Н.Семенова РАН»
Закотеев Юрий Александрович, e-mail: louvaahmar@gmail.com
ФГБОУ ВПО "Московская государственная академия ветеринарной медицины и биотехнологии имени К.И. Скрябина"
Орехов Федор Константинович, практикант e-mail: theorehov@gmail.com
ФГБУН «Институт химической физики им. Н.Н. Семенова РАН»
Аннотация: статья рассматривает актуальные для молочной промышленности вопросы, связанные с проблемой определения радиойода в молоке и молочных продуктах. В работе рассматривается широкое использование сцинтилляционных счетчиков и анализаторов в анализе молочной продукции. Авторами проведена многоступенчатая многопрофильная модернизация двухпучкового флуоресцентного спектрометра.
Ключевые слова: анализатор молока; сцинтилляционные счетчики; лазерное спектральное калибровочное позиционирование; определение радиойода.
Введение
Начиная с 1960-х, когда впервые была поставлена проблема радиоактивности молока и молокопродуктов1, возникла потребность в создании средств контроля радиоизотопов в данных средах. Это было связано с тем, что массовые ядерные испытания, проводившиеся в США на полигоне Невада в 1950-1960-х гг. привели к раковым заболеваниям у детей, потреблявших нативное молоко и молочные продукты из облученных областей в качестве продукта питания2. В 1966 году вышла аналитическая статья о содержании радиоизотопа йода 131I (радиойода) в пище [1], из которой следовало что при наличии йододефицитных зон или популяционных групп усвоение радиойда в случае соответствующего загрязнения среды было в них максимальным. При связывании радиойода молочным белком возникает потенциал биохимико-физиологической регуляции связывания, так как йод отщепляется от молочного белка под действием ферментов печени, которые вырабатываются при его недостатке, тогда как при избытке йода вводимая доза будет выводиться, не поступая в щитовидную железу. Поэтому содержание изотопа йода и продуктов распада в молоке и молокопродуктах стало предметом особого внимания аналитиков. Проблема содержания радиойода в молоке вновь всплыла в зарубежной периодике после Чернобыльской аварии, так как обнаружилось распространение экологических последствий аварии на территорию достаточно отдаленных государств, таких как островные Япония и Великобритания [2-6]; в частности, было обнаружено: содержание радиойода и радиоцезия в продуктах сырной промышленности [7], миграция осажденных в почву пастбищ радиоизотопов в молоко при посредстве кормовых растений [8], аккумуляция и выделение при апокриновой секреции данных радиоизотопов с передачей питающимся [9] и перенос радиойода с радиоактивно-контаминированной растительности в молоко овец в недостаточно отдаленных регионах [10] (что закономерно привело к увеличению заболеваемости раком щитовидной железы [11-15] в подвергшихся воздействию областях). Поэтому уже в 1988 году появились новые методы определения радиойода 131I в молоке, основанные на использовании жидкостных неоднородных сцинтилляторов с использованием анионообменных смол [16], пригодные для определения следовых количеств радиоактивного йода. Это имело большое значение для проверки гипотезы о косвенном радиационном гормезисе (радиационном гомеостазе) [17] при связывании следовых количеств радиойода молочным белком, так как следовые и более высокие уровни загрязнения 131I регистрировались на территории бывшего СССР и СРР [18], что могло иметь (и имело [11-15]) перспективы долгосрочного последействия от однократного загрязнения. Таким образом, было предопределено широкое использование жидкостных сцинтилляционных счетчиков и анализаторов в анализе молочной продукции на предмет радиоизотопной контаминации, вошедшее в повседневный обиход множества зарубежных лабораторий позднее - в 1990-е.
Несколько ранее, чем это было внедрено в стандарты определения радиоактивного йода, была опубликована технология определения радиостронция (90Sr) с использованием жидкостно-сцинтилляционной регистрации (в ходе экстрагирова-
1 Видимо, первыми официальными государственными изданиями по этой тематике были отчеты Agricultural Research Council UK (Radio-biological Laboratory) под общим заголовком «Radioactivity in milk», выходившие в течение ряда лет в Великобритании. К сожалению, точные даты назвать нельзя, так как при картотечном поиске были обнаружены за рубежом только два экземпляра данных отчетов - за 1963 и 1965 годы.
2 Популярно это описано в сравнительно недавней статье: Steven S., Bouville A., Land C. Fallout from Nuclear Weapons Tests and Cancer Risks. American Scientist, Vol. 94, No. 1, pp. 48-57 (2006).
ния 9^г из молока после извлечения 137Cs) [19], поэтому в 1989 году речь велась уже о создании ускоренного (8 ч. и менее на образец) типа методов определения следов 9^г в молоке [20] (хотя применение в подобных методиках стандартных счетчиков Гейгера-Мюллера вместо сцинтилляционных детекторов вызывало недоумение и могло быть обусловлено только экономическими или технико-эксплуатационными причинами, так как даже в методах быстрого скрининга на 9^г с использованием излучения Черенкова [21] для прецизионной регистрации данных более логично использование жидкостных сцинтилляционных счетчиков и спектрометров [22]). Впоследствии была опубликована технология определения 9^г с предварительным извлечением радиоиттрия 9^, также использующая жидкостно-сцинтилляционный метод детектирования [23]. В 1990-е гг. определение стронция в молоке вошло в число рутинных методов радиоаналитической химии [24-27], причем разделение стало возможным вести и в двухфазных системах (например, молоко-пектин [28]) с примесями сторонних элементов - Сs, Ей и др. К настоящему времени методы скринингового определения стронция стали значительно более скоростными [29] и доступными для развивающихся стран типа Ирана [30]. Наблюдается тенденция на скрининговое аналитическое тестирование коммерческих продуктов по критерию наличия 9^г [31], из чего следует возможность достаточно скорой стандартизации этого метода на пищевых производствах в случае повторения инцидентов радиоизотопного загрязнения сельскохозяйственных территорий
[32], так как МАГАТЭ к настоящему времени установило параметры загрязнения молочной продукции 137Cs, 134Cs, 9^г, 40К на молоко и порошковые молокопродукты
[33]. Это касается и России, так как, согласно ГОСТ Р 22.8.02-94, к радиоактивным отходам агропромышленного производства (РАО АПП) относят молоко и продукты его переработки (п. 4.2.3) с временными сроками хранения не более 5 суток (п. 5.8). Следует отметить, что Институт эталонных материалов и измерений (ШММ) уже производит аналогичную сравнительную работу в ЕС, согласно принятым там законодательным схемам ICS-REM, в частности по 13^, 40К и 9^г [34]. То, что в схему измерений включены также 137Cs, 40К радиохимически логично и аналогично (по принципу) сравнительному промеру радиоактивной контаминации молока 137Сб после чернобыльской аварии с естественной радиоактивностью по 40К [35], тем более что после данного инцидента анализу подвергались и весьма слабые уровни контаминации молока [36]. Так, Ато Rantavaara, автор весьма популярной в свое время работы по радиоактивно загрязненной молочной и агротехнической продукции в Финляндии вследствие аварии на Чернобыльской АЭС [37] в техническом отчете по N^^0^2 напрямую указывает, что в качестве фактора конверсии по 13^ принималось 1.3 х 10-8 Зв Бк-1, а для 9^г принимали 2.8 х 10-8 Зв Бк-1 [38]. Учитывая, что по отношению к молоку возможно сравнение между массопереносом и изотопным разбавлением [39], в долгосрочной динамике эти параметры не выглядят биологически критичными (жидкостно-сцинтилляционные измерения по 40К [40] здесь можно в принципе не учитывать по причине его функции в сопоставлении [35]).
