CC BY
189
УДК 632.4.01/.08
Зараженность зерна пшеницы грибами
Fusarium и Alternaria на юге России в 2010 году
Т.Ю. ГАГКАЕВА,
ведущий научный сотрудник ВИЗР
Ф.Б. ГАННИБАЛ,
старший научный сотрудник
О.П. ГАВРИЛОВА,
научный сотрудник
e-mail:[email protected]
Заражение семян патогенными видами грибов снижает энергию прорастания и всхожесть. Вредоносность в значительной степени зависит от глубины локализации мицелия и количества пораженных семян. В случае, когда партии зерна идут на продовольственные и кормовые цели, важна не только степень инфицированности, но и видовой состав патогенов. Многие грибы в процессе роста образуют токсичные вторичные метаболиты (микотоксины), представляющие опасность для здоровья млекопитающих. Основными факторами, определяющими уровень загрязнения зерна микотоксинами, являются степень заражения и видовой состав развивающихся на нем грибов.
Грибы р. Fusarium продуцируют различные микотоксины, в том числе дезоксиниваленол (ДОН) и Т-2 токсин, на которые установлены предельные нормы содержания в зерне и продуктах его переработки -0,7-2 и 0,1 мг/кг соответственно.
Другим распространенным заболеванием злаков является альтер-нариоз зерна, вызываемый грибами р. Alternaria, которые обычно не приводят к существенному снижению количественных показателей урожая зерна, но способны загрязнять сельскохозяйственную продукцию своими метаболитами. У группы видов комплекса A. infec-
toria известных микотоксинов не выявлено, в то же время несколько часто встречающихся в зерне видов этого рода (A. tenuissima, A. alter-nata и др.) продуцируют целый ряд веществ, токсичных для различных организмов, включая растения, бактерии, птиц и млекопитающих, однако в санитарных правилах и нормах они не упоминаются. Несмотря на меньшую токсичность для здоровья человека альтерна-риотоксинов по сравнению с фуза-риотоксинами, они могут быть опасны из-за более высокой частоты встречаемости.
Существенная загрязненность зерна грибами рр. Fusarium [2] и Alternaria [4] во многих регионах России показывает актуальность проблемы микотоксинов для зер-нопроизводящих регионов страны, а также необходимость контроля качества зернового сырья, идущего на изготовление продуктов питания и кормов, и совершенствования мер профилактики микотокси-козов.
Целью нашей работы была оценка зараженности грибами рр. Fusa-rium и Alternaria, видового состава этих патогенов и загрязненности микотоксинами зерна озимой пшеницы, выращенной в Краснодарском и Ставропольском краях в 2010 г.
Проведен анализ образцов зерна озимой пшеницы из 25 районов Краснодарского (65 образцов) и 16 районов Ставропольского (31 образец) краев. Образцы были подвергнуты микологическому анализу для выявления и определения видов грибов, продуцирующих микотоксины. После поверхностной сте-
рилизации по 100 зерен из каждого образца раскладывали на питательную среду (картофельно-сахароз-ный агар), разлитую в чашки Петри. Через 7-10 суток инкубации при 23 °С учитывали количество зерен, вокруг которых наблюдался рост колоний грибов рр. Fusarium и Alternaria. Зараженность образцов (%) рассчитывали как отношение числа зерен, инфицированных определенной группой грибов, к общему числу анализированных.
Видовую идентификацию грибов проводили с использованием классических определителей [5, 7, 10]. Частоту выявления определенного вида устанавливали по отношению числа образцов зерна, в которых данный вид встречался, к общему числу анализируемых образцов. Долю конкретного вида (%) в комплексе патогенов рр. Fusarium и Alternaria рассчитывали как отношение числа зерен, зараженных данным видом, к общему числу зерен, зараженных грибами рода. Для грибов р. Fusarium зараженность зерна 1-4 % считали низкой, 5-10 % -средней, 11-15 % - высокой, более 15 % - очень высокой. Для видов р. Alternaria в связи с их меньшей вредоносностью использовали иные градации: 1-15 % - низкая зараженность, 16-50 % - средняя, более 50 % - высокая.
Анализ зерна на содержание фу-зариотоксинов иммунофермент-ным методом был проведен на расширенном наборе образцов из тех же районов Краснодарского (122 образца) и Ставропольского (54) краев.
