УДК 577.352.333:616.155.1(618.4+616.523)
Н.А. Ишутина
E-mail: [email protected]
ВЛИЯНИЕ ПРОЦЕССОВ ПЕРЕКИСНОГО ОКИСЛЕНИЯ ЛИПИДОВ НА СТРУКТУРНОФУНКЦИОНАЛЬНЫЕ СВОЙСТВА МЕМБРАН ЭРИТРОЦИТОВ У РОЖЕНИЦ ПРИ ГЕРПЕСНОЙ ПАТОЛОГИИ
ГУ Дальневосточный научный центр физиологии и патологии дыхания СО РАМН, г Благовещенск
Целый ряд патологических состояний приводит к той или иной форме повреждения клетки, которое практически всегда подразумевает нарушение целостности как плазматической мембраны, так и мембран клеточных органелл. Липидный слой, входящий в состав клеточных мембран, определяет их механические и физико-химические свойства, модулирует активность мембранных рецепторов. Изменения состава фосфолипидов сказываются на функциональной активности клетки и сопровождаются растройствами микроструктуры, физико-химических свойств и основных функций мембран [1]. Одним из основных факторов, приводящих к дезорганизации клеточных мембран, является развитие в них процессов перекисного окисления ненасыщенных жирных кислот, приводящее к нарастанию уровня липидных перекисей и образованию в мембранах так называемых липидных пор, что обусловливает значительное изменение в них проницаемости [2]. Патологически протекающая беременность сопровождается нарушением состава фосфолипидов и активацией процессов перекисного окисления липидов (ПОЛ) [3], что в свою очередь может сказываться на таком функциональном свойстве биомембран как
микровязкость. В доступной нам литературе отсутствуют данные, касающиеся изменения структурной организации мембран клеток при герпес-вирус-ной инфекции.
Цель данного исследования - оценить влияние процессов ПОЛ на структурно-функциональные свойства мембран эритроцитов рожениц при герпесной патологии.
МАТЕРИАЛ И МЕТОДЫ
Проведен структурно-функциональный анализ мембран эритроцитов периферической крови (фос-фолипидный состав и относительная микровязкость) у женщин в родах на сроке гестации 38-40 недель. Изучаемую группу составили 30 женщин, перенесших во время беременности обострение герпес-ви-русной инфекции (ГВИ) в разные сроки гестации при титре антител к вирусу простого герпеса (ВПГ) 1:12800. В качестве группы сравнения обследованы 30 практически здоровых рожениц.
Определяли содержание лизофосфатидилхолина (Ьре) и сфингомиелина (ЗрЬ) методом двухмерной тонкослойной хроматографии по Кирхнеру [4]. Измерение микровязкости мембран эритроцитов проводили методом латеральной диффузии гидрофобного флуоресцентного зонда пирена [5]. Оценка микровязкости основывается на вычислении коэффициента эксимеризации пирена (Кэкс =Р470/Р395), который находится в обратной зависимости от микровязкости. Об интенсивности процессов ПОЛ судили по накоплению в сыворотке крови малонового диальдегида (МДА), концентрацию которого определяли по методу Гаврилова В.Б. и соав. [6].
Статистический анализ данных проводился по критерию Стьюдента с использованием автоматизированной системы для научных исследований в области физиологии и патологии дыхания человека [7]. Критический уровень значимости при проверке статистических гипотез в данном исследовании принимался равным 0,05.
Н.А. Ишутина
ВЛИЯНИЕ ПРОЦЕССОВ ПОЛ НА СВОЙСТВА МЕМБРАН
Таблица
Показатели МДА сыворотки крови, фосфолипидов и микровязкости мембран эритроцитов у рожениц с герпесной инфекцией
Группа Число обследованных МДА, мкмоль/л Lpc,% Sph,% Липидный бислой Зона липид-белковых контактов
Роженицы 30 1,22±0,008 12,5±0,86 26,97±0,87 0,6±0,03 0,86±0,02
Здоровые роженицы 30 0,89±0,05 7,6±0,70 22,94±1,0 0,82±0,04 1,13±0,06
РЕЗУЛЬТАТЫ И ОБСУЖДЕНИЕ
Анализ результатов исследования ПОЛ показал, что у рожениц, перенесших во время гестации обострение ГВИ (титр антител к ВПГ 1:12800), наблюдалось закономерное увеличение уровня МДА в сыворотке крови по сравнению с соответствующими показателями в контрольной группе женщин (таблица).
