Научная статья на тему 'Возрастная динамика экспрессии изоформ CD45 Т-хелперами и Т-цитотоксическими лимфоцитами крови здоровых людей'

Возрастная динамика экспрессии изоформ CD45 Т-хелперами и Т-цитотоксическими лимфоцитами крови здоровых людей Текст научной статьи по специальности «Фундаментальная медицина»

CC BY
1233
210
i Надоели баннеры? Вы всегда можете отключить рекламу.
Журнал
Иммунология
Scopus
ВАК
CAS
RSCI
Ключевые слова
ВОЗРАСТНАЯ ДИНАМИКА Т-КЛЕТОК / НАИВНЫЕ Т-КЛЕТКИ / Т-КЛЕТКИ ПАМЯТИ / CD45RA/CD45R0 / CD45RA/CD45RO / AGE-DEPENDENT DYNAMICS OF T-CELLS / T-NAIVE CELLS / T-MEMORY CELLS

Аннотация научной статьи по фундаментальной медицине, автор научной работы — Топтыгина Анна Павловна, Семикина Е. Л., Копыльцова Е. А., Алешкин В. А.

Целью настоящей работы было исследование возрастной динамики экспрессии различных изоформ CD45 на Т-лимфоцитах периферической крови здоровых людей. Когорта исследования состояла из 337 человек (166 лиц мужского пола и 171 - женского) в возрасте от рождения (включая пробы пуповинной крови) до 88 лет. Четырехцветные комбинации CD45RA/CD45R0/CD3/CD4 и CD45RA/CD45R0/CD3/CD8 были использованы для оценки различных субпопуляций Т-лимфоцитов методом проточной цитофлуорометрии с помощью цитометра FACSCalibur (BD Biosciences, США). Была выявлена зависящая от возраста динамика наивных лимфоцитов и Т-клеток памяти. Обнаружено, что количество CD45RA +CD3 +CD4 +-клеток снижалось, а количество CD45R0 +CD3 +CD4 + клеток повышалось быстрее, чем в соответствующих субпопуляциях CD3 +CD8 +-лимфоцитов. Обсуждается вклад периферической пролиферации недавних мигрантов из тимуса и гомеостатической пролиферации наивных Т-клеток в соотношение субпопуляций Т-лимфоцитов.

i Надоели баннеры? Вы всегда можете отключить рекламу.

Похожие темы научных работ по фундаментальной медицине , автор научной работы — Топтыгина Анна Павловна, Семикина Е. Л., Копыльцова Е. А., Алешкин В. А.

iНе можете найти то, что вам нужно? Попробуйте сервис подбора литературы.
i Надоели баннеры? Вы всегда можете отключить рекламу.

Age-dependent dynamics of the CD45 isoforms expression on the T-helper and T-cytotoxic lymphocytes in the blood of the healthy people

The aim of the study was the age-dependent dynamics of CD45 isoforms expression on the main T-cell subsets investigation. Examined cohort was 337 people (166 male and 171 female) aged from birth (cord probe included) up to 88 years old. Four-colour combinations CD45RA/CD45R0/CD3/CD4 and CD45RA/CD45R0/CD3/CD8 were used to estimate different subsets of T-lymphocytes by flow cytometer FACSCalibur (BD Biosciences, USA). Age-dependent dynamics of T-naive and T-memory cell subsets was shown. It was found the CD45RA +CD3 +CD4 +cells decreased and the CD45R0 +CD3 +CD4 + cells increased rapidly than CD3 +CD8 + lymphocyte subsets did. The peripheral proliferation of the recent thymic emigrant subset and homeostatic proliferation of the T-naive cells contribution in T-subsets proportion is discussed.

Текст научной работы на тему «Возрастная динамика экспрессии изоформ CD45 Т-хелперами и Т-цитотоксическими лимфоцитами крови здоровых людей»

становлении лимфоидных органов приводит к конверсии фенотипа части наивных Т-клеток в центральные Т-клетки памяти, при этом более высокий уровень пролиферации особенно CD8+-Т-клеток скорее всего является причиной накопления клеток с фенотипом эффекторных Т-клеток памяти.

Работа выполнена при финансовой поддержке Российского фонда фундаментальных исследований РАН России; грант 11-04-01741-а.

