CC BY
60
УДК 615.273.2:616.12-005.4-002.2-055.2
А.М. дыгай м.Ю. Котловский 2, Д.А. Кириченко 2, И.Ю. Якимович3, Д.С. Терешина 2,
Ю.В. Котловский 2, В.Н. Титов 4
влияние симвастатина на состав жирных кислот мембран эритроцитов у женщин с хронической формой ишемической болезни сердца
1ФГБУ «Научно-исследовательский институт фармакологии» СО РАМН (Томск)
2 ГБОУ ВПО «Красноярский государственный медицинский университет» Минздрава России (Красноярск)
3 ГБОУ ВПО «Сибирский государственный медицинский университет» Минздрава России (Томск)
4 ФГБУ «Российский кардиологический научно-производственный комплекс» Минздрава России
(Москва)
Обследовано 23 женщины, больных хронической формой ишемической болезни сердца (ИБС), до и после двух месяцев приема симвастатина в дозах 40 и 80 мг/сутки. Независимо от дозировки отмечено снижение общего холестерола (ОХ), холестерина липопротеинов низкой плотности (ХС-ЛПНП) и коэффициента атерогенности (КА), что указывало на усиление клетками апоВ-100 рецепторного эндоцитоза ХС-ЛПНП со всеми переносимыми ими жирными кислотами (ЖК), в различных формах эфиров. Методом газожидкостной хромато-масс-спектрометрии исследован спектр ЖК в фосфолипидах (ФЛ) мембран эритроцитов, где выявлено перераспределение ЖК после лечения разными дозировками: снижение индекса ненасыщенности (ИН) мембран эритроцитов, что свидетельствует о нарушении физико-химических и функциональных свойств мембраны клеток. Уменьшалось содержание ЖК-субстратов мембран и субстратов витамина F, субстратов триглицеролов (ТГЛ), наблюдался рост ЖК-энергетических субстратов клетки. Вероятно, способность статинов активировать ферменты-десатуразы сказывалась наувеличении длинноцепочечных ш-9ЖК. При этом уменьшение олеиновой ш-9 ЖК влияло на снижение ТГЛ. Лечение в дозировке 80 мг/сутки у женщин приводило к повышению соотношения ш-3/ш-6 ЖК и к снижению дигомо-у-линоленовой ЖК, что указывало на формирование более благоприятных условий нормализации функции клетки in vivo, по сравнению с дозировкой 40 мг/сутки. При данных условиях наблюдалось уменьшение пальмитиновой ЖК и, соответственно этому, снижение активности развития атероматоза.
Ключевые слова: статины, жирные кислоты, липидный спектр, ишемическая болезнь сердца
effect of simvastatin on fatty acids composition of erythrocyte membranes in women with chronic form of coronary heart disease
A.M. Dygai ’, M.Yu. Kotlovskiy 2, D.A. Kirichenko 2, I.Yu. Yakimovitch 3, D.S. Tereshina 2,
Yu.V. Kotlovskiy 2, V.N. Titov 4
1 Scientific Research Institute of Pharmacology, Tomsk 2 Krasnoyarsk State Medical University, Krasnoyarsk
3 Siberian State Medical University, Tomsk
4 The Russian Cardiology Research and Production Complex, Moscow
23 women with a chronic form of coronary heart disease (CHD) were examined before and after two months of taking simvastatin at doses of 40 and 80 mg/day. Regardless of the dosage the reduction in total cholesterol (TC) level, low-density lipoprotein cholesterol (LDL-C) and atherogenic index (AI) was found that pointed at the strengthening of receptor-mediated endocytosis in LDL-C cells with all portable fatty acids (FA) in them by apoB-100 cells, in various forms of esters. The spectrum of FA in the erythrocyte membrane phospholipids (FL) was researched by gas-liquid chromatography-mass spectrometry. Redistribution of FA was revealed after treatment with different doses: reduction of the unsaturation index (UI) of the membranes erythrocytes indicated a violation of physical, chemical andfunctional properties of cell membranes. The content of the FA-membrane substrates and substrates of vitamin F, triglycerol substrates (TGL) decreased and FA-energy substrates cells increased. Probably, the ability of statins to activate the desaturase enzymes had an effect of the increasing of long-chain ш-9 FA content. In this case the reduction of oleic ш-9 FA influenced the reduction of TGL. Unlike doses of 40 mg/day treatment at a dosage of 80 mg/day in women resulted the increase of relation ш-3/ш-6 LC and the decrease of dihomo-y-linolenic LCD. It indicated the formation of favorable conditions of the normalization of cell function in vivo. Under these conditions the level of palmitic FA and, correspondingly, the activity of atheromatosis decreased.
