CC BY
55
УДК 582.28:57.083
ВЛИЯНИЕ НЕКОТОРЫХ НЕОРГАНИЧЕСКИХ СОЕДИНЕНИЙ НА АКТИВНОСТЬ ВНЕКЛЕТОЧНЫХ ЛЕКТИНОВ ГРИБА 1£Л/Г/Ш8 ЯЮОЕБ
О.М. Цивилева, А.Н. Панкратов*, В.Е. Никитина, Н.А. Бычков, Е.А. Лощинина
Институт биохимии и физиологии растений и микроорганизмов РАН, лаборатория микробиологии и микологии E-maii: [email protected]
* Саратовский государственный университет, кафедра аналитической химии и химической экологии E-mail: [email protected]
Показана возможность регулирования лектиновой активности высшего гриба-базидиомицета Lentinus edodes с помощью неорганических компонентов жидкой питательной среды. Выяснено, что одним из факторов, влияющих на активность внеклеточных лектинов L. edodes, является присутствие в среде культивирования солей металлов в степени окисления +2. Влияние двухзарядных катионов железа, кобальта, никеля на лектиновую активность изменяется симбатно с энергиями (UHF/3-21 G(d,p), МР2/3-21G(d,p)//UHF/3-21G(d,p)) реакций хелатообразования гексааквакомплексов металлов с модельным бидентатным лигандом.
Effect of the Selected Inorganic Compounds on the Lectin Activity and Morphogenesis of the Basidiomycete Lentinus edodes
O.M. Tsivileva, A.N. Pankratov, V.E. Nikitina,
N.A. Bychkov, E.A. Loshchinina
The possibility of interfering the lectin activity of the higher fungus, basidiomycete Lentinus edodes by means of the inorganic components of liquid nutrient medium has been shown. A relationship between the presence of double-charged metal cations in the culture medium and the activity of extracellular lectins of L edodes has been found. The effect of Fe2*, Co2+, Ni2+ on the lectin activity has been demonstrated to change with a symbate character in respect to the energies of chelating reactions of metals hexaaqua complexes with the model ligand ethylene glycol, computed at the UHF/3-21 G(d,p), MP2/3-21 G(d,p)//UHF/3-21 G(d,p) levels of theory.
Исследование влияния низкомолекулярных соединений на рост и развитие съедобных грибов представляет одну из важных областей биохимии и физиологии высших грибов. В рамках изучения биохимических аспектов развития Lentinus edodes, или шии-таке, одним из наименее исследованных классов белков являются лектины, упоминание о которых для этого базидиомицета в литературе ограничивалось работами [1, 2], касающимися выделения лектина из плодового тела. Изучение лектиновой активности L. edodes во взаимосвязи с различными физико-химическими факторами, в том числе химическим составом среды культивирования, представляет особый интерес. Настоя-
щая работа посвящена дальнейшему исследованию в этом аспекте внеклеточных лектинов шиитаке, начатому нами ранее [3].
Материалы и методы исследования
В работе использован штамм Ь. edodes ¥-249 из коллекции высших базидиальных грибов кафедры микологии и альгологии Московского государственного университета. Культуры грибов поддерживали на сусло-агаре при 4°С. При глубинном культивировании Ь. edodes использовали синтетические среды с источником углерода (концентрация 300 ммоль/л по углероду): Л-глюкоза, £-ара-биноза, сахароза; с источниками азота: хлорид аммония или нитрат натрия (соотношение углерод: азот в среде составляло от 7.5:1 до 150 : 1); эссенциальные аминокислоты (20 ммоль/л по азоту). В качестве компонентов-добавок к среде выращивания использовали соли металлов (концентрации 0-10 ммоль/л): Мё8047Н20, СаСЬ'2Н20, МпС12'4Н20,
Ре804'7Н20, Си804'5Н20, 2п804'7Н20,
СоС12'6Н20, №8046Н20, 8пС12'2Н20.