литература

2. Ярилин А.А. Гомеостатические процессы в иммунной системе. Контроль численности лимфоцитов. Иммунология. 2004; 25 (5): 312-20.

8. Митин А.Н., Литвина М.М., Комогорова В.В., Шарова Н.И., Ярилин А.А. Вклад гомеостатической пролиферации и связанных с ней процессов в восстановление популяции периферических Т-клеток в условиях лимфопении, индуцированной облучением. Иммунология. 2013; 34 (5): 242-7.

Поступила 25.04.14

references

1. Sprent J., Cho J.-H., Boyman O., Surh C.D. T cell homeostasis. Immunol. Cell Biol. 2008; 86: 312-9.

2. Yarilin A.A. Homeostatic processes in immune system. Lymphocytes quantity control. Immunologiya. 2004; 25 (5): 312-20. (in Russian)

3. Sprent J., Surh C.D. Normal T cell homeostasis: the conversion of naive cells into memory-phenotype cells. Nature. Immunology. 2011; 12: 478-84.

4. Cho B.K., Rao V.P., Ge Q., Eisen H.N., Chen J. Homeostasis-stim-ulated proliferation drives naive T cells to differentiate directly into memory T cells. J. Exp. Med. 2000; 192: 549-56.

5. Goldrath A.W., Bogatzki L.Y., Bevan M.J. Naive T cells transiently acquire a memory-like phenotype during homeostasis driven proliferation. J. Exp. Med. 2000; 192: 557-64.

6. Sallusto F., Geginat J., Lanzavecchia A., Central memory and effector memory T cell subsets: function, generation, and maintenance. Annu. Rev. Immunol. 2004; 22: 745-63.

7. Gleeson P.A., Toh B.H., van Driel I.R. Organ-specific autoimmu-nity induced by lymphopenia. Immunol. Rev. 1996; 149: 97-125.

8. Mitin A.N., Litvina M.M., Komogorova V.V., Sharova N.I., Yarilin A.A. Contribution of homeostatic proliferation and related processes to restoration of peripheral T cell population in irradiation induced lymphopenia. Immunologiya. 2013; 34 (5): 242-7. (in Russian)

9. Haluszczak C., Akue F.D., Hamilton S.E. et al. The antigen-specific CD8+ T cell repertoire in unimmunized mice includes memory phenotype cells bearing markers of homeostatic expansion. J. Exp. Med. 2009; 206: 435-48.

Received 25.04.14

о коллектив авторов, 2014 удк 612.017.1.084-053

Топтыгина А.П.1, Семикина Е.л.2-3, Копыльцова Е.А.2, Алешкин В.А.1

возрастная динамика экспрессии ИзОФОРМ CD45-T-ХEЛПEРАМИ И т-цитотоксическими лимфоцитами крови здоровых людей

1Лаборатория цитокинов, ФБУН «МНИИЭМ им. ПН. Габричевского», Роспотребнадзора, 125212, г Москва; Централизованная клинико-диагностическая лаборатория ФГБУ «Научный центр здоровья детей», РАМН, г. Москва; 3Российский национальный исследовательский медицинский университет им. Н.И. Пирогова, г. Москва

Целью настоящей работы было исследование возрастной динамики экспрессии различных изоформ CD45 на Т-лимфоцитах периферической крови здоровых людей. Когорта исследования состояла из 337 человек (166 лиц мужского пола и 171 - женского) в возрасте от рождения (включая пробы пуповинной крови) до 88 лет. Четырехцветные комбинации CD45RA/CD45R0/CD3/CD4 и CD45RA/CD45R0/CD3/CD8 были использованы для оценки различных субпопуляций Т-лимфоцитов методом проточной цитофлуорометрии с помощью цитометра FACSCalibur (BD Biosciences, США). Была выявлена зависящая от возраста динамика наивных лимфоцитов и Т-клеток памяти. Обнаружено, что количество CD45RA+CD3+CD4+-клеток снижалось, а количество CD45R0+CD3+CD4+ клеток повышалось быстрее, чем в соответствующих субпопуляциях CD3+CD8+-лимфоцитов. Обсуждается вклад периферической пролиферации недавних мигрантов из тимуса и гомеостатической пролиферации наивных Т-клеток в соотношение субпопуляций Т-лимфоцитов.