Следующим элементом, входящим в состав молока, по отношению к которому часто использовали методы радиоэмиссионной регистрации или жидкостно-сцин-тилляционную регистрацию, является радиоуглерод 14С. В 1972 году метод изотопного разбавления при исследовании молочной секреции был впервые применен на модельном объекте - морской свинке (Cavia рогсе!^) с использованием 141Се и 14С-содержащего полимера [41]; позже в одной из экстравагантных работ, свя-
занных с анализом рубцового переваривания молока у молодых молочных коз, было предложено использование D-глюкозы с радиоизотопной 14С-меткой [42]. Но для большинства неэкзотических применений в аналитике молочной промышленности применяли метод сжигания и жидкостно-сцинтилляционного анализа в чистом виде [43, 44]3. Этот же подход использовали при анализе изотопов иных нативных элементов молока, таких как физиологически пропорционально коррелирующие кальций и фосфор [45], вне зависимости от методов пробоотбора и про-боподготовки, так как это не являлось критическим для жидкостно-сцинтилляци-онного метода регистрации4.
Несомненно, если бы применения жидкостно-сцинтилляционной регистрации были ограничены анализом радиоактивных изотопов, этот способ не смог бы получить большое признание, выражающееся в весьма высоком количестве его пользователей для молочно-хозяйственных нужд. Однако поскольку, начиная с 1980-х, когда появилась возможность определять белки, жиры и сахара (лактозу) на жидкостных сцинтилляционных счетчиках [47], положение кардинально изменилось. Исходно появившаяся в 1980-е гг. возможность утилитарного применения жидкостных сцинтилляционных счетчиков при радиоиммунном анализе [48, 49] сделала неизбежным рост популярности этой техники первоначально для изотопного иммунологического анализа молока на гормоны [50-56], ксенобиотики [57] и токсины [58]. Уже в первое десятилетие массового распространения радиоиммунологии в молочном хозяйстве была предусмотрена возможность дифференцирования артефактов от собственно позитивных специфичных результатов радиоиммуноло-гического анализа [59], а в настоящее время фактически общедоступна верификация данных радиоиммунологии с использованием компьютерного сопоставления с двойной иммунодиффузией (2 enzyme immunoassay) [60], вследствие чего воспроизводимые радиоиммунологические анализы в настоящее время доступны и для малых молочных хозяйств или ферм [61]. Несомненно, жидкостные сцин-тилляционные анализаторы не заменяют необходимых в аналитических молочнохозяйственных лабораториях рентгеновских анализаторов элементного состава и нейтронно-активационный анализ, позволяющий весьма прецизионно определять наличие ряда элементов в молочной продукции [62, 63], однако очевидно также и то, что границы применимости жидкостных сцинтилляционных анализаторов (и их простейших аналогов) в молочном хозяйстве значительно шире, чем это представляет себе стандартный фермер.
3 Следует отметить, что в ряде подобных экспериментально-практических работ фактор конверсии (Зв Бк-1) значительно отличался от рассчитанного в работе [38].
4 В связи с этим необходимо упомянуть недавнюю работу, в которой для подготовки молочной продукции к анализу на жидкостно-сцинтилляционной аппаратуре использовалась микроволновая переработка [46].
Рис. 1. Многоканальный (32768-канальный) жидкостной сцинтилляционный счетчик
Beckman Coulter LS 6500
Обычным прибором для реализации рутинных анализов становится многоканальный жидкостной сцинтилляционный счетчик. Начиная с 1990-х гг. наиболее прогрессивную и массовую нишу в номенклатуре подобных приборов занимает компания Beckman Coulter, имеющая курс на широкое внедрение своих аппаратов в повседневную практику [64]. Ее наиболее известным5 и многопрофильным прибором для указанных измерений является сцинтилляционный счетчик LS 6500, работающий с жидкими пробами или с порошками и твердыми концентратами (в последнем случае для исследования твердых сред используют специальные растворители с последующим добавлением сцинтилляционной жидкости) и используемый обычно для определения активности альфа- и бета- излучения в образцах, меченных радиоактивными изотопами. Данный прибор - его изображение приведено на рисунке 1 - обладает исключительно высокими характеристиками (32768 каналов, 0.06 кэВ на канал; точность счета ±1%; максимальная полная скорость счета 26-106 отсчетов в минуту, максимальная скорость по тритиевому окну 10-106 отсчетов в минуту, по 14С-окну - 26-106 отсчетов в минуту, для более высокоизотопных окон 5-106 отсчетов в минуту; корректная эффективность анализа по дейтерию 60 %, по радиоуглероду 95 %), но чрезвычайно дорог - особенно в новом полнофункциональном или мало использованном состоянии, поэтому практически недоступен для пользователей среднего или нижнего звена. На это указывает тот факт, что в системе Российского Индекса Научного Цитирования находится немногим более 10 публикаций, где в той или иной мере использовался этот прибор, а более двух третей находимых публикаций с его использованием в РИНЦ зарубежные6. Из этого явно следует необходимость разработки / адаптации более доступного и эле-
5 Этот прибор принадлежит к поколению счетчиков с микропроцессорным управлением, первые концепты которого появились в начале 1980-х гг. В СССР презентация этого поколения р - счетчиков прошла в 1981 г. (19.05-20.05) на семинаре фирмы «Beckman» в Институте Биоорганической Химии в Москве, где P. Reichert представил доклад «A comprehensive line of microprocessor controlled nuclear counters».
6 Следует отметить, что и диверсификация использования подобной техники за рубежом значительно выше. Так, как удалось обнаружить при поиске по базе данных одного из крупнейших медицинских издательств - «Humana Press»,
существует солидное количество протоколированных повседневных методик, требующих использование работы LS 6500; эти методы и протоколы можно найти в нередко переиздаваемых сборниках типа: «Glycobiology Protocols» (Ed. by I. Brockhausen), «Neurodegeneration Methods and Protocols» (Ed. by J. Harry, H.A. Tilson), «Alcohol: Methods and Protocols»
(Ed. by L.E. Nagy) и др. Аналогичным образом обстоит дело в фундаментальной академической науке, где одним издатель-
ством «Academic Press» в известной серии «Methods in Enzymology» издано множество выпусков с описанием требующих описанного прибора методик - в частности тематические тома «Oxidants and Antioxidants», «Vitamins & Coenzymes», «The Unfolded Protein Response and Cellular Stress», «Regulators and Effectors of Small GTPases: Rho Family» и др. Естественно, что в отечественных условиях соответствующие методы и протоколы нереализуемы в принципе.
ментарного, но не менее информационно-ценного аппаратного оснащения для реализации свойственных ему принципов, а следовательно - методов и протоколов, в отечественных условиях. Наиболее логично было бы создание подобной системы как дополнение к известным функциям уже известной техники без нарушения ее базовой функциональности, так как отечественные лаборатории не слишком оснащены и не готовы финансировать абсолютно новый прибор такого типа. Это соответствует идеям самого А. Бекмана, в числе правил которого одним из приоритетных стратегических пунктов шла абсолютная интеграция (целостность) [65].
Принципы технологической субституции
Как известно, сцинтилляции представляют собой кратковременные люминесцентные вспышки. Длительность конверсии (время высвечивания) у органических сцинтилляторов составляет порядка наносекунд [66, 67], то есть на порядки меньше, чем у неорганических сцинтилляционных кристаллов [68]. Поэтому количество импульсов, регистрируемых за единицу времени от органических сцинтилляторов значительно больше. Это позволяет не использовать сложные схемы интегрирования по времени при наличии флуоресцентных детекторов с временами накопления сигнала много большими наносекунд и достаточными инерционными характеристиками. Большинство современных простейших люминометров имеют время накопления сигнала от 10 секунд на образец (например, японский «Lumitester С-110»), а рутинные флуориметры эконом-класса (например, широко распространенный в СНГ аппарат «Флюорат-02») для анализа хемилюминесценции имеют чувствительность канала не хуже 1000 фотонов / сек., что заведомо превышает характеристические времена большинства сцинтилляционных источников. Более того, известно, что многие из таких приборов способны работать в режиме измерения более чем на одной длине волны либо представляют собой спектрофлуориметры для люминесцентного химического анализа (в случае, если в схему прибора введен монохроматор). Этим они прогрессивно отличаются от схем детектирования сцинтилляций, для которых спектральная светочувствительность фотоэлектронных умножителей или иных фотоприемников согласуется со спектральными характеристиками высвечивания сцинтиллятора на стадии конструирования установки и, тем самым, создается взаимно-однозначная спектральная привязка носителя и источника, после которой изменение спектральной характеристики фактически нецелесообразно, так как несогласованный с чувствительностью приемника спектр высвечивания отрицательно сказывается на энергетическом разрешении. Иными словами, использование более полной по диапазону спектральных характеристик флуоресцентно-спектрометрической техники в экспериментах с необходимо заменимыми, в силу специфики эксперимента, жидкостными сцинтилляторами с различными спектрами высвечивания позволит избежать стандартного недостатка обычного типа измерений - неизменности оптимально-регистрируемой длины волны для детектора оптического сигнала. Особенно создание аналогичной аналитической установки было бы полезным на базе измерительных систем, способных к регистрации в режиме счета фотонов или накопления сигнала, так как излучаемое количество фотонов у сцинтилляционных источников пропорционально поглощенной энергии, что, собственно, и является причиной возможности регистрации энергетических спектров излучения с их использованием.