Key words: statins, fatty acids, lipid spectrum, coronary heart disease
Клиническое применение гиполипидемических препаратов снижает риск развития атероматоза и атеротромбоза коронарных артерий, частоту и выраженность острого коронарного синдрома. Общепризнанно, что препараты группы статинов являются ингибиторами ключевого фермента синтеза спирта холестерола (ХС) - (3-гидрокси-р-метилглютарил-КоА редуктазы [3]. При этом действие статинов дозозависимо [13]. Они достоверно понижают в плазме крови
содержание ОХ, ХС-ЛПНП, уровень ТГЛ - эфиров ЖК. Это может происходить только по причине усиления статинами рецепторного поглощение клетками ХС-ЛПНП или ХС-ЛП очень низкой плотности (ХС-ЛПОНП). Клетки поглощают их раздельно путем апоВ-100 эндоцитоза ХС-ЛПНП и апоЕ/В-100 рецепторного поглощения ХС-ЛПОНП. Как бы выраженно статины ни понижали уровень спиртов (ХС и глицерина, ТГ), концентрацию ХС-ЛПНП и ХС-ЛПОНП в сыворотке
крови, окончательно действие препаратов при атеросклерозе реализовано в клетках при синтезе биологически активных эйкозаноидов и реализации биологической функции адаптации. Для этого на аутокринном уровне каждая из клеток синтезирует ХС самостоятельно.
Достоверным способом оценки метаболизма ЖК in vivo является определение содержания их в ФЛ мембран эритроцитов. Эти клетки не синтезируют ЖК, и содержание их в мембране ФЛ в полной мере определено: а) поступлением с пищей; б) синтезом в печени эндогенных ЖК из углеводов при действии инсулина; в) катаболизмом в пероксисомах (окисление, сатурация и десатурация) гепатоцитов очень длинноцепочечных, принятых с пищей ненасыщенных ЖК (ННЖК) [10, 15]. Этот метод выполним и отражает алиментарное благополучие и биологическую доступность для клеток ННЖК и эссенциальных полиеновых ЖК (ЭС ПНЖК). В последнее время показано, что статины, кроме ингибирования синтеза ХС, способны влиять на образование арахидоновой (С20:4) ш-6 ЖК из очень длинноцепочечных ННЖК [12]. Это изменяет содержание в плазме крови, моноцитах и гепатоцитах ш-6 ЭС ПНЖК; они становятся физиологичным субстратом для синтеза филогенетически ранних, биологически активных гуморальных медиаторов - эйкозаноидов [1].
Цель работы: проследить изменения в спектре ЖК эритроцитов при лечении симвастатином (дозы -40 и 80 мг/сутки) у женщин с хронической формой ишемической болезни сердца (ИБС).
материалы и методы
В настоящем исследовании мы отталкивались от гендерных особенностей влияния холестеринпони-жающей терапии, поскольку существуют работы, где показано, что у женщин профилактический эффект от применения статинов выражен в большей степени, чем у мужчин [16]. До и после приема симвастатина обследовано 23 женщины с хронической формой ИБС, средний возраст - 56,2 ± 6,3 года. Критерии исключения: инфаркт миокарда, прогрессирующая стенокардия, инсульт, тромбоэмболия легочной артерии, перенесенные менее чем за 6 месяцев до обследования, стенокардия напряжения III-IV функциональных классов, выраженные нарушения функции печени, почек, острые и хронические заболевания в стадии обострения, злоупотребление алкоголем, отсутствие добровольного информированного согласия на участие в исследовании. В зависимости от дозы препарата, пациенты разделены на группы. Первая группа (14 пациенток) получала «Симвагексал» (симваста-тин) в дозе 40 мг/сутки. Вторую группу составили 9 женщин с ИБС, которые получали данный препарат в дозе 80 мг/сутки. Длительность лечения - 2 месяца.
Спектр липидов в сыворотке крови, включая определение концентрации спирта ОХ, ТГ, ХС-ЛП высокой плотности (ХС-ЛПВП) в плазме крови, определен спектрофотометрическим способом на биохимической анализаторе модели «Star Fax 1904+» (США). Содержание ХС-ЛПНП и ХС-ЛПОНП рассчитывали по формуле Фридвальда. Для расчета коэффициента
атерогенности (КА) применили широко используемую формулу [2]. Состав ЖК мембран эритроцитов определили методом газожидкостной хромато-масс-спектрометрии. Метилирование ЖК проводили в гомогенатах эритроцитов без экстракции. Образованные эфиры ЖК очищали методом тонкослойной хроматографии на пластинах силикагеля толщиной 250 мкм, с диаметром гранул 25 мкм и размерами пор 60 A (Fluka, США). Разделение ЖК проводили на капиллярной колонке «От^а wax 250» длиной 30 м, диаметром 0,25 мм (США). Идентификацию ЖК осуществили на хромато-масс-спектрометре Agilent Technologies, США) на основании времен удерживания (Rf) стандартных образцов ЖК (внутреннего стандарта) и «библиотеки» масс-спектрометрических параметров. Содержание индивидуальных ЖК выражали в % от суммы ЖК в ФЛ эритроцитов.