В 80 % образцов из Краснодарского края и 87 % из Ставропольского края выявлены зерна с фузари-озной инфекцией (табл. 1). В то же время средняя зараженность зерна была невысокая: в Краснодарском крае - 3 % (от 0 до 14 %), в Ставропольском крае - 7 % (от 0 до 53 %).
В 12 районах Краснодарского края (Брюховецкий, Динской, Каневский, Кореновский, Курганинс-
Таблица 1
Зараженность озимой пшеницы грибами рр. Fusarium и Alternaria в Ставропольском и Краснодарском краях (урожай 2010 г.)
Уровень зараженности (%) Число образцов с различной зараженностью зерна (%)
Краснодарский край Ставропольский край
Fusarium spp. Alternaría spp. Fusarium spp. Alternaría spp.
0 20 0 13 0
1-4 52 0 57 0
5-10 23 3 10 6
11-15 5 8 10 0
15-50 0 63 10 52
>50 0 26 0 42
кий, Кущевский, Лабинский, Отрад-ненский, Славянский, Староминский, Тимашевский, Тихорецкий) выявлены образцы зерна со средней (5-10 % и более)зараженностью видами р. Fusarium. Высокую (1115 %) зараженность зерна имели 5 % образцов из Каневского, Курганин-ского и Отрадненского районов.
В Ставропольском крае образцы с высокой и очень высокой зараженностью выявлены в Изобиль-ненском, Кировском, Кочубеевском и Шпаковском районах.
Зараженность зерна видами р. Alternaria была значительно выше,
чем видами р. Fusarium. Все образцы содержали зерна с внутренней инфекцией Alternaria spp. В Ставропольском крае средняя зараженность составляла 49 %, а в Краснодарском - 37 %. Встречались образцы, зараженность которых видами Alternaria превышала 80 % (Брю-ховецкий район Краснодарского края, Александровский и Благодар-ненский районы Ставропольского края). Образцы из одного района могли отличаться по зараженности грибами этого рода в большой степени, иногда в 10 раз (Лабинский район Краснодарского края).
Большинство видов этих грибов являются широко специализированными, могут развиваться и сохраняться на любых растительных остатках и на многих растениях, включая сорные. Отмечена относительно высокая зараженность фу-зариевыми грибами образцов пшеницы, возделываемой после таких предшественников, как кукуруза (на зерно и на силос), подсолнечник, сахарная свекла и озимый рапс (табл. 2). Зараженность зерна видами Alternaria слабо зависела от предшественника. Сравнение образцов пшеницы, выращенной в Краснодарском крае после кукурузы, подсолнечника и сахарной свеклы, не выявило существенной разницы в их зараженности как токси-генными, так и не токсигенными видами Alternaria.
Из всех образцов зерна выделено 201 (Краснодарский край) и 215 (Ставропольский край) изолятов фузариевых грибов, относящихся, как минимум, к 15 видам этого рода. Однако только несколько видов из них встречаются со значительной частотой и могут оказывать негативное влияние на качество зерна.
Традиционно для Северо-Кавказского региона опасность представляет гриб F. graminearum, образующий микотоксин ДОН. В Краснодарском крае этот вид выявлен в 23 % анализируемых образцов с встречаемостью от 1 до 6 % (табл. 3). Встречаемость данного патогена выше 5 % отмечена только в трех образцах из Курга-нинского и Отрадненского районов (предшественники кукуруза на зерно, подсолнечник). Доля F. graminearum в комплексе грибов р. Fusarium в Краснодарском крае составила 16 %.
В Ставропольском крае этот вид выявлен в 16 % анализируемых образцов, встречаемость варьировала от 1 до 35 %. Доля гриба в комплексе патогенов составила 40 %. Однако только в трех образцах из
Таблица 2
Зависимость зараженности зрна озимой пшеницы грибами р. Fusarium от предшественников
Кранодарский край Ставропольский край
Предшественник Число ФЗ* (%) Число ФЗ * (%)
образцов Средняя Мин.-макс. образцов Средняя Мин.-макс.