Синтетическая среда для изучения процессов хелатообразования состояла из глюкозы (50 ммоль/л), аспарагина (10 ммоль/л), включала добавки Ре(Н), Со(Н), N1(11) (4 ммоль/л) и этиленгликоля (Ев) (2 ммоль/л или 4 ммоль/л).
Оптимальная температура роста мицелия для данного вида 26°С [4].
Инокуляцию жидких сред осуществляли стандартными блоками, вырезанными из зоны роста колонии штамма на агаризованном пивном сусле [5], из расчета 3 диска диаметром 5 мм на 50 мл среды.
© OR Цивилева, А.И. Панкратов, В.Е. Никитина, М.А. Бычков, Е.А. Лощинина, 2007
Гемагглютинирующую активность жидких сред определяли реакцией гемагглюти-нации с самопроизвольным оседанием эритроцитов, используя 2%-ную суспензию трип-синизированных кроличьих эритроцитов в серии последовательных разведений лектина [6]. Титр гемагглютинации (ТГА) выражали как наибольшее разведение раствора, вызывающее агглютинацию эритроцитов. Удельную активность лектинов выражали как отношение титра гемагглютинации к концентрации белка (мкг/мл) [7-9].
Квантовохимические ab initio расчеты осуществляли неограниченным методом Хартри-Фока (UHF) в базисе 3-21G(d,p) (UHF/3-21G(d,p)) [10, 11] с использованием программ из пакета HyperChem [HyperChem (ТМ), Hypercube, Inc., 1115 NW 4th Street, Gainesville, Florida 32601, USA]. Полную оптимизацию геометрии проводили посредством алгоритма Полака-Рибера (Polak-Ribi-ere conjugate gradient algorithm) [12]. Предварительную оптимизацию геометрии осуществляли методом РМЗ [13, 14] с помощью программы из того же пакета. При квантовохимических расчетах задавали условие, чтобы норма градиента не превышала 0.02 ккал/(моль-А). Корреляционные поправки к хартри-фоковским энергиям рассчитывали для оптимизированной геометрии (Single Point) в рамках теории возмущений Мел-лера-Плессе второго порядка (МР2) [10, 11] в том же базисе (подход MP2/3-21G(d,p)// UHF/3-21G(d,p)).
Результаты
Влияние химического состава синтетической среды выращивания на активность внеклеточных лектинов L. edodes подтверждается рядом экспериментов, проведенных нами ранее [3].
Затем были предприняты попытки оптимизировать среду выращивания в отношений лектиновой активности. Для этого определяли в динамике величины ТГА культуральной жидкости при использовании источников азота разной природы. В табл. 1 и 2 приведены соответствующие данные для различных мольных соотношений углерода и неорганического азота в среде культивирования. Из табл. 1, 2 видно, что лектиновая
активность наиболее высока в случае аммонийного азота при соотношении С : 1М, равном 150 : 1. Данные табл. 3 характеризуют лектиновую активность жидкой культуры при использовании аминокислотного источника азота для различных мольных соотношений углерод : азот в среде культивирования. Как видно из табл. 3, активность внеклеточных лектинов Ь. edodes Р-249 высока для сред с органическим азотом (ТГА достигает значения 4096 при соотношении С : 1М, равном 17:1).
Таблица 1
Максимальные значения ТГ А в зависимост и от соотношения углерод : азот в среде культивирования I. ес1ос!е$ Р-249 с 1ЧН4О
С : N
150 : 1 75: 1 30: 1 12.5 : 1 7.5: 1
1024 64 64 64 64
(13) (1,9-27) (1,13-27) (13-27) (13-27)
Примечание. В скобках указан возраст глубинной культуры, сут.
Таблица 2
Максимальные значения ТГА в зависимости от соотношения углерод : азот в среде культивирования I. ес1ос1ез р-249 с ЫаЫОз
С: N
150 : 1 75 : 1 30: 1 15 : 1 10: 1 7.5: 1
512 (1-3,7, 11-14) 512 (7,И) 128 (1-3, 7-17) 128 (1-3,7, 11-17) 512 (3) 256 (3)
Примечание. См. табл. 1.
