CC BY
79
ЛИТЕРАТУРА: 1. Сюрин В.Н. и др. Вирусные болезни животных. -М., ВНИТИБП, 1998 - 928 с. 2. Arora A.K., Killinger A.H. et al. Bacteriologic and vaccination studies in a field epizootic of infectious keratoconjuvktivitis in calves. - Amer. J. vet. Res. - 1976 - 37 - P.803-805. 3. Saunders J.R., Olson S.M., Radositis O.M. Efficacy of an intramuscular infectious bovine rhinotracheitis vaccine against abortion due to the virus. -Canad. Vet. J. - 1972 - 13 - P. 273-278.
ЭФФЕКТИВНОСТЬ ИСПОЛЬЗОВАНИЯ ИНАКТИВИРОВАННЫХ И ЖИВЫХ
ВАКЦИН ПРОТИВ ИРТ - ИПВВ
Новых Н. Н.
Резюме
Для оздоровления поголовья от ИРТ рекомендуем в течение трех лет подвергать его иммунизации инактивированными моновакцинами против ИРТ и патогенетическое лечение инфекционного пустулезного вульвовагинита в сочетании с использованием вакцины против ИПВВ.
THE EFFECTIVENES OF THE USAGE OF NON ACTIVE AND ALIVE VACCINE
AGAINST IRT - IPVV
Novyh N.N.
Summary
Some recommendation about the improvement livestock population health against infectious rhinotracheitis are given. It is necessary to immunize it with inactivated monovaccine against infectious rhinotracheitis during three years. Recommendations about making pathogenic treatment infectious pustule vulvovaginitis in aggregate with using vaccine against it are given.
УДК 636.2.034:636.2.082.
ВОСПРОИЗВОДИТЕЛЬНЫЕ КАЧЕСТВА СВИНОМАТОК С РАЗНЫМИ ГЕНОТИПАМИ ПО ГЕНУ ПРОЛАКТИНОВОГО
РЕЦЕПТОРА
Нургалиев Ф.М. - аспирант ФГБОУ ВПО КГАВМ, тел.: 89534866333
Ключевые слова: свиноматка, ген пролактинового рецептора, генотип, ПЦР, ДНК.
Key words: sow, prolactin receptor gene, genotype, PCR, DNA.
Пролактиновый рецептор (PRLR) - это специфичный рецептор для гормона пролактина, являющегося одним из важнейших гормонов репродуктивной функции. Ген пролактинового рецептора является маркером репродуктивных качеств в свиноводстве благодаря своей роли в процессе воспроизводства [2].
A.L. Vincent, C.K. Tuggle, M.F. Rothschild (1998) провели исследования по изучению влияния полиморфизма гена PRLR в синтетических линиях свиней - крупной белой, ландрас и крупная белая х мейшан на общее количество поросят и/или многоплодие. Их исследования показали, что наибольшим многоплодием обладали свиноматки, несущие в своем геноме А аллель гена PRLR.
Однако в исследованиях Е.В. Лаломовой (2007) проведенные на свиноматках крупной белой породы, получены другие результаты. Так, она отмечает, что наилучшими показателями по многоплодию отличались матки с генотипом ВВ гена PRLR, которые также имели наименьший процент мертворожденных поросят по сравнению с аналогами с другими генотипами.
Схожие результаты получены в исследованиях B.J. Isler et al. (2001). Так, изучение влияния полиморфизма гена PRLR на репродуктивную способность свиноматок пород йоркшир, крупной белой и кроссбредных, осемененных хряками гемпшир показало, что животные с генотипом ВВ имели более высокую массу зародышей и наибольшее количество зародышей на рог матки по сравнению со сверстницами с другими генотипами. При этом наибольшей приживаемостью зародышей отличались также свиноматки с генотипом ВВ.
С учетом вышеизложенного считаем, что исследования, касающиеся воспроизводительных качеств свиноматок с разными генотипами гена PRLR, являются актуальными и представляют научный интерес.
Материал и методика исследований. Исследования проводились на 100 основных свиноматках чистопородной крупной белой породы в подсобном хозяйстве «Новая Тура» Зеленодольского района Республики Татарстан.
Для проведения ДНК-диагностики по гену PRLR у животных были отобраны пробы крови. Полученную кровь у животных вносили в пробирки с 100 мМ ЭДТА до конечной концентрации 10 мМ.
