CC BY
80
УДК: 616.341-089:542.943
ВЛИЯНИЕ ЖИДКОСТИ С ОТРИЦАТЕЛЬНЫМ ОКИСЛИТЕЛЬНО-ВОССТАНОВИТЕЛЬНЫМ ПОТЕНЦИАЛОМ НА ПОКАЗАТЕЛИ КРОВИ ПОСЛЕ РЕЗЕКЦИИ ТОНКОГО КИШЕЧНИКА
А.А. ЖЕЛУДЕВ
Воронежская государственная медицинская академия им. Н.Н. Бурденко, улица Студенческая, д. 10, г. Воронеж, 394036
Анноатция: в ходе работы получены данные о влиянии жидкости с отрицательным окислительновосстановительным потенциалом на показатели гуморального иммунитета, фагоцитарной активности после резекции тонкого кишечника крыс.
Ключевые слова: тонкий кишечник, окислительно- восстановительный потенциал, жидкость с отрицательным окислительно-восстановительным потенциалом.
EFFECT OF LIQUIDE WITH NEGATIVE OXIDATION-REDUCTION POTENTIAL ON THE BLOOD QUOTIENTS
AFTER RESECTION OF THE SMALL INTESTINE
А.А. ZHELUDEV
Voronezh State N. N. Burdenko Medical Academy
Abstract: this paper presents the study results about the effects of the liquid with a negative oxidation-reduction potential on indices of humoral immunity, phagocytic activity after resection of the small intestine in the rats.
Key words: small intestine, oxidation - reduction potential, liquid with a negative oxidation-reduction potential.
Несостоятельность кишечного шва наблюдается в 1,6-3,0% случаев при операциях на желудке и двенадцатиперстной кишке, в 2,8-8,7% при операциях на тонкой и в 4,0-32,0% при операциях на толстой кишке [1,2,3,5]. Известно, важную роль в прочности шва играют 2 фактора: механическая прочность шва, зависящая от рядности наложенных швов и биологическая прочность шва, обеспечивающаяся «биологической герметичностью, хотя она не предупреждает инфицирование брюшин [3,6]. Следовательно, использование средств, обладающих противомикробной активностью и одновременно стимулирующих процессы восстановления тканей вполне оправдано. Такими свойствами обладают жидкости с отрицательным (-500-550 мВ - католит) и положительным (+680+720 мВ - анолит) окислительно-восстановительным потенциалом [7,8,9]. Работами Колесниченко П. Д. установлено, что введение внутрь жидкостей с различным окислительно-восстановительным потенциалом (ОВП) не вызывает отрицательного действия на слизистые оболочки полости рта, желудка, толстого и тонкого кишечника, печени и поджелудочной железы [5].
Материалы и методы исследования. Животные содержались в стандартных условиях вивария, кормление осуществлялось в соответствии с ГОСТ Р 50258-92. Все манипуляции на животных проводились в соответствии с Европейской конвенцией о защите позвоночных животных, используемых для экспериментов или в иных научных целях (ЕТБ N 123, по состоянию на 18 октября 2006 г.) и Национальным стандартом РФ «Принципы надлежащей
лабораторной практики» (ГОСТ Р 53434-2009 - идентичен GLP OECD). Эвтаназию экспериментальных и контрольных животных осуществляли утром, натощак. Под глубоким эфирным наркозом вскрывали грудную клетку, стерильным шприцом пунктировали сердце и забирали 5 мл крови для биохимических исследований. Исследования сыворотки крови проводились НИИ экспериментальной биологии и медицины им. Н.Н. Бурденко на биохимическом полуавтоматическом анализаторе Stat Fax 1904 (США), применялись наборы реактивов фирмы «DiaSys» (Германия). При проведении экспериментов учитывались требования Комиссии по проблеме этики отношения к животным Российского национального Комитета по биоэтике наук и этические нормы, изложенные в «Международных рекомендациях по проведению медикобиологических исследований с использованием животных» (1989 г.).