Данное решение не является новаторским с точки зрения постановки эксперимента, так как известны автоматизированные методы оптической спектроскопии
сцинтилляторов [69, 70] и прецеденты их люминесцентной или флуоресцентной спектроскопии [71-73] как предмет специального исследования. Известно, что само ультрафиолетовое излучение как поток частиц-фотонов также регистрируется сцинтилляторами (можно реализовать расчет квенчинг-фактора), причем свойства отклика на некогерентный и когерентный УФ-пучок неэквивалентны [74, 75], вследствие чего можно использовать ультрафиолетовые пучки для калибровки измерительных систем с использованием жидкостных сцинтилляторов. В сущности, реализация сцинтилляционных спектрофлуориметрических установок UV-Vis-диапазона не представляет большого труда, так как оптический отклик сцинтилляционных сред исследован вплоть до достаточно больших энергий (см., напр.: [76]), а теоретические исследования UV-Vis-спектров сцинтилляторов с использованием современных ЭВМ [77] не является излишне ресурсоемким (более того, во многих случаях возможна оптическая симуляция самих детекторов [78]). Так как многие сцинтилляционные среды являются, в то же время, активными средами для лазеров, в том числе ультрафиолетового и вакуумно-ультрафиолетового диапазона7 [79], а также лазеров с перестраиваемой длиной волны (от 350 до 600 нм [80] и далее), логично использовать спектрофлуориметр с соответствующей областью сканирования для анализа.
В общем случае, при оптическом сцинтилляционном анализе подобного рода можно получить следующие предсказуемые (и поэтому легко обнаружимые и нивелируемые при инженерно-программной переработке) артефакты, которые могут сказаться на измерениях типичных для молочного хозяйства аналитов, если их не учитывать исходно. Во-первых, многие органические молекулярные жидкости, в том числе, используемые в аналитике и биологической химии, способны к радиолюминесценции (см., напр.: [81]); под действием ускоренных электронов или бета-частиц высокой энергии к этому способна даже обычная вода [82]. Во-вторых, многие оптические стекла также способны к радиолюминесценции [83], а часто используемые в физической и аналитической химии боро-силикатные стекла с и03 (напр., ЖС-19), также являются радиолюминесцентными источниками, показывая в статистическом эксперименте с регистрацией в режиме счета фотонов свойства типичных непуассоновских источников [84]. Радиолюминесценция обнаружена также у кварцевого оптоволокна, часто применяемого в прецизионных спектроф-луориметрах и основанных на их использовании микроспектрометрических системах в качестве световодов [85]. Эти же свойства могут, однако, являться основой новой измерительной техники для исследований молочной продукции, так как в тех же микроскопических системах радиолюминесценция может являться источником иллюминирующего или аналитического сигнала [86], то есть являться средством или объектом измерения.
7 Надо отметить, что большинство органических сцинтилляторов при распаде возбужденных состояний, как правило, испускает фотоны ультрафиолетового диапазона с малой длиной поглощения, поэтому оптические фотоны, регистрируемые основным счетным оборудованием и доступные человеческому наблюдению, есть не прямой результат ядерно-химического или радиохимического взаимодействия, а продукт преобразования первичного излучения при его поглощении центрами флуоресценции, так как вывод излучения реализуется за счет вводимого в сцинтиллятор изотропно-переизлучающего шифтера, смещающего итоговый спектр. У этого правила, впрочем, есть исключения - см., напр.: Nakamura H., Kitamura H., Shinji O., Saito K., Shirakawa Y., Takahashi S. Development of polystyrene-based scintillation materials and its mechanisms. Appl. Phys. Lett., Vol. 101, Issue 26, pp. 261110-1 - 261110-3 (2012).
3erkin-Elmer announces the new Model 512 Double Beam Fluorescence Spectrophotometer.
:or the first time in a single instrument: Double beam fluorescence •
Single beam fluorescence • Percent transmission • Double beam absorbance.
'he Model 512 uses a unique double beam optical system which time shares fluorescence radiation from joth a reference and sample, in both excitation and jmission monochromators.
A single switch selects any one of five modes of Dperation. And a complete system (above) occupies )nly a little more than four feet of bench space.
SUBTRACT MODE.
As a double beam fluorescence spectrophotometer, the Model 512 can be used effectively for many ap-Dlications. For example:
• Eliminate Raman scatter peaks. (Minimizes interference with bands of interest).
• Record quantitative difference. (Differential analysis of similar samples).
• Monitor product quality. (Checks conformation to standard of quality).
• Identify pollutants. (Pinpoints source of oil spills or chemical waste products).
• Save cost of expensive solvents. (Eliminates unwanted fluorescence due to impurities).
RATIO OR ENERGY MODE.
In the single beam modes of operation (Ratio or Energy), the Model 512 permits the highest sensitivity for trace analysis.
In Ratio mode, extra stability is provided since, if the source output varies in time, the ratio remains constant. If the reference detector is a quantum counter (rhodamine B), then relative quantum excitation spectra are recorded.
Рис. 2. Раритетная реклама 1970-х гг. с техническим описание Perkin-Elmer 512.
Конструкция системы
Нами в качестве основы для построения установки был использован стандартный по меркам 1970-1980-х (и поэтому, вероятно, доступный для многих оснащав-
V/ ^ W \ и I \jr
шихся в данный период советских лабораторий) двухпучковый флуоресцентный спектрометр Hitachi 512 - лицензионный клон Perkin Elmer 512. Данный аппарат позволял производить измерения в диапазоне 250-640 нм, причем допускал также измерение поглощения флуоресцирующего образца без попадания флуоресценции на детектор, элиминирование пиков Рамановского рассеяния, дифференциальный анализ подобных образцов, сопоставление-идентификацию загрязнений и элиминирование флуоресценции растворителей. Таким образом, аппаратура такого рода позволяла избавляться от вышеуказанных спектрохимических артефактов по дельта - схеме, обеспечивая высококачественное измерение сцинтилляционных свойств во всем доступном ей спектральном диапазоне, хорошо перекрывающем высвечивание всех необходимых для анализа сцинтилляторов. В исходной ком-
% TRANSMISSION OR ABSORBANCE MODE.
The double beam system is also used in the % Transmission and Absorbance modes. If the sample fluoresces, this light is not seen by the detector since the sample is positioned between two monochromators.
Typical uses include:
• Analysis of samples. Accurate qualitative and quantitative spectral information for routine analysis in 250 to 640 nm range.
• Measuring absorbance of fluorescing sample.
Used for 250 to 640 nm range. No fluorescent light reaches detector to cause error.
We believe that the modest price and excellent performance of the Model 512 will impress you. Call your nearest Perkin-Elmer Sales Office or contact Fluorescence Product Department, Instrument Division, Perkin-Elmer Corp., Main Avenue,
Norwalk, CT 06856.
