CC BY
8
УДК 616.248-053.5-07
ЗАПАЛЬН1 МАРКЕРИ КОНДЕНСАТУ ВИДИХУВАНОГО П0В1ТРЯ ТА ПОКАЗНИКИ КИСНЕЗАЛЕЖНОГО МЕТАБ0Л13МУ ГРАНУЛОЦИТ1В КРОВ1 У ХВОРИХ НА БРОНХ1АЛЬНУ АСТМУ ШКОЛЯР1В
Тарас М.Н.
Буковинський державний медичний умверситет, м. Чермвщ
На п/дстав/ вивчення маркер'<в запалення у конденсатI видихуваного пов'пря та показник1в кисне-залежно/' м '1кробоцидност '1 еозиноф1льних та нейтроф1льних гранулоцит!в кров/ у 45 д/тей шк1льного в1ку, хворих на середньотяжку та тяжку персистувальну бронх1альну астму, по м '1р'1 потяжчання пе-реб1гу патологи спостер!гали тендению до зб1льшення вм1сту метабол1т1в оксиду азоту та продукт'<в протеол!зу в конденсат/ видихуваного пов'пря, активаф киснезалежного метабол1зму еозиноф1л1в та зниженнI вм1сту фармазанпозитивних форм нейтроф1л1в у перифер1йн1й кров'!, що п1дтверджува-лася в1рог1дними корелящйними зв'язками.
Ключов1 слова: бронх1альна астма, д1ти, конденсат видихуваного пов1тря, метаболии оксиду азоту, НСТ-тест.
Вступ
Нараз1 питания стартовоТ та подальшоТ ступе-нево'Г терапп бронх1альноТ астми (БА) в дитячо-му вщ1 базуеться на визначены тяжкосл персис-тування хвороби [1,2], що фунтуеться на типо-вих патолопчних процесах, притаманних данш патологи - запалены та пперсприйнятливосп дихальних шлях1в. Осктьки запалення бронх1в е одшею з характерних ознак БА, ймов1рно, його ¡нтенсивнють може асоцшвати з тяжкютю пере-б1гу захворювання [3]. Поряд з цим, ефекторни-ми кл1тинами у реал1заци запального процесу в ресшраторному тракт1 виступають нейтрофтьш та еозинофтьш гранулоцити кров1, що робить доцтьним, одночасно ¡з застосуванням ¡нфла-матометрп конденсату видихуваного пов1тря (КВП), дослщжувати показники киснезалежного метабол1зму вказаних кл1тин кров1 [4,5,6,7]. Вщ-сутнють достов1рних даних стосовно д1агностич-но1 значимое^ зазначених показник1в кров1 та КВП в дитячому вщ1 у верифкаци тяжкого вар1а-нту патологи надае дослщженню актуальности а зростання поширеносп БА у дитячш популяци -перспективность
Метою роботи було визначення маркер1в запалення у конденсат! видихуваного пов1тря та показниш киснезалежноТ м1кробоцидност1 еози-нофтьних та нейтрофтьних гранулоцит1в кров1 у д1тей шктьного в1ку, хворих на середньотяжку та тяжку персистувальну астму.
Матерал та методи дослдження
На баз1 пульмонолопчного вщдтення обласноТ дитячо! ктычноТ л1карн1 м.Чершвц1 обстежений 21 пащент шктьного в1ку з верифкованим д1аг-нозом тяжко! персистувальноТ БА (I ктычна трупа) та 24 школяр1 з середньотяжким вар1антом захворювання (II клш1чна група). Тяжк1сть патологи визначали за д1ючими регламентованими критер1ями зг1дно наказу М1н1стерства охорони здоров'я та М1жнародного консенсусу з лкуван-ня та проф1лактики астми (С1ЫА) [1]. За основ-ними характеристиками групи виявилися репре-зентативними. Так, у I клш1чнш груп1 хлопчиш
було 62%, а в rpyni пор1вняння - 66% (рф>0,05). Мешканц1 стьськоТ м1сцевост1 серед обстежених з тяжким персистуванням БА склали 64%, у II клш1чнш rpyni - 59% (рф>0,05). Середн1й в1к д1тей
I групи становив 13,4±0,7 рок1в, а хворих на середньотяжку персистувальну БА - 12,2±0,7 рок1в (р>0,05). Тривал1сть захворювання в групах по-р1вняння також суттево не вщр1знялась. Так у I rpyni вона сягала в середньому 8,6±0,7 poKiB, а у
II - 6,6±0,84 poKiB (р>0,05).