ДНК из крови выделяли комбинированным щелочным способом.
Генотипирование животных по гену PRLR проводили методом ПЦР-ПДРФ. ПЦР проводили на программируемом термоциклере «Терцик» (Россия) в объеме 20 мкл, содержащей буфер (60 мМ трис-HCl (рН 8,5), 1,5 мМ MgCl2, 25 мМ KCl, 10 мМ меркаптоэталол; 0,1 мМ тритон Х-100), 0,25 мМ dNTP, 1 ед. Taq ДНК полимеразы, по 0,5 мкМ праймеров PRL1 и PRL2 и свиней и 1 мкл ДНК-пробы.
Для амплификации фрагментов гена РЯЬЯ использовали следующие праймеры:
ряы: 57- Саа-сса-сла-ллт-сст-аст-ас-3/,
РЯЬ2: 57- лсс-ссл-сст-тат-ллс-ссл-тсл-тсс-э7 (Я.с. Ьіпуіііє
й а1., 2001).
Амплификаты гена РЯРЯ расщепляли эндонуклеазай Лїиї.
Для визуализации фрагментов ДНК пробы вносили в лунки 4% агарозного геля с содержанием этидия бромида (0,5 мкг/мл) и проводили горизонтальный электрофорез при 15 В/см в течение 40 мин в 1*ТВЕ буфере.
Частоту встречаемости генотипов пролактинового рецептора определяли по формуле:
р = п/И, где р - частота определения генотипа, п - количество особей, имеющих определенный генотип, N - число особей.
Частоту отдельных аллелей определяли по формуле:
РА = (2пЛЛ+пЛВ) : 2И и дВ = (2пВВ+пЛВ) : 2И, где РА - частота аллеля А, qв - частота аллеля В, N - общее число аллелей.
По закону Харди-Вайнберга [1] рассчитывали ожидаемую частоту генотипов в исследуемой популяции.
Оценка свиноматок с разными генотипами РЯЬЯ по воспроизводительным качествам проводилась по первому опоросу и включала следующие показатели: количество живых и мертворожденных поросят.
Полученные результаты в ходе научных исследований обработаны биометрическим методом [3]. Уровень достоверности полученных результатов определяли по критерию Стьюдента.
Результаты собственных исследований. Нами проведено исследование свиноматок чистопородной крупной белой породы на наличие в их геноме аллельных вариантов А и В гена РЯЬЯ, связанных с воспроизводительными качествами животных.
После обработки амплификата рестриктазой Лїиї выявляли три генотипа животных по гену РЯЬЯ: генотипу АА соответствовал продукт 127 п.н., генотипу АВ - 127, 92 и 35 п.н. и генотипу ВВ - 92 и 35 п.н.
Оценка результатов ПЦР-ПДРФ-анализа показала, что распределение свиноматок по генотипам локуса гена РЯЬЯ было следующим: 61 (61,0%) свиноматка имела гомозиготный генотип АА, 32 (32,0%)- гетерозиготный генотип АВ и всего 7 (7,0%) свиноматок -гомозиготный генотип ВВ. Частота аллеля А достигла 0,77, аллеля В - 0,32 (табл. 1).
Далее нами были проанализированы воспроизводительные свойства свиноматок с разными генотипами по локусу гена РЯЬЯ (табл. 2).
Проведенные исследования показали, что свиноматки с генотипом ВВ гена РЯЬЯ превосходили свиноматок с другими генотипами как по
общему количеству рожденных поросят (на 1,16-1,32 поросенка), так и по количеству рожденных живых поросят (на 1,31-1,76 поросят) в среднем на одну свиноматку.
1. Полиморфизм гена РЯТЯ у свиноматок чистопородной
крупной белой породы
Генотипы Частота
Хозяйство п А А АВ ВВ аллелей X2
п % п % п % А В
«Новая Н 100 61 61,0 32 32,0 7 7,0 0,77 0,23 0,32
Тура» О 59 59,0 35 35,0 5 5,0
Н - наблюдаемое распределение генотипов, О - ожидаемое распределение генотипов
Наименьшие показатели воспроизводительных качеств отмечены у животных с генотипом АВ (11,25 и 10,53 - рожденных и живых поросят соответственно). Достоверная разница выявлена между свиноматками с генотипами АВ и ВВ по количеству рожденных живых поросят - 1,76 поросенка (Р<0,05). При этом различия по другим показателям и генотипам РЯТЯ были статистически недостоверными.
