Влияние пептидной терапии на активность воспалительного процесса в легких (на модели ХОБЛ у крыс) Текст научной статьи по специальности «Фундаментальная медицина»

2017, Т. 19, Специальный выпуск 2017, Vol. 19, Special Issue

Экспериментальные модели Experimental models

в селекции NK-клеток, наиболее подходящих для потенциальной адоптивной иммунотерапии.

Работа выполнена при поддержке РНФ (грант № 1615-00309).

ВЛИЯНИЕ ПЕПТИДНОЙ ТЕРАПИИ НА АКТИВНОСТЬ ВОСПАЛИТЕЛЬНОГО ПРОЦЕССА В ЛЕГКИХ (НА МОДЕЛИ ХОБЛ У КРЫС)

Суркова Е.А., Лебедева Е.С., Кузубова Н.А.

ФГБОУ ВО «Первый Санкт-Петербургский государственный медицинский университет им. И.П. Павлова» Министерства здравоохранения РФ, Санкт-Петербург, Россия

Введение. Согласно современным представлениям, эпителиоциты бронхов являются ключевыми эффектор-ными клетками в патогенезе хронической обструктивной болезни легких (ХОБЛ), инициируя иммунную и воспалительную реакции, гиперсекрецию слизи и продукцию активных форм кислорода. Стимулирование эндогенных регенеративных возможностей для восстановления поврежденного эпителия при ХОБЛ может обеспечить длительный терапевтический эффект по сравнению с использованием традиционных кортикостероидов.

Цель. Оценить противовоспалительный и регенеративный эффект низкомолекулярной пептидной терапии на модели ХОБЛ у крыс.

Материалы и методы. Модель формирования ХОБЛ выполнена на крысах-самцах линии Вистар с помощью ингаляционного воздействия диоксида азота. Пептидную терапию проводили в течение месяца, используя препарат Бронхоген (ООО ХБО при РАН «Фирма Вита») — синтезированный тетрапетид, соответствующий полипептиду из слизистой бронхов животных. В пробах бронхоальве-олярной лаважной жидкости (БАЛЖ) определяли содержание TNFa, IL-8, нейтрофильной эластазы, матрикс-ной металлопротеиназы-12 (ММР-12), химазы тучных клеток, секреторного иммуноглобулина А (sIgA), сурфак-тантного протеина В (SP-B) методом ELISA.

Результаты. В БАЛЖ животных, не получавших пептидную терапию (контрольная группа), содержание нейтрофилов в 5 раз превышало интактное значение (25,9±4,1 и 5,2±0,5% соответственно, р < 0,05), а число лимфоцитов было в 2 раза больше, чем у интактных крыс (18,5±2,4 и 9,1±1,9% соответственно, р < 0,05). В лаважной жидкости контрольных крыс определялись повышенные концентрации провоспалительных цитокинов (TNFa и IL-8) нейтрофильной эластазы, ММР-12 и химазы тучных клеток, действие которой значительно усиливает деструктивный эффект на легочные структуры. Под влиянием применения Бронхогена происходило восстановление цитологического профиля БАЛ, который незначительно отличался от интактной группы: процентное содержание нейтрофилов снижалось по сравнению с контролем и составляло 9,0±1,2% (р < 0,05), возрастала доля макрофагов (76,5±2,02%, р < 0.05). Концентрации TNFa, IL-8, а также нейтрофильной эластазы и ММР-12 практически не отличались от показателей интактной группы, а уровень хи-мазы тучных клеток оказался в 2 раза ниже интактного. Нормализовалось содержание SP-B, что могло быть отражением восстановления секреторной функции альве-олоцитов 2-го типа. Значительно возрастала интенсив-

ность синтеза sIgA, превышая аналогичный показатель и в контрольной, и в интактной группе.

Заключение. Под влиянием пептидной терапии наблюдалось снижение активности нейтрофильного воспаления, которое сопровождалось восстановлением функциональной активности бронхиального эпителия, предупреждением аномального ремоделирования легочной ткани и связанных с ним тяжелых осложнений ХОБЛ.

АЛЬВЕОЛЯРНЫЕ МАКРОФАГИ И СУРФАКТАНТ ЛЕГКИХ ПРИ ДИСБАЛАНСЕ ДОФАМИНЕРГИЧЕСКОЙ НЕЙРОТРАНСМИССИИ

Тимофеева М.Р., Лукина С.А.

ФГБОУ ВО «Ижевская государственная медицинская академия», Ижевск, Россия

Введение. Дисфункция дофаминергической системы является основой патогенеза нейродегенеративных и нервно-психических заболеваний, висцеропатий, сопровождающихся изменениями иммунного статуса организма (Крыжановский Г.Н. и соавт., 2010) и метаболических функций легких (Тимофеева М.Р. и соавт., 2015). Установлено, что альвеолярные макрофаги участвуют в реализации механизмов врожденного и адаптивного иммунитета, в катаболизме сурфактанта легких (Череш-нев В.А. и соавт., 2002). Вместе с тем, фосфолипиды сурфактанта стимулируют фагоцитарную активность альвеолярных макрофагов (Грачева Л., 1996; Ипатова О.М., 2005), а сурфактант-ассоциированные протеины модулируют их участие в иммунном ответе и секреции провос-палительных цитокинов (Sano H. et al., 2005).

Цель. Изучение фагоцитарной активности альвеолярных макрофагов и фосфолипидов сурфактанта при дисбалансе дофаминергической нейротрансмиссии, моделируемой введением допамина в боковой желудочек мозга и активацией стриатума без и при введении амантадина.

Материалы и методы. Опыты выполнены на наркотизированных крысах-самцах в соответствии с этическим кодексом (n = 77), в том числе ложнооперированных, с церебровентрикулярным введением допамина (в дозе 1,6 мкМ, через день, три недели) посредством канюль: P = 0,8; L = 1,5; V = 3,6, с имплантацией нанокобальта в стриатум: А = 1,7; L = 2,5; V = 5,5 и в сочетании с введением амантадина (ПК-Мерц, Германия; 1 мг/кг, через день, 2 недели, в/брюшинно). После окончания экспериментов определяли содержание фосфолипидов (Комаров Ф.И. и соавт., 1981) в бронхоальвеолярных смывах (БАС) и их поверхностную активность (метод Вильгельми), клеточный состав смывов и фагоцитарную активность альвеолярных макрофагов (АМ) по поглощению частиц монодисперсного латекса (01,5 мкм) с расчетом фагоцитарного индекса и фагоцитарного числа. Фракционирование фосфолипидов проводили методом тонкослойной хроматографии. Статистический анализ выполнен в программе SPSS 17 с использованием критерия Шапиро— Уилка и U-критерия Манна—Уитни.

Результаты. Дисбаланс допаминергической системы, индуцированный введением допамина в боковой желудочек мозга, сопровождался повышением продукции фосфолипидов (p = 0,03) за счет фракции лизофос-фатидилхолина (p = 0,001), и фосфатидилэтаноламина (p = 0,02), фосфатидной кислоты (p = 0,001), что привело к снижению поверхностной активности сурфактанта (p = 0,001), но стимулировало фагоцитарную активность