Таблица 3
Максимальные значения ТГА в зависимости от соотношения углерод : азот в среде культивирования Ь. еёо/Зея ¥-249 с ^-аспарагином
С : N
152 : 1 77: 1 32: 1 17: 1 12: 1 9.5 : 1
128 (1-9) 1024 (3-7) 1024 (1-7) 4096 (3-7) 1024 (3-7) 1024 (1-7)
Примечание. См. табл. 1.
Оптимизацию состава питательной среды в отношении лектиновой активности продолжали при использовании солей некоторых металлов в степени окисления +2. Определяли лектиновую активность культуральной жидкости I. edodes Р-249 в динамике, изучая зависимости титра гемагглютинации от продолжительности выращивания. Источником азота служил ^-аспарагин.
Среды выращивания с кальцием (источник углерода - глюкоза, сахароза, арабиноза) различаются как величинами титров гемаг-глютинации (максимальные значения составляют 1024 для глюкозы и арабинозы, 256 для сахарозы), так и периодами проявления наибольшей лектиновой активности. Так, титр 1024 наблюдается при содержании Са2+ 1 ммоль/л на 9-е сут и в период 16-28 сут культивирования в случае глюкозы, но только в интервале 21-28 сут в случае арабинозы. Максимальная лектиновая активность (титр 256) на среде с сахарозой наблюдается лишь на 3-и и 5-е сут, причем при той же 1 мМ концентрации Са2+.
Более высокое содержание магния (2 мМ) способствует проявлению наибольшей для среды с этим катионом активности внеклеточных лектинов Ь. ес1ос1е8 Р-24^9 с титром гемагглютинации культуральной жидкости 1024 в течение самого длительного из вышеупомянутых периода выращивания - 13-28 сут.
В случае марганца, аналогично кальцию, более благоприятна для проявления лектиновой активности 1 мМ концентрация катиона. Возраст культуры 21-28 сут; титр не превышает 512. В единственном случае, на 5-е сутки, эта величина титра соответствует 2 ммоль/л Мп2+.
Интересно, что при использовании в качестве добавки к синтетической среде культивирования Ь. edod.es Р-249 двухзарядных катионов меди имела место зависимость «лектиновая активность - концентрация катиона», противоположная наблюдаемой для других металлов в настоящей работе. Наибольшая активность внеклеточных лектинов проявлялась на среде с максимальным содержанием меди; титр гемагглютинации 1024 при возрасте культуры 5 и 21-28 суток. И если до 3 суток выращивания оптимальна концентрация 6-8 ммоль/л Си2+ (титр 256 по сравнению с 128 для 10 ммоль/л Си2+), то в течение всего периода культивирования 5-28 сут титр гемагглютинации жидкой среды наиболее высок при 8-10 мМ Си2+. Обсуждаемые выше для других металлов концентрации 1 и 2 мМ в случае Си2+ способствуют проявлению максимальной для этих концентраций лектиновой активности с титром 256 и 512 соответственно при возрасте культуры 21-28 суток.
Более подробное исследование в динамике внеклеточной лектиновой активности шиитаке при выращивании на синтетических средах с разными концентрациями Си2+ (в интервале концентраций катиона от 2‘ 10-4 до НО”2 моль/л) проводили, определяя один из важнейших параметров - удельную лектино-вую активность, достигаемую в культуральной жидкости при используемых концентрациях компонентов среды. Наилучший результат получался при концентрации ионов меди (II) в синтетической среде культивирования ЬепИпш edodes - 1 мМ, /)-глюкозы -300 мМ по углероду, ^-аспарагина - 20 мМ по азоту. При возрасте глубинной культуры 14 сут достигалось более чем 8-кратное увеличение удельной лектиновой активности при указанной концентрации Си2+ по сравнению с более низкими концентрациями меди из приведенного выше интервала значений. Результаты иллюстрирует рис. 1.