Рассмотрение мононенасыщенных (МЖК), ненасыщенных (ННЖК) и эссенциальных полиненасы-щенных (ЭС ПНЖК) проводили раздельно, в зависимости от семейства ЖК, к которым они отнесены: ш-7 С16:1 пальмитолеиновая МЖК; ш-9 С18:1 эндогенная олеиновая МНК, ш-9 С20:1 эйкозеновая МЖК и ш-9 С22:1 эруковая МЖК. К незаменимым семействам ЖК относились: ш-6 С18:2 линолевая ЖК; ш-6 С20:3 дигомо-у-линоленовая ЖК; ш-6 С20:4 арахдоновая (Арахи) ПНЖК; ш-3 С20:5 эйкозапентаеновая (Эйкоза) ПНЖК; ш-3 С22:6 докозагексаеновая (Докоза) ПНЖК. В качестве интегрального показателя, указывающего на перераспределение ЖК в составе липидов, использовали индекс ненасыщенности (ИН) - отношение содержания ННЖК к содержанию насыщенных ЖК (НЖК), умноженное на 100. В качестве оценки биологической доступности и биологической ценности потребляемых пищевых жиров по составу ЖК использовали коэффициент эффективности метаболизма (КЭМ) ЭС ПНЖК как отношение ш-6 Арахи к ш-3 Эйкоза + Докоза.
Содержание ЖК, этерифицированных со спиртом глицерином в составе ТГ, рассчитывали как сумму пальмитиновой (Пальм) (С16:0) НЖК, олеиновой (С18:1) ш-9 МЖК, линолевой (С18:2) ш-6 ННЖК и а-линоленовой (С18:3) ш-3 ННЖК. В качестве субстратов для построения мембран клеток (эритроцитов) использовали процентное содержание ННЖК с двумя и более двойными связями (-С=С-) (ДС) к общему содержанию ЖК; энергетическим субстратом для наработки клетками АТФ являлась сумма ННЖК и МЖК. Анализ данных провели при использовании пакета статистических прикладных программ SPSS 13.0 for Windows с проверкой распределения по критериям Колмогорова - Смирнова. Достоверность различий для парных выборок определяли по t-критерию Стьюдента. Статистически значимыми считали различия при p < 0,05.
результаты и обсуждение
У женщин после приема препарата (в обеих дозах) в сыворотке крови происходило достоверное снижение содержания ОХ, ХС-ЛПНП и, соответственно этому, достоверное уменьшение интегрального показателя - КА (табл. 1). Данные изменения являются
Таблица 1
Липиды в крови женщин с ИБС до и после приема симвастатина (М ± m)
Липиды сыворотки крови Содержание липидов (мМ/л)
в дозе 40 мг (п = 14) в дозе 80 мг (п = 9)
до лечения после лечения до лечения после лечения
ТГ 2,18 ± 0,37 1,72 ± 0,16 1,82 ± 0,20 1,61 ± 0,18
ХС 6,21 ± 0,37 4,21 ± 0,20*** 5,76 ± 0,54 4,20 ± 0,34**
ХС-ЛПВП 1,44 ± 0,08 1,51 ± 0,10 1,40 ± 0,13 1,23 ± 0,09
ХС- ЛПНП 3,78 ± 0,35 1,92 ± 0,15*** 3,53 ± 0,48 2,23 ± 0,28**
ХС-ЛПОНП 0,99 ± 0,17 0,78 ± 0,07 0,83 ± 0,09 0,73 ± 0,08
КА 5,21 ± 0,37 3,21 ± 0,20*** 4,76 ± 0,55 3,20 ± 0,34**
примечание (здесь и далее): М - среднее значение; т - ошибка среднего; уровень значимости различий между группами