PERKIN-ELMER
плектации спектрофотометры Perkin Elmer 512 тех лет комплектовались самописцем (см. рекламный проспект 1970-х на илл. 2), но Hitachi 512 конца 1970-х имел также цифропечатающее устройство - принтер с разъемом Centronics, что позволяло нам при перехвате данных, посылаемых на самописец, АЦП современного компьютера, качественно юстировать границы диапазона длин волн с использованием численных данных, считывавшихся с распечаток данного периферийного устройства. Впоследствии юстировка проводилась по пику лазерного источника и/или его флуоресцентному отклику калибровочного носителя. Для этого вместо ламповой головки световвода была смонтирована вращаемая система лазерных источников различных длин волн (лазерные диоды или - впоследствии - модули). Одним из наиболее прогрессивных, хотя и временных, использовавшихся только для тестирования вариантов была подводка пучка от HeCd или эксимерного лазера8. Кроме того, в процессе конструирования системы были использованы различные ФЭУ для различных спектральных диапазонов, но анализ результатов измерений в сравнении с литературно-каталожными данными показал, что в разумных пределах ассигнований на модернизацию принципиально новых характеристик изменением ФЭУ или заменой отдельных элементов оптической схемы достигнуть нельзя.
Тем не менее, можно дать некоторые основные рекомендации на случай объективной необходимости реконструкции, которая может возникнуть в случае регистрации слишком малых интенсивностей излучения, когда собственная чувствительность собственных ФЭУ и/или конфигурации электроники прибора недостаточна для фиксирования сцинтилляций. Существует несколько не исключающих друг друга или взаимно дополняемых вариантов:
1. Замена ФЭУ. Известно, что ФЭУ сцинтилляционных счетчиков обладают высокой эффективностью фотокатода (до 2,5%), коэффициентом усиления 106 - 108, малым временем сбора электронов (меньше 10-8 с) и, как следствие, высоким разрешением (до 10-9 с) при большой площади фотокатода с однородной чувствительностью. Как пример можно привести следующее: допустим, фотокатод обеспечивает выход 10 фотоэлектронов на 100 фотонов с типичной для фосфоресценции длиной волны Л = 440 нм. При ускорении электронов электрическим полем от 100 В по направлению к первому электроду - диноду, из которого эмитируется N вторичных электронов (ускоряемых в направлении второго динода, где также происходит увеличение их количества в N раз) и дальнейших этапах вторичной электронной эмиссии динодов происходит увеличение в Nk раз, где k - количество динодов. Из данного простого подсчета видно, что увеличение количества динодов позволяет улучшить качество регистрации. Увеличение размера фотокатода дает улучшение репрезентативности статистики сбора данных. Исходя из этого, очевидно, что, заменяя ФЭУ в приборе на ФЭУ с лучшими характеристиками, можно регистрировать и достаточно малые интенсивности сцинтилляций.
2. Регуляция диапазонов чувствительности. Так как в жидкие сцинтилляторы нередко добавляют шифтеры для смещения длин волн в сторону высшей чувствительности ФЭУ, можно заменить этот недостаточно оправданный в случае молочного анализа процесс настройки «эквализацией» чувствительности регистрирующей системы по спектральным поддиапазонам. С торца
________Hitachi 512 расположена панель регуляции спектральной чувствительно-
8 Мы выражаем благодарность сотрудникам одного из физических институтов РАН за данную возмож-
ность.
сти (калибровки / юстировки), позволяющая смещать усиление сигнала в интересующих диапазонах, с помощью которой можно менять уровень выходного сигнала, соответствующего заданной области Л, выводящегося на АЦП, без добавки шифтеров. Возможность изменения нескольких параметров одновременно делает возможным использование многокомпонентных жидкостных сцинтилляционных смесей, выявляющих разные излучающие компоненты, или же двухканального сопоставительного анализа сигнала при использовании известной в ядерной физике методики совпадений (в т.ч. - в двухкюветном варианте; см. ниже).
3. Введение добавок в жидкий сцинтиллятор. Известно, что при вводе в сцинтиллятор различных присадок изменяется его чувствительность к различным типам частиц и излучений - для повышения чувствительности к Y-квантам используют соли РЬ, В^ для чувствительности к медленным нейтронам вводят соединения Cd, Gd и В, и т. д. Найдя по справочным источникам (или базам данных) номенклатуру необходимых присадок, смещающих чувствительность, можно, не заменяя ФЭУ, оптимизировать сбор информации на приборе.
4. Изменения в окружении ФЭУ. Для счета потоков фотонов малой интенсивности на практике часто используют счетчики фотонов с фотоэлектронными умножителями, работающими при пониженной температуре, что позволяет понизить темновой фон и увеличить достоверность сбора данных. В качестве криогенного «теплоносителя» зачастую используют жидкий азот, нередко непосредственно сочетая сосуд Дьюара с ФЭУ. Это - эксклюзивная мера, однако Н^саЫ 512 позволяет реализовать ее, так как наличие патрубков ввода под кюветным отделением и легко просверливаемый корпус, благоприятствующий также замене ФЭУ на ФЭУ с другим форм-фактором, не препятствуют подобной модификации в случае ее неизбежности.
5. Изменения в системе сбора данных. Естественно, что по функционалу описанный модернизированный прибор не является спектрометром ядерных излучений, хотя и позволяет собрать некоторую информацию об эмиссии частиц и излучений, исходя из оптического спектра высвечивания сцинтиллятора, набираемого в режиме счета фотонов. Сцинтилляционные счетчики могут обладать высокой эффективностью в случае, если количество сцинтиллятора в рабочем объеме достаточно велико, ввиду чего аддитивная величина оптического сигнала достаточна для регистрации. Если объем сцинтиллятора мал, как это характерно для кюветы спектрофлуориметра, то возможна регистрация сцинтилляций с применением пересчетных приборов и АЦП с ПО для счета импульсов с ФЭУ. Счет при малом количестве сигналов следует вести без децимации на мультивибраторных пересчетных ячейках или декатронах.
В целом, внутренняя конструкция данного аппарата значительно менее доступна для модификации относительно отечественных неполноценных аналогов, но достигнутая этим утилитарная устойчивость прибора в аспекте рутинных измерений позволяет получать более оптимальные формы воспроизводимости результатов после изменения, чем также тестировавшиеся на предмет конструктивной модернизации для целей сцинтилляционных измерений отечественные аналоги.
Поскольку известно, что различные частицы с одинаковой энергией дают различный световыход (это вычисляется как отношение световыхода, индуцируемого данным типом частиц к световыходу гамма квантов; такое соотношение и называют квенчинг-фактором), очевидно, что возможен анализ квенчинг-факторов с использованием данного прибора по дельта-схеме в рамках двухпучкового (двухкю-ветного) замера биоаналитов, обогащенных различно-эмитирующими изотопами. По аналогии с LS 6500, являющимся анализатором альфа- и бета- частиц, можно обеспечить хотя бы а/р-квенчинг-измерения, поскольку а/р-отношение (квен-чинг-фактор а-частиц) для большинства органических сцинтилляторов на порядок меньше квенчинг-фактора электронов, р-частиц, близкого к единице. Достаточно простой анализ подобной "дельта-спектроскопии по квенчинг-факторам" производится на МА^АВ с помощью программы, написанной одним из участников работы по созданию установки. Также был предложен сопоставительный анализ кристаллов сцинтилляторов с целью калибровки установки при фиксации их в соответствующих кюветных отделениях (всего в кюветном отделении помещается не более 4 кювет на вращающейся карусели), а затем для точного сопоставления при больших дозах загрязнения в прибор была встроена (жестко врезана в стенку кюветного отделения) батарея счетчиков Гейгера-Мюллера типа СТС, выводившая данные через измерительную схему на программу "Радиоспектрометр" разработки Ю.А. Закотеева (см. рис. 4), благодаря чему стало возможным производить корректные и хорошо воспроизводимые сопоставительно-относительные измерения. Надо отметить, во избежание недоразумений, что альфа-частицы не измерялись (и неизмеримы) счетчиком Гейгера, поэтому, пользуясь затемнением, создаваемым при закрытии крышки кюветного отделения для проведения флуоресцентных исследований, мы монтировали на определенных металлоконструкциях вблизи кюветы также ядерные фотоэмульсии разных типов9. Исходно мы использовали отечественные ядерные фотоэмульсии, произведенные НПО ФОМОС (б. НИИХИМ-ФОТОПРОЕКТ) и фотопластинки для ядерных исследований Московского Завода
9 Это также в комплексе с вышеописанными регистраторами позволяло верифицировать результаты
самых спорных измерений, так как визуальная или цифровая микроскопическая обработка данных, полученных с использованием метода ядерных фотоэмульсий, как известно, допускает возможность самоконтроля на том же принципе измерений: точность измерения энергии частиц измерима по их пробегу в фотоэмульсии [87], а собственные искажения (дисторсии), вносимые фотоэмульсией, анализируются с использованием изотопов - источников альфа-частиц [88].
