CC BY
99
УДК 615.015+ 612.825-826
ВЛИЯНИЕ MЕКСИДОЛA И ЦИТОФЛАВИНА НА БОЛЕВУЮ ЧУВСТВИТЕЛЬНОСТЬ У КРОЛИКОВ
ВИК.В. ЯСНЕЦОВ*, Е.П.ПРОСВИРОВА**
В экспериментах на нелинейных кроликах-самцах установлено, что мексидол (100 мг/кг внутривенно) в отличие от цитофлавина (1 мл/кг внутривенно) обладает отчетливым обезболивающим действием, повышая порог болевой чувствительности при электрическом раздражении пульпы зуба. Mексидол (микроионофоретическое подведение) оказывал прямое влияние на 61-66% нейронов сенсомо-торной коры большого мозга и заднего вентрального ядра таламуса; при этом тормозная реакция на препарат встречалась гораздо чаще (в 4,88,9 раза), чем возбуждающая. Действие мексидола на нейронном уровне (почти у 60% клеток) реализуется через ^M^-бензодиазепин-рецепторный комплекс.
Ключевые слова: мексидол, цитофлавин, обезболивающее действие, ГAMКA-бензодиазепин-рецеш'орный комплекс.
В настоящее время отечественные лекарственные препараты мексидол и цитофлавин широко применяют в различных областях медицины, в том числе успешно используют в неврологии [4,11-13]. Однако данные об их влиянии на болевую чувствительность у человека и животных противоречивы. В частности, мек-сидол либо не давал болеутоляющий эффект [6,7] либо оказывал обезболивающее действие в эксперименте и клинике [5,8,9].
Цель исследования — сравнительное изучение влияния мек-сидола и цитофлавина на болевую чувствительность у кроликов.
Материалы и методы исследования. Эксперименты проводили на 16 нелинейных бодрствующих кроликах-самцах массой 2,4-2,9 кг. Подготовительный этап проходил за 1 сутки до опыта в условиях барбитурового наркоза (гексенал внутривенно /в/в/ в дозе 40 мг/кг): у животных на верхних резцах делали отверстия с помощью бормашины, а также рассекали мягкие ткани головы и в черепе просверливали трепанационные отверстия; для местного обезболивания использовали 2% раствор лидокаина.
У животных определяли порог болевой чувствительности (ПБЧ) при электрическом раздражении пульпы зуба [2].
В работе использовали оригинальные отечественные лекарственные препараты мексидол (в виде действующего вещества этилметилгидроксипиридина сукцината; ЗАО «Фармасофт») и цитофлавин (1 мл раствора содержит следующие действующие вещества: кислота янтарная 100 мг, никотинамид 10 мг, инозин 20 мг, рибофлавина мононуклеотид 2 мг; ООО НТФФ «Полисан»).
Для расшифровки действия мексидола на нейронном уровне использовали стандартную стереотаксическую и микроэлектрод-ную технику [3], а также метод микроионофореза физиологически активных веществ к отдельным нейронам различных структур головного мозга [1]. Внеклеточную регистрацию биоэлектрической активности отдельных нейронов и микроионофорез веществ осуществляли с помощью многоканальных стеклянных электродов [10]. Вещества выводили током положительной полярности силой 10-60 нА. В ходе опыта оценивали спонтанную и вызванную активность нейронов.
Статистическую обработку результатов исследований проводили с использованием программы StatPlus 2009 Professional.
Результаты и их обсуждение. Mексидол при в/в введении в дозе 100 мг/кг у 10 (83%) из 12 кроликов значимо повышал ПБЧ при электрическом раздражении пульпы зуба на 27±2% (р<0,02) в течение 1,5-2 часов. При этом параллельно наблюдалось угнетение вызванных реакций корковых (сенсомоторная зона коры большого мозга) нейронов на ноцицептивное электрокожное раздражение (ЭКР) задней конечности.
Цитофлавин (в/в 1 мл/кг) не изменял ПБЧ у 10 кроликов (из них 6 животных были чувствительны к действию мексидола, а 4 -вводили только цитофлавин).