*** - p < 0,001; ** - p < 0,01; * - р < 0,05; п - количество наблюдений.
Таблица 2
Содержание ННЖК и ЭС ПНЖК в эритроцитах женщин с хронической формой ИБС при приеме симвастатина
(М ± т)
Название и формула ЖК Содержание ЖК в ФЛ эритроцитов, %
в дозе 40 мг (п = 14) в дозе 80 мг (п = 9)
до лечения после лечения до лечения после лечения
СО 3 Эйкоза С20:5 ПНЖК 0,75 ± 0,12 0,57 ± 0,12* 0,82 ± 0,11 0,79 ± 0,08
Доказа С22:6 ПНЖК 6,29 ± 0,35 6,16 ± 0,39 6,46 ± 0,27 7,76 ± 0,53
Сумма ы-3 ЖК 7,05 ± 0,44 6,75 ± 0,42 7,29 ± 0,34 8,59 ± 0,51
со 3 Линолевая С18:2 ПНЖК 9,84 ± 0,34 7,97 ± 0,33*** 10,01 ± 0,57 7,34 ± 0,34***
Дигомо-у-линолевая С20:2 ПНЖК 0,31 ± 0,02 0,38 ± 0,03 0,26 ± 0,02 0,48 ± 0,16
Дигомо-у-линоленовая С20:3 ПНЖК 1,38 ± 0,09 1,33 ± 0,11 1,53 ± 0,11 1,33 ± 0,13*
Арахи С20:4 ПНЖК 16,35 ± 0,58 14,35 ± 0,59* 15,51 ± 0,37 13,57 ± 0,36**
Сумма ы-6 ЖК 27,96 ± 0,50 24,08 ± 0,74*** 27,31 ± 0,74 22,72 ± 0,55***
Отношение Ы-3/Ы-6 25,27 ± 1,58 28,69 ± 2,52 27,01 ± 1,72 37,95 ± 2,37***
ы-6 Арахи / ы-3 Докоза 2,68 ± 0,14 2,47 ± 0,18 2,44 ± 0,16 1,81 ± 0,13**
ы-6 С20:3 + ы-3Эйкоза / ы-3 Докоза 1,50 ± 0,09 1,43 ± 0,11 1,65 ± 0,10 1,44 ± 0,13*
ы-6 Арахи / ы-3Эйкоза 29,48 ± 7,11 36,69 ± 7,11 21,48 ± 2,76 19,47 ± 3,57
КЭМ 1,52 ± 0,08 1,46 ± 0,10 1,40 ± 0,09 1,14 ± 0,06**
г- 3 Пальмитолеиновая С16:1 0,06 ± 0,01 0,10 ± 0,01** 0,08 ± 0,01 0,09 ± 0,02
Вакценовая С18:1 1,00 ± 0,07 1,02 ± 0,08 0,99 ± 0,11 1,02 ± 0,13
Сумма ы-7 ЖК 1,09 ± 0,09 1,12 ± 0,09 1,14 ± 0,12 1,11 ± 0,15
а> 3 Олеиновая С18:1 10,95 ± 0,33 9,96 ± 0,25 *** 11,87 ± 0,36 10,07 ± 0,51**
Эйкозаеновая С20:1 0,19 ± 0,03 0,26 ± 0,01* 0,16 ± 0,01 0,28 ± 0,04**
Эруковая С22:1 0,008 ± 0,007 0,13 ± 0,02*** 0,02 ± 0,01 0,17 ± 0,03***
Селаховая С24:1 5,18 ± 0,27 6,62 ± 0,61* 4,79 ± 0,27 6,63 ± 1,30
Сумма ы-9 ЖК 16,33 ± 0,33 16,84 ± 0,55 17,01 ± 0,40 17,13 ± 0,94
I МЖК 17,43 ± 0,35 18,09 ± 0,59 17,43 ± 0,35 18,09 ± 0,59
I ННЖК 55,80 ± 0,94 51,05 ± 1,00 ** 55,95 ± 0,65 52,28 ± 0,91***
свидетельством эффективного гиполипидемического действия симвастатина.
Лечение симвастатином в дозировке 40 мг/сутки приводило к небольшому снижению концентрации ш-3 Эйкозы (С20:5) ПНЖК в эритроцитах, что не влияло на общий уровень ш-3 ЖК. При дозировке 80 мг/сутки как
содержание отдельных ш-3 ЖК в аминофосфолипидах эритроцитов, так и суммарный состав данного семейства у женщин не изменялись. Однако необходимо отметить, что содержание ш-3 Докозы (С22:6) ПНЖК в ФЛ мембран до и после лечения почти на порядок выше, чем ш-3 Эйкозы (С20:5) ПНЖК (табл. 2).
Снижение уровня ш-6 дигомо-у-линоленовой (С20:3) ЖК при 80 мг/сутки и уменьшение уровня ш-6 линолевой (С18:2) ЖК и ш-6 Арахи (С20:4) ЖК при обеих дозировках препарата отразилось на суммарном уровне ш-6 ЖК, степень понижения которого составила «10-15 %.
Прием симвастатина в дозе 80 мг/сутки достоверно увеличил отношение суммы ш-3 ЖК к сумме ш-6 ЖК. Снижение отношения Арахи/Докоза ПНЖК происходит, главным образом, за счет уменьшения в ФЛ мембран эритроцитов содержания Арахи (С20:4) ЭС ПНЖК - предшественника эйкозаноидов с провоспалительным эффектом, без выраженного увеличения доли ш-3 Эйкозы (С20:5) и Докозы (С22:6) ЖК [11]. У данной группы исследуемых лиц отмечено уменьшение соотношения ш-6 С20:3 + ш-3 Эйкоза / ш-3 Докоза в результате снижения содержания ш-6 С20:3 ЖК - предшественника эй-козаноидов 1-й серии, которые, с позиций общей биологии, действуют афизиологично. Изменение содержания ш-6 ЭС ПНЖК при увеличении дозы препарата сказалось на снижении коэффициента эффективности метаболизма (КЭМ), по сравнению с данными до лечения, что свидетельствовало о неполном обеспечении синтеза ПНЖК - структурных компонентов клеточных мембран. В целом просматривается способность статинов несколько понижать в ФЛ мембраны эритроцитов содержание ш-6 ЖК при тенденции к увеличению ш-3 ЭС ПНЖК, которая более выражено проявляется при дозировке симвастатина 80 мг/сутки.