Горох 3 2,3 1-5 2 4,5 1-8
Кукуруза 21 3,8 1-14 5 25,8 5-53
Лук - - - 1 14 -
Многолетние травы 2 1,5 0-3 1 0 -
Озимые зерновые 1 1 - 9 1,7 0,4
Подсолнечник 24 2,7 0-8 3 6,3 2-13
Раис 1 5 - 2 4,5 3-12
Рис 1 2 - - - -
Сахарная свекла 7 3,6 0-13 - - -
Пар - - - 7 1,3 0-3
Соя 4 1,7 0-5 1 4 -
Эсиарцет 1 1 - - - -
НСР 0,8 - - 4,4 -
ФЗ в среднем (%) - 3,1 - - 6,9 -
ФЗ медиана (%) - 2,0 - - 3,0 -
* ФЗ - зараженность зерна грибами р. Fusarium; НСР - наименьшая существенная разница (Р < 0,05).
Таблица 3
Видовой состав грибов pp. Fusarium и Alternaria, выделенных из зерна озимой пшеницы в Краснодарском и Ставропольском краях (2010 г.)
Краснодарский край Ставропольский край
Вид Частота Доля в Максималь- Частота Доля в Максималь-
выявле- комплексе ная зара- выявле- комплексе ная зара-
ния (%) рода (%) женность (%) ния (%) рода (%) женность (%)
A. infectoria 100 67 72 100 69 68
A. tenuissima 100 33 31 100 31 30
F. cerealis 3 2 2 13 13 15
F. graminearum 23 16 6 16 40 35
F. langsethiae 8 5 5 23 6 3
F. poae 22 13 6 39 11 5
F. proliferatum 39 20 3 32 13 8
F. sporotrichioides 34 23 7 39 7 2
F. subglutinans 11 5 3 13 4 3
F. tricinctum 22 9 2 10 5 9
F. verticillioides 6 2 1 0 0 0
Fusarium spp. 11 6 2 6 1 1
Кочубеевского и Кировского районов (предшественник - кукуруза на зерно и силос) выявлена значительная встречаемость этого патогена -от 14 до 35 %.
Гриб F. sporotrichioides, образующий высокотоксичный Т-2 токсин, выявлен в 34-39 % всех анализируемых образцов с 1-7 % встречаемостью. Доля этого вида в комплексе фузариевых грибов в образцах из Краснодарского края составила 23 %, а из Ставропольского края - 7 %.
Впервые на территории Северного Кавказа массово выявлен вид гриба F. langsethiae, который также является продуцентом Т-2 токсина. Он присутствовал в 8 % образцов из Краснодарского края и в 23 % - из Ставропольского. Максимальная встречаемость данного гриба достигала 5 % в образце из Каневского района Краснодарского края (предшественник сахарная свекла, сорт Фортуна), общая зараженность зерна составила 13 %. В комплексе патогенов из Краснодарского и Ставропольского краев доля гриба F. langsethiae составила соответственно 5 и 6 %.
На территории РФ вид F. lang-sethiae впервые был выделен в
2003 г. в Ленинградской области [6] и до настоящего времени массово выявлялся только на северо-западе страны [1]. Мониторинг встречаемости F. langsethiae в европейских странах является приоритетной темой исследований, поскольку наблюдаемое в последние годы повышение загрязнения зерна Т-2 токсином связывают с распространением этого гриба [11, 12]. Обнаружение этого гриба на территории Северного Кавказа представляет значительный научный и практический интерес.
Гриб F. poae, образующий трихо-теценовый микотоксин ниваленол, выявляли с частотой 22 % в Краснодарском крае и 39 % в Ставропольском. Доля этого вида составляла в среднем около 11-13 % выделенных изолятов грибов. Максимальная зараженность зерна F. poae (6 %) обнаружена в образце из Лабинского района Краснодарского края (предшественник - кукуруза).
Вид F. cerealis, также продуцирующий ниваленол, встречается в Краснодарском крае с низкой частотой, однако в Ставропольском крае он выявлен в 14 % образцов и входит в группу видов, доля которых в комплексе грибов р. Fusarium
выше 10 %, а максимальная встречаемость - 15 %.
Также среди патогенов зерна идентифицированы фузариевые грибы, относящиеся к комплексу Gibberella fujikuroi (F. proliferatum, F. subglutinans и F. verticilliodes), некоторые виды которого способны к активному образованию фумонизи-нов [3]. Частота выявления этой группы грибов составила 46 % в Краснодарском крае и 39 % в Ставропольском. Максимальная зараженность зерна грибами G. fujikuroi выявлена в двух образцах из Ставропольского края (Новоалександровский и Изобильненский районы) и составила 7-10 %. По морфологической идентификации около 76 % выделенных изолятов относятся к виду F. proliferatum, следующий по встречаемости - F. subglutinans, а единичные изоляты F. verticillio-ides встречались только в Краснодарском крае.