Технических Фотопластинок, но затем перешли на Ilford, сложность обработки которых компенсировалась доброкачественностью получаемых данных (хотя, с позиций "цена-качество", продукты НПО ФОМОС, несомненно, более оптимальны).
а
б
в
Рис. 4. Скриншоты программы «Radiospectrometer" на русском (а), китайском (б) и арабском (в) языках
Таким путем была реализована многоступенчатая многопрофильная модернизация, результатом которой стало получение принципиально нового функционала аппаратуры и продление срока службы спектрофотометра прогрессивной 2-пуч-ковой оптической схемы [89] с морально устаревшим интерфейсом. Следует отметить, что, несмотря на разработку в 1970-е гг., данный аппарат сохранял свое значение и после появления "осовремененных" компьютеризованных аналогов - до конца 1990-х. Так, как показал интенсифицированный литературно-технологический поиск, зарубежные статьи с использованием этого прибора публиковались с 1970-х по 1999 год в биохимии [90-96] и клинической химии [97-102], а в области аналитической химии последняя известная статья в высоко релевантном журнале с использованием данного прибора датируется 1998 годом [103]. При замене ксено-новой 150-ваттной лампы аппараты данного класса могут служить еще длительное время (хотя и не по прямому назначению - в связи с увеличением требований к аналитической точности в мировой науке за прошедшие годы), особенно в малобюджетной российской практике.
Данный проект относится к популярному в настоящее время направлению открытого аппаратного обеспечения OSHW (Open Source Hardware), которым в последние несколько лет занимаются и такие крупные организации как ЦЕРН (известна, в частности, лицензия CERN OHL - CERN Open Hardware Licence, направленная на поддержание и качественное улучшение малобюджетных систем и программно-аппаратных комплексов радиационных измерений, доступных к по-лифункциональной реализации и модификации по принципам DIY [104]). Однако, так как Open Source проекты характерны для инновационной тактики развития малых предприятий10, подобные формы аппаратной модернизации вполне могут быть реализованы в отечественной практике, включая лаборатории небольших и
10 Одна только компания «O'Reilly Media» выпустила два продукта на эту тему за 2012 год: «Economic Impact of Open Source on Small Business» и «Open Source Strategies for the Enterprise».
средних масштабов отечественных производителей молочной продукции.
Благодарность
Авторы выражают благодарность биохимикам МГУ за предоставление списанного прибора «Hitachi 512» и такелажникам - азотчикам ГЕОХИ РАН за предоставление азота и доставку прибора к месту монтирования установки. Особенная благодарность выражается коллегам из РОНЦ, обеспечившим необходимое количество сцинтилляционной жидкости, и пожелавшему остаться неназванным инженеру ИХФ РАН, смонтировавшему некоторые конструктивные узлы установки и участвовавшему в подборе зарубежной и англоязычной технической литературы и литературной обработке материала.
список литературных источников:
1. Straub C.P., Murthy G.K., Campbell J.E. Iodine-131 in foods. Reviews of Environmental Contamination and Toxicology, Vol. 13, pp. 33-68 (1966).
2. Hill C..R, Adam I., Anderson W., Ott R.J., Sowby F.D. Iodine-131 in human thyroids in Britain following Chernobyl. Nature, Vol. 321, Issue 6071, pp. 655-656 (1986).
3. Baverstock K.F. A preliminary assessment of the consequences for inhabitants of the UK of the Chernobyl accident. Int. Journ. Radiat. Biol., Vol. 50, Issue 1, pp. III-XIII (1986).
4. Erratum to: Baverstock K.F. A preliminary assessment of the consequences for inhabitants of the UK of the Chernobyl accident. Int. Journ. Radiat. Biol., Vol.
51, Issue 1, p. 184 (1987).
5. Gilmore B.J., Cranley K. Radionuclide monitoring in Northern Ireland of the Chernobyl nuclear reactor accident. Ulster Med. Journ., Vol. 56, Issue 1, pp. 45-53 (1987).
6. Nishizawa K., Takata K., Hamada N., Ogata Y., Kojima S., Takeshima K. Monitoring of 131I in milk and rain water in Japan following the reactor accident at Chernobyl and estimates ofhuman thyroidal dose equivalents. Health Phys., Vol. 55, Issue
5, pp. 773-777 (1988).
7. Assimakopoulos P.A., Ioannides K.G., Pakou A.A., Papadopoulou C.V. Transport of the radioisotopes iodine-131, cesium-134, and cesium-137 from the fallout following the accident at the Chernobyl nuclear reactor into cheesemaking products. Journ. Dairy Sci., Vol. 70, Issue 7, pp. 1338-1343 (1987).
8. Wilkins B.T., Bradley E.J., Fulker M.J. The influence of different agricultural practices on the transfer of radionuclides from pasture to milk after the Chernobyl accident. Sci. Total Environ., Vol. 68, pp. 161-172 (1988)
9. Gori G., Cama G., Guerresi E., Cocchi G., Dalla Casa P., Gattavecchia E., Ghini
5., Tonelli D. Radioactivity in breast milk and placentas during the year after Chernobyl. Am. Journ. Obstet. Gynecol., Vol. 159, Issue 5, pp. 1232-1234 (1988).
10. Howard B.J., Beresford N.A., Mayes R.W., Lamb C.S. Transfer of 131I to sheep milk from vegetation contaminated by Chernobyl fallout. Journal of Environmental Radioactivity, Vol. 19, Issue 2, pp. 155-161 (1993)
11. Hatch M., Brenner A., Bogdanova T., Derevyanko A., Kuptsova N., Likhtarev
1., Bouville A., Tereshchenko V., Kovgan L., Shpak V., Ostroumova E., Greenebaum E., Zablotska L., Ron E., Tronko M. A Screening Study of Thyroid Cancer and Other Thyroid Diseases among Individuals Exposed in Utero to Iodine-131 from
Chernobyl Fallout. Journ. Clin. Endocrinol Metab., Vol. 94, Issue 3, pp. 899-906 (2009)
12. Drozdovitch V., Khrouch V., Maceika E., Zvonova I., Vlasov O., Bratilova A., Gavrilin Y., Goulko G., Hoshi M., Kesminiene A., Shinkarev S., Tenet V., Cardis E., Bouville A. Reconstruction of Radiation Doses in a Case-Control Study of Thyroid Cancer Following the Chernobyl Accident. Health Phys., Vol. 99, Issue
1, pp. 1-16 (2010).
13. Zvonova I., Krajewski P., Berkovsky V., Ammann M., Duffa C., Filistovic V., Homma T., Kanyar B., Nedveckaite T., Simon S.L., Vlasov O., Webbe-Wood D. Validation of 131I ecological transfer models and thyroid dose assessments using Chernobyl fallout data from the Plavsk district, Russia. Journ. Environ Radioact., Vol. 101, Issue 1, pp. 8-15 (2010)
14. Brenner A.V., Tronko M.D., Hatch M., Bogdanova T.I., Oliynik V.A., Lubin J.H., Zablotska L.B., Tereschenko V.P., McConnell R.J., Zamotaeva G.A., O'Kane P., Bouville A.C., Chaykovskaya L.V., Greenebaum E., Paster I.P., Shpak V.M., Ron E. I-131 Dose Response for Incident Thyroid Cancers in Ukraine Related to the Chornobyl Accident. Environ Health Perspect., Vol. 119, Issue 7, pp. 933939 (2011).