Трудно ожидать, что лечение симвастатином оказывает выраженное влияние на содержание МНЖК семейства ш-7, таких, как пальмитолеиновая (С16:1) ЖК и транс-вакценовая (С18:1) МЖК [20], которые синтезируют бактерии толстого кишечника и которые, также бактериального происхождения, содержатся в пище, в частности, в говядине. Данные ЖК не имеют биологической или диагностической цен-
ности, однако в определенной мере повышение ш-7 MЖK может отражать нежелательное преобладание говядины, в которой содержание пальмитолеиновой может достигать 7-8 %, среди пищи животного происхождения.
Достоверное повышение содержания ш-9 эйкоза-еновой (С20:1) MЖK, ш-9 эруковой (С22:1) MЖK при обеих дозах препарата и ш-9 селаховой (С24:1) MЖK при 40 мг/сутки в обеих группах сопровождалось сниженным уровнем эндогенной ш-9 олеиновой (С18:1) MЖK. В связи с этим суммарное содержание ш-9 ЖK в ФЛ не изменилось.
Таким образом, у женщин в дозировках симвастатина 40 и 80 мг/сутки наблюдалось понижение суммарных уровней ш-6 ЖК отразившееся на уменьшении общего показателя НЖК
У женщин при лечении симвастатином, независимо от дозировки, наблюдалось повышение арахи-новой (С20:0), бегеновой (С22:0) и лигноцериновой (С24:0) ЖK (табл. 3).
При дозировке 80 мг/сутки происходило увеличение маргариновой (С17:0), трикозановой (С23:0) и гексакозановой (С26:0) ЖK и снижение пальмитиновой (С16:0) ЖК Независимо от дозы препарата увеличение значительного количества отдельных НасЖK приводило к росту суммарного уровня НасЖК В связи с этим при пониженной сумме НЖK индекс ненасыщенности снижался.
Независимо от дозировки препарата у пациентов происходило снижение ЖK-субстратов витамина F и ЖK-субстратов мембран эритроцитов за счет уменьшения ш-6 ЖK (табл. 4).
В результате снижения олеиновой (С18:1) и линолевой (С18:2) ЖK при обеих дозировках симвастатина и пальмитиновой (С16:0) ЖK при 80 мг/сутки уменьшалось содержание ЖK в составе ТГЛ. Состав Ж^ обеспечивающий энергетические потребности клеток, увеличивался после лечения препаратом независимо от дозировки.
Таблица 3
Содержание НЖК в эритроцитах женщин с ИБС при приеме статина (M ± m)
Систематическое название, формула Содержание ЖК в ФЛ эритроцитов, %
в дозе 40 мг (n = 14) в дозе 80 мг (n = 9)
до лечения после лечения до лечения после лечения
Миристиновая С14:0 0,04 ± 0,01 0,06 ± 0,01 0,05 ± 0,01 0,04 ± 0,01
Пентадекановая С15:0 0,03 ± 0,01 0,06 ± 0,01 0,05 ± 0,01 0,05 ± 0,01
Пальмитиновая С16:0 14,08 ± 0,76 12,43 ± 0,77 15,62 ± 0,29 11,77 ± 1,09*
Маргариновая С17:0 0,24 ± 0,03 0,27 ± 0,02 0,15 ± 0,02 0,27 ± 0,03**
Стеариновая С18:0 20,74 ± 0,68 21,33 ± 0,75 21,00 ± 0,41 20,14 ± 0,97
Арахиновая С20:0 0,31 ± 0,03 0,48 ± 0,05** 0,22 ± 0,02 0,44 ± 0,05**
Бегеновая С22:0 1,82 ± 0,14 2,49 ± 0,17*** 1,59 ± 0,11 2,49 ± 0,21**
Трикозановая С23:0 0,46 ± 0,06 0,73 ± 0,15 0,24 ± 0,03 0,65 ± 0,11*
Лигноцериновая С24:0 6,59 ± 0,53 9,83 ± 0,82*** 5,59 ± 0,43 10,52 ± 1,11**
Гексакозановая С26:0 0,70 ± 0,12 0,82 ± 0,10 0,39 ± 0,09 1,09 ± 0,22*
Сумма НЖК 45,19 ± 0,90 48,95 ± 1,01* 45,03 ± 0,64 48,07 ± 0,94**
Таблица 4
Содержание ЖК-субстратов мембран, витамина F, субстратов энергии и ТГЛ в эритроцитах женщин
с ИБС при приеме статина (М ± т)
Систематическое название, формула Содержание ЖК в ФЛ эритроцитов, %
в дозе 40 мг (n = 14) в дозе 80 мг (n = 9)
до лечения после лечения до лечения после лечения
Субстраты мембран эритроцитов 38,00 ± 0,86 32,96 ± 0,76** 37,50 ± 0,63 33,70 ± 0,78*
Субстраты витамина F 33,24 ± 0,66 29,06 ± 0,71** 32,82 ± 0,59 29,49 ± 0,75*
Субстраты ТГЛ 34,88 ± 1,27 30,37 ± 1,12** 37,69 ± 0,73 29,18 ± 1,77**
Субстраты энергии 62,00 ± 0,86 67,04 ± 0,76** 62,50 ± 0,63 66,30 ± 0,78*
Проведенное исследование показало, что при выраженном гиполипидемическом действии сим-вастатина в такой ткани, как кровь, наблюдалось перераспределение жирнокислотного состава эритроцитов, которое отразилось на более высоком содержании НасЖК и низком уровне НЖК. В то же время статины достоверно понижали содержание НЖК в интиме артерий эластического и смешанного типов [8]. Одновременно статины оказывали влияние и на содержание ЖК в составе ЛП плазмы крови [4, 6].