Гриб F. tricinctum (относительно слабый патоген) выявлен в 22 % образцов из Краснодарского края с зараженностью 1-2 % и в 10 % образцов из Ставропольского края, но только в одном образце из Шпа-ковского района (сорт Виктория Одесская, предшественник - озимый рапс) установлена высокая зараженность этим патогеном -9 % (при общей зараженности образца 12 %). Гриб F. tricinctum продуцирует микотоксин монилифор-мин, содержание которого не регламентируется, однако он представляет опасность для здоровья млекопитающих и птиц.
Кроме вышеуказанных видов выявлены единичные изоляты F. ave-naceum, F. equiseti, F. heterosporum, F. sambucinum, F. acuminatum и F. oxysporum.
Во всех образцах были обнаружены как токсигенные виды р. Alternaria (представленные преимущественно A. tenuissima, изредка A. alternata и A. arborescens), так и не токсигенные из комплекса A. infectoria. Токсиген-ный вид A. tenuissima, продуци-
рующий альтернариол, монометиловый эфир альтернариола, тенуа-зоновую кислоту и другие токсичные метаболиты, встречался в 1-31 % зерен образца. Наиболее зараженные этим видом образцы были собраны в Благодарненском районе Ставрополья и Павловском районе Краснодарского края. Зараженность зерна A. infectoria в обоих регионах в среднем была в 2 раза выше, чем этот же показатель для A. tenuissima и колебалась в широких пределах - 1-72 %.
Показатели встречаемости в определенной местности вида гриба, продуцирующего определенный микотоксин, и его доли в комплексе патогенов позволяют прогнозировать значительный уровень мико-токсинов в урожае зерна. Так, в Краснодарском крае 93 % образцов были контаминированы ДОН, из них 35 % имели уровень микотоксина 0,5-0,8 мг/кг, в Ставропольском крае было контаминировано ДОН 50 % образцов, однако только у 13 % количество микотоксина достигало этого уровня.
Все 10 образцов, содержащих зерно, инфицированное грибами F. sporotrichioides и F. langsethiae, содержали Т-2 токсин. Однако уровни этого микотоксина были низкими, кроме одного образца из Каневского района Краснодарского края (сорт Таня, предшественник - подсолнечник), в котором выявлено 0,5 мг/кг Т-2 токсина, что в 5 раз превышает его предельно допустимое содержание в зерновом субстрате. Общая зараженность этого образца составила 7 %, в том числе грибом F. sporotri-chioides - 3 %.
Из 6 образцов, в которых были обнаружены представители G. kuroi, только в одном выявлено низкое содержание фумонизина В1 (Краснодарский край, Белоглинс-кий район, сорт Краля, предшественник - подсолнечник). Как правило, фумонизины загрязняют зерно кукурузы, однако при определен-
ных условиях возможно массовое развитие видов грибов, продуцирующих эту группу токсичных метаболитов, на озимой пшенице.
Совместное сосуществование различных представителей мико-флоры на растении может приводить к прямой конкуренции за субстрат, и преимущество могут получить виды с высокой скоростью роста, способные продуцировать токсичные метаболиты. Так, в Норвегии была выявлена положительная связь между зараженностью зерна пшеницы, ячменя и овса грибами F. avenaceum, F. tricinctum и A. infe-ctoria и отрицательная - между F. culmorum и A. infectoria, F. gra-minearum и A. infectoria [8]. Инокуляция в теплице колосьев озимой пшеницы A. altemata, предваряющая инокуляцию F. culmorum снижала развитие фузариоза на колосковых чешуйках с 19 % до 4 % [9]. В наших исследованиях также наблюдалась отрицательная корреляция между зараженностью образцов из Ставропольского края A. infectoria и F. graminearum. Для образцов из Краснодарского края такая корреляция была слабой и положительной.