15. Drozdovitch V., Minenko V., Khrouch V., Leshcheva S., Gavrilin Y., Khrutchinsky A., Kukhta T., Kutsen S., Luckyanov N., Shinkarev S., Tretyakevich S., Trofimik
S., Voilleque P., Bouville A. Thyroid dose estimates for a cohort of belarusian children exposed to radiation from the Chernobyl accident. Radiat Res., Vol. 179, Issue 5, pp. 597-609 (2013)
16. Jansta V. Determination of 131I in milk using heterogeneous liquid scintillation counting. Journal of Radioanalytical and Nuclear Chemistry, Vol. 135, Issue 5, pp. 313-320 (1989)
17. Vaiserman A.M. Radiation Hormesis: Historical Perspective and Implications for Low-Dose Cancer Risk Assessment. Dose Response, Vol. 8, Issue 2, pp. 172-191 (2010).
18. Margineanu R., Mitrica B., Apostu A., Gomoiu C. Traces of radioactive 131I in rainwater and milk samples in Romania. Environmental Research Letters, Vol.
6, No. 3, pp. 034011-1 - 034011-3 (2011)
19. Koprda V., Scasnar V. Extraction of radiostrontium from the mixture of radionuclides in milk using dicarbolide of cobalt. Journal of Radioanalytical Chemistry, Vol. 77, Issue 1, pp. 71-78 (1983)
20. Vaney B., Friedli C., Geering J.J., Lerch P. Rapid trace determination of radiostrontium in milk and drinking water. Journal of Radioanalytical and Nuclear Chemistry, Vol. 134, Issue 1, pp. 87-95 (1989)
21. Stamoulis K.C., Ioannides K.G., Karamanis D.T., Patiris D.C. Rapid screening of 90Sr activity in water and milk samples using Cherenkov radiation. Journal of Environmental Radioactivity, Vol. 93, Issue 3, pp. 144-156 (2007).
22. Takiue M., Natake T., Fujii H., Aburai T. Accuracy of Cerenkov measurements using a liquid scintillation spectrometer. Applied Radiation and Isotopes, Vol.
47, Issue 1, pp. 123-126 (1996)
23. Bj0rnstad H.E., Lien H.N., Yu Y.-F., Salbu B. Determination of 90Sr in environmental and biological materials with combined HDEHP solvent extraction-low liquid scintillation counting technique. Journal of Radioanalytical and Nuclear Chemistry, Vol. 156, Issue 1, pp. 165-173 (1992)
24. Stella R., Ganzerli Valentini M.T., Maggi L. Determination of 90Sr and milk by using two inorganic exchangers. Applied Radiation and Isotopes, Vol. 44, Issue 8, pp. 1093-1096 (1993)
25. Mikulaj V., Svec V. Radiochemical analysis of 90Sr in milk, soil and plants by solvent extraction, Journal of Radioanalytical and Nuclear Chemistry, Vol. 175, Issue 4, pp. 317-324 (1993)
26. Tait D., Wiechen A. Use of liquid scintillation counting for fast determination of 89Sr and 90Sr in milk. Science of The Total Environment, Vol. 130-131, pp. 447-457 (1993).
27. Cobb J., Warwick P., Carpenter R.C., Morrison R.T. Determination of strontium-90 in milk samples using a controlled precipitation clean-up step prior to ion-chromatography. Science of The Total Environment, Vol. 173-174, pp. 179-186 (1995)
28. Macasek F., Gerhart P. Distribution and speciation of cesium, strontium, and europium in the aqueous two-phase system milk-pectin. Journal of Radioanalytical and Nuclear Chemistry, Vol. 186, Issue 1, pp. 9-21 (1994)
29. Kabai E., Hornung L., Savkin B.T., Poppitz-Spuhler A., Hiersche L. Fast method and ultra fast screening for determination of 90Sr in milk and dairy products. Science of The Total Environment, Vol. 410-411, pp. 235-240 (2011)
30. Saraygord-Afshari N., Abbasisiar F., Abdolmaleki P., Ghiassi-Nejad M., Attarilar A. Determination of 90Sr in milk and milk powder in Tehran and estimation of annual effective dose. The Environmentalist, Vol. 31, Issue 3, pp 308-314 (2011)
31. Kruk M., Solecki J. Studies of 90Sr presence in milk and commercial dairy products. Journal of Radioanalytical and Nuclear Chemistry, Vol. 290, Issue
2, pp. 325-332 (2011)
32. Hamada N., Ogino H., Fujimichi Y. Safety regulations of food and water implemented in the first year following the Fukushima nuclear accident. Journ. Radiat Res., Vol. 53, Issue 5, pp. 641-671 (2012).
33. Altzitzoglou T., Bohnstedt A. Characterisation of the IAEA-152 milk powder reference material for radioactivity with assigned values traceable to the SI units. Applied Radiation and Isotopes, Vol. 66, Issue 11, pp. 1702-1705 (2008)
34. Spasova Y., Watjen U., Altzitzoglou T. European measurement comparison of 137Cs, 40K and 90Sr in milk powder. Journal of Radioanalytical and Nuclear Chemistry, Vol. 277, Issue 1, pp. 211-215 (2008)
35. Navarrete J.M., Martinez T., Cabrera L. Comparative study between radioactive contamination in powder milk by Chernobyl accident (137Cs) and natural radioactivity (40K). Journal of Radioanalytical and Nuclear Chemistry, Vol. 272, Issue 2, pp. 277-279 (2007).
36. Schonhofer F., Weisz J. Measurement by ultra low level liquid scintillation counting following the Chernobyl accident. Journal of Radioanalytical and Nuclear Chemistry, Vol. 115, Issue 1, pp. 125-140 (1987)
37. Rantavaara A., Haukka S. Radioactivity of milk, meat, cereals, and other agricultural products in Finland after the Chernobyl accident in 1986. Finnish Centre for Radiation and Nuclear Safety, 1988, 110 p.
38. Rantavaara A., Saxen R., Kostiainen E. Dietary 137Cs and 90Sr in Finland in 1960 - 2000. In: Summaries of studies carried out in the NKS/BOK-2 project (Technical report; Ed. by S.E. Palsson), pp. 10-18, Icelandic Radiation Protection
Institute, 2002.
39. Goldsworthy S.D., Lea M.A., Guinet C. Comparison of mass-transfer and isotopic dilution methods for estimating milk intake in Antarctic fur seal pups. Polar Biology, Vol. 27, Issue 12, pp. 801-809 (2004)
40. Ogawa K., Saito J., Nozaki T. Liquid scintillation measurement of 40K for the education on radioactivity. Journal of Radioanalytical and Nuclear Chemistry, Vol. 239, Issue 3, pp. 657-659 (1999).
41. Snipes M.B., Lengemann F.W. Guinea Pig Mammary Gland Milk Content by Isotope Dilution Methods Using 141Ce and 14C-Polyethylene Glycol-4000. Journal of Dairy Science, Vol. 55, Issue 12, pp. 1775-1782 (1972).
42. Rychen G., Rubert-Aleman X., Lucas F., Blanchart G., Laurent F. Incorporation of [14C] in milk proteins after a ruminal infusion of d-[U-14C] glucose in dairy goats. Small Ruminant Research, Vol. 27, Issue 3, pp. 251-256 (1998).
43. Lockyer J.F., Lally A.E. The determination of tritium, 14C and 35S in milk and crop samples using a combustion technique. Science of The Total Environment, Vol. 130-131, pp. 337-344 (1993)
44. Rao R.R., Cooper E.L., Milton G.M. Preparation and evaluation of the homogeneity of milk as a candidate reference material for carbon-14. Fresenius' Journal of Analytical Chemistry, Vol. 352, Issue 1-2, pp. 136-142 (1995)
45. Bem H., Reimschйssel W. Simultaneous determination of phosphorus-32 and calcium-45 activity in biological samples. Journal of Radioanalytical Chemistry, Vol. 52, Issue 2, pp. 361-367 (1979)
46. Janda J., Sladek P., Sas D. Rapid dissolution of biological samples using microwave digestion for determination of radionuclide contamination by liquid scintillation. Journal of Radioanalytical and Nuclear Chemistry. Vol. 293, Issue 1, pp. 223-229 (2012)
47. Noble R.C., Shand J.H., West I.G. Novel Determination of Protein, Fat, and Lactose of Milk by Liquid Scintillation Counter. Journal of Dairy Science, Vol. 64, Issue 1, pp. 14-18 (1981)
48. Chase G.D. Applications of liquid scintillation counting to radioimmunoassays. International Journal Of Applied Radiation And Isotopes, Vol. 31, Issue 1, pp. 34-34 (1980)
49. Chase G.D. Applications of Liquid Scintillation Counting to Radioimmunoassay. In: Liquid Scintillation Counting, Recent Applications and Development: Sample Preparation and Applications (Ed. by C.-T. Peng, D.L. Horrocks, Alpen E.L.). pp. 489-502, Academic Press, New York, London, Sydney, Toronto, San Francisco. 1980.