Mикроионофоретическое исследование влияния мексидола на спонтанную активность нейронов двух структур головного мозга (сенсомоторная кора большого мозга и заднее вентральное ядро /ЗВЯ/ таламуса) кроликов показало, что препарат оказывает примерно одинаковое действие на нервные клетки этих структур (табл.). Так, например, он в основном угнетал фоновую импуль-
* ОАО «Всероссийский научный центр по безопасности биологически активных веществ», 142450, Московская обл., Ногинский район, г. Старая Купавна, ул. Кирова, 23
ГБОУ ВПО «Московский государственный медико-стоматологический университет» Минздравсоцразвития России, 127473, г. Москва, ул. Делегатская, д. 20, стр. 1
сацию нейронов (у 54-55% клеток), а усиление спонтанной активности встречалось довольно редко (у 6-11% клеток). Следовательно, мексидол оказывает прямое влияние на 61-66% нейронов двух структур головного мозга; при этом тормозная реакция на микроионофоретически подводимый препарат встречается в 4,8-
8,9 раза чаще (р<0,001), чем возбуждающая. Это также свидетельствует о локализации болеутоляющего действия мексидола (по крайней мере ЗВЯ таламуса и сенсомоторная кора большого мозга).
Таблица
Влияние микроионофоретически подводимого мексидола на спонтанную активность нейронов сенсомоторной коры большого мозга и заднего вентрального ядра (ЗВЯ) таламуса
Область Всего Эффект
головного мозга нейронов мексидола
Сенсомоторная кора большого мозга Возбуждающий 4 (11,4%)
35 (100%) Угнетающий 19 (54,3%)
Отсутствует 12 (34,3%)
Возбуждающий 2 (6,1%)
ЗВЯ таламуса 33 (100%) Угнетающий 18 (54,5%)
Отсутствует 13 (39,4%)
На фоне действия ГАМК-негативных веществ бикукуллина и пикротоксина (микриононофорез до аппликации мексидола) угнетающее влияние мексидола на спонтанную активность ряда нейронов сенсомоторной коры и ЗВЯ таламуса (более 60%) полностью предотвращалось или существенно ослаблялось. Это свидетельствует о том, что у этих нейронов угнетающее действие препарата на клетки реализуется через ГАМКА-бензодиазепин-рецепторный комплекс.
Мексидол при микроионофоретическом подведении ослаблял вызванные ноцицептивным ЭКР конечности ответы нейронов ЗВЯ таламуса (63%) и сенсомоторной коры большого мозга (51%). При этом на фоне действия ГАМК-негативных веществ бикукуллина и пикротоксина указанное влияние мексидола (почти у 60% клеток) также полностью предотвращалось или существенно ослаблялось.
Итак, мексидол в отличие от цитофлавина оказывает отчетливое обезболивающее действие у кроликов. Причем действие мексидола на нейронном уровне (почти у 60% клеток) реализуется через ГАМКА-бензодиазепин-рецепторный комплекс.
Выводы:
1. Мексидол (100 мг/кг внутривенно) в отличие от цитофлавина (1 мл/кг внутривенно) оказывает отчетливое обезболивающее действие у кроликов, повышая порог болевой чувствительности при электрическом раздражении пульпы зуба.
2. Мексидол (микроионофоретическое подведение) оказывает прямое влияние на 61-66% нейронов сенсомоторной коры большого мозга и заднего вентрального ядра таламуса; при этом тормозная реакция на препарат встречается гораздо чаще (в 4,8-
8,9 раза), чем возбуждающая.
3. ГАМК-негативные вещества бикукуллин и пикротоксин способны полностью предотвращать или существенно ослаблять действие мексидола на спонтанную и вызванную активность нейронов (почти у 60% клеток) сенсомоторной коры и заднего вентрального ядра таламуса таламуса.
Литеатура
1. Александров, А А. Метод электрофореза в физиологии /
А. А. Александров.- Л.: Наука, 1983.- С. 56-59.