Возраст культуры, сут
Рис. 1. Зависимость удельной лектиновой активности (ТГА/(белок, мкг/мл)) культуральной жидкости /,. edod.es Р-249 с добавкой меди (И) от времени культивирования. Концентрация Си2+, (моль/л) 104: 7-2; 2-5; 5-10; 4- 20; 5-50; 6-100; 7-0
Максимальная лектиновая активность в случае и железа, и цинка характеризуется
титром 128, за единственным исключением
2 '1
(14-суточная культура, концентрация М -10 мМ). Активность выше с компонентом среды Ре2+ по сравнению с Хп2+. Увеличение концентрации катиона от 4 до 10 ммоль/л после 3 сут выращивания не сказывается на величине титра гемагглютинации в случае Ъх\+, однако оно приводит к снижению титра в 2 раза при возрасте культуры 14 суг на среде с железом.
При увеличении концентрации катиона металла лектиновая активность снижается. Небольшое возрастание титра (в 2 раза) можно отметить только в случае Sn2+ после 10 сут выращивания. С добавками кобальта в степени окисления +2 титр гемагглютина-ции культуральной жидкости ниже в 4 раза при концентрации Со2+ 10 мМ по сравнению с 4 мМ. Наибольший отрицательный эффект добавки в среду культивирования двухзарядных катионов имеет место в случае никеля: лектиновая активность проходит через максимум на 10-е сутки культивирования (титр 32) при 4 мМ Ni2+ и не проявляется совсем при 10 мМ.
Принимая во внимание величины титров гемагглютинации и продолжительность периода их существования, на основе полученных данных можно сделать вывод, что активность внеклеточных лектинов Lentinm edodes F-249 в зависимости от присутствия в синтетической жидкой среде культивирования двухзарядных катионов металлов изменяется в ряду:
Mg > Са > Си > Fe > Mn > Zn ~ Sn > Со > Ni.
Интерес представляет объяснение влияния катионов металлов на лектиновую активность с позиций квантовой химии. Вероятный механизм положительного влияния катионов металлов на лектиновую активность состоит в том, что они образуют сме-шаннолигандные комплексы с гидроксильными группами лектинов и гликоконъюгатов, способствуя обратимому связыванию гликоконъюгатов лектинами. Почему же двухзарядные ионы железа, кобальта и никеля, составляющие ряд близких по важнейшим характеристикам катионов металлов со сходной электронной конфигурацией, так сильно различаются по своему влиянию на лектиновую активность? Скорее всего, различия в гораздо большей степени определяются термодинамикой реакций комплексооб-разования, прочностью связи металл-кислород, чем электростатическими предпосылками комплексообразования М2+ с кислородсодержащими лигандами.
Для проверки этого предположения мы провели квантовохимическое ab initio исследование термодинамики реакций гексааквакомплексов железа (И), кобальта (11) и нике-
ля (II) с модельной системой - этиленглико-лем как типичным хелатообразующим реагентом и простым аналогом углеводов. Трактовка катионов Fe2+, Со2+ и Ni2+ и комплексов с этиленгликолем как аддуктов, содержащих молекулы воды во внутренней координационной сфере, позволяет достаточно адекватно учесть гидратацию. При расчетах принимали во внимание то, что молекулы воды и органического реагента как лиганды создают достаточно слабое поле [15]. Спиновая муль-типлетность смешаннолигандных комплексов - такая же, как у акваионов [16]: 5, 4 и 3 для соединений Fe(II), Co(II) и Ni(II) соответственно. В качестве примеров приведены графические образы молекулы этиленглико-ля (рис. 2, а), гексааквакомплекса никеля (И) (рис. 2, б) и смешаннолигандного комплекса никеля (II) с водой и этиленгликолем (рис. 2, в) с геометрией, оптимизированной методом UHF/3-21G(d,p).
