CC BY
11А „ SSSE5SSS 24-26 октября 2023 г.
^ А -ПРОХОРОвОСИЕ НЕДЕЛИ-
Высокочувствительное определение поверхностного вируса гепатита B с помощью усиления сигнала спектрально-фазовой интерферометрии наночастицами золота
Милованова М.В.1,2, Скирда А.М.1,2
1- Институт общей физики им. А.М. Прохорова Российской академии наук, Москва 2 - Национальный исследовательский ядерный университет «МИФИ», Москва.
Е-mail: akame2905@gmail. com
DOI: 10.24412/cl-35673-2023-1-177-179
Гепатит B является одним из наиболее распространенных вирусных заболеваний, которое может привести к развитию цирроза и рака печени. И хотя существуют различные методы диагностики гепатита, многие из них имеют ограничения, такие как низкая чувствительность и специфичность. При этом актуальной является задача создания новых методов анализа, основанных на применении наночастиц в качестве меток.
Наночастицы золота обладают хорошей биосовместимостью и являются одними из наиболее распространенных видов наночастиц, которые применяются в биомедицине. Их уникальные оптические свойства позволяют использовать их для усиления аналитического сигнала при детекции различных биологических молекул.
Целью данной работы является разработка метода усиления (амплификации) аналитического сигнала с помощью наночастиц золота, функционализированых различными биомолекулами, которые могут специфически связываться с антигенами вируса. Формирование комплексов антитело-антиген-конъюгат наночастицы с антителом анализируется с помощью метода спектрально-фазовой интерферометрии (СФИ) [1].
В ходе работы были синтезированы конъюгаты золотых наночастиц с поликлональными антителам (пАт) и к поверхностному антигену вируса гепатита B — HBsAg. Для исследования амплификации сигнала с помощью СФИ была произведена ковалентная иммобилизация на поверхности карбоксилированных стёкол либо антител к HBsAg, либо антигена HBsAg. Далее для определения способности детекции HBsAg с помощью антител без меток была реализована в троекратном повторении следующая модель эксперимента, представленная на рисунке 1.
ШКОЛ А-КОНФЕРЕНЦИЯ
МОЛОДЫХ УЧЁНЫХ
-ПРОХОРОвОСИЕ НЕДЕЛИ-
ФИЗИКА БИОЛОГИЧЕСКИХ И МЕДИЦИНСКИХ ПРИЛОЖЕНИИ
Рис. 1. Схема анализа прямого взаимодействия поликлональных антител с HBsAg, иммобилизованным на стеклянной сенсорной поверхности
Следующая серия экспериментов была посвящена сравнению сенсорных откликов при реализации сэндвич-иммуноанализа для определения HBsAg помощью синтезированных конъюгатов и немеченых пАт (рис. 2).
Рис. 2. Сравнение сенсорных откликов СФИ при реализации сэндвич-иммуноанализа для определения HBsAg помощью синтезированных конъюгатов и немеченых поликлональных антител.
А „ SSSE5SSS 24-26 октября 2023 г.
^ А -ПРОХОРОвОСИЕ НЕДЕЛИ-
В результате, было установлено, что с помощью использования наночастиц золота в качестве меток детектируемый СФИ сигнал увеличивается в 12 раз, что позволяет рассматривать предложенный подход как перспективный для создания чувствительных аналитических систем для определения HBsAg.
Автор выражает благодарность научному руководителю к.ф.-м.н. Никитину П.И. и к.ф-м.н. Орлову А.В. за постановку научной задачи, помощь в измерениях и обсуждение результатов.
1. Орлов А.В. и др. Acta Naturae (русскоязычная версия). 2014. 6(1(20)). 91-102.
