CC BY
33
3. Гиляров М.С. Биологический энциклопедический словарь / М.С. Ги-ляров. - М., 1986. - С. 65.
4. Горбачев В.В. Концепции современного естествознания / В.В. Горбачев. - М., 2005. - С. 274-275.
5. Хильдебрандт Г. Хронобиология и хрономедицина / Г. Хильдебрандт, М. Мозер, М. Лехофер. - М.: Арнебия, 2006. - С. 15-16.
ЗАКОНОМЕРНОСТИ ФОРМИРОВАНИЯ СПЕЦИФИЧЕСКОЙ ФАГОЦИТАРНОЙ РЕАКЦИИ НА МИКРОБНЫЙ АНТИГЕН
© Рочев В.П.*
Пермский государственный национальный исследовательский университет,
г. Пермь
При исследовании закономерностей формирования специфической фагоцитарной реакции к антигену шигелл Зонне установлена обратная корреляционная связь между исходными величинами фагоцитоза к специфическому объекту и изменением их уровня после активизации лейкоцитов ин витро микроконцентрациями шигелл Зонне, в ранний (1 час) и поздний (1 неделя) сроки. В то же время определяется прямая корреляционная связь между уровнями специфического изменения ФАЛ ин витро, в ранние и поздние сроки после иммунизации, что позволяет прогнозировать уровень специфического изменения фагоцитоза до введения в организм бактериального антигена - проводить отбор лиц для вакцинации против бактериальных инфекций.
Ключевые слова: фагоцитарная активность лейкоцитов, иммунизация животных.
В современной иммунологии общепризнанным является представление об иммунитете как о способе зашиты организма от живых тел и веществ, несущих на себе признаки чужеродной информации [3]. Антимикробная защита осуществляется неспецифическими факторами резистентности организма и специфическими иммунными факторами. Иммунная реакция выявляется не ранее конца первой-начала второй недели после первичного контакта организма с антигенами [8-9].
В литературе имеются работы, свидетельствующие о возможности очень быстрого специфического изменения фагоцитарной активности лейкоцитов (ФАЛ) - в ближайшие часы, даже минуты после введения микробов в организм [1, 3]. Эта специфическая фагоцитарная реакция (СФР) воспроизводится
* Профессор кафедры Экологии человека и безопасности жизнедеятельности, доктор медицинских наук, профессор.
и ин витро при взаимодействии крови с микробными антигенами [7]. По определению уровня СФР проводится ранняя диагностика инфекций [1, 2, 4]. Однако недостаточно исследована взаимосвязь между ранней СФР и специфического изменения ФАЛ на введение микробного антигена в организм.
Целью настоящего исследования является изучение взаимозависимости между уровнями изменения ФАЛ ин витро под влиянием микробных антигенов, в ранние и поздние сроки после введения этих антигенов в организм.
Материал и методы исследования
Исследования были проведены с кровью 35 кроликов.
В первой серии изучены закономерности изменения СФР, индуцируемой путем взаимодействия ин витро крови 36 кроликов с микробным антигеном шигелл Зонне с активностью от 0.001 до 0.1 антигенных единиц (АЕ)/мл в реакции торможения пассивной гемагглютинации (РИДА). Взвесь микробного антигена различной активностью смешивали в соотношении 1:1 с цельной кровью и выдерживали 30 мин при 37 °С и определяли уровни ФАЛ.
Во второй серии 7 кроликам вводили подкожно взвеси шигелл в дозе 600 млн микробных тел в 0.25 мл физиологического раствора хлористого натрия. ФАЛ определяли до введения микробной взвеси, после индукции СФР ин витро при взаимодействии микроконцентрациями антигена шигелл Зонне, через 1-2 часа и 7-8 дней после иммунизации кроликов.
Исследование ФАЛ производили с эритроцитами из антигенных эрит-роцитарных диагностикумов и предварительно окрашенными анилиновым красителем контрольными эритроцитами из антигенных диагностикумов, являющимися соответственно специфическими и неспецифическими объектами фагоцитоза. Такой способ позволяет в одном мазке одновременно производить подсчет фагоцитоза специфических и неспецифических объектов, окрашенных соответственно в синий и черный цвет [Авт. свид.].
Смесь выдерживали 10 мин при 37 °С. Мазки красили по Романовскому-Гимза. Величину ФАЛ оценивали по фагоцитарному числу (ФЧ) - среднему количеству фагоцитированных эритроцитов на каждый фагоцит.