Результаты проведенного анализа показывают наличие на юге европейской части России значительного запаса инфекции фузариевых и альтернариевых грибов, в том числе продуцирующих опасные мико-токсины. Любое благоприятное для того или иного вида гриба изменение может привести к значительной зараженности зерна и ухудшению его посевных и пищевых качеств. Порог вредоносности заболевания установить достаточно сложно из-за участия в патогенном процессе разнообразных видов грибов, различающихся по агрессивности и токси-нообразующим свойствам. Часто наблюдается заметное отклонение от предполагаемой закономерности «чем больше зараженность, тем выше количество микотоксинов». Связано это с генетическими особенностями патогенов и сорта рас-
тения, глубиной инфицированности зерновок, погодными условиями, а также с взаимовлиянием микроорганизмов друг на друга. Если посев проведен инфицированными семенами по восприимчивому предшественнику, и в период цветения складываются благоприятные условия для развития патогенов, то необходимо предусмотреть своевременную обработку фунгицидами и проведение других организационно-хозяйственных мероприятий, направленных на снижение зараженности зерна и накопления в нем микоток-синов.
ЛИТЕРАТУРА
1. Гаврилова О.П., Гагкаева Т.Ю. Фуза-риоз зерна на севере Нечерноземья и в Калининградской области в 20072008 годах // Защита и карантин растений, 2010, № 2, с. 23-25.
2. Гагкаева Т.Ю., Левитин М.М., Санин С.С., Назарова Л.Н. Зараженность зерна и видовой состав грибов рода Fusarium на территории РФ в 2004-2006 годах //Агро XXI, 2009, № 4-6, с. 4-6.
3. Гагкаева Т.Ю., ЛевитинМ.М. Современное состояние таксономии грибов комплекса Gibberella fujikuroi// Микология и фитопатология, 2005, т. 39, № 6, c.1-14.
4. Ганнибал Ф.Б. Alternaria spp. в семенах зерновых культур в России // Микология и фитопатология, 2008, т. 42, вып. 4, c. 359-368.
5. Booth C. The genus Fusarium. - England: Common. Mycol. Inst., 1971, 237 p.
6. Gagkaeva T., Gavrilova O., Levitin M., Kononenko G. et al. Characterization of distribution, cultural characters and T-2 toxin production of Fusarium sporotrichioides, F. poae and F. langsethiae from Russia / In book of abstracts. European Fusarium Seminar, Wageningen, The Netherlands, 2006, p. 49.
7. Gerlach W., Nirenberg H. The genus Fusarium - a Pictorial Atlas Mitt. Biol. Bundesanst. Ld. Berlin, 1982, 406 p.
8. Kosiak B., Torp M., Skjerve E., Andersen B. Alternaria and Fusarium in Norwegian grains of reduced quality - a matched pair sample study //Inter. J. of Food Microbiol., 2004, v. 93, p. 51-62.
9. Liggitt J., Jenkinson P., Parry D.W. The role of saprophytic microflora in the development of Fusarium ear blight of winter wheat caused by Fusarium culmorum // Crop Prot., 1997, v. 16, № 7, p. 679-685.
УДК 632.914.2
Прогноз зараженности семян озимой пшеницы фузариозной инфекцией
10. Simmons E.G. Alternaria. An Identification Manual. Utrecht: CBS, 2007, 775 p.
11. Torp M., Nirenberg H.I. Fusarium langsethiae sp. nov. on cereals in Europe // Intern. J. Food Microbiol., 2004, v. 95, p. 247-256.
12. Yli-Mattila T., Paavanen-Huhtala S., Jestoi M., Parikka P. et al. Real-time PCR detection and quantification of Fusarium poae, F. graminearum, F. sporotrichioides and F. langsethiae as compared to mycotoxin production in grains in Finland and Russia // Archives of Phytopath. and Plant Protection, 2008, v. 41, № 4, p. 243-260.
Аннотация. Проведен анализ зерна 96 образцов озимой пшеницы, собранной в Краснодарском и Ставропольском краях в 2010 г., на зараженность грибами рр. Fusarium и Alternaria. Средняя зараженность зерна видами Fusarium в Краснодарском крае составила 3 % (варьировала от 0 до 14 %), в Ставропольском крае - 7 % (от 0 до 53 %). Виды A. infectoria, A. tenuissima, F. graminearum, F. poae, F. sporotrichioides и F. proliferatum характеризовались высокой встречаемостью. Впервые на юге Европейской части РФ был выявлен вид F. langsethiae, образующий Т-2 токсин. Методом иммунофер-ментного анализа проанализировали 176 образцов зерна пшеницы. Максимальный уровень дезоксиниваленола в них достигал 0,8 мг/кг, Т-2 токсина - 0,5 мг/кг.
