ВЛИЯНИЕ СУДОРОЖНОЙ АКТИВНОСТИ, ВЫЗВАННОЙ ПЕНТИЛЕНТЕТРАЗОЛОМ, НА ЭКСПРЕССИЮ ПРОИ ПРОТИВОВОСПАЛИТЕЛЬНЫХ ЦИТОКИНОВ В МОЗГЕ КРЫСЫ Текст научной статьи по специальности «Фундаментальная медицина»

Карань A.A., Спивак Ю.С., Сулейманова Л.М.

Федеральное государственное бюджетное учреждение науки

Институт Высшей Нервной Деятельности и Нейрофизиологии РАН, Москва

e-mail: [email protected]

ВЛИЯНИЕ СУДОРОЖНОЙ АКТИВНОСТИ, ВЫЗВАННОЙ ПЕНТИЛЕНТЕТРАЗОЛОМ,

НА ЭКСПРЕССИЮ ПРО- И ПРОТИВОВОСПАЛИТЕЛЬНЫХ ЦИТОКИНОВ В МОЗГЕ КРЫСЫ

Эпилепсия — это синдром, характеризующийся повторными приступами с нарушением двигательных, чувствительных, вегетативных и др. функций, возникающими вследствие чрезмерной ней-рональной активности, распространяющейся по головному мозгу. Данное заболевание включает три основных аспекта: электрофизиологический, морфологический (например, нейродегенерация) и судорожный, которые по-разному воспроизводятся и исследуются на животных моделях. Целью данной работы было исследование того, может ли эпилептиформная активность, вызванная инъекцией конвульсанта пентилентетразола (PTZ) [1], индуцировать ней-ровоспалительный ответ. В частности, зависит ли величина этого ответа от интенсивности эпилептиформной активности, а также, модулируется ли нейровоспалительный ответ каннабиноидными СВ2 рецепторами.

Данная работа включает 2 эксперимента. В первом использовались образцы левых вентральных гиппокампов ^Ш), левых дорсальных гиппокампов ^Ш), соматосенсорной коры, твердой мозговой оболочки (DM), кортикальной оболочки (CM), гиппо-кампальной оболочки (HM), селезенки из 71-й крысы линии Wistar. Две группы крыс состояли из контрольных животных (инъекция физиологического раствора), животных после инъекций малой (40 мг/кг) или большой дозы (70 мг/кг) PTZ, и их сбор проводился через 3 и 6 часов после инъекции. Третья группа включала контрольных животных (инъекция большой дозы (70 мг/кг) PTZ)

и животных после инъекции большой дозы (70 мг/кг) PTZ и аго-ниста каннабиноидных CB2 рецепторов HU308. Во втором эксперименте использовались образцы VHL, DHL, правых вентральных гиппокампов (VHR), правых дорсальных гиппокампов (DHR), со-матосенсорной коры, CM, селезенки из 21-й крысы линии Wistar. В данном эксперименте была лишь одна группа крыс, включающая в себя контрольных крыс (инъекция большой дозы (70 мг/кг) PTZ) и животных после инъекции большой дозы (70 мкг/кг) PTZ и антагониста каннабиноидных CB2 рецепторов AM630. Каждая проба проходила этапы гомогенизации, выделения тотальной РНК, обратной транскрипции и ПЦР в реальном времени (rtPCR) для определения экспрессии генов домашнего хозяйства и некоторых маркеров воспаления.

При статистической обработке с использованием теста Краске-ла-Уоллиса мы обнаружили, что во всех исследованных структурах мозга абсанс-подобная эпилептиформная активность, вызванная низкой дозой PTZ, не приводила к достоверным изменениям в экспрессии типичных для нейровоспаления маркеров. Интенсивная же эпилептиформная активность, индуцированная высокой дозой PTZ, приводила к достоверному изменению экспрессии нескольких маркеров воспаления, в частности, к росту экспрессии CCL2 в левых дорсальном и вентральном гиппокампах, в соматосенсорной коре и в кортикальной оболочке через 3 часа после инъекции, IL6 в дорсальном левом гиппокампе через 3 часа и соматосенсорной коре через 6 часов, TNFa в соматосенсорной коре через 3 и 6 часов, а также к достоверному снижению экспрессии TGF^l к кортикальной оболочке через 3 часа.

Эти изменения, вызванные интенсивной эпилептиформной активностью, отличаются по продолжительности. Рост экспрессии CCL2, наблюдаемый через 3 часа, через 6 часов исчезал. Повышение экспрессии IL6 исчезало в дорсальном левом гиппокампе через 6 часов, но только появлялось в это время в соматосенсорной коре, рост концентрации мРНК TNFa в соматосенсорной коре сохранялся в обеих исследуемых временных точках, пониженная экспрессия TGFpi к кортикальной оболочке, наблюдаемая через 3 часа после инъекции, исчезала через 6 часов.

Активация CB2 рецепторов с помощью HU308 привела к небольшому ослаблению нейровоспалительного ответа в гип-покампе и соматосенсорной коре через 3 часа, блокада же CB2 рецепторов с помощью AM630 привела к усилению нейровоспаления

в гиппокампе через 3 часа, что проявляется в повышении экспрессии ILip в левом и правом дорсальном и вентральном гиппокампах.

Эти данные говорят о небольшой продолжительности нейро-воспалительного ответа, вызванного интенсивной эпилептиформ-ной активностью, контроле продолжительности вплоть до подавления развития этого ответа при активации каннабиноидных CB2 рецепторов.

Список литературы:

1. Dhir, A. (2012). Pentylenetetrazol (PTZ) Kindling Model of Epilepsy. Current Protocols in Neuroscience. John Wiley & Sons, Inc. https:// .org/10.1002/0471142301.ns0937s58

Касаткина М.Ю.12, Моисеева Ю.В.1, Онуфриев М.В.1, Гуляева Н.В.12

1 — Федеральное государственное бюджетное учреждение науки Институт высшей нервной деятельности и нейрофизиологии Российской академии наук

2 — Научно-практический психоневрологический центр им З.П. Соловьева e-mail: [email protected]

ЭКСПЕРИМЕНТАЛЬНАЯ ОККЛЮЗИЯ СРЕДНЕМОЗГОВОЙ АРТЕРИИ ДЛЯ ИЗУЧЕНИЯ МЕХАНИЗМОВ ГИППОКАМП-ЗАВИСИМЫХ ПОСТИНСУЛЬТНЫХ РАССТРОЙСТВ: СРАВНИТЕЛЬНОЕ ИССЛЕДОВАНИЕ ДВУХ МОДЕЛЕЙ

Существенная часть пациентов, перенесших ишемический инсульт, имеют отдаленные последствия в виде когнитивных и психических (в первую очередь, депрессивных) расстроств. Вовлечен-