CC BY
26
Влияние полиоксидония на костномозговое кроветворение после двухнедельной интоксикации ванадием и хромом у крыс с экспериментальным воспалением
Балабекова М.К., Нурмухамбетов А.Н., Нургалиева К.Т. Казахский национальный медицинский университет им. С.Д. Асфендиярова, Научный центр педиатрии и детской хирургии МЗ РК
Ванадий мен хроммен ею апта бойыуландырган тэжiрибелiк цабыну жасалынган жануарлардыц сYйеккемiктiк цан вндiрiлуiне полиоксидонийдщ acepi
Нурмухамбетов Э.Н., Балабекова М.К.., Нургалиева К..Т. Тэжipибeлiк цабыну жасалынган егеуцуйрыцтарда ванадий мен хромныц эсертен cYйeккeмiктiк цан вндipiлу тeжeлдi. Полиоксидоний мен емделген жануарларда cYйeк кeмiгi мен шeткepi цаныныц жасушалыц цурамы зерттеулердщ бастапцы кезецтде цалпына оралды.
Effect On Polyoxidonium Bone Marrow Hemopoiesis After Two Weeks Of Intoxication Vanadium And Chromium In Rats With Experimental Inflammation
Nurmukhambetov A.N., BalabekovaM.K.,, Nurgalieva K.T. Under the influence of vanadium and chromium inhibited bone marrow hemopoiesis in rats with experimental inflammation. Treatment polyoxidonium already at initial stages of research led to the restoration of the cellular composition of bone marrow and peripheral blood of experimental animals.
К числу самых опасных видов токсичности токсикантов следует отнести миелотоксичность [1]. Повреждение костного мозга сопровождается снижением содержания числа лейкоцитов, тромбоцитов и эритроцитов периферической крови, при этом наиболее опасным проявлением миело-депрессии является нейтропения, которая в значительной степени повышает риск инфекционных осложнений [2]. В связи с этим поиск и разработка препаратов, снижающих токсичность экотоксикантов на систему крови, является актуальной задачей. Перспективными в этом плане являются препараты, которые стимулируют иммунную систему, усиливают процесс фагоцитоза, повышают количество лимфоцитов в крови и лимфоидных органах [3]. Установлен факт активации процессов кроветворения некоторыми полисахаридами, особенно эритроидного ростка [4]. Таким образом, представилось целесообразным изучить действие полиоксидония на показатели костномозгового кроветворения и периферической крови в условиях терапии животных с экспериментальным воспалением, протекавшим на фоне двухнедельной затравки ванадатом аммония и бихроматом калия.
Материал и методы исследования Эксперименты выполнены на 30 белых крысах-самцах массой 180-220 г, содержавшихся в стандартных условиях вивария на обычном пищевом рационе. Проведены 2 серии экспериментов: 1 серия - контрольные животные; 2 серия - животные с воспалением, вызванным на фоне
Рисунок 1 - Морфологическая картина костного мозга бедренной кости у опытных крыс с экспериментальным воспалением после затравки ВА и БК и лечения ПО через 1 сутки. Окрашивание по Романовскому-Гимза. Увеличение х1000
воздействия ванадата аммония (ВА) и бихромата калия (БК) (ВА+БК+С); 3 серия -животные с воспалением, леченые полиоксидонием на фоне интоксикации ВА и БК (М+Скипидар+ПО). У опытных животных интоксикацию соединениями металлов вызывали путем введения ВА и БК в дозе по 5 мг/кг м.т. перорально через зонд в течение двух недель. По окончании двухнедельной затравки ВА и БК у животных вызывали асептическое воспаление путем подкожного введения 0,3 мл скипидара на вазелиновом масле в межлопаточную область [5], после чего начинали лечение ПО в дозе 50 мг/кг, растворяя в физиологическом растворе, и вводили подкожно в объеме 0,5 мл в течение недели. Контрольные животные получали равный объем 0,9% раствора №С1. Животных выводили из эксперимента путем декапитации под эфирным наркозом на 1, 7, 14, 30 сутки эксперимента от начала коррекции ПО. Пунктаты костного мозга животных окрашивали по Романовскому-Гимза Полученные цифровые данные математически обработаны по ^критерию Стъюдента.