Эксперименты in vitro показали, что статины ингибируют синтез ХС, главным образом, в гепатоцитах [14]. Выраженное понижение содержания в крови ХС-ЛПНП после приема симвастатина в обеих дозировках указывает на усиление клетками апоВ-100 рецепторного эндоцитоза ХС-ЛПНП со всеми переносимыми ими как ЖК в форме эфиров со спиртом глицерином (ТГ), так и в форме этерифицированных спиртом холестерином ЭС ПНЖК.
Мембрана эритроцитов не содержит рецепторов для ХС-ЛПНП, ХС-ЛПОНП, а также рецепторов к инсулину, поэтому изменения содержания ЖК в ФЛ эритроцитов - это результат пассивного поглощения ЖК по градиенту концентрации межклеточная среда ^ мембрана эритроцитов. При этом быстрыми и выраженными изменения ЖК в ФЛ эритроцитов быть не могут. Однако снижение ш-6 линолевой (С18:2) ЖК - основного субстрата для построения мембран клеток и синтеза эйкозаноидов, возможно, является следствием снижения содержания переносчиков ХС-ЛПНП в кровотоке. Кроме того, уменьшение относительного содержания ш-6 ЭС ПНЖК и тенденция снижения дигомо-у-линоленовой (С20:3) ш-6 ННЖК при дозировке симвастатина 80 мг/сутки может увеличить содержание аминофосфолипидов, улучшить физиологичные параметры и функцию клеточной мембраны [17]. И если содержание ш-6 С20:3 ННЖК и С20:4 ЖК не увеличено, а уровень ш-3 ПНЖК оставался неизменным, следовательно, клетки содержат достаточное количество предшественников для синтеза эйкозаноидов серии 2 или даже серии 3, из которых простациклины-3 являются активными вазодилататорами, тромбоксаны-3 активно ингибируют взаимодействие клеток (агрегацию тромбоцитов), лейкотриены-3 выраженно активируют синдром компенсаторной противовоспалительной защиты [7].
Кроме того, все статины, ингибируя синтез спирта ХС в печени и изменяя активность биохимических превращений ХС-ЛПОНП и ХС-ЛПНП в крови при переносе, а также поглощение клетками ННЖК и ЭС ПНЖК, формируют условия нормализации функции клетки in vivo. Полученные данные указывают на повышение соотношения ш-3 ЖК к ш-6 ЖК при дозировке симвастатина 80 мг/сутки, что говорит об относительном повышении ш-3 ЖК и является благоприятным в отношении течения заболевания [19].
Лечение симвастатином в дозе 80 мг/сутки приводило к снижению в ФЛ уровня пальмитиновой (С16:0) ЖК - эндогенного предшественника олеиновой (С18:1) ш-9 ЖК, понижение которой наблюдали при обеих дозах препарата. Возможно, содержание ш-9 С18:1 МЖК компенсировало увеличение уровня гондоиновой (С20:1), эруковой (С22:1) ЖК при обеих дозах и селаховой (С24:1) ш-9 МЖК при дозе препарата 40 мг/сутки. С другой стороны, снижение ш-9 С18:1 ЖК и увеличение длинноцепочечных ш-9 ЖК, вероятно, объясняется способностью статинов активировать ферменты-десатуразы, усиливая образование Арахи ЖК при метаболизме очень длинноцепочечных ННЖК [12]. Возможно также снижение синтеза эндогенной олеиновой МЖК за счет уменьшения субстрата - содержания пальмитиновой (С16:0) НЖК в гепатоцитах. Уменьшение содержания в клетках данной ЖК при дозировке симвастатина 80 мг/сутки также является позитивным действием статинов, поскольку, наряду со снижением олеиновой ш-9 и линолевой W-6 ЖК независимо от дозы препарата, это приводило к уменьшению этерификации ЖК в функционально нежелательные пальмитиновые ТГЛ. Напомним, что пальмитиновая, стеариновая НЖК и олеиновая МЖК являются основными ЖК, которые переносят к клеткам ХС-ЛПОНП - это субстраты для наработки клетками энергии при окислении ЖК в митохондриях.