Возможны варианты комплексообразования с участием как ионов гидроксония, так и гидроксид-ионов. Чтобы отразить тенденцию изменения (А£) значений полной энергии молекулярных систем в ряду металлов независимо от того, по какому брутто-уравнению протекает реакция, целесообразно представить энергетические эффекты в виде относительных величин (табл. 4). Величина АЕ является аналогом свободной энергии (AG) реакции без учета энтропии. Использование величины АЕ или энтальпии реакции АН вместо AG корректно (см., например, [17-30]). Учет электронной корреляции сглаживает, делает более реалистичными различия в АЕ для разных катионов металлов. Ряд уменьшения склонности катионов к комплексообразованию с этиленгликолем Fe2f > Со2+ » Ni2+, полученный из квантовохимических расчетов, согласуется с рядом уменьшения влияния этих катионов на лектиновую активность: Fe2+ > Со2+ > Ni2+.
Наряду с описанным выше квантовохимическим ab initio исследованием термодинамики реакций гексааквакомплексов Fe(II), Co(II) и Ni(II) с этиленгликолем мы провели экспериментальное исследование поведения моделируемой системы. Для этого определяли в динамике лектиновую активность культуральной жидкости L. edodes в разных вари-
Таблица 4
Значения АЕ реакции по отношению к М = Ре
Рис.2. Графический образ: а - молекулы этиленгликоля, б - молекулы и акваиона [№(1ЬО)б]2 \ в - молекулы сме-шаннолигапдного комплекса никеля (II) с водой и эти-ленгликолем [ННН20)4(0С112СН20)] с геометрией, оптимизированной методом иНГ73-2]Ст(с1.р)
[М(Н,ои2+ + н0 ^ 2 6 но-сн,
Р-ФЪ
(Н20)4МЧ | + 2Н30
о-сн
+ 2Ш" —' Г + 40
ни ин2 О-СН,
м АЕ, ккал/моль
иНР/3-2Ю(с!.р) МР2/3-210(ё,р)1/иНР/3-210(с1.Р)
Ре 0 0
Со 6 33
№ 261 185
антах опыта. Во-первых, соли перечисленных металлов и этиленгликоль вводили в состав стерильных питательных сред перед их засевом мицелием. Во-вторых, изучаемые химические добавки, стерилизованные в тонком слое, вводили в состав бесклеточной культуральной жидкости, асептически отобранной из среды выращивания Ь. ес1ос!еБ при возрасте культуры, характеризующемся высоким титром гемагглютинации. По-нашему мнению, активность внеклеточных лектинов шиитаке в описанных экспериментальных условиях позволила бы судить о степени участия катионов железа, кобальта, никеля в процессах биосинтеза лектинов, предположительно опосредованных хелатообразова-нием с соединениями - носителями гидроксильных групп.
Удобно представить полученные данные В виде отношения ТГАа^/ТГА, где ТГАа(1с1 - титр гемагглютинации в присутствии Ре2+, Со2+, №24 или этиленгликоля как компонентов питательной среды, ТГА - титр гемагглютинации в отсутствие этих добавок. Результаты показаны в табл. 5. Прежде всего отметим, что величины ТГАа[И/ТГА равны единице для всех возрастов культуры и вариантов опыта, когда к среде добавлен только этиленгликоль, что говорит об отсутствии заметного влияния последнего на лектино-вую активность и правомерности использования этого соединения в качестве модельного хелатообразующего реагента для целей настоящей работы.