Ключевые слова: возрастная динамика Т-клеток; наивные Т-клетки; Т-клетки памяти; CD45RA/CD45R0. ToptyginaA.P.1, SemikinaE.L.23, Kopyl'tsovaE.A.2, Alioshkin V.A.1

AGE-DEPENDENT DYNAMICS OF THE CD45 ISOFORMS EXPRESSION ON THE T- HELPER AND T-CYTOTOXIC LYMPHOCYTES IN THE BLOOD OF THE HEALTHY PEOPLE

'G.N. Gabrichevsky Research Institute of Epidemiology and Microbiology, Moscow, Russia; 2Scientific Center of Children's Health RAMS, Moscow, Russia; 3Russian State Medical University

The aim of the study was the age-dependent dynamics of CD45 isoforms expression on the main T-cell subsets investigation. Examined cohort was 337 people (166 male and 171 female) aged from birth (cord probe included) up to 88 years old. Four-colour combinations CD45RA/CD45R0/CD3/CD4 and CD45RA/CD45R0/CD3/CD8 were used to estimate different subsets of T-lymphocytes by flow cytometer FACSCalibur (BD Biosciences, USA). Age-dependent dynamics of T-naïve and T-memory cell subsets was shown. It was found the CD45RA+CD3+CD4+cells decreased and the CD45R0+CD3+CD4+ cells increased rapidly than CD3+CD8+ lymphocyte subsets did. The peripheral proliferation of the recent thymic emigrant subset and homeostatic proliferation of the T-naïve cells contribution in T-subsets proportion is discussed.

Key words: age-dependent dynamics of T-cells; T-naïve cells; T-memory cells; CD45RA/CD45RO.

Для корреспонденции: Топтыгина Анна Павловна, e-mail: [email protected] For correspondence: Toptygina Anna Pavlovna, e-mail: [email protected]

Введение

Т-лимфоциты (CD3+-KneTKH) подразделяются на две основные субпопуляции: CD4+, или хелперы, и CD8+, или цитотоксические лимфоциты. Трансмембранный гликопротеин CD45 представлен на всех лейкоцитах периферической крови, его цитоплазма-тический домен обладает тирозин-фосфатазной активностью. Этот белок вовлечен в процесс передачи сигнала от Т-клеточного рецептора [1]. Описано по крайней мере 4 изоформы CD45, образующихся в результате альтернативного сплайсинга 4, 5 и 6 экзонов одного и того же гена [2]. Эти изоформы по-разному экспрессированы на субпопуляциях лимфоцитов, так наивные Т-лимфоциты человека имеют фенотип CD45RA+CD45R0-, тогда как клетки памяти, напротив, демонстрируют CD45RA-CD45R0+-фенотип [3]. По экспрессии L-селектина (CD62L) и хемокинового рецептора CCR7 из пула Т-лимфоцитов, экс-прессирующих cD45RA, можно выделить собственно наивные Т-клетки (фенотип CD45RA+CCR7+CD62Lhi) и эффекторы первичного иммунного ответа (фенотип CD45RA+CCR7"CD62Ll0) [4, 5]. Последние представляют собой короткоживущие эффек-торные клетки, образующиеся в ответ на первичный контакт с антигеном, которые и обеспечивают элиминацию антигена при первичном иммунном ответе и уходят в апоптоз по завершении его. В то же время клетки памяти делят на центральные (фенотип cD45R0+ccR7+cD62Lhi) и эффекторные (фенотип CD45R0+CCR7~CD62Ll0) [6, 7]. Центральные клетки памяти ре-циркулируют через вторичные лимфоидные органы и отвечают за поддержание пула клеток памяти, а эффекторные клетки памяти рециркулируют через барьерные органы и ткани и осуществляют иммунологический надзор и быструю элиминацию антигена в случае повторного внедрения последнего в иммунный организм [8, 9]. Однако выявление нескольких новых субпопуляций Т-клеток нарушило эту стройную систему. Оказалось, что Т-эффекторы памяти в свою очередь разделяются на типичные Т-эффекторы памяти с фенотипом CD45R0+CCR7"CD62Ll0 и окончательно дифференцированные (ранее их называли псевдонаивные Т-лимфоциты) Т-эффекторы памяти с фенотипом CD45RA+ CCR7"CD62Ll0 [10, 11]. Последние образуются в процессе вторичного иммунного ответа, они максимально активны в отношении своих причинных антигенов и после завершения иммунного ответа полностью элиминируются из организма [8, 12]. С другой стороны, были также обнаружены наивные Т-клетки, экспрессирующие CD45R0. Эти клетки образуются при гомео-статической пролиферации и носят наименование "memory-like phenotype", или суррогатные клетки памяти [13, 14].

