Возрастная динамика коли-титра кишечного микробиоценоза поросят в 3 - 9 недель жизни Текст научной статьи по специальности «Ветеринарные науки»

УДК 579.262:636.4

ВОЗРАСТНАЯ ДИНАМИКА КОЛИ-ТИТРА КИШЕЧНОГО МИКРОБИОЦЕНОЗА ПОРОСЯТ В 3 - 9 НЕДЕЛЬ ЖИЗНИ AGE DYNAMICS OF COLI-TITER IN INTESTINAL MICROBIOCENOSIS OF PIGLETS AT THE AGE OF 3 - 9 WEEKS

Скобликов Н. Э. к.м.н., Забашта Н. Н. к.в.н., Москаленко Е. А. ГНУ СКНИИЖ Россельхозакадемии, Российская Федерация, г. Краснодар, Зимин А. А. к.б.н.

ФБУН ИБФМ им.Г.К.Скрябина РАН, Российская Федерация, г. Пущино

N. E. Skoblikov, M.D., N.N Zabashta, Dr.Sci., E. A. Moskalenko North-Caucasus Research Institute of Animal Husbandry, Russian Academy of Agricultural Sciences, Krasnodar, Russian Federation, A. A Zimin, Dr. Sci.

Institute of Biochemistry and Physiology of Microorganisms, Pushchino, Moscow Region, Russian Federation

Аннотация: в результате исследования установлены особенности динамики коли-титра поросят в возрасте 3 - 9 недель, наиболее характерные из которых - подъём до 5,6 - 5,9 lg КОЕ/г в 46 дней и падение до 0,95 - 1,74 lg КОЕ/г в 53 дня. Установлено, что 50,0 % изолятов E.coli не имели плазмид.

Summary: the investigation showed special features of the dynamics of coli-titer for piglets the age of 3 - 9 weeks. The most characteristic of them: increase up to 5,6 - 5,9 lg CFU/g at 46 day and decrease to 0,95 - 1,74 lg CFU/g at 53 day. It is determined that 50,0 % of E.coli isolates had no plasmids.

Ключевые слова: поросята; кишечный микробиоценоз; E.coli; плазмиды; возрастная динамика.

Key words: piglets; intestinal microbiocenosis; E.coli; plasmids; age dynamics.

Исследование выполнено при финансовой поддержке РФФИ в рамках научного проектов № 11-04-96575-р_юг_ц; 12-04-90864-мол_рф_нр; 13-04-96599-р-юг-а.

Изучение микроэкологических механизмов популяционных изменений в микробиоценозах является в последнее время актуальным направлением микробиологии. Исследованиям в области популяционной динамики микробиоценозов теплокровных последнее время посвящено множество работ [1; 2; 3]. Данная работа направлена на описание динамики изолятов Е.еоН (динамика коли-титра) в кишечнике поросят с высокой частотой детализации (3 - 7 дней).

Методика. Производили периодический (с интервалом от 3 до 7 дней) отбор фекалий у 3 поросят 12 раз (всего 36 образцов), в возрасте от 17 до 66 дней. Фекалии, отобранные в стерильный контейнер, взвешивали, после чего ресуспендировали в 20 мл за-буференного физраствора и делали серию 10-кратных разведений в этом же растворе. Из пробирок с разведениями осуществляли первичный посев биоматериала на среду Эндо с последующим инкубированием при 37 °С в течение 24 ч. После инкубирования отбирали изолированные колонии, подозрительные на Е.еоН, учитывая их морфологические особенности и количество коло-ние-образующих единиц (КОЕ) данных бактерий. Количественная оценка (титр) содержания Е.еоН в исследуемом биоматериале осуществлялась путём подсчёта колоний после первичного посева, выражая её в ^ КОЕ/г.

После этого штаммы Е.еоН охарактеризовывали по спектру их физиолого-биохимических и молекулярно-генетических (определение плазмидного профиля) свойств.

Результаты исследований и их обсуждение. Общее количество выделенных изолятов Е.еоН составило 40 - от 10 до 16 на животное (в среднем, по 13,3 изолятов Е.еоН от одного животного). Наибольшим разнообразием типов изолятов Е.еоН отличались периоды 42 и 66 дней: в эти периоды у большинства животных определялось 2 штамма Е.еоН. Стоит отметить, что в тех образцах, где определялось 2 изолята Е.еоН, один из них был количественно доминирующим, демонстрирующим рост в титре, на 0,5 - 3 порядка превосходящем титр другого изолята.

Что касается суммарного коли-титра в каждом образце, то его динамика имела различия между животными. Коли-титр сильно различался между животными, колеблясь в диапазоне от

1,88 до 6,34 ^ КОЕ/г до 35-дневного возраста, после чего в динамике наблюдались определённые закономерности, характерные для всех животных. Наблюдалась стабилизация около 3,81 -4,51 ^ КОЕ/г в 39 дней, подъём до 5,6 - 5,9 ^ КОЕ/г в 46 дней, падение до 0,95 - 1,74 ^ КОЕ/г в 53 дня с последующим подъёмом в диапазон 3,49 - 4,53 ^ КОЕ/г в 39 дней (рис. 1).

Динамика титра E.coli у поросят 3-9 недель жизни

Возраст животных, дней

По результатам исследования плазмидного профиля выделенных изолятов E.coli было установлено, что безплазмидные штаммы составили 50,0 %. При этом интересно, что большинство (60,0 % от общего количества) таких штаммов выделялось до отъёма.

Что касается характеристики самих плазмид в изолятах, то их дифференцировка по молекулярной массе (М.м.) позволила выявить, по меньшей мере, 20 типов плазмид с М.м. от 900 до 10000 п.о.

Список литературы

1. Куликов Е.Е., Исаева А.С., Роткина А.С., Маныкин А.А. и Летаров А.В. Биоразнообразие и динамика бактериофагов в фекалиях лошадей // Микробиология. - 2007. - № 76. - С. 271-278.

2. Burova LM, Komeichuk EP, Kushkina AI, Tovkach FI. Plasmid profile, colicinogeny and phage sensitivity as indicators of the dynamics of Escherichia coli populations in the human gut. Mikrobiol Z. 2012 Sep-Oct;74 (5): - P. 99-107.

3. Golomidova A, Kulikov E, Isaeva A, Manykin A, Letarov A. The Diversity of Coliphages and Coliforms in Horse Feces Reveals a Complex Pattern of Ecological Interactions. Appl Environ Microbiol. - 2007. October; 73 (19): -P. 5975-5981.