Данные, представленные в табл.5 для разной продолжительности инкубирования бесклеточной жидкости с добавками М2+, по-
Таблица 5
Влияние добавок к среде культивирования на лектиновую активность культуральной жидкости Ь. edod.es Р-249 (ТГАаа</ГГА)
Добавка h к среде Продолжительность инкубирования с добавкой0, сут
3 7 10 14 17 21 25
Fe(Il) 1 [1] 1 [11 1 [1] 1 [11 1/2 1/4 ’А
Fe(Il)+KGc' 1 [1] 2 [1] 1 [1] 1 [1] 1/2 1/4 %
Fe(II)+2EGrf 2 [1] 4 [1] 1 [1] 1 [1] 1 1/2 1/2
Co(II) 1/8 Ш 1/8 [1/8] 1/16 [1/2] 1/16 [1] 1/16 1/32 1/32
Co(II)+EG 1/2 [1] 1/4 [1] 1/16 [11 1/16 [1] 1/16 1/32 1/32
Co(II)+2EG 1 ш 1 [1] 1/4 [11 1/16 [1] 1/16 1/16 1/16
Ni(II) 1/32 ш 1/64 [1/64] 1/128 [1/16J 1/128 [1/8] 0 0 0
Ni(II)+EG 1/32 [1] 1/64 [1/32] 1/128 [1/8] 1/128 [1/4] 0 0 0
Ni(II)+2EG 1/8 [1] 1/64 [1/32] 1/128 [1/8] 1/128 [1/2] 0 0 0
EG 1 [1] 1 [1] 1 [11 1 [1] 1 1 1
2 EG 1 [11 1 ш 1 [1] 1 [11 1 1 1
Примечания. " В квадратных скобках приведены данные для бесклеточной культуральной жидкости (см. пояснения в тексте). Ь Состав сред более подробно указан в тексте. с Среда с этиленгликолем (2 ммоль/л). а Среда с этиленгликолем (4 ммоль/л).
казывают, что предполагаемое нами взаимодействие катионов металлов с лектинами, присутствующими в среде, само по себе оказывает достаточно малое влияние на активность этих белков. Отношение ТГАас1/]ТА бесклеточной жидкости равно единице во всех случаях до 3-х сут инкубации. Однако к 7-м сут эта величина для Со(П) и N1(11) значительно снижается (до 1/8 и 1/64 ТГА соответственно) и становится одинаковой в случаях растущей культуры и бесклеточной культуральной жидкости. Несколько «исправляет» ситуацию присутствие этиленгли-коля, повышающее ТГАас1с|/ТГА в 8 раз для Со(П) и в 2 раза для №(Н), по-видимому, благодаря обратимому, протекающему в различной степени (см. выше теоретическое рассмотрение) комплексообразованию М2+. Интересно, что для большинства добавок на
14-е сут величина TTAadd/TTA возвращается к единице (далее наблюдения не проводились, так как имело место уменьшение величины ТГА из-за естественного снижения активности лектинов во времени). То есть при длительном инкубировании М2+ с лектинами даже Ni2+ не оказывает такого резко отрицательного влияния на TTAadd, как при добавлении его перед инокуляцией питательной среды мицелием. По-видимому, катионы металлов участвуют в процессах биосинтеза лектинов на их начальных этапах, что вполне подтверждается данными табл.5. Наиболее благоприятны добавки Fe2+: при одновременном присутствии с этими катионами эти-ленгликоль оказал значительное положительное влияние на лектиновую активность культуры (отношение TrAadd/TrA составило 4 на 7-е сут культивирования). Наибольшая склонность к комплексообразованию соединений, содержащих гидроксогруппы именно для этого М2+, показана выше квантовохимическими расчетами.
Таким образом, в настоящей работе установлено, что одним из факторов, влияющих на лектиновую активность глубинной культуры L. edodes, является присутствие в среде культивирования солей металлов в степени окисления +2. Обнаружено, что в отношении величин титров гемагглютинации и периодов проявления наибольшей лекти-новой активности имеет значение не только концентрация катиона М2+, но и источник углеродного питания грибной культуры. Оказалось, что лишь в случае меди имеет место зависимость лектиновая активность -концентрация катиона, противоположная наблюдаемой для других металлов в настоящей работе. Полученные данные позволяют составить последовательность в порядке уменьшения положительного эффекта М на активность внеклеточных лектинов шиитаке.