Процент мертворожденных поросят от свиноматок с разными генотипами по гену РЯТЯ уменьшался в ряду АВ>АА>ВВ, что в количественном выражение составляло 6,4>3,8>2,2.
2. Количество поросят по первому опросу у свиноматок чистопородной крупной белой породы с разными генотипами по гену РЯТЯ
Генотип свиноматок по гену РЯТЯ Количество свиноматок Количество поросят в среднем на одну свиноматку Процент мертворожденных поросят
всего живых
АА 61 11,41±0,29 10,98±0,29 3,8
АВ 32 11,25±0,40 10,53±0,38 6,4
ВВ 7 12,57±0,65 12,29±0,71* 2,2
* - Р<0,05, разница между животными с генотипами АВ и ВВ
Выводы. 1. Свиноматки крупной белой породы являются
полиморфными по локусу гена пролактинового рецептора. Доля животных с генотипом АА - 61,0%, АВ - 32,0%, ВВ - 7,0%, при этом частота встречаемости аллеля А составила 0,77, аллеля В - 0,23; 2. Наилучшие показатели по многоплодию имели свиноматки с генотипом ВВ гена пролактинового рецептора. У гетерозигот (АВ) наблюдались наихудшие показатели по многоплодию и проценту мертворожденных поросят - 6,4, что в 1,7-2,9 раза выше, чем у гомозигот (АА и ВВ).
ЛИТЕРАТУРА: 1. Жигачев, А.И. Ветеринарная генетика / А.И. Жигачев, В.Л. Петухов, Г.А. Назарова. - М.: Колос, 1985. - 369 с.
2. Лаломова, Е.В. Полиморфизм свиней по генам эстрогенового, пролактинового и рианодинового рецепторов : автореф. дисс. канд. биол. наук: 06.02.01 / Лаломова Елена Владимировна. - Лесные Поляны. - 2007. - 23 с. 3. Меркурьева, Е.К. Биометрия в селекции и генетике сельскохозяйственных животных / Е.К. Меркурьева. - М.: Колос, 1970. - 424 с. 4. Isler, B.J. Examination of the relationship between the prolactin receptor gene and reproductive tract components in swine / B.J. Isler, K.M. Irvin, M.F. Rothschild, G.J. Evans // The Ohio State University Department of Animal Sciences. Research and Reviews. - 2001. - P. 83-86. 5. Linville, R.C. Candidate gene analysis for loci affecting litter size and ovulation rate in swine / R.C. Linville, D. Pomp, R.K. Johnson, M.F. Rothschild // J. Anim. Sci. - 2001. - V. 79. - P. 60-67. 6. Vincent, A.L. The prolactin receptor gene is associated with increased litter size in pigs / A.L. Vincent, C.K. Tuggle, M.F. Rothschild // Iowa State Univ. Coop. Extens. Serv. - 1998. - № 638. - P. 30-31.
ВОСПРОИЗВОДИТЕЛЬНЫЕ КАЧЕСТВА СВИНОМАТОК С РАЗНЫМИ ГЕНОТИПАМИ ПО ГЕНУ ПРОЛАКТИНОВОГО РЕЦЕПТОРА
Нургалиев Ф.М.
Резюме
В данной работе представлены результаты влияния полиморфизма гена пролактинового рецептора (PRLR) на воспроизводительные качества свиноматок крупной белой породы. Исследования показали, что свиноматки с генотипом ВВ по сравнению со сверстницами с другими генотипами имели наибольшее количество рожденных поросят и наименьший процент мертворожденных поросят.
REPRODUCTIVE QUALITIES OF SOWS WITH DIFFERENT GENOTYPES OF THE PROLACTIN RECEPTOR GENE
Nurgaliev FM.
Summary
In the given work results of influence of polymorphism the prolactin receptor gene (PRLR) on reproductive qualities of sows of large white breed are presented. Researches have shown, that sows with genotype ВВ in comparison with contemporaries with other genotypes had the greatest quantity of the born pigs and the least percent of deadborn pigs.