В своей статье, посвященной возрастным изменениям в иммунной системе, А.А. Ярилин [15] подчеркивал, что наиболее глубоким возрастным изменениям подвергается именно ти-мусзависимое звено системы иммунитета. И там же формулировал: «Важно также изучить возрастные особенности регуляции фракций наивных Т-клеток и Т-клеток памяти и изыскать средства воздействия на продолжительность их жизни». Целью настоящей работы было исследование возрастной динамики экспрессии различных изоформ cD45 на Т-лимфоцитах периферической крови здоровых людей.

Материал и методы

В процессе работы были обследованы 337 человек (166 лиц мужского пола и 171 - женского). В анамнезе обследованных лиц отсутствовали тяжелые и хронические заболевания. При осмотре обследованных врачом не отмечалось признаков патологии. Полученные в результате лабораторного исследования показатели общего анализа крови (5Diff - автоматизированный анализ), процентный и абсолютный состав основных субпопуляций лимфоцитов крови и показатели гуморального иммунитета находились в пределах возрастных норм, что позволило охарактеризовать когорту обследованных как «здоровых людей». Обследованные лица по возрасту были разделены на следующие группы: 16 проб пуповинной крови, 17 недоношенных новорожденных (средний гестационный возраст 34 нед), 27 здоровых новорожденных, дети в возрасте 4-5 мес - 34 человека, 42 ребенка в возрасте 6-11 мес, 26 детей в возрасте 1-2 года, 25 детей в возрасте 3-5 лет, дети в возрасте 7-10 лет - 20 человек, в возрасте 11-12 лет - 38 человек, 25 подростков в возрасте 13-15 лет, 27 подростков в возрасте 15-17 лет, 19 взрослых в возрасте 18-35 лет, 13 человек в возрасте 45-55 лет и 8 пожилых лиц в возрасте

100 90 80 70 60 50 40 30 20 10 0

%

100 90 80 70 60 50 40 30 20 10 0

Hi- (дЛ V*- V ^Л ^Л ,о,Л фЛ фЬ фР % б

Рис. 1. Возрастные изменения количества Т-лимфоцитов, экспрес-сирующих различные изоформы молекулы CD45 (М ± SE). а - процент от количества СБ3+-лимфоцитов; б - процент от количества СВ3+СБ4+-лимфоцитов; в - процент от количества СБ3+СБ8+-лимфоцитов.

Сплошная линия - процент лимфоцитов, экспрессирующих СD45RA. Пунктирная линия - процент лимфоцитов, экспрессирующих СD45R0. Здесь и на рис. 2: по оси абсцисс - возраст обследованных лиц; Пуп. - в пуповинной крови; НН - новорожденные недоношенные; НД - новорожденные доношенные.

61-88 лет. При исследовании пуповинной крови и новорожденных детей использован остаточный объем крови после выполнения общего анализа, в других возрастных группах пробы крови брали при проведении диспансеризации; у детей в возрасте до 2 лет исследовали капиллярную кровь, в более старшем возрасте - венозную.

Мембранные СD-маркеры определяли методом проточной цитофлюорометрии в реакции прямой иммунофлюоресценции,

реактивы и технологии BD Bioscienses: цитометр FacsCalibur, программа сбора и обработки информации CellQuest. Пробо-подготовку проводили по методу «лизис с отмывкой», выделение лимфоидного региона - с окрашиванием CD45 по графикам CD45/SSC и графикам светорассеяния FSC/SSC с контролем чистоты выделения лимфоцитов по экспрессии CD45 (95-98% CD45+-клеток в регионе). Для определения субпопуляций Т-лимфоцитов использовали четырехцветные композиции из следующих поверхностных маркеров: CD45RA FITC / CD45R0 PE / CD3 PerCP / CD4 APC и CD45RA FITC / CD45R0 PE / CD3 PerCP / CD8 APC. Оценивали общий уровень Т-лимфоцитов, Т-хелперов и Т-цитотоксических клеток (процент CD3+, CD3+CD4+ и CD3+CD8+ соответственно). Для оценки экспрессии CD45RA и CD45R0 в субпопуляциях Т-лимфоцитов, Т-хелперов и Т-цитотоксических клеток проводилось построение графиков CD45RA/CD45R0 в регионах, выделенных по флюоресценции CD3+, CD3+CD4+ и CD3+CD8+ соответственно.