В эксперименте использовано 45 крыс, самцы, массой 250-300 г., которые были распределены на следующие группы:
1 группа интактные животные 15 крыс;
2 группа - контроль (оперированные животные) без применения ЭАВР 15 крыс;
3 группа - оперированные животные с использованием ЭАВР - 15 крыс.
Методика проведения операции:
Подготовка к операции - перед операцией была выбрита передняя брюшная стенка. Подкожно ввели цефтриаксон 0,002 г, для наркоза применялся препарат золетил внутрибрюшинно 0,04 г (на 300 г белой крысы.)
Ход операции; передняя брюшная стенка двух кратно обработана водным раствором хлоргексидина биглюконата 0,05%. Проводилась срединная лапаро-томия. Извлекалась петля тонкого кишечника. Затем произведена резекция тонкой кишки на протяжении 1,5 см и формирование кишечного анастомоза по типу конец в конец двухрядным швом по Альберту-Ламберу. Первый ряд швов накладывался викрилом 7/0, второй ряд швов полипропиленом 7/0. После наложения анастомоза брюшная стенка была ушита непрерывным обвивным брюшинно-апоневротическим, а затем и кожными швами. Учитывая данные о проти-вомикробном действии анолита брюшина и зона операции обрабатывалась анолитом рН 6,0-6,8, 0ВП+710-770 мВ [1].
Взятие биологического материала (кровь, стенка тонкого кишечника) проводилось на 5 и 15 сутки. Забор венозной крови для исследования осуществляли в пробирки «Vacuette», «Greiner bio-one», Австрия, для получения сыворотки (определение биохимических параметров и оценка антиоксидантного статуса) и цитратной плазмы (определение общего анализа крови и уровня тиоловых групп). Исследование проводили в день забора биоматериала. Для фиксации стенки тонкого кишечника использовался нейтральный формалин 10%.
Учитывая данные К.М. Резникова и др. и клинический опыт Ю.Н. Латышевой использовался като-лит с параметрами PH=8,5-9,0, ОВП - минус 510570 мВ [4,8]. Он применялся per os в качестве питья ежедневно в течение всего периода наблюдения вместо питьевой воды.
Статистическая обработка результатов исследований проводилась на ПК Pentium V с помощью пакетов программ Ехсеї 2007, Statistica 7.0. с использованием параметрических и непараметрческих критериев [10]. Парный двухвыборочный t-тест Стью-дента использовался, когда генеральная совокупность тестировалась дважды (внутри группы). В других случаях, например, когда сравнивались показатели животных из разных групп, для доказательства достоверности изменений того или иного параметра использовался непараметрический критерий: Т-
критерий Вилькоксона [11].
Результаты и их обсуждение. На основании результатов общего анализа крови, исследования фагоцитарной активности, уровня иммуноглобулинов была сделана попытка установить влияние лечебного процесса на процессы воспаления. В табл. 1 представлены результаты общего анализа крови во всех группах эксперимента.
Воздействие католита на уровень гемоглобина на 5 сутки в 3 группе привило к увеличению его по сравнению со 2 группой на 1,2 раза. Уровень лейкоцитов во 2 группе уменьшается по сравнению с 1 группой на 37,5% (1,6 раза), так же уменьшаются показатели уровня лимфоцитов во 2 группе на 15 сутки
по сравнению с 1 группой на 28% и в 3 группе на 5 сутки уровень лимфоцитов уменьшился по сравнению с 1 группой на 23%. При применении католита в 3 группе на 15 сутки уровень лимфоцитов увеличился на 27% по сравнению со 2 группой 15 сутки., а показатели СОЭ изменяются во 2 группе на 5 сутки, происходит увеличение уровня СОЭ в 2,5 раза и на 15 сутки у животных 2 группы в 2,3 раза по сравнению с животными 1 группы. В 3 группе экспериментов на 5 сутки происходит уменьшение уровня СОЭ на 57% по сравнению с соответствующим показателем 2 группы и уменьшение на 15 сутки в 3 группе на 55% по сравнению с изменениями у животных 2 группы.