Независимо от дозы препарата в мембранах эритроцитов после проведенного лечения выявлено понижение количества НЖК. Интегральный показатель - индекс ненасыщенности - является тестом изменения физико-химических свойств мембраны эритроцита, их микровязкости и жидкосности. Кроме того, увеличение этерификации НасЖК в ФЛ делает структуру мембраны более ригидной, нарушая функциональную активность всех интегральных протеинов мембраны [9].
Снижение в сыворотке крови концентрации ТГ, ХС-ЛПНП дает основание утверждать, что статины усиливают поглощение всеми клетками ХС-ЛПНП путем апоВ-100 эндоцитоза и поглощение ХС-ЛПОНП при апоЕ/В-100 рецепторном поглощении инсулинзависимыми клетками. При ингибировании синтеза специфичного пула спирта ХС в гепатоцитах:
а) статины изменяют физико-химические параметры синтезируемых гепатоцитами пальмитиновых, олеиновых, стеариновых, линолевых и линоленовых ХС-ЛПОНП [5];
б) в первых трех ХС-ЛПОНП статины активируют гидролиз ТГ, формирование апоЕ/В-100 лиганда и поглощение их клетками путем апоЕ/В-100 эндоцитоза;
в) активируя гидролиз линолевых и линоленовых ТГ в составе ХС-ЛПОНП, статины во время перехода ЭС ПНЖК, этерифицированных спиртом ХС, из ХС-ЛПВП в ХС-ЛПОНП, способствуют формированию апоВ-100 лиганда и быстрому поглощению всеми клетками ХС-ЛПНП путем апоВ-100 рецепторного эндоцитоза [18];
г) пропорционально уменьшению содержания ХС-ЛПНП клетки увеличивают поглощение ННЖК и ЭС ПНЖК, которые ХС-ЛПНП переносят и активируют синтез физиологичных эйкозаноидов серии 2 или 3, уменьшая выраженность всех клинических симптомов (проявлений) атеросклероза - дефицита в клетках ЭС ПНЖК;
д) увеличивая поглощение клетками ХС-ЛПНП, статины уменьшают количество ХС-ЛПНП, которые не сформировали апоВ-100 лиганд, которые не могут рецепторно поглотить клетки и которые становятся в крови «биологическим мусором»;
ж) все ХС-ЛПНП - «биологический мусор» клетки эндотелия - путем биологической реакции транс-цитоза выводятся в интиму артерий эластического и смешанного типа, в локальный пул сбора и утилизации «биологического мусора» из локального пула внутрисосудистой среды;
з) в процессе неполной утилизации макрофагами ЭС ПНЖК в форме эфиров со спиртом ХС происходит формирование атероматозных масс. Все большее число фармакологов и клиницистов приближаются к пониманию того, что статины реально ускоряют поглощение клетками ХС-ЛПНП и ХС-ЛПОНП и нормализуют биодоступность для всех клеток ЭС ПНЖК [5]. Последние же и проявляют свойственное им позитивное действие как на все симптомы синдрома атеросклероза, так и на формирование атероматоза, в частности, коронарных артерий.
литература
1. Галявич А.С., Салахова Л.Р. Аторвастатин и концентрация жирных кислот в крови у больных ИБС / / Атеросклероз и дислипидемии. - 2011. - № 1. -С. 18-22.
2. Климов А.Н., Никульчева Н.Г. Обмен липидов, липопротеидов и его нарушения. - СПб.: Питер Ком, 1999. - 512 с.
3. Кухарчук В.В. Семейная гиперхолестеринемия: современные аспекты диагностики, профилактики и терапии // Кардиология. - 2009. - № 49 (1). - С. 76-83.
4. Новицкий В.В., Карпов Р.С., Клименко С.В., Сал-мина А.Б. и др. Роль жирных кислот плазмы крови в патогенезе стабильной стенокардии // Бюл. сибирской мед. - 2007. - № 4. - С. 41-45.
6. Титов В.Н. Статины, холестерин, жирные кислоты и диабет // Научный диалог. - 2013. - № 3 (15). -С. 148-183.
5. Титов В.Н. Ариповский А.В., Каба С.И., Колесник П.О. и др. Индивидуальные жирные кислоты в плазме крови, эритроцитах и липопротеинах. Сравнение результатов больных ишемической болезнью сердца и добровольцев // Клин. лаб. диагност. -2012. - № 7. - С. 3-8.
7. Эндакова Э.А. Модификация состава жирных кислот крови при сердечно-сосудистых заболеваниях. - Владивосток: Дальнаука, 2002. - 290 с.
8. Bocan T.M., Krause B.R., Rosenbury W.S. The combined effect of inhibiting both ACAT and HMG-CoA reductase may directly induce atherosclerotic lesion regression // Atherosclerosis. - 2001. - Vol. 157, № 1. - P. 97-105.
9. De Vries J.E., Vork M.M., Roemen T.H., de Jong Y.F. et al. Saturated but not mono-unsaturated fatty acids induce apoptotic cell death in neonatal rat ventricular myocytes // J. Lipid. Res. - 1997. - Vol. 38. - P. 1384-1394.