Результаты и обсуждение
Изменения лейкоцитарного состава крови экспериментальных животных представлены в таблице 1. Так, через 1 сутки после воздействия скипидара в крови у опытных животных, леченых полиоксидонием, отмечалось достоверное снижение общего количества лейкоцитов на 76,8%. Следствием резкого снижения лейкоцитов явилось уменьшение абсолютного и относительного количества
Рисунок 2 - Морфологическая картина костного мозга бедренной кости у опытных крыс с экспериментальным воспалением после затравки ВА и БК и лечения ПО через 7 суток. Окрашивание по Романовскому-Гимза. Увеличение х1000
64
Вестник АГИУВ №3-4, 2010
Таблица 1 - Лейкограмма крыс, подвергавшихся воздействию скипидара на фоне затравки ВА и БК и лечения полиоксидонием (М±т)
Серии ОЛ (109/л) П/Я (%) С/Я (%) Э (%) М (%) Л (%) Л (109/л)
Через 1 сутки
1.Контр. 9,7±0,29 1,7±0,16 16,9±0,93 1,0±0,17 2,4±0,26 78,9±0,93 7,6±0,25
2.ВА+БК+С 1,47±0,09* 2,9±0,31* 31,4±2,3* 1,0±0,3 3,1±0,38 61,6±2,23* 0,9±0,07*
3.М+С+ПО 2,25±0,1*(****) 4,1±1,25* 26,2±1,11*(****) 2,9±0,74 *( ****) 2,3±0,3 64,5±1,6* 1,4±0,06*(****)
Через 7 суток
1.Контр. 9,7±0,29 1,7±0,16 16,9±0,93 1,0±0,17 2,4±0,26 78,9±0,93 7,6±0,25
2.ВА+БК+С 3,8±0,18*(**) 3,4±0,48* 26,6±2,14* 2,4±0,43*(**) 2,6±0,37 65,0±1,97* 2,4±0,13 *(**)
3.М+С+ПО 8,1±0,23*(**)**** 2,7±0,73 29,3±1,65* 0,8±0,25**(****) 2,0±0,33 65,8±1,27* 5,3±0,18*(**)****
Через 14 суток
1.Контр. 9,7±0,29 1,7±0,16 16,9±0,93 1,0±0,17 2,4±0,26 78,9±0,93 7,6±0,25
2.ВА+БК +С 5,5±0,23*(**) 3,5±0,5* 26,7±2,26* 1,4±0,3 2,4±0,22 66,0±2,3* 3,6±0,22*(**)
3.М+С+ПО 11,6±0,44*(**)**** 3,8±0,42* 25,6±1,87* 1,7±0,37*(**) 1,6±0,22*(****) 67,3±1,94* 7,8±0,38**(****)
Через 30 суток
1.Контр. 9,7±0,29 1,7±0,16 16,9±0,93 1,0±0,17 2,4±0,26 78,9±0,93 7,6±0,25
2.ВА+БК+С 6,2±0,43* 4,5±0,45* 21,5±1,26*(**) 1,3±0,21 2,3±0,37 70,4±1,58* 4,4±0,29*(**)
3.М+С+ПО 8,5±0,58**(****) 1,7±0,21**(****) 23,2±1,77* 2,7±0,330*(**)**** 1,7±0,21* 70,7±1,7* 6,0±0,43*(**)****
Через 45 суток
1.Контр. 9,7±0,29 1,7±0,16 16,9±0,93 1,0±0,17 2,4±0,26 78,9±0,93 7,6±0,25
2.ВА+БК+С 7,2±0,18*(**) 4,9±0,6* 27,7±1,1*(**) 1,4±0,27 2,4±0,34 63,6±1,07*(**) 4,6±0,15*
3.М+С+ПО 8,0±0,23*(****) 1,4±0,3**** 26,3±1,71* 0,6±0,27** (****) 1,4±0,22*(****) 70,3±1,53*(****) 5,6±0,19*(****)
Примечанием * -р<0,05 по отношению к контрольным данным 2 ** -р<0,05 по отношению к предыдущим данным 3 **** -р<0,05 по отношению к металлу со скипидаром
лимфоцитов в 5,4 и 1,2 раза по сравнению с контролем. Однако эти данные превышали данные нелеченных животных в 1,5 раза.