Представленные данные свидетельствуют о том, что наибольшее снижение величины показателей характеризующих воспаление отмечается при применении католита в послеоперационном периоде. Изменения фагоцитоза в этих же условиях демонстрируют материалы табл. 2.
Таблица 1
Динамика некоторых показателей общего анализа крови (М±т) при медикаментозной коррекции заживления кишечного анастомоза
Показатели 1 группа 2 группа 3 группа
5 сутки 15 сутки 5 сутки 15 сутки
Эритроциты. 10*11/л 5,95±0,41 4,96±0,85 5,76±0,5 5,74±1 5,35±0,39
Гемоглобин г/л 124±7,05 110±7,9 129±7,01 131±10,7# 134±3,98
Лейкоциты10*9/л 10,4±1,9 6,5±1,3* 10,5±2,95 7,55±1,5 7,09±0,8
Палочкоядерные % 1,13±0,58 1,8±0,76 3,3±1,6 1±1,01 1,43±0,39
Сегментоядерные % 29,5±4,9 38,6±7,7 41,7±7,49 39,4±8,37 32,1±3,8
Лимфоциты % 67,8±2,9 60±7,8 48,9±7,4* 52,1±8,5* 62,4±4,5#
СОЭ мм/ч 1,25±0,49 3,1±0,8* 2,9±0,9* 1,75±0,32# 1,7±0,4#
Примечание (здесь и далее): * - Р<0,05 по сравнению с контролем; # - Р<0,05 по сравнении с 2 группой
Таблица 2
Динамика показателей фагоцитарной активности (М±т) при медикаментозной коррекции заживления кишечного анастомоза
На 5 сутки 2 группы фагоцитарный индекс уменьшается в 13,7 раза, в то время как уровень фагоцитарной активности увеличивается этой же группы в 4,1 раза. На 15 сутки 2 группы уровень фагоцитарного индекса возрастает по сравнению с 1 группой в 1,3 раза и фагоцитарная активность повышается в 56 раз. В 3 группе 5 группе при применении ка-толита в послеоперационном периоде в происходит уменьшение фагоцитарного индекса по сравнению с
Показатели 1 группа 2 группа 3 группа
5 сут. 15 сут. 5 сут. 15 сут.
фагоцитарный индекс 58,88±10,59 4,3±0,3* 77,39±2,8* 1,43±0,27*# 22,46±1,67*#
фагоцитарная активность 8,125±1,79 33,1±13,2* 449,6±11,4*# 99,7±10,34*# 117,8±12,8*#
1 группой в 42 раза, а фагоцитарная активность увеличивается по сравнению с 1 группой в 12,3 раза. На 15 сутки в 3 группе уровень фагоцитарного индекса уменьшается 2,6 раза, в то время как фагоцитарная активность на 15 сутки увеличивается в 14,5 раз. На 15 сутки 3 группе уровень фагоцитарного индекса уменьшается.
При сравнении 3 группы со 2 группой 5 сутки происходит уменьшение фагоцитарного индекса на 3,1, в то время как фагоцитарная активность увеличивается в 3 раза. На 15 сутки 3 группе уровень фагоцитарного индекса уменьшается в 2,6 раза по сравнению со 2 группой и уровень фагоцитарной активности уменьшается в 3,8 раза.
Участие иммунной системы в формировании саногенетических звеньев заживления после операционного анастамоза тонкого кишечника можно проанализировать по табл. 3.
Таблица 3
Динамика некоторых показателей гуморального иммунитета (М±т) при медикаментозной коррекции заживления кишечного анастомоза
Изменения С у жвитных контрольной группы остается высоким, на 5 ^ С увеличился в 1,7 раза, а на 15 сутки в 1,4 раза. В группе животных принимавших католит в послеоперационном периоде ^ С также оставался на высоком уровне - на 5 сутки увеличился в 1,4 раза, а на 15 сутки в 2,1 раза по сравнению с контрольной группой животных. Ъ
Уровень ^ А в контрольной группе животных снизился на 5 сутки в 1,7 раза, на 15 сутки в 1,3 раза. В группе животных принимавших католит в послеоперационном периоде также уменьшался на 15 сутки на 2,2 раза.