50. Butler W.R., Des Bordes C.K. Radioimmunoassay technique for measuring cortisol in milk. Journ. Dairy Sci., Vol. 63, Issue 3, pp. 474-477 (1980).
51. Allen R.M., Redshaw M.R., Holdsworth R. A comparison of tritiated and iodinated tracers in the radioimmunoassay ofprogesterone in cow milk. Journ. Rep. Fert., Vol. 58, pp. 89-93 (1980).
52. MacDonald B.J., Sauer M.J., Watson E.D., Foulkes J.A. Direct radioimmunoassay of estradiol-170 in defatted bovine milk. Steroids, Vol. 39, Issue 6, pp. 711-721 (1982)
53. Hruska K., Franek M., Bursa J., Kalab P. Radioimmunoassay of progesterone in cow milk. Endocrin. Exp., Vol. 17, Iss. 3-4, pp. 213-218 (1983).
54. Abeyawardene S.A., Gyawu P., Greig B.D., Pope G.S. Radioimmunoassay
of oestradiol-170 in cows' milk after its extraction on sepharose-coupled antiserum: A study of specificity using high-pressure liquid chromatography. British Veterinary Journal, Vol. 141, Issue 4, pp. 416-423 (1985).
55. Michael Akers R., McFadden T.B., W.E. Beal, Guidry A.J., Farrell H.M. Radioimmunoassay for measurement of bovine a-lactalbumin in serum, milk and tissue culture media, Journal of Dairy Research, Vol. 53, Issue 3, pp. 419429 (1986)
56. Capparelli R., Iannelli D., Bordi A. Use of monoclonal antibodies for radioimmunoassay of water buffalo milk progesterone. Journ. Dairy Res., Vol. 54, Issue 4, pp. 471-477 (1987).
57. Newsome W.H., Shields J.B. Radioimmunoassay of PCBs in milk and blood. Int. Journ. Environ. Anal. Chem., Vol. 10, Issue 3-4, pp. 295-304 (1981)
58. Pestka J.J., Li Y., Harder W.O., Chu F.S. Comparison of radioimmunoassay and enzyme-linked immunosorbent assay for determining aflatoxin M1 in milk. Journ. Assoc. Off. Anal. Chem., Vol. 64, Issue 2, pp. 294-301 (1981)
59. Mallol J., Obregon M.J., de Escobar M.G. Analytical artifacts in radioimmunoassay of L-thyroxin in human milk. Clin Chem., Vol. 28, Issue 6, pp. 1277-1282 (1982)
60. Colazo M.G., Ambrose D.J., Kastelic J.P., Small J.A. Comparison of 2 enzyme immunoassays and a radioimmunoassay for measurement of progesterone concentrations in bovine plasma, skim milk, and whole milk. Can. Journ. Vet Res., Vol. 72, Issue 1, pp. 32-36 (2008).
61. Shamsuddin M., Bhuiyan M.M.U., Chanda P.K., Alam M.G.S., Galloway D. Radioimmunoassay of milk progesterone as a tool for fertility control in smallholder dairy farms. Tropical Animal Health and Production, Vol. 38, Issue
1, pp. 85-92 (2006).
62. Pashkova G.V. X-ray Fluorescence Determination of Element Contents in Milk and Dairy Products. Food Analytical Methods, Vol. 2, Issue 4, pp. 303-310 (2009)
63. Dang H.S., Desai H.B., Jaiswal D.D., Kayasth S.R., Somasundaram S. A sequential multielement separation scheme for determination of As, Mn, Mo, Cu and Zn in human milk by neutron activation analysis. Journal of Radioanalytical Chemistry, Vol. 77, Issue 1, pp. 65-70 (1983)
64. Bouniort F. La strategie Beckman Coulter en immunoanalyse. BioTribune Magazine, Vol. 8, issue 1, p. 38 (2003)
65. Thackray A., Myer M. Arnold O. Beckman: One Hundred Years of Excellence. 397 p., Chemical Heritage Foundation, Philadelphia, 2000.
66. Cooper P.N. Introduction to Nuclear Radiation Detectors, 152 p., Cambridge University Press, Cambridge New York, 2011.
67. Grupen C., Shwartz B., Spieller H., Eidelman S., Stroh T. Particle Detectors, 676 p., Cambridge University Press, Cambridge New York, 2011.
68. Lecoq P., Annenkov A., Gektin A., Korzhik M., Pedrini C. Inorganic Scintillators for Detector Systems: Physical Principles and Crystal Engineering. 263 p., Springer, Berlin Heidelberg, 2010.
69. Baryshevsky V.G., Fyodorov A.A., Korzhik M.V., Moroz V.I., Pavlenko V.B., , Kachanov V.A., Prokoshkin Y.D., Soloyjanov V.L., Zadneprovsky B.I., Nefyodov V.A., Nefyodov P.V NaBi(WO4)2 scintillators: Optical spectroscopy and radiation hardness. International Workshop on Heavy Scintillators for Scientific and
Industrial Applications, Chamonix, 1992, pp. 361-365.
70. Wojtowicz A.J., Balcerzyk M., Berman E., Lempicki A. Optical spectroscopy and scintillation mechanisms of CexLa1-xF3. Phys. Rev. B, Vol. 49, pp. 1488014895 (1994)
71. Homma Y., Murase Y., Ishii M. Some effects of temperature on fluorescence for pure toluene and liquid scintillator. Journal of Radioanalytical and Nuclear Chemistry, Vol. 95, Issue 5, pp. 281-290 (1985).
72. J0rgensen C.K. Luminescence of cerium(III) inter-shell transitions and scintillator action. Structure and Bonding (Optical and Electronic Phenomena in Sol-Gel Glasses and Modern Application), Vol. 85, pp. 195-214 (1996).
73. Undagoitia T.M., von Feilitzsch F., Oberauer L., Potzel W., Ulrich A., Winter J., Wur M. Spectroscopy of electron-induced fluorescence in organic liquid scintillators, Eur. Phys. J. D, Vol. 57, No. 1, pp. 105-110 (2010)
74. Golutvina I.G., Zhil'tsova L.Y., Matveeva E.N., Rubina O.G., Stoletova
1,M., Shafranov M.D. Changes in transmission spectra of plastic scintillators irradiated by UV radiation. Journal of Applied Spectroscopy, Vol. 23, Issue 1, pp. 926-927 (1975)
75. Nurmukhametov R.N., Volkova L.V., Klimenko V.G., Kabanov S.P., Salov R.V. Fluorescence and absorption of a polystyrene-based scintillator exposed to UV laser radiation. Journal of Applied Spectroscopy, Vol. 74, Issue 6, pp. 824-830 (2007).
76. Bernabei R., Belli P., Cerulli R., Montecchia F., Incicchitti A., Prosperi D., Dai C.J., Angelone M., Batistoni P., Pillon M. Light response of a pure liquid Xenon scintillator irradiated with 2.5 MeV neutrons. EPJ direct, Vol. 3, Issue 1, pp. 1-8 (2001).
77. Huang P.-W., Cao H.-Y., Qi M., Li P.-Y., Fu Z.-W., He C.-C., Li J.-X., Ding Y.-Y. Theoretical study of UV-Vis light absorption of some impurities in alkylbenzene type liquid scintillator solvents. Theoretical Chemistry Accounts, Vol. 129, Issue
2, pp. 229-234 (2011).