Лечение в течение недели опытных животных полиоксидонием приводило к более выраженному, по сравнению с другими сериями эксперимента, повышению общего количества лейкоцитов.
Так, по сравнению с нелеченными животными общее количество лейкоцитов в этот срок исследования повышалось на 113,2% и лишь на 16,5% отставало от контроля.
Через 14 суток в крови у опытных животных под влиянием полиоксидония нарастание общего количества лейкоцитов по сравнению с контрольными крысами и опытными животными без лечения составило 19,6% и 111% соответственно, развивался нейтрофильный лейкоцитоз с ядерным сдвигом влево, абсолютное количество лимфоцитов вернулось к норме.
К 30 суткам эксперимента, несмотря на общее снижение лейкоцитов крови крыс под влиянием полиоксидония, данные нелеченных крыс по отношению к ним оставались достоверно сниженными. Нейтрофильная реакция крови под влиянием полиоксидония за счет достоверного повышения сегментоядерных нейтрофилов у этих животных сохранялась и оставалась такой до конца эксперимента (таблица 1).
Как показано на рисунке 1, исследования костномозгового пунктата, проведенные через 1 сутки после воздействия скипидара у опытных крыс, леченых полиоксидонием, выявили полиморфный клеточный состав, умеренное число митозов клеток гранулоцитарного ростка кроветворения, эритроцитарный росток был сужен, эози-нофильная реакция в 2,8 раза превышала контрольную. Мегакариоциты были представлены в единичном количестве. Уменьшение клеточного состава пунктата костного мозга, как видно из таблицы 2, происходило в основном за счет клеток гранулоцитарно-моноцитарного и эритро-идного рядов.
Так, за счет снижения числа митозов клеток гранулоцитарного ростка в пунктате костного мозга снижались сегментоядерные нейтрофилы, моноциты и лимфоциты, в то время как эритробластический росток кроветворения
уменьшался примерно на треть в основном за счет наиболее ранних предшественников эритропоэза: пронормо-цитов и базофильных нормоцитов.
Цитологическое исследование пунктата костного мозга опытных крыс с экспериментальным воспалением, проведенное через 7 суток от начала воздействия скипидара и лечения полиоксидонием выявило клеточный и полиморфный пунктат костного мозга. Гранулоцитарный росток был расширен с преобладанием зрелых нейтро-филов. Эритроцитарный росток был умеренно расширен. Эозинофильная реакция была менее выраженной. Мегакариоциты представлены в умеренном количестве.
Клеточный состав костного мозга (таблица 2) в этот срок исследования был представлен за счет гранулоцитарно-моноцитарного ряда. Так, количество сегментоядерных нейтрофилов и лимфоцитов повышалось по сравнению с предыдущим сроком исследования на 64% и 110% соответственно. Увеличение юных предшественников эритропоэза (пронормоцитов и базофильных нормоцитов) на 56% и 119% приводило к повышению общего клеточного состава эритробластического ростка на 17%.