10. Jula A., Marniemi J., Ronnemaa T. et al. Effects of diet and simvastatin on fatty acid composition in hyper-cholesterolemic men // Arteriosclerosis, Thrombosis and Vascular Biology. - 2005. - Vol. 25. - С. 1952-1959.
11. Kawabata T., Hirota S., Hirayama T. Associations between dietary n-6 and n-3 fatty acids and arachidonic acid compositions in plasma and erythrocytes in young and elderly Japanese volunteers // Lipid. Health. Dis. -2011. - N 13. - P. 10-138.
12. Levine L. Statins stimulate arachidonic acid release and prostaglandin I2 production in rat liver cells // Lipids Health Dis. - 2003. - N 2. - P. 1-10.
13. Murphy S.A., Cannon C.P., Wiviott S.D. et al. Effect of intensive lipid-lowering therapy on mortality after acute coronary syndrome (apatient-levelanalysis of the Aggrasta to Zocor and Pravastatin or Atorvastatin evaluation and infection therapy-thrombolysis in myocardial infarction 22 trials) // Am. J. Cardiol. - 2007. -Vol. 100 (7). - P. 1047-1051.
14. Parker R.A., Clark R.W., Sit S.Y. Selective inhibition of cholesterol synthesis in liver versus extrahepatic tissues by HMG-CoA reductase inhibitors // J. Lipid. Res. - 1990. -Vol. 31 (7). - P. 1271-1282.
15. Rise P., Colombo C., Galli C. et al. Effects of simvastatin on the metabolism of polyunsaturated fatty acids and on glycerolipid, cholesterol, and de novo lipid synthesis in THP-1 cells // J. Lipid Research. - 1997. - July, Vol. 38. -P. 1299-1307.
16. The Scandinavian Simvastatin Survival Study Group. Randomized trial of cholesterol lowering in 4444 patients with coronary heart disease: the Scandinavian Simvastatin Survival Study (4S) // Lancet. - 1994. -Vol. 344. - P. 1383-1389.
17. Uydu H.A. Yildirmis S., Orem C.J. The effects 744 of atorvastatin therapy on rheological characteristics of erythrocyte membrane, serum lipid745 profile and oxidative status in patients with dyslipidemia // Membr. Biol. - 2012. - Vol. 245 (11). - P. 697-705.
18. Van Fossen B.T. et al. Statin users without an apoE-4 allele have increased insulin resistance // J. Alzheimer's Disease. - 2010. - Vol. 19 (4). - P. 1149-1153.
19. Zhang B., Wang P., Zhou Q. The relationships between erythrocyte membrane n-6 to n-3 polyunsaturated fatty acids ratio and blood lipids and C-reactive protein in Chinese adults: an observational
study // Biomed. Environ. Sci. - 2011. - Vol. 24 (3). -P. 234-242.
20. Zong G., Ye X., Sun L., Li H. Associations of erythrocyte palmitoleic acid with adipokines, inflammatory markers, and the metabolic syndrome in middle-aged and older Chinese // Am. J. Clin. Nutr. - 2012. - Vol. 96 (5). -P. 970-976.
сведения об авторах
Дыгай Александр Михайлович - доктор медицинских наук, профессор, директор ФГБУ «Научно-исследовательский институт фармакологии» СО РАМН (634028, г. Томск, пр. Ленина, 3; тел.: 8 (3822) 41-83-72)
Котловский Михаил Юрьевич - кандидат медицинских наук, врач-терапевт Центральной научно-исследовательской лаборатории ГБОУ ВПО «Красноярский государственный медицинский университет» Минздрава России (660022, г. Красноярск, ул. П. Железняка, 1; тел.: 8 (3912) 28-09-14; e-mail: [email protected])
Кириченко Дарья Александровна - научный сотрудник, биолог Центральной научно-исследовательской лаборатории ГБОУ ВПО «Красноярский государственный медицинский университет» Минздрава России (e-mail: [email protected]) Якимович Инесса Юрьевна - кандидат медицинских наук, доцент, заведующая учебной частью кафедры физической культуры и здоровья ГБОУ ВПО «Сибирский государственный медицинский университет» Минздрава России (634050, г. Томск, Московский тракт, 2; тел.: 8 (3822) 55-61-16)
Терешина Дарья Сергеевна - биолог Центральной научно-исследовательской лаборатории ГБОУ ВПО «Красноярский государственный медицинский университет» Минздрава России
Котловский Юрий Васильевич - доктор медицинских наук, профессор, заведующий Центральной научно-исследовательской лаборатории ГБОУ ВПО «Красноярский государственный медицинский университет» Минздрава России Титов Владимир Николаевич - доктор медицинских наук, профессор, руководитель лаборатории клинической биохимии липидного обмена ФГБУ «Российский кардиологический научно-производственный комплекс» Минздрава России (121552, г. Москва, ул. 3-я Черепковская, 15а; e-mail: [email protected])