Высказана гипотеза об обратимом связывании катионов металлов в непрочные смешаннолигандные комплексы с лектинами и гликоконъюгатами, способная разумно объяснить различное влияние катионов металлов на лектиновую активность. Проведено квантовохимическое ab initio исследование термодинамики реакций аквакомплексов металлов (И) с модельной системой - эти-
ленгликолем. Оказалось, что влияние двухзарядных катионов железа, кобальта, никеля на лектиновую активность изменяется сим-батно с энергиями (UHF/3-21G(d,p), МР2/3-21G(d,p)//UHF/3-21G(d,p)) реакций хелато-образования гексааквакомплексов металлов с модельным бидентатным лигандом.
Библиографический список
1. Jeune КН., Moon I.J., Kim М.К., Chung S.R. Studies on Lectins from Korean Higher Fungi; IV. A Mitogenic Lectin from the Mushroom Lentinus edodes II Planta Med. 1990. V.56. P.592.
2. Wang H.X., jVg- T.B., Ooi V.E.C. Studies on Purification of a Lectin from Fruiting Bodies of the Edible Shiitake Mushroom Lentinus edodes II Intern. J. Biochem. Cell Biol. 1999. V.31, №5. P.595-599.
3. Цивилева О.М., Никитина В.Е., Гарибова Л. В. и др. Ге-магглютинирующая активность Lentinus edodes (Berk.) Sing [Lentinula edodes (Berk.) Pegler] // Микробиология. 2000. T.69, №1. С.38-44.
4. Przybylowicz P., Donoghue J. Shiitake Growers Handbook: The Art and Science of Mushroom Cultivation. Dubuque: Kendall/Hunt Publ. Co., 1991. 217 p.
5. Leatham G.F., Stahmann M.A. Studies on the Laccase of Lentinus edodes: Specificity, Localization and Association with the Development of Fruiting Bodies // J. Gen. Microbiol. 1981. V.125. P.147-157.
6. Луцик М.Д., Панасюк E.H., Луцик АД. Лектины. Львов: Вища школа. Изд-во при Львовск. ун-те, 1981. 156 с.
7. Kawagishi Н., Nomura A., Mizuno Т. el al. Isolation and Characterization of a Lectin from Grifola frondosa Fruiting Bodies // Biochim. Biophys. Acta. 1990. V.1034. P.247-252.
8. Kaneko Т., Oguri S., Kato S., Nagata Y. Developmental Appearance of Lectin During Fruit Body Formation in Pleurotus cornucopiae II J. Gen. Appl. Microbiol. 1993. V.39. P.83-90.
9. Yoshida М., Kato S., Oguri S., Nagata Y. Purification and Properties of Lectins from a Mushroom Pleurotus cornucopiae II Biosci. Biotech. Biochem. 1994. V.58, №3. P.498-501.
10. Hehre W.J., Radom L., Schleyer P.v.R., Pople J.A. Ab Initio Molecular Orbital Theory. N.Y.: Wiley, 1986. 548 p.
11. Кпарк Т. Компьютерная химия: Практ. руководство по расчетам структуры и энергии молекулы / Пер. с англ. А.А. Коркина; Под ред. B.C. Мастрюкова, Ю.Н. Панченко. М.: Мир, 1990.383 с.
12. Дэннис Дж., Шнабель Р. Численные методы безусловной оптимизации и решения нелинейных уравнений / Пер. с англ. О.Г1. Бурдакова; Под ред. Ю.Г. Евтушенко. М.: Мир, 1988.440 с.
13. Stewart J.J.P. Optimization of Parameters for Semiempiri-cal Methods. I. Method // J. Comput. Chem. 1989. V.10, №2. P.209—220.
14. Stewart J.J.P. Optimization of Parameters for Semiempiri-cal Methods. II. Applications // J. Comput. Chem. 1989. V.10, №2. P.221-264.
15. Хьюи Дж. Неорганическая химия. Строение вещества и реакционная способность / Пер. с англ. Л.Ю. Аликберо-вой, Н.И. Козловой, Н.С. Рукк, Е.В. Савинкиной, А.А. Цветкова; Под общ. ред. Б.Д. Степина, Р.А. Лидина. М.: Химия, 1987. 696 с.