При статистической обработке результатов исследования вычисляли среднюю арифметическую (М), среднюю ошибку (±т), коэффициент достоверности по Стьюденту (Р).
Результаты исследований и их обсуждение
Результаты исследований дозозависимого характера специфического изменения фагоцитоза у кроликов ин витро к микробному антигену шигелл Зонне изложены в табл. 1 и рис. 1.
Как видно из табл. 1, при контакте крови с микроконцентрациями антигена шигелл Зонне (до 0,001 от 0,1 АЕ/мл) отмечается статистически достоверное повышение ФАЛ к эритроцитам антигенного диагностикума из ши-
гелл Зонне. Реакция имеет также специфический характер: у активизированных фагоцитов наблюдается снижение уровня ФАЛ к контрольному объекту фагоцитоза.
Таблица 1
Изменение уровня ФАЛ кроликов ин витро под влиянием антигена шигелл Зонне
Статистические показатели Индуцирующая концентрация шигелл Зонне в АЕ/мл РТПГА
0,1 0,001
контроль опыт контроль опыт
М ± т (фагоцитарное число) 0,34 + 0,04 0,61 ± 0,06 0,44 + 0,03* 0,50 ± 0,06 0,34 + 0,03 0,55 ± 0,07 0,45 + 0,03* 0,50 ± 0,07
В % к фону 129 82 132 91
П (число животных) 29 18 20 9
Примечание: * Р < 0,05 в сравнении с интактными лейкоцитами;
в числителе величина ФАЛ к антигену шигелл Зонне, в знаменателе - к антигену шигелл Ньюкестл.
Таблица 2
Связь между уровнями специфического изменения фагоцитоза под влиянием активизирующих концентраций антигена шигелл Зонне ин витро, в ранние и поздние сроки после иммунизации кроликов этим антигеном
N крови кролика статистические показатели Показатели фагоцитоза
до введения активизированных шигеллами Зонне после введения шигелл Зонне кроликам через
1 час 1 неделю
фагоцитарное число в % к фону фагоцитарное число в % к фону фагоцитарное число в % к фону
1 0,21 0,34 0,38 0,35 +181 +103 0,43 0,39 +105 +15 1,10 0,20 +524 59
2 0,21 0,19 0,38 0,35 +181 +184 0,42 0,37 +200 +195 1,43 0,40 +681 +211
3 0,36 0,42 0,44 0,29 +122 69 0,47 0,29 +131 69 1,40 0,17 +389 40
4 0,40 0,43 0,50 0,37 +125 86 0,78 0,48 +195 112 0,93 0,10 +233 23
5 0,47 0,45 0,41 0,30 87 67 0,59 0,23 +126 51 1,00 0,20 +112 -56
6 0,49 0,39 0,35 0,58 71 149 0,57 0,47 +116 +121 0,63 0,40 +129 +103
7 0,50 0,38 0,34 0,55 68 145 0,27 0,43 54 +113 0,73 0,20 +146 53
М ± т 0,38+0,05 0,37+0,03 0,40+0,02 0,40+0,04 105 108 0,50+0,06 0,38+0,03 +132 +103 1,03+0,12* 0,24+0,04 +271 65
Примечание: * Р < 0,05 в сравнении с исходной величиной:
в числителе - величина ФАЛ к эритроцитам антигенного диагностикума из шигелл Зонне, в знаменателе - из шигелл Ньюкестл.
Результаты исследований взаимосвязи между уровнями изменения ФАЛ ин витро при взаимодействии микроконцентрациями антигена шигелл Зон-не, через 1-2 часа и 7-8 дней после иммунизации кроликов этих антигенов введены в табл. 2.
Как видно из табл. 2, отмечается статистически достоверная обратная корреляционная связь между исходными величинами фагоцитоза к специфическому объекту и изменением их уровня после активизации лейкоцитов ин витро микроконцентрациями шигелл Зонне (г = -0,99 ± 0,06; Р < 0,001): в ранний (г = -0,83 ±0,25; Р < 0,01) и поздний (г = -0,96 ± 0,13; Р < 0,001) сроки. В то же время определяется прямая корреляционная связь между уровнями специфического изменения ФАЛ ин витро в ранние и поздние сроки (г = соответственно + 0,89 ± 0,24; Р < 0,01 и + 0,94 ±0,15; Р < 0,001); с показателями по ранним и поздним срокам после иммунизации (г = + 0,73± 0,31; P < 0,05).