2. Булаев, ВМ. Методические указания по изучению обезболивающего (морфиноподобного) действия и налоксоноподоб-ной активности фармакологических веществ / Н.В. Булаев, Н.В. Коробов // Руководство по экспериментальному (доклиническому) изучению новых фармакологических веществ/Под редакцией Р.У.Хабриева.- М., 2005.- С. 338-342.
3. Буреш, Я. Методики и основные эксперименты по изучению мозга и поведения: пер. с англ. / Я. Буреш, О. Бурешова, П.Д. Хьюстон //Под. ред. Батуева А.С.- М.: Высш. шк., 1991.-С. 251-285.
4. Воронина, Т.А. Отечественный препарат нового поколения мексидол: основные эффекты, механизм действия, применение / Т.А. Воронина.- М., 2004.- С. 3-8.
5. Экспер. и клин. Фармакол / Т.А. Воронина [и др.].-2006.- Т. 69.- № 4.- С. 6-9.
6. Данилова Е.Д. Экспер. и клин. Фармакол / Е.Д. Данилова,
В.Н. Графова, Т.А. Воронина, В.К. Решетняк.- 1995.- Т. 58.- №
3.- С. 17-20.
7. Дюмаев, КМ., Воронина, Т.А., Смирнов, Л.Д. Антиоксиданты в профилактике и терапии патологий ЦНС.- M.: Изд. Института биомедицинской химии РAMH, 1995.- C. 81-86.
8. Применение антиоксиданта мексидола в стоматологической практике (антиоксидантная защита при стрессе, боли, воспалении). Mетодические рекомендации / Л.И. Ларенцова [и др.].-M., 2002.- C. 4-6.
9. Мнацаканова, Л.И. Бюл. экспер. биол. и мед. / Л.И. Mra-цаканова, В^. Кущ.- 2006.- Прил. 1. «Mексидол в клинике и эксперименте». - С. 58-59.
10. Правдивцев, В.А. Фармакол. и токсикол / В.А. Прав-дивцев, KM. Осипов, В.В. Яснецов.- 1981.- № 2.- С. 224-226.
11. Силина, Е.В. Вестник интенсивной терапии / Е.В. Силина, С.А. Румянцева.- 2006.- № 2.- С. 82-88.
12. Журн. неврол. и психиатр. им. С.С.Корсакова /
А.А. Скоромец [и др.].- 2004.- Т. 104.- № 5.- С. 24-27.
13. Суслина, З. А. Инсульт: диагностика, лечение, профилактика / З.А. Суслина, M.A. Пирадов.- M.: Mедпресс-информ, 2008.- C. 164-169.
THE EFFECT OF MEXIDOL AND CYTOFLAVIN ON PAIN SENSITIVITY IN RABBITS
VIC.V.YASNETSOV, YE.P.PROSVIROVA
All-Russian Centre of Biologically Active Substance Safety,
Staraya Kupavna, Noginsk District,Moscow Region, 142450, Russia.
Moscow State University of Medicine and Dentistry
The experiments with non-linear male rabbits showed that mex-idol (100 mg/kg intravenously) as opposed to cytoflavin (1 ml/kg intravenously) produced an analgesic effect and raised pain threshold at electro-stimulating the dental pulp. Mexidol (microiontophoretic application) produced direct effect on 61-66% of sensorimotor cortex neurons and ventral posterior thalamic nucleus; at that inhibiting effect took place in 4,88,9 times more often than stimulating. The effect of mexidol on the neuron level (almost 60% of cells) realized via GABAA/benzodiazepine receptor complex.
Key words: mexidol, cytoflavin, analgesic action,
GABAA/benzodiazepine receptor complex.