78. Gann G.O., Seibert S., Tunnell C. Optical simulations of a liquid scintillator detector for reactor neutrino experiments. Nuclear Physics B - Proceedings Supplements, Vol. 221, p. 396 (2011).
79. Krupa J.-C., Makhov V.N. UV-VUV Lasers and Fast Scintillators, "Physics of Laser Crystals", NATO Science Series, Vol. 126, pp. 23-33 (2003).
80. Lidholt L.R., Wladimiroff W.W. Scintillator and dye lasers in the range 350 to 600 nm pumped by a 200 kW nitrogen laser. Opto-electronics, Vol. 2, Issue 1, pp. 21-28 (1970).
81. Galunov N.Z., Tarasenko O.A. Mechanism of radioluminescence of organic molecular solids and liquids. Journal of Applied Spectroscopy, Vol. 62, Issue
3, pp. 471-473 (1995)
82. Tarasov M.D., El'Yash S.L., Goncharova V.F., Petrushin O.N., Savel'Ev Yu.A., Tarakanov M.Yu., Shigaev Yu.S. Efficiency of radioluminescence of water under the action of accelerated electrons. Instruments and Experimental Techniques, Vol. 50, Issue 6, pp. 761-763 (2007)
83. Akishin A.I., Bessonova T.S., Vasil'ev S.S. Electron and proton radioluminescence of optical glasses. Journal of Applied Spectroscopy, Vol.
15, Issue 3, pp. 1191-1194 (1971).
84. Tsaplev Y.B. Statistical analysis of recording light emitted by ZhS-19 glass.
Optics and Spectroscopy, Vol. 104, Issue 2, pp. 275-276 (2008).
85. Тарасов, М. Д. Поведение кварцевых волоконных световодов под действием наносекундного пучка ускоренных электронов / М. Д. Тарасов [и др.] // Прикладная физика. - 2008. - №4. - С. 26-29.
86. Pratx G., Chen K., Sun C., Martin L., Carpenter C.M., Olcot P.D., Xing L. Radioluminescence Microscopy: Measuring the Heterogeneous Uptake of Radiotracers in Single Living Cells. PLOS ONE, Vol. 71, Issue 10, Spec. sect., p.1: e46285 (2012)
87. Barabash A.S., Bradnova V.Y., Dubinina V.V., Egorenkova N.P., Konovalov
S.I., Pozharova E.A., Polukhina N.G., Smirnitskii V.A., Starkov N.I., So T.N., Chernyavskii M.M., Shchedrina T.V., Yumatov V.I. Determination of the energy measurement accuracy for charged particles by their range in nuclear photoemulsion. Bull. Leb. Phys. Inst., Vol. 39, issue 10, pp. 300-304 (2012).
88. Dubinina V.V., Egorenkova N.P., Krotkova V.I., Pozharova E.A., Smirnitsky V.A., Shamanov V.V., Novikov V.M. Measuring the distortion in nuclear emulsion using a particles from a radioactive source. Instruments and Experimental Techniques, Vol. 49, issue 4, pp. 483-488 (2006).
89. Anacreon R.E., Ohnishi Y. Double beam fluorescence spectrophotometer: design and typical applications. Applied Optics, Vol. 14, Issue 12, pp. 29212926 (1975)
90. Siskos P.A., Cahill P.T., Javitt N.B. Serum bile acid analysis: a rapid, direct enzymatic method using dual-beam spectrophotofluorimetry. Journal of Lipid Research, Vol. 18, pp. 665-671 (1977).
91. Kauffman R.J., Bertino J.R., Schimke R.T. Quantitation of Dihydrofolate Reductase in Individual Parental and Methotrexate-resistant Murine Cells; Use of Fluorescence Activated Cell Sorter, The Journ. of. Biol. Chem., Vol. 53, Issue
16, pp. 5852-5860 (1978)
92. Tecoma E.S., Wu D. Membrane Deenergization by Colicin K Affects Fluorescence of Exogenously Added but Not Biosynthetically Esterified Parinaric Acid Probes in Escherichia coli. Journ. Bacteriol., Vol. 142, Issue 3, pp. 931-938 (1980).
93. Lindberg W., Persson J.-A., Wold S. Partial least-squares method for spectrofluorimetric analysis of mixtures of humic acid and lignin sulfonate. Anal. Chem., Vol. 55, Issue 4, pp. 643-648 (1983).
94. Tabata M., Umetani Y., Shima K., Tanaka S. Glucosylation of esculetin by plant cell suspension cultures. Plant Cell, Tissue and Organ Culture, Vol. 3, Issue 1, pp. 3-9 (1984).
95. Reaven E., Tsai L., Azhar S. Intracellular Events in the "Selective" Transport of Lipoprotein-derived Cholesteryl Esters. The Journ. of. Biol. Chem., Vol. 271, Issue 27, pp. 16208-16217 (1996)
96. Vasdev S., Ford C.A., Parai S., Longerich L.,Gadag V. Dietary vitamin B6 supplementation attenuates hypertension in spontaneously hypertensive rats. Molecular and Cellular Biochemistry Vol. 200, Issue 1-2, pp. 155-162 (1999).
97. Cohen H.J., Chovaniec M.E. Superoxide generation by digitonin-stimulated guinea pig granulocytes. A basis for a continuous assay for monitoring superoxide production and for the study of the activation of the generating system. Journ. Clin Invest., Vol. 61, Issue 4, pp. 1081-1087 (1978)
98. Papanastasiou-Diamandis A., Siskos P.A., Diamandis E.P. A direct kinetic
fluorimetric method for the enzymic determination of lactate in plasma. Clin. Chim. Acta, Vol. 129, pp. 359-364 (1983).
99. Zigman S., Paxhia T., Waldron W. Biochemical Features of the Grey Squirrel Lens. Investig. Ophtalm. & Vis. Sci., Vol. 26, Issue 8, pp. 1075-1082 (1985).
100. Ioannou P.C., Konstantlanos D.G. Fluorometric Determination of Magnesium in Serum with 2-Hydroxy-1 -naphthaldehyde Salicyloylhydrazone. Clinical Chemistry, Vol. 35, Issue 7, pp. 1492-1496 (1989)
101. Kouppairs M.A., Diamandis E.P., Malmstadt H.V. Automated stopped-flow analyzer in clinical chemistry: determination of albumin with bromcresol green and purple. Clin. Chim. Acta, Vol. 149, pp. 225-235 (1985)
102. Jedrzejczak R., Szteke B., Reczajska W. Certified reference materials for quality control of mercury and selenium determination in food. Arh. Hig. Rad. Toks., Vol. 50, Issue 1, pp. 13-21 (1999).
103. Ioannou P.C., Rusakova N.V., Andrikopoulou D.A., Glynoua K.M., Tzompanakia G.M., Bogatsky A.V. Spectrofluorimetric determination of anthranilic acid derivatives based on terbium sensitized fluorescence. Analyst, 1998, Vol. 123, Issue 12, pp. 2839-2843 (1998).
104. Katz A. Towards a Functional Licence for Open Hardware, Int. FOSSL Review, Vol. 4, Issue 1, pp. 41-62 (2012)
Fluid scintillation milk analyzer with laser spectral calibrating positioning based on fluorescent photometer
Pankratov Sergey Kirrilovich e-mail: pankrater@bk.ru
FSBEU HPE "Moscow State Academy of Veterinarian medicine and biotechnology named after K.I. Skryabin".
Zakoteev Uriy Aleksandrovich e-mail: louvaahmar@gmail.com
FSBEU HPE "Moscow State Academy of Veterinarian medicine and biotechnology named after K.I. Skryabin".
Orekhov Fedor Konstantinovich e-mail: theorehov@gmail.com
FSBSU "Institute of Chemical physics named after N.N.Semenov RSA".
Abstract: the article considers the actual for milk industry subjects connected with the problem of radioiodine definition in milk and dairy products. The work considers the wide usage of scintillation registers and analyzers in studying dairy products. The authors performed multi- staged complicated improvement of double-beam fluorescent photometer.
Keywords: milk analyzer, scintillation registers, laser spectral calibrating positioning, radioiodine definition.