Ключевые слова. Фитопатогенные грибы, Fusarium, Alternaria, пшеница, зерно.
Abstract. The occurrence of Fusarium and Alternaria species in 96 samples post-harvest winter wheat grains from Krasnodarskiy and Stavropolskiy krays in 2010 was studied. The incidence of Alternaria spp. and Fusarium spp. varied significantly in samples of reduced quality. Fusarium infection level in Krasnodarskiy kray on average was 3 %, and in Stavropolskiy kray it was 7 % ranging from 0 to 14 % and to 53 %, respectively. The most commonly isolated species were A. infectoria, A. tenuissima, F. graminearum, F. poae, F. sporotrichioides, and F. proliferatum. T-2 producing species F. langsethiae was isolated in the South of the European part of Russia for the first time. The level of mycotoxins was assessed with ELISA in 176 grain samples. The maximal level of deoxynivalenol reached 0,8 and T-2 toxin - 0,5 mg/kg.
Keywords. Phytopathogenic fungi, Fusarium, Alternaria, wheat, grain, geographic distribution.
В.В. ЧЕКМАРЕВ, заведующий лабораторией Среднерусского филиала Тамбовского НИИ сельского хозяйства Г.В. КОБЫЛЬСКАЯ, ведущий научный сотрудник Г.Н. БУЧНЕВА,
старший научный сотрудник О.И. КОРАБЕЛЬСКАЯ, младший научный сотрудник e-mail:[email protected]
Известно, что на интенсивность поражения зерна и колоса пшеницы грибами рода Fusarium влияют три компонента: возбудитель болезни, растение-хозяин и условия внешней среды, прежде всего, температура, влажность воздуха и количество осадков в период заражения патогеном и его распространения. Установлено, что интенсивность проявления фузариоза колоса в Краснодарском крае зависит от осадков, выпадающих в период цветения и созревания зерна озимой пшеницы: при значительном их количестве поражение достигает достаточно высокого уровня [5]. В условиях Татарстана повышенная зараженность зерна яровой пшеницы фузариевы-ми грибами отмечается во влажные годы, в сухие этот показатель существенно ниже [3].
Сильное поражение зерна злаковых культур фузариозной инфекцией может иметь серьезные негативные последствия. Известно, что грибы рода Fusarium способны вырабатывать различные микотоксины, которые представляют опасность для здоровья человека и сельскохозяйственных животных. Наиболее часто в зерновой продукции обнаруживается дезоксиниваленол (ДОН). Содержание ДОН в товарных партиях зерна зависит от количества в них фузариозных зерен. Коэффициент
корреляции между этими показателями достаточно высок и составляет 0,88-0,95 [1]. Растения пшеницы, выросшие из инфицированных фу-зариевыми грибами семян, в значительно большей степени поражаются корневой гнилью, у них снижается число зерен в колосе, их масса и продуктивность [6]. Таким образом, знание уровня зараженности зерна пшеницы фузариозной инфекцией позволяет судить о пригодности получаемой продукции для пищевых, фуражных и семенных целей. Для оздоровления посевного материала следует применять протравители семян, эффективные в отношении фузариевых патогенов. На практике определение зараженности зерна фузариозом и содержания в нем микотоксинов проводится после уборки урожая в специализированных лабораториях. Разработка метода прогноза позволила бы заранее рассчитать эти показатели.
Нами изучена возможность прогнозирования уровня поражения зерна озимой пшеницы грибами рода Fusarium в условиях Тамбовской области. В исследованиях применяли метод метеопатологического прогноза, основанный на выявлении корреляционных зависимостей между развитием заболевания и погодными факторами [4]. При составлении прогноза использовали данные ближайшей метеостанции (г. Тамбов). Зерно для микологического анализа отбирали с растений озимой пшеницы сорта Мироновская 808, выращиваемой в условиях естественного инфекционного фона. Химические обработки посевов не проводили. Анализ на зараженность зерна фузариозом выполняли согласно ГОСТ 12044-93 с использованием среды Чапека [2]. Следует отметить, что в Тамбов-