УДК 615.28
ИССЛЕДОВАНИЕ КАРДИОПРОТЕКТОРНОГО ДЕЙСТВИЯ ДЕАНОЛА АЦЕГЛУМАТА В УСЛОВИЯХ ЭКСПЕРИМЕНТАЛЬНОГО НАРУШЕНИИ МОЗГОВОГО КРОВООБРАЩЕНИЯ
Д.С. БЛИНОВ, Е.В. БЛИНОВА, Л.В. ПИВКИНА, Н.М. ФИЛАТОВА, Е.Д. ГОГИНА, М.В. ВЕРТЯНКИН, Г.Г. БОЙКО, Т.В. КРАСИЛИНА*
В результате комплексного фармакологического изучения эффектов нового отечественного цитопротектора деанола ацеглумата у животных с нарушением мозгового кровообращения установлено, что вещество при внутривенном введении восстанавливает автоматию номотопного водителя ритма, проводимость в предсердиях и атриовентрикулярном соединении, рефрактерность атриовентрикулярного соединения, нарушенные вследствие острой церебральной ишемии. Соединение не угнетает инотропную функцию сердца кошек и ограничивает размеры зоны некроза у крыс с инфарктом миокарда, протекающем на фоне дефицита мозгового кровотока.
Ключевые слова: деанола ацеглумат, церебральная ишемия, гемодинамика, электрофизиологические эффекты.
Деанола ацеглумат - новое отечественное соединение из группы производных N-глутаминовой кислоты, показавшее в эксперименте высокую эффективность в лечении и профилактике поражений сердечно-сосудистой системы ишемического характера [3]. Активность деанола ацеглумата как средства, обладающего цитопротекторным действием, сопоставима с активностью его фармакологического гомолога - мексидола [3]. При этом для деанола ацеглумата свойственна высокая гемодинамическая безопасность [1], сочетающаяся с антиишемическим эффектом и противоаритмическим действием соединения [7], механизмом реализации которых служат антиоксидантная активность и способность модулировать обмен катехоламинов на уровне миокарда
ФБГОУ ВПО «Mордовский государственный университет
им. Н.П. Огарёва» 430005 г. Саранск, ул. Большевистская, д. 68
[3,7]. Представленный спектр фармакологического действия деа-нола ацеглумата диктует целесообразность его изучения в качестве средства коррекиии цереброкардиального синдрома, что и является основной целью настоящей работы.
Материалы и методы исследования. В работе использовали жидкую лекарственную форму деанола ацеглумата (ОАО «ВНЦ БАВ», Россия). Острую церебральную ишемию воспроизводили двухсторонней перевязкой сонных артерий: одну сонную артерию перевязывали полностью, кровоток во второй ограничивали под контролем расходомера крови (Россия, датчики С1-С2) до двукратного снижения показателя ударного объема дистальнее места окклюзии. Влияние деанола ацеглумата на возбудимость, рефрактерность предсердий и желудочков, автоматию водителя сердечного ритма, проводимость волны возбуждения по предсердиям, атриовентрикулярному соединению и желудочкам изучали в опытах на половозрелых, наркотизированных тиопентал-натрием (50 мг/кг внутрибрюшинно), и переведенных на управляемое дыхание кошках с острым нарушением мозгового кровообращения по методу [4]. Стимуляцию сердца проводили с помощью кардиостимулятора «Кордэлектро» (Латвия) посредством платиновых электродов, наложенных на предсердия и желудочки. Регистрацию электрограммы осуществляли при помощи самописца ЭЛКАР-2А (Россия). Деанола ацеглумат (n=7) вводили в дозе (75 мг/кг/сут внутрь 5 суток), пропорциональной показателю LD50, определенному при внутрижелудочном введении у мышей с учетом правил межвидового переноса доз. Контрольная группа выполнена на 10 животных.
Влияние деанола ацеглумата на сократимость миокарда изучено в острых опытах на кошках с церебральной ишемией. Уровень внутрижелудочкового и артериального давления регистрировали при помощи датчиков давления «Bentley» (Великобритания) на самописце фирмы «Ugo Basile» (Италия) и прямым методом Людвига при помощи открытого ртутного манометра. Исследуемое соединение вводили внутрь курсом 5 дней до регистрации исходных показателей гемодинамики в дозе 75 мг/кг/сут.
Изучение влияния деанола ацеглумата на объем поражения сердца при экспериментальном инфаркте миокарда, протекающем у крыс с острым нарушением мозгового кровообращения выполнено дифференциальным индикаторным методом Л.Н. Сернова и
В.В. Гацуры [5,6]. Эксперимент проводили на крысах линии Vistar, наркотизированных тиопентал-натрