CC BY
23
областных целевых программ (приоритетных направлений) и их коммерческой реализации путем создания малых предприятий и (или) частно-государственного партнерства с помощью целевых программ по развитию инновационной деятельности.
А.Б. Селькина, В.И. Шепитько, Г.А. Ерошенко,
О.Д. Лисаченко
Влияние трансплантации криоконсервированной плаценты на местный иммунный статус слизистой оболочки полости рта
ВГУЗ Украины «Украинская медицинская стоматологическая академия», Полтава, Украина [email protected]
А.В. Sel’kina, V.l. Shepitko, G.A. Yeroshenko, Lisachenko Influence of kryopreserved placenta transplantation on the oral cavity mucosa’s local immune status
Местные защитные реакции в слизистой оболочке полости рта обеспечиваются иммунокомпетентными клетками как в составе эпителиальной пластинки (клетки Лангерганса, макрофаги, лимфоциты), так и в собственной пластинке (макрофаги, лимфоциты, плазматические клетки, тканевые базофилы). Изменение их количества и соотношения дает представление о напряженности местного защитного барьера.
Целью работы было определение клеточного состава «иммуноцитов» в собственной пластинке слизистой оболочки дорсальной поверхности языка (ДПЯ) крыс после трансплантации криоконсервированной плаценты (ККП).
Исследование выполнено на 30 крысах линии Ви-стар, 5 из которых составили контрольную группу, а 25 одноразово провели трансплантацию ККП объемом 0,125 см3 под кожу на плече. Выведение животных из эксперимента осуществляли на 2, 7, 14, 21 и 30 сут. Фрагменты слизистой оболочки ДПЯ заключали в эпон-812 по общепринятой методике, изготавливали полутонкие срезы, которые окрашивали полихромным красителем. Количество макрофагов, лимфоцитов, плазмоцитов и тканевых базофилов определяли методом стандартных площадей в 10 полях зрения. Статистическую обработку полученных цифровых данных провели при помощи программы Excel.
У животных контрольной группы в собственной пластинке ДПЯ определялись лимфоциты (0,9+,23 в п/з), макрофаги (1,0+0,29 в п/з), плазматические клетки (0,4+0,22 в гУз) и тканевые базофилы (1,2+0,29 в п/з).
На 2-е сут. после трансплантации ККП количество всех изученных клеток, особенно макрофагов (в 6 раз) и плазмоцитов (в 9 раз) статистические достоверно увеличилось, что может служить морфологическим подтверждением формирования иммунного ответа в слизистой оболочке языка в ответ на введение плацентарной ткани. Количество лимфоцитов и тканевых
+
3,2+0,18 в п/з соответственно (р<0,05).
На 7-е сут. эксперимента количество лимфоцитов соответствовало показателям в контрольной группе животных. Нормализация количества тканевых базофилов определялась до 14 сут. наблюдения. К 21 сут. эксперимента количество всех изученных клеток не отличалось от значений в контрольной группе.
Таким образом, трансплантация ККП вызывает изменение количества и соотношения «иммуноцитов» в собственной пластинке ДПЯ. Однако наличие в ККП
биологически активных веществ способствует быстрой реализации иммунного ответа и восстановлению морфофункционального состояния слизистой оболочки ДПЯ до 14 сут. наблюдения.
С.А. Сергеев 1, Н.В. Кошелева 1 а, И.Н. Сабурина а,
М.Л. Семенова 1
Оптимизация результатов трансплантации клеток в сетчатку, поврежденную лазерным излучением на модели эксплантационной культуры
1 МГУ им. М.В. Ломоносова, Москва, Россия
2 Институт общей патологии и патофизиологии РАМН, Москва, Россия
S.A. Sergeev, N.V. Kosheleva, I.N. Saburina, M.L. Semenova Cells transplantation results optimization using the explantation retina culture model damaged by laser emission
Применение клеточных технологий, а именно, трансплантация нейрональных стволовых/прогениторных клеток (НСПК) и клеток пигментного эпителия (ПЗ), в современной офтальмологии дало возможность восстанавливать утраченное зрение после необратимых повреждений сетчатки. Однако полученные как в клинике, так и в эксперименте данные наблюдения за репарацией дефектов сетчатки после клеточной трансплантации часто носят противоречивый характер и не позволяют добиться желаемого результата. Остается бесспорной решающая роль нового микроокружения на судьбу трансплантированных клеток, однако наглядно продемонстрировать зависимость активности участия введенных в организм клеток от места и способа инъекции удается при сравнении экспериментов in vivo и in vitro с применением модели органотипического эксплантационного культивирования.
Нами были предложены модели трансплантации GFP+ НСПК 4-го пассажа и клеток ПЗ 6-го пассажа мышей линии C57BL/6-Tg(ACTB-EGFP)/0sb/J в эксплан-тационную культуру сетчатки (37°С, 5%С02 DMEM/F12, + глутамин, -t-dFGFn EGF (Юнг/мл), В27, N2 и 10% Fetal clone) и их инъекции интравитриально (10 ООО кл./2 мкл), ретробульбарно (300 ООО кл/10 мкп) и супрахориоидально (300 ООО кл./2 мкл) крысам линии Campbell в возрасте 14 сут. с последующим иммуногистохимическим анализом экспресии p-lll-тубу-лина и GFAP.
После трансплантации in vivo на основании ЗРГ установлено, что клетки ПЗ как при интравитриальной, так и при ретробульбарной трансплантации через 4 и 6 сут. оказывают слабоположительное влияние на функциональное состояние сетчатки крыс Campbell возраста 25 сут. и позволяет сохранить функциональную активность сетчатки у крыс до 36 сут. Статистически достоверно увеличивается толщина ONL у опытных животных возраста 27 и 43 сут. При супрахориоидаль-ной трансплантации клеток ПЗ отмечено выраженное стабилизирующее влияние трансплантации на процессы дегенерации, развивающиеся в ONL у крыс Campbell и сохранение высокого уровня функциональной активности сетчатки. При супрахориоидальной трансплантации НСПК функциональная активность сетчатки животных была в 3 раза ниже, чем при аналогичной трансплантации клеток ПЗ, несмотря на статистически неразличимые морфологические данные толщины ONL.
Клеточная трансплантология и тканевая инженерия Том V, № 3, 2010