Цитологическое исследование, представленное на
Рисунок 3 - Морфологическая картина костного мозга бедренной кости у опытных крыс с экспериментальным воспалением после затравки ВА и БК и лечения ПО через 14 суток. Окрашивание по Романовскому-Гимза. Увеличение х1000
Таблица 2 - Клеточный состав пунктата костного мозга бедренной кости контрольных крыс и опытных крыс с экспериментальным воспалением после воздействия ванадия и хрома и лечения полиоксидонием (подсчет на 100 клеток)
Лейкобластический росток (%) Контроль Через 1 Через 7 Через 14 Через 30
сутки суток суток суток
а? Промиелоцит 1,8 4,2 1,2 2,5 1,3
ч: Миелоцит 6,8 5,3 5,4 7,0 4,3
■ к О CP Юные 15,0 13,7 14,1 10,7 8,4
и Палочкоядерные 10,2 9,5 9,3 17,1 16,1
тн S £ Сегментоядерные 23,6 17,2 28,2 18,4 26,9
Моноциты 3,6 2,1 2,1 7,6 3,8
Лимфоциты 7,8 4,2 8,8 10,8 8,0
Всего: 69,0 56,2 69,1 74,1 68,8
Промиелоцит 0,4 2,5 0,5 0,7
.0 Миелоцит 0,2 5,2 0,3 0,2 0,5
с Юные 0,8 2,6 0,7 0,5 1,2
■в- ч Палочкоядерные 1,4 6,8 4.6 1,2 2,9
1 ^ Сегментоядерные 7,0 10,0 5,3 2,9 3,6
О I £ Всего: 9,8 27,1 11,4 4,8 8,9
Эритробластический росток (%)
Пронормоцит 2,4 1,8 2,8 3 0,3
Базофильный нормоцит 6,8 3,7 8,1 7,4 1,2
Полихроматофильный нормоцит 10,4 9,8 6,8 9,4 20,0
Оксифильный нормоцит 1,6 1,4 1,8 1,3 1,8
Всего: 21,2 16,7 19,5 21,1 22,3
рисунке 3, показало, что у опытных крыс, пролеченных полиоксидонием, через 14 суток после воздействия скипидара в пунктате костного мозга определялась клеточность и полиморфность. Было обнаружено расширение грануло-цитарного и эритроцитарного ростков кроветворения.
В клеточном составе пунктата костного мозга преобладали предшественники миелопоэза, а также палочкоя-дерные нейтрофилы, которые по сравнению с предыдущим сроком исследования повышались на 84%. В моноцитар-ном ряду кроветворения выявляли более выраженное увеличение моноцитов, которые опережали предшествующие данные на 262%, в то время, как лимфоциты - на 22,7%. Клеточный состав эритробластического ростка кроветво-
рения полностью совпадал с контрольными данными. Через месяц морфологическая картина костного мозга практически ничем не отличалась от контрольных величин.
Таким образом, лечение полиоксидонием опытных крыс с экспериментальным воспалением оказывало существенное влияние на костномозговое кроветворение у опытных крыс. Так, по сравнению с нелеченными животными в клеточном составе этих крыс уже через 7 суток происходило увеличение клеток гранулоцитар-ного ряда с преобладанием зрелых нейтрофи-лов. К 14 сроку исследования клеточный состав костного мозга опытных крыс пополнялся за счет увеличения юных и зрелых нейтрофилов, моноцитов и лимфоцитов, а также эритроцитов, которые к этому сроку исследования вернулись к норме. В периферической крови вследствие стимуляции костномозгового кроветворения под влиянием полиоксидония общее количество лейкоцитов крови опытных крыс с экспериментальным воспалением, начиная с первых суток исследования, по сравнению с данными нелеченных животных, заметно повышалось и к двухнедельному сроку достигало максимальных величин благодаря восстановлению абсолютного количества лимфоцитов и развитию нейтрофилии.
Литература
1. Химиотерапия опухолевых заболеваний/Под ред. Н.И. Переводчиковой. М, 2000. 392 с. FreifeldA.G., Walsh T. J., Pizzo P.A. Clinical approaches to infections in the compromised host. Hematology // Basic Principles and Practice. 2000. Vol. 79. Р. 1443-1500. Сычев И.А. Влияние полисахарида донника желтого ВРПК на некоторые свойства иммунной системы животных // Российский медико-биологический вестник им. акад. И.П. Павлова. 2004. № 3-4. С. 71-78.
Сычев И.А., Порядин Г.В., Смирнов В.М. Действие полисахаридов на систему крови крыс // Бюллетень экспериментальной биологии и медицины. 2006. № 5. С. 530-533. Руководство к практическим занятиям по патологической физиологии //Под редакцией Лосева Н.И. Москва. «Медицина». 1985. - 140 с.