Полученные результаты были подвергнуты обработке методами вариационной статистики с вычислением средней арифметической и ее стандартной ошибки (M ± SE). О достоверности различий средних величин судили по критерию Стьюдента (Г). Корреляции рассчитывали методом Пирсона. Различия считали значимыми при p < 0,05.

результаты и обсуждение

Изменение количества Т-лимфоцитов (гейт CD3+) в периферической крови, экспрессирующих CD45RA или CD45R0, в зависимости от возраста представлено на рис. 1, а. Прежде всего обращает на себя внимание прогрессивное снижение количества наивных клеток (CD45RA) и повышение количества Т-клеток памяти (CD45R0). На рисунке хорошо видно, что в возрасте около 50 лет количество Т-клеток, экспрессирующих CD45RA и CD45R0, уравнивается (на графике - точка перекреста). В более старшем возрасте наивных Т-лимфоцитов становится еще меньше, а количество клеток памяти прогрессивно нарастает. Эти данные полностью согласуются с существующими на данный момент представлениями о том, что с возрастом увеличивается количество контактов с чужеродными антигенами, что ведет к нарастанию пула клеток памяти. Весьма любопытным представляется тот факт, что у здоровых новорожденных и даже недоношенных детей имеется около 10% Т-лимфоцитов, экспрессирую-щих маркер CD45R0, т. е. такие клетки должны рассматриваться как клетки памяти, хотя контакт с антигенами окружающей среды едва только начался и времени на формирование клеток памяти новорожденному ребенку еще недостаточно.

Далее была исследована представленность CD45RA и CD45R0 на основных субпопуляциях Т-лимфоцитов. Результаты исследования отражены на рис. 1, б (для гейта CD3+CD4+) и рис. 1, в (для гейта CD3+CD8+). Хорошо видно, что тенденции, выявленные для всей популяции Т- лимфоцитов, прослеживаются и в отношении их субпопуляций, однако с некоторыми различиями. Так, в субпопуляции Т-хелперов (CD3+CD4+) отмечается более быстрое снижение количества наивных Т-лимфоцитов и соответственно более быстрый прирост Т-клеток памяти. Точка перекреста двух кривых достигается уже в молодом возрасте (группа 18-35 лет). В то же время в субпопуляции цитотоксических Т-клеток эти процессы идут значительно медленнее. Точка перекреста достигается в возрасте 60 лет. В раннем возрасте нет различий в экспрессии разных изоформ CD45 в субпопуляциях CD3+CD4+ и CD3+CD8+ Т-лимфоцитов. Однако тенденция намечается в возрасте 3-5 лет и становится значимой в более старшем возрасте (р < 0,01) и снова исчезает в возрасте 60 лет и старше. Так же, как и на всей популяции Т-клеток, примерно на 10% CD3+CD4+ и CD3+CD8+ Т-лимфоцитов пуповинной крови и новорожденных была экспрессирована изоформа CD45R0. Выявлена сильная отрицательная корреляция между возрастом и общим количеством Т-клеток, несущим маркер

маркеров

20

18

16

14

12

10 8

6

0

CD45RA, и их CD4+- и CD8+-субпопуляций (rCD3+ = - 0,716, rCD4+ = - 0, 713, rCD8+ = - 0,626) и сильная положительная корреляция между возрастом и Т-лимфоцитами, экспрессирующими CD45R0, как для общего количества CD3+-клеток, так и для популяций CD3+CD4+ и CD3+CD8+ Т-лимфоцитов (r = 0,728,

rcD4+ = 0 724, r CD8+ = 0,635>

При анализе соотношения количества Т-лимфоцитов, экспрессирующих разные изоформы CD45, обнаружена интересная тенденция. Результаты анализа представлены на рис. 2. Если кривая отношения клеток, экспрессирующих CD45RA, к количеству клеток, экспрессирующих CD45R0, для субпопуляции CD3+CD4+ практически не отличалась от кривой, построенной для всех Т-лимфоцитов и плавно снижалась, то аналогичная кривая, построенная для субпопуляции CD3+CD8+ лимфоцитов сильно отставала, особенно в раннем возрасте. Но и в старшем возрасте эта тенденция сохранялась, различия оказались значимыми (р < 0,05).