Уровень фосфолипидов мембран мало подвержен изменениям, поскольку они обеспечивают целостность морфологической структуры эритроцита и прочно удерживаются эритроцитарной мембраной. В то же время даже незначительные структурные перераспределения, приводящие к утрате ассимет-рии мембранных фосфолипидов клетками, могут сказаться на нарушении функций биомембраны, ее проницаемости, вязкоэластических свойств, что влечет за собой снижение стабильности мембран клеток крови [8]. При анализе фосфолипидного состава мембран эритроцитов у рожениц с ГВИ (титр антител к ВПГ 1:12800), было выявлено увеличение процентного содержания Ьре по сравнению с контрольной группой (таблица).
Важное значение в изменении структурно-функциональных свойств мембраны придается увеличению БрЬ, способствующего увеличению микровязкости липидной фазы мембран [9]. Было выявлено статистически значимое увеличение процентного содержания БрЬ в мембранах эритроцитов у рожениц, которые в период гестации перенесли обострение ГВИ, по сравнению с контролем (таблица).
У рожениц с ГВИ наблюдалось статистически значимое снижение текучести (т.е. увеличение микровязкости) мембран эритроцитов как в липидном бислое, так и в зоне липид-белковых контактов по сравнению с контролем (таблица).
ВЫВОДЫ
Активация процессов ПОЛ у рожениц, перенесших обострение ГВИ в период беременности, приводит к структурной реорганизации фосфолипидных компонентов мембран эритроцитов в сторону увеличения процентного содержания Ьре и БрЬ, что отражается на функциональных свойствах клетки, а именно, относительной микровязкости, увеличение которой сопровождается нарушением функционирования их транспортных и ферментных систем и изменения состояния всей клетки.
ЛИТЕРАТУРА
1. Сотникова Л.Г., Наумов А.В., Кузнецова В.А. Значение некоторых показателей липидной пероксидации эрит-роцитарных мембран при позднем токсикозе беременных // Акуш. и гин. - 1986. - № 4. - С. 20-22.
2. Карагезян К.Г., Овсепян Л.М., Адонц К.Г. и др. Изучение фосфолипид-фосфолипидных соотношений и динамика свободнорадикального окисления липидов в биологических мембранах при аллоксановом диабете // Вопр. мед. химии. - 1982. - № 2. - С. 56-60.
3. Ишутина Н.А. Зависимость микровязкости мембран эритроцитов от фосфолипидного состава при беременности, осложненной герпес-вирусной инфекцией // Бюл. физиол. и патол. дыхания. - 2008. - Вып. 28. - С. 25-28.
4. Тонкослойная хроматография // Пер с англ. Ю. Кирхер.
- М.: Мир,1981. - С. 52-115.
5. Добрецов Г.Е. Флуоресцентные зонды в исследовании клеток, мембран и липопротеинов //М.: Наука, 1989. -С. 191-206.
6. Гаврилов В.Г., Гаврилова А.Р., Мажуль Л.М. Анализ методов определения продуктов перекисного окисления липидов в сыворотке крови по тесту с тиобарбитуровой кислоты // Вопр. мед. химии. - 1987. - № 1. - С. 118-121.
7. Ульянычев Н.В. Автоматизированная система для научных исследований в области физиологии и патологии дыхания человека // Новосибирск: ВО «Наука», 1993.
- 246 с.
8. Вязова А.В. Фосфолипиды мембран эритроцитов у больных хроническим бронхитом, сочетанным с уролитиа-зом. // Патол. физиол. и экс терапия. - 2006. - № 1.
- С. 12-15.
9. Ли В.С., Халилов Э.М., Сабурова В.И. и др. Липидный состав и структурно-функциональные свойства мембран эритроцитов разного возраста // Вопр. мед. химии.
- 1982. - Т. 28, Вып. 6. - С. 66-71.
INFLUENCE OF LIPID PEROXID OXIDATION PROCESSES ON STRUCTURAL-FUNCTIONAL PROPERTIES OF ERYTHROCYTE MEMBRANES IN WOMEN IN BIRTH HAVING HERPES PATHOLOGY
N.A. Ishoutina
SUMMARY
Investigation results of structurally functional properties of membranes of erythrocytes women in birth having herpes-virus infection and influence on them
of lipid peroxide oxidation processes are described in the paper. Increased percentage level of lisophos-phatidilcholine and sphingomyelin and decrease of fluidity of erythrocyte membranes in the lipid bilayer and zone of lipid-protein contacts in women in birth in the
antibody titre to the simple herpes virus 1:12800 in simultaneous accumulation of malone dialdehyde in blood serum.
Key words: herpes-viral infection, peroxide oxidation, membranes of erythrocytes.