Обстеження включало 6ioxiMi4He дослщження КВП (визначення загального бтку фотометрич-ним методом за Лоур1, продукт1в перекисного окиснення бтк1в фотометричним методом за O.G. Дубшшою, 1995 р. та метаболтв оксиду азоту спектрофотометричним методом за Н.Л. бмченком, 1994 р. з використанням реактиву Фолша-Чеколтеу) та визначення показниш киснезалежного метабол1зму еозинофтьних та нейтрофтьних гранулоцит1в KpoBi за тестом ¡з н1тросин1м тетразол1ем (спонтанний та стиму-льований вар1анти НСТ-тесту). Обчислювали ¡н-декс стимуляци гранулоцит1в (еозинофт1в - ICE та нейтрофт1в - ICH) як вщношення результат1в стимульованого до спонтанного НСТ-тесту, а також резерв у вигляд1 р1зниц1 даних вар1ант1в НСТ-тесту.
Досл1дження проведене з урахуванням основ-них положень б1оетики.
Результати та i'x обговорення
Згщно наведених даних (табл. 1), 3i зростан-ням тяжкост1 БА спостер1гали тенденц1ю до 36i-льшення вм1сту метабол1т1в оксиду азоту в КВП. Водночас спостер1гали обернену тенденц1ю 3i значениями загального б1лка, вмют якого змен-шувався у д1тей з тяжким переб1гом захворювання, ймов1рно, за рахунок посилення процеав перекисного окиснення 61лк1в. Останне пщтвер-джувалося достов1рним зб1льшенням за тяжкого nepeöiry БА пром1жних продукт1в даного процесу - бтк1в основного та нейтрального характеру у пор1внянн1 ¡з такими значениями у школяр1в ¡з середньотяжким вар1антом патологи.
* НДР: "Обфунтування ШивШуап'яованого лкування бронх1альноГ астми в dimeü шктьного вку", державний реестращй-ний номер 0107U004049
Том 9, Випуск 4 47
В1СНИК Украгнсъког' медичног' стоматологгчног академгг
Таблиця 1
Окрем1 показники КВП в dimeü кл/н/чних груп
№ КЛ1Н1ЧН1 ГРУПИ К-СТЬ Д1ТЕЙ МЕТАБОЛ 1ТИ ОКСИДУ АЗОТУ, МКМОЛЬ/Л ЗАГАЛЬНИЙ Б1ЛОК, Г/Л Б1ЛКИ ОСНОВНОГО ХАРАКТЕРУ, У.О.ОПТ.Щ1Л. Б1ЛКИ НЕЙТРАЛЬНОГО ХАРАКТЕРУ, У.О.ОПТ.Щ1Л.
1 тяжкии ПЕРЕБ1Г 21 38,5±4,39 3,4±0,38 77,2±9,17 7,6±0,97
II СЕРЕДНЬОТЯ ЖКИИ ПЕРЕБ1Г 24 35,7±4,94 3,9±0,37 52,3±8,3 5,1±0,78
Р >0,05 >0,05 <0,05 <0,05
Осктьки запальний процес у бронхах опосе-редковуеться ефекторними кл1тинами (при БА -еозинофтьш та нейтрофтьш гранулоцити), до-слщжували IX метабол1чну активнють в д1тей клш1чних груп.
В обстежених пац1ент1в вщм1чали зниження показниш вмюту фармазанпозитивних еозино-фт1в кров1 як у спонтанному, так \ в стимульова-ному вар1ант1 НСТ-тесту (табл. 2), що могло св1-дчити про зменшення можливостей до реал1заци ресшраторного вибуху внаслщок залучення цих
Показники киснезалежного метабол'!Зму еозиш
кл1тин до патоф1зюлопчних процеав, що кпш1чно проявлялися нападом БА. Звертала на себе увагу тенденц1я до зниження значень ICE та Тх резерву на тл1 зростання виходу фармазанпозитивних кл1тин у спонтанному та стимульованому вар1антах НСТ-тесту при тяжкому персистуванш БА в1дносно середньотяжкого nepeöiry. Можли-во, це пояснювалося бтьшим виснаженням ео-зинофт1в через ix пост1йну антигенну стимуля-ц1ю у pa3i тяжко!' форми захворювання.