Для анализа полученных результатов необходимо вспомнить, что пул Т-клеток на периферии поддерживается за счет трех основных процессов: формирования новых наивных Т-клеток в тимусе, формирования Т-клеток памяти в процессе иммунного ответа и гомеостатической пролиферации как наивных, так и Т-клеток памяти. В разные возрастные периоды эти процессы идут с разной интенсивностью. Известно, что с наибольшей интенсивностью тимус работает от рождения до пубертатного возраста, затем начинается возрастная инволюция тимуса, однако и у очень пожилых людей эта функция не исчезает полностью [16]. В то же время пул клеток памяти только начинает формироваться после рождения, постепенно увеличиваясь по мере все новых контактов с чужеродными антигенами. Кроме того, также возрастает продукция основного гомеостатического цитокина клеток памяти - IL-15, что также позволяет увеличиваться пулу клеток памяти [17]. Гомеостатическая пролиферация играет ключевую роль в ликвидации глубокой лимфопении [18]. Но не все так просто в организме человека. Относительно недавно стало известно, что после выхода наивных Т-клеток из тимуса (RTE-клеток - от «recent thymic emigrants») они проходят еще один этап созревания - периферическую положительную селекцию [19, 20]. Клетки RTE должны распознать на поверхности дендритных клеток комплекс МНС-аутопептид во вторичных лимфоидных органах. Дело в том, что спектр аутопептидов, представляемый для селекции в тимусе, немного отличается от спектра аутопептидов, представляемых на периферии. Только те RTE-клетки, которые распознают аутопептид на периферии, получают сигнал к выживанию, при этом они про-лиферируют несколько раз, приобретают статус зрелых наивных Т-клеток, но продолжают экспрессировать все маркеры, типичные

Пуп. НН НД

4-5 мес

6-11 мес

1-2 года

3-5 лет

7-10 лет

11-12 13-15 15-17 18-35 45-55 лет лет лет лет лет

61-88 лет

Рис. 2. Изменение соотношения лимфоцитов, экспрессирующих CD45RA к лимфоцитам, экспрессирующим CD45R0, в зависимости от возраста (М ± SE).

Кривая (черные кружки) - соотношение в гейте СБ3+-лимфоцитов; косая штриховка - соотношение в гейте СБ3+СБ4+-лимфоцитов; перекрестная лимфоцитов.

соотношение в гейте CD3+CD8+

для наивных клеток, в том числе и CD45RA. Те RTE, которые не смогли распознать аутопептид, уходят в апоптоз. За счет этого механизма увеличивается количество клеток в каждом клоне наивных клеток и общее количество клеток в пуле наивных Т-клеток на периферии. Ранее считали, что этот механизм работает только непосредственно после рождения, но недавние работы показали, что у человека этот механизм привносит весьма весомый вклад в общий пул Т-клеток и во взрослом состоянии в отличие от мышей [21]. Совсем иной механизм и результат при гомеостатической пролиферации. Этот процесс индуцируется лимфопенией и сопровождается сменой спектра маркеров, характерных для наивных клеток, на спектр маркеров, типичных для Т-клеток памяти [14]. При этом свойства клеток соответствуют уровню наивных клеток, в частности TCR таких клеток способен с низким аффинитетом распознавать аутопептид, выживание зависит преимущественно от IL-7, а на поверхности экспрессированы CD45R0, CCR9, CCR4 и cD44 (у мышей), такие клетки называют суррогатными клетками памяти или memory-like phenotype. Накопление таких клеток может провоцировать начало аутоиммунной патологии [22].