В контрольной группе животных уровень М увеличился на 5 сутки
в 6,2 раза, а на 15 сутки в 7 раз по сравнению со здоровыми животными. В группе животных принимавших католит показатель ^ М на 5 сутки увеличился в 3 раза, а на 15 сутки в 9,3 раза по сравнению с контрольной группой.
Представленные данные свидетельствуют о том, что католит, оказывает позитивное действие на показатели гуморального иммунитета на протяжении всего послеоперационного периода.
Выводы:
1.При резекции тонкого кишечника в постопера-ционном периоде католит положительно влияет на выраженность показателей гуморального иммунитета.
2.Применение католита приводит к стимуляции фагоцитарной активности в послеоперационном периоде.
3.Послеоперационная обработка брюшины и операционной зоны кишечника анолитом обеспечивает снижение процессов воспаления.
Литература
1. Комплексная оценка заживления кишечных анастомозов в раннем послеоперационном периоде /Г.И. Воробей [и др.] //Хирургия.- 1989.- №2.- С. 47-51.
2.Гончаренко, О.В. Причины возникновения, патогенез и комплексная профилактика несостоятельности швов кишечника /О.В. Гончаренко// Клиническая хирургия.- 1997.- №9-10.- С. 24-25.
3Дарвин, В.В. Послеоперационные осложнения при резекции желудка по поводу язвенной болезни /В.В. Дарвин, Е.П. Воевода, И.Р. Рабин, В.Г. Бекк // Лучевая и клиническая диагностика послеоперационных осложнений. Караганда.- 1993.- С. 53-54.
4Девятов, В.А. Роль электрохимически активированного анолита в оптимизации лечебной работы в амбулаторной гнойной хирургии /В.А. Девятов // Электрохимическая активация в медицине, сельском хозяйстве, промышленности. Ш Международный симпозиум.- М., 2001.- С.116-121.
5.Колесниченко, П.Д. Влияние жидкостей с различным окислительно-восстановительным потенциалом на органы желудочно-кишечного тракта. Автореф. дисс. ... канд. мед. наук / П.Д. Колесниченко.- Курск.- 2012.- 27 с.
6.Мохов, Е.М. Укрепление толстокишечных анастомозов демукоризованным трансплантатом тонкой кишки /Е.М. Мохов, Е.И. Бредихин // Вестник хирургии.- 1990.- №6.- С. 115-117.
7. Прилуцкий, В.И. Электрохимически активированная вода: аномальные свойства, механизм биологического действия /В.И. Прилуцкий, В.М. Бахир.-М.: ВНИИМТ, 1995.- 228 с.
8.Резников, К.М. Вода жизни / К.М. Резников // Прикладные информационные аспекты медицины.-2001.- Т.4.- №2.- С. 3-10.
9.Резников, К.М. Системный анализ безопасности и фармакологических свойств электроактивиро-ванных водных растворов /К.М. Резников, Ю.Н. Латышева, Ю.А. Левченко, Е.Б. Сабитова //Системный анализ и управление в биомедицинских системах.-2008.- №2.- С.409-413.
10. Сидоренко, Е.В. Методы математической обработки в психологии / Е.В. Сидоренко.- СПб.: ООО «Речь», 2002.
11. Wilcoxon, F. Individual Comparisona by Ranking Methods /Wilcoxon F. //Biometrica Bulletin.- 1945.-N1.- P. 80-83.
Показатели мг/дл 1 группа 2 группа 3 группа
5 сут. 15 сут. 5 сут. 15 сут.
Ig G 40,18±0,79 99,3±2,87* 66,67±7,17* 55±7,39*# 83±4,30*#
Ig A 13,49±0,47 8,0±0,71* 10,33±1,43* 8,67±1,43* 4,67±2,87*#
Ig M 3,24±0,12 20,0±4,97* 22,67±5,59* 9±2,49*# 30±4,97*