Таким образом, в двух сериях исследований подтверждается ранее изложенная закономерность обратной зависимости специфического изменения фагоцитоза ин витро под влиянием микроконцентраций микробных антигенов, что позволяет сделать заключение о возможности по индивидуальному уровню изменения этого показателя под влиянием активизирующих концентраций вакцин ин витро прогнозировать изменение ФАЛ в ранние и поздние сроки после иммунизации, проводить отбор обследуемых для вакцинации [6].
Список литературы:
1. Каплин В.Н. Нетрадиционная иммунология. - Пермь, 1996. - 233 с.
2. Колесникова А.Ф. Иммунопатогенез шигеллезов. - Новосибирск: Наука, 1984. - 135 а
3. Петров Р.В. Иммунология. - М.: Медицина, 1987. - 414 с.
4. Способ иммунодиагностики инфекций / В.Н. Каплин, Г.А. Клевцова, Н.А. Минина, Л.П. Санакоева, В.П. Рочев. Автор. свидетельство. N 1627992 от 15 октября 1990 г.
5. Черешнев В.А. К обоснованию механизма ранней специфической фагоцитарной реакции на введение бактериальных антигенов // Роль иммунных механизмов в развитии различных заболеваний. - Пермь, 1976. - X 138. -С. 58-59.
6. Черешнев В.А., Рочев В.П., Фельдблюм И.В. Способ отбора лиц для вакцинации против бактериальных инфекций. Патент. N 1800367 от 9.10.1992.
7. Цынкаловский Р.Б., Маслов А.К. Влияние полисахаридосодержащих комплексов клеточных оболочек микробов Зонне и Флекснера на фагоцитарную активность лейкоцитов в пробирке // Материалы к итоговой научной конференции. - Пермь, 1970. - Т. 99. - С. 195-198.
8. Melmon K.L., Khan M.M. Histamine and its lymphocyteselective derivatives as immune modulators // Trends Pharmacol. Sci. - 1987. - V 8, N 11. -P. 437-441.
9. Role of macrophages as modulators but not as stimulators in primary mixed leukocyte reaction / K. Naito [et al.] // Cell. Immunol. - 1984. - V 88, N 2. -P. 361-373.
РЕГУЛЯТОРНОЕ ВЛИЯНИЕ АНТИТЕЛ НА ФОРМИРОВАНИЕ СПЕЦИФИЧЕСКОЙ ФАГОЦИТАРНОЙ РЕАКЦИИ НА МИКРОБНЫЙ АНТИГЕН
© Рочев В.П.*
Пермский государственный национальный исследовательский университет,
г. Пермь
Исследования были проведены с кровью 26 обследуемых лиц в возрасте от 19 до 56 лет, из них 6 доноров и 20 лиц, подлежащих вакцинации против столбнячной инфекции, и 6 кроликов. Установлена обратная корреляция между уровнями специфического изменения фагоцитарной активности лейкоцитов (ФАЛ) ин витро под влиянием микро-доз микробных антигенов и иммунных сывороток и исходными величинами ФАЛ и титрами антител и прямая зависимость между уровнями изменения ФАЛ ин витро и через 8 дней после вакцинации животных. Доказана возможность прогнозирования эффективности вакцинации против бактериальных инфекций.
Ключевые слова иммунитет, антитела, фагоцитарная активность лейкоцитов, прогнозирование эффективности вакцинации.
Антимикробная защита организма осуществляется факторами неспецифическими и специфическими факторами иммунитета. Иммунная реакция (ИР) выявляется не ранее конца первой - начала второй недели после первичного контакта организма с антигенами Поэтому иммунодиагностика инфекций и оценка эффективности вакцинации, основанные на определении ИР, носят поздний характер [4, 6, 7].
В литературе имеются работы, свидетельствующие о возможности очень быстрого специфического изменения фагоцитарной активности лейкоцитов (ФАЛ) - в ближайшие часы и даже минуты после введения микробов в организм [1, 3] и в ранние сроки инфекций [2]. Эта специфическая фагоцитар-
* Профессор кафедры Экологии человека и безопасности жизнедеятельности, доктор медицинских наук, профессор.