Результирующая всех вышеописанных процессов отражается в возрастной динамике различных изоформ CD45. Так, к моменту первой волны выселения арТ-клеток из тимуса на периферии фактически имеются условия тотальной лимфопении. Как бы активно ни работал тимус в этом периоде, он не способен моментально заполнить всю периферию достаточным количеством Т-клеток. Частично этот дефицит покрывается за счет периферической положительной селекции RTE-клеток, в результате чего частично увеличивается количество зрелых наивных клеток на периферии. Эти клетки экспрессируют изоформу cD45RA. Однако на первых порах этого совершенно недостаточно. Потребность периферического отдела в Т-клетках значительно больше. Поэтому зрелые наивные клетки вступают в гомеостатическую пролиферацию на периферии. В результате клетки, прошедшие гомеостатическую пролиферацию, начинают экспрессировать молекулу CD45R0 - это суррогатные клетки памяти. Отражение именно этого процесса мы наблюдаем в пробах пуповинной крови и у новорожденных - около 10% Т-клеток несут маркер CD45R0, хотя у них еще не было достаточно времени после рождения для выработки истинных клеток памяти. Тимус активно работает в раннем возрасте, поставляя вновь образовавшиеся наивные Т-клетки на периферию, постепенно выравнивая ситуацию. Возможно, именно этим объясняется обнаруженная нами тенденция, что у недоношенных детей меньше клеток, несущих CD45RA, и больше, экспрессирующих CD45R0, чем у доношенных. Значимость различий оказалась практически на грани достоверной (p = 0,0508). По мере взросления, а затем старения организма вклад тимуса в поддержание пула Т-клеток все меньше и все большую роль начинает играть гомеостатическая пролиферация. Это приводит к тому, что в старческом возрасте изрядную долю CD45R0-клеток составляют суррогатные клетки памяти. С одной стороны, они конкурируют за выживание с истинными клетками памяти, обеспечивающими иммунную защиту пожилым людям. С другой стороны, как уже говорилось выше, они могут спровоцировать аутоиммунную патологию, известно, что в пожилом возрасте риски таких заболеваний резко возрастают. Поэтому в любом возрасте не следует рассматривать все клетки, несущие маркер CD45R0, как истинные клетки памяти. По-видимому, всегда в той или иной мере среди них присутствуют и суррогатные клетки памяти. Существует мнение, что суррогатные клетки хуже экспрессируют молекулу CD49d, чем истинные клетки памяти, по крайней мере у мышей [22]. Возможно, использование этого маркера прольет свет на истинное соотношение различных субпопуляций в пуле периферических Т-лимфоцитов.

литература

5. Топтыгина А.П. Т-клетки памяти. Иммунология. 2008; 29 (5): 311-7.

12. Топтыгина А.П., Семикина Е.Л., Алешкин В.А. Изменение количества Т клеток памяти в ответ на вакцинацию «Приорикс». Российский иммунологический журнал. 2012; 6 (15): 253-8.

15. Ярилин А.А. Возрастные изменения тимуса и Т-лтимфоцитов. Иммунология. 2003; 24 (2): 117-28.

16. Донецкова А.Д., Фроленко А.Л., Трошина В.В., Смолягин А.И., Ярилин А.А. Тимусные эксцизионные кольца в лимфоцитах периферической крови. Возрастная динамика и влияние тимэкто-мии. Иммунология. 2010; 31 (6): 293-9.

20. Ярилин А.А., Донецкова А.Д. Т-клетки недавние мигранты из тимуса. Иммунология. 2012; 33 (6): 326-34.

22. Митин А.Н., Литвина М.М., Комогорова В.В., Шарова Н.И., Ярилин А.А. Вклад гомеостатической пролиферации и связанных с ней процессов в восстановление популяции периферических Т-клеток в условиях лимфопении, индуцированной облучением. Иммунология. 2013; 34 (5): 242-7.

Поступила 25.04.14

references

1. Koretzky G.A., Picus J., Thomas M.L., Weiss A. Tyrosine phosphatase CD45 is essential for coupling T-cell antigen receptor to the phosphatidyl inositol pathway. Nature. 1990; 346 (6279): 66-8.

2. Streuli M., Hall L.R., Saga Y., Schlossman S.F., Saito H. Differential usage of three exons generates at least five different mRNAs encoding human leukocyte common antigens. J. Exp. Med. 1987; 166 (5): 1548-66.

3. Beverley P.C.L., Merkenschlager M., Terry L. Phenotypic diversity of the CD45 antigen and its relationship to function. Immunology. 1988; Suppl. 1: 3-8.

4. Bradley L.M., Duncan D.D., Tonkonogy S.L., Swain S.L. Characterization of antigen-specific CD4+ effector T cells in vivo: Immunization results in transient population of MEL-14-CD45RB- helper cells that secretes Il-2, Il-3, and Il-4. J. Exp. Med. 1991; 174: 547-59.