Таблиця2
inie у dimeü кл1н1чних груп (за результатами НСТ-
тесту)
№ КЛ1Н1ЧН1 ГРУПИ к-сть Д1ТЕИ BMICT ФАРМАЗАНПОЗИТИВНИХ ЕОЗИНОФ1Л1В, % ICE, У.О. РЕЗЕРВ М1КРОБ1ЦИДНОСТ1 , %
СПОНТАННИИ HCT-TECT СТИМУЛЬОВАНИИ HCT-TECT
1 ТЯЖКИИ ПЕРЕБ1Г 21 10,2±1,35 11,4± 1,63 1,1 ±0,02 0,0043 ±0,0035
II СЕРЕДНЬО ТЯЖКИЙ ПЕРЕБ1Г 24 7,9±0,58 8,9±0,53 1,44±0,31 0,054 ±0,049
Р >0,05 >0,05 >0,05 >0,05
Згщно результате, наведених у табл. 3, вм1ст фармазанпозитивних нейтрофтьних гранулоци-TiB у кров1 школяр1в з тяжким персистувальним nepeöiroM БА виявився BiporiflHO вищим, шж у пац1ент1в ¡з середньотяжким вар1антом патолог1|. Под1бна тенденц1я характеризувала i стимульо-ваний вар1ант НСТ-тесту. Тяжкому вар1анту БА притаманними були зниження ICH та зменшення резерву киснезалежноТ м1кробщидносп нейтро-ф1л1в кров1, що, могло обумовлюватися зростан-ням антигенноТ стимуляцИ' цих гранулоцит1в.
Вказан1 феномени, ймов1рно, пояснювалися нер1вном1рним розпод1лом пулу гранулоцит1в. Так, при середньотяжкому персистувальному nepeöiry захворювання еозиноф1льн1 гранулоцити переважно сконцентрован1 у вогнищ1 запа-
лення - дихальних шляхах, I, осктьки вони е ос-новними ефекторними кл1тинами алерг1йного запалення, тому Тх фармазанпозитивн1 форми в менш1й к1лькост1 виявляються у перифер1йн1й кров1. За тяжкого переб1гу БА до запального процесу у респ1раторному тракт1 залучаються також неалерг1йн1 механ1зми, де кл1тинами-ефекторами виступають нейтроф1ли, що пояс-нювало зменшення к1лькост1 Тх фармазанпозитивних форм у кров1. Водночас зниження ¡ндек-с1в стимуляцпта виснаження резерву обох вид1в гранулоцит1в по м1р1 зростання тяжкост1 переб1гу патолог1Т, напевне, пояснювалося зб1льшенням антигенного навантаження та розширенням спектру сенсибт1заци орган1зму дитини (наприклад, до ¡нфекцшних чинник1в).
Таблиця3
Показники метабол'!Зму нейтрофтьних гранулоцит'1в у dimeü кл1н1чних груп (за результататми
НСТ-тесту)
№ КЛ1Н1ЧН1 ГРУПИ к-сть Д1ТЕИ BMICT ФАРМАЗАНПОЗИТИВНИХ НЕЙТРОФ1Л1В, % ICH, У.О. РЕЗЕРВ М1КРОБ1ЦИДНОСТ1 , %
СПОНТАННИИ HCT-TECT СТИМУЛЬОВАНИИ HCT-TECT
1 ТЯЖКИИ ПЕРЕБ1Г 21 19,2±1,74 29,5±1,56 1,7±0,54 0,13±0,025
II СЕРЕДНЬО ТЯЖКИЙ ПЕРЕБ1Г 24 25,6±2,37 34,8±2,87 2,1±0,68 0,19±0,068
Р <0,05 >0,05 >0,05 >0,05
Залучення до запального процесу в дихальних шляхах д1тей з тяжким персистувальним nepeöi-гом БА нейтрофтьних гранулоцит1в пщтверджу-валося низкою в1ропдних кореляц1йних зв'язк1в.
Зокрема, в1дм1чено прямий в1рог1дний кореля-ц1йний зв'язок ICH ¡з вм1стом загального б1лку (r=0,61, р<0,05) та негативний - з продуктами протеол1зу, зокрема, з бтками нейтрального (r=-
0,49, р<0,05) та основного характеру (r=-0,47, р<0,05). В д1тей I шшчноТ групи також вщм1ча-лася BiporiflHa кореляц1я вмюту метаболтв азоту в КВП з ICE (r=-0,59, р<0,05), та показниками ix резерву (r=-0,48, р<0,05).
Висновки
1. У хворих шк1льного в1ку по Mipi зростання тяжкосп бронх1ально1 астми поряд з тенденц1ею до п1двищення вм1сту метаболтв оксиду азоту у конденсат! видихуваного пов1тря спостер1галося в1рог1дне зростання продукт1в протеол1зу (61лк1в основного та нейтрального характеру).