16. Лидин Р.А., Андреева Л.Л., Молочко В.А. Справочник по неорганической химии. Константы неорганических веществ. М.: Химия, 1987. 320 с.
17. Днепровский А.С., Темникова Т.Н. Теоретические основы органической химии. Строение, реакционная способность и механизмы реакций органических соединений. Л.: Химия, 1991. 560 с.
18. Дьюар М. Теория молекулярных орбиталей в органической химии / Пер. с англ. А.А. Дяткиной; Под ред. М.Е. Дяг-киной. М.: Мир, 1972. 592 с.
19. Pankratov A.N., Shchavlev А.Е. Semiempirical Quantum Chemical PM3 Computations and Evaluations of Redox Potentials, Basicities and Dipole Moments of the Diphenylamine Series As Analytical Reagents // Canad. J. Chem. 1999. V.77, №12. P.2053-2058.
20. Pankratov A.N., Tsivileva O.M., Nikitina V.E. Laccase of Lentinus edodes Catalyzed Oxidation of Amines and Phenolic Compounds: A Semiempirical Quantum Chemical Consideration Hi. Biochem. and Mol. Biol. 2000. V.33, №1. P.37-42.
21. Pankratov A.N., Uchaeva l.M. A Semiempirical Quantum Chemical Testing of Thermodynamic and Molecular Properties of Arsenic Compounds // J. Mol. Struct. Theochem. 2000. V.498, №1-3. P.247-254.
22. Pankratov A.N. Electrophilic Aromatic Substitution Regi-oselectivity for Benzene Derivatives in Terms of Cationic Localization Energies from Semiempirical Quantum Chemical Computations // J. Mol. Struct. Theochem. 2000. V.507, №1-3. P.239-244.
23. Pankratov A.N. Azo-Coupling Reactions Used in Analytical Chemistry: The Role of Reactants, Intermediates, and Aqueous Medium // Helvetica Chim. Acta. 2004. V.87, №6. P.1561-1573.
24. Панкратов A.H. Количественные соотношения структура - свойство в ряду катионов диазония - полупродуктов синтеза аналитических форм и красителей // Журн. аналит. химии. 2005. Т.60, №2. С.149-156.
25. Панкратов А.Н., Древко Б.И. Квантово-химическое изучение «гидридной» подвижности в молекулах халько-генопиранов // Химия гетероцикл, соед. 2005. №9. С.1305-1311.
26. Панкратов А.И. Аналитические реакции азосочетания: взгляд с точки зрения квантовой химии // Журн. аналит. химии. 2005. Т.60, №10. С.1036-1046.
27. Shchavlev А.Е., Pankratov A.N, Shalabay A.V. Theoretical Studies on the Intramolecular Hydrogen Bond and Tauto-merism of 8-Mercaptoquinoline in the Gaseous Phase and in Solution Using Modern DFT Methods // J. Phys. Chem. A. 2005. V.109, №18. P.4137-4148.
28. Shchavlev A.E., Pankratov A.N., Borodulin V.B., Chaplygina O.A. DFT Study of the Monomers and Dimers of 2-Pyrro-lidone: Equilibrium Structures, Vibrational, Orbital, Topological, and NBO Analysis of Hydrogen-Bonded Interactions // J. Phys. Chem. A. 2005. V.109, №48. P. 10982-10996.
29. Shchavlev A.E, Pankratov A.N., Shalabay A. V. DFT Computational Studies on Rotation Barriers, Tautomerism, Intramolecular Hydrogen Bond, and Solvent Effects in 8-Hydroxy-quinoline // Intern. J. Quantum Chem. 2006. V.106, №4.
P.876-886.
30. Сурова T.B., Еняшин A.H. Таутомерия и кислотные свойства N-незамещенных бензогидроксамовых кислот: полуэмпирическая квантовохимическая оценка // Журн. структурн. химии. 2003. Т.44, №2. С.334-337.