5. Toptygina A.P. T-memory cells. Immunologiya. 29 (5): 311-7. (in Russian)

6. Sallusto F., Lenig D., Foster R., Lipp M., Lanzavecchia A. Two subsets of memory T lymphocytes with distinct homing potentials and effector functions. Nature. 1999; 401: 708-12.

7. Sallusto F., Geginat J., Lanzavecchia A. Central memory and effector memory T cell subsets: function, generation, and maintenance. Annu. Rev. Immunol. 2004; 22: 745-63.

8. Maldonado A., Mueller Y., Thomas P., Bojczuk P., O'Connors C., Katsikis P.D. Decreased effector memory CD45RA+CD62L-CD8+ T cells and increased central memory CD45RA-CD62L+CD8+ T cells in peripheral blood of rheumatoid arthritis patients. Arthr. Res. Ther. 2003; 5: 91-6.

9. Tussey L., Speller S., Gallimore A., Vessey R. Functionally distinct CD8+ memory T cell subsets in persistent EBv infection are differentiated by migratory receptor expression. Eur. J. Immunol. 2000; 30: 1823-9.

10. Tomiyama H., Matsuda T., Takiguchi M. Differentiation of human CD8+ T cells from a memory to memory/effector phenotype. J. Immunol. 2002; 168: 5538-50.

11. Waller E.C., McKinney N., Hicks R. Carmichael A.J., Sissons J.G., Wills M.R. Differential costimulation through CD137 (4-1BB) restores proliferation of human virus-specific "effector memory" (CD28-CD45RAhi) CD8+ T cells. Blood. 2007; 110: 4360-6.

12. Toptygina A.P., Semikina E.L., Alioshkin V.A. Changing of T-mem-ory cell number after "Priopix" vaccination. Rossiyskiy immunolog-icheskiy zhurnal. 2012; 6 (15): 253-8. (in Russian)

13. Goldrath A.W., Bogatzki L.Y., Bevan M.J. Naive T cells transiently acquire a memory-like phenotype during homeostasis driven proliferation. J. Exp. Med. 2000; 192: 557-64.

14. Sprent J., Surh C.D. Normal T cell homeostasis: the conversion of naive cells into memory-phenotype cells. Nature. Immunology. 2011; 12: 478-84.

15. Yarilin A.A. Age-matched changes in the thymus and T-lymphocytes. Immunologiya. 2003; 24 (2): 117-28. (in Russian)

16. Donetskova A.D., Frolenko A.L., Troshina V.V., Smolyagin A.I., Yarilin A.A. T-cell receptor excision circles in peripheral blood lymphocytes: the influence of age and thymectomy. Immunologiya. 2010; 31 (6): 293-9. (in Russian)

17. Purton J.F., Tan J.T., Rubinstein M.P., Kim D.M., Sprent J., Surh C.D. Antiviral CD4+ memory T cells are IL-15 dependent. J. Exp. Med. 2007; 204 (4): 951-61.

18. Williams K., Hakim F.T., Gress R.E. T cell immune reconstitution following lymphodepletion. Semin. Immunol. 2007; 19: 318-30.

19. Kohler S., Thiel A. Life after the thymus: CD31+ and CD31- human naive CD4+ T-cell subsets. Blood. 2009; 113: 769-74.

20. Yarilin A.A., Donetskova A.D.T-cell are recent migrants from the thymus. Immunologiya. 2012; 33 (6): 326-34. (in Russian).

iНе можете найти то, что вам нужно? Попробуйте сервис подбора литературы.

21. den Braber I., Mugwagwa T., Vrisekoop N., Westera L., Mogling R., de Boer A.B. et al. Maintenance of peripheral naive T cells is sustained by thymus output in mice but not humans. Immunity. 2012; 36 (2): 288-97.

22. Mitin A.N., Litvina M.M., Komogorova V.V., Sharova N.I., Yarilin A.A. Contribution of homeostatic proliferation and related processes to restoration of peripheral T cell population in irradiation induced lymphopenia. Immunologiya. 2013; 34 (5): 242-7. (in Russian)

Received 25.04.14

i Надоели баннеры? Вы всегда можете отключить рекламу.