2. Дисбаланс метабол1зму гранулоцит1в кров1 вщображався активац1ею киснезалежного мета-бол1зму еозиноф1л1в та зниженням вмюту фармазанпозитивних форм нейтрофт1в у перифе-р1йн1й кров1 по Mipi потяжчання nepeöiry патологи в1дпов1дно до переважання ефекторноТ рол1 цих клпин у запаленш дихальних шлях1в.
Лтература
1. Рекомендации Глобальной инициативы по борьбе с бронхиальной астмой, пересмотр 2006г. // Клшмна ¡мунолопя, алерголопя, ¡нфектолопя -
2007. - № 5. - С. 20 - 32.
2. Taylor D.R. A new perspective on concepts of astma severity and control / D.R. Taylor, E.D. Bateman, L-P. Boulet // Eur. Respir. J.-2008.-Vol.32. -P.545-554.
3. Безруков Л.О., Колоскова O.K. Хроннне запалення дихальних шляхв та атоп1я - характеры особливост1 бронх1альноТ астми в д1тей / Л.О.Безруков, O.K. Колоскова // Здоровье ребенка.-
2008.- №1(10).- С.125-127.
4. Horvath I. Barnes Exhaled breath condensate: methodological recommendations and unresolved questions / I. Horvath, J. Hunt, P.J. // Eur. Respir. J. -2005. - Vol. 26. - 523-548.
5. Ricciardolo F.L.M. Nitric oxide in health and disease of the respiratory system/ F.L.M. Ricciardolo, P.J. Sterk, B. Gaston // Phisiol. Rev. - 2004. - Vol. 84. - P.731-765.
6. Montuschi P. Analysis of exhaled breath condensate in respiratory medicine: methodological aspects and potential clinical applications /P. Montuschi// Ther. Adv. Respir. Dis. - 2007. Vol. 1. - P. 5-20. Carraro S. Metabolomics Applied to Exhaled Breath Condensate in Childhood Asthma / S. Carraro, S. Rezzi, F. Reniero // American Journal of Respiratory and Critical Care Medicine.- 2007.- Vol 175. P. 986990.
7.
Перспективы подальших розробок
Подальш1 дослщження передбачають розши-рення спектру ¡мунолопчного дослщження кров1 та 6ioxiMi4Horo анал1зу КВП з визначенням д1аг-ностично! цшносп дослщжуваних показнимв з метою об'ективноТ верифкацп тяжкого персисту-вального nepe6iry БА.
Реферат
МАРКЕРЫ ВОСПАЛЕНИЯ КОНДЕНСАТА ВЫДЫХАЕМОГО ВОЗДУХА И ПОКАЗАТЕЛИ
КМСЛОРОДОЗАВИСИМОГО МЕТАБОЛИЗМА ГРАНУЛОЦИТОВ КРОВИ У БОЛЬНЫХ БРОНХИАЛЬНОЙ АСТМОЙ
ШКОЛЬНИКОВ
Гарас М.Н.
Ключевые слова: бронхиальная астма, дети, конденсат выдыхаемого воздуха, метаболиты окиси азота, HCT-тест.
На основании изучения маркеров воспаления в конденсате выдыхаемого воздуха и показателей ки-слородзависимой микробицидности эозинофильных и нейтрофильных гранулоцитов крови у 45 детей школьного возраста, страдающих среднетяжелой и тяжелой персистирующей бронхиальной астмой, по мере утяжеления течения выявлена тенденция к увеличению содержания метаболитов оксида азота и продуктов протеолиза в конденсате выдыхаемого воздуха, активации кислородзависимого метаболизма эозинофилов и снижении содержания фармазанпозитивных форм нейтрофилов в периферической крови, что подтверждалось достоверными корреляционными связями.
Summary
INFLAMMATORY MARKERS IN EXHALED AIR CONDENSATE AND INDICES OF OXYGEN-INDEPENDENT METABOLISM OF BLOOD GRANULOCYTES IN SCHOOLCHILDREN WITH BRONCHIAL ASTHMA Haras M.N.
Key words: bronchial asthma, children, exhaled air condensate, nitric oxide metabolites.
Having studied the inflammatory markers in exhaled air condensate and indices of oxygen-independent germicidal activity of eosinophil and neutrophil blood granulocytes in 45 schoolchildren with moderate and severe bronchial asthma and as the course of the disease had become more severe we have observed the tendency to increasing in nitric oxide metabolites and proteolysis products in exhaled air condensate, to activation of oxygen-dependent eosinophil metabolism, and to decreasing in containing of farmazan positive forms of neutrophils in peripheric blood that was proved by reliable correlation.
Tom 9, Выпуск 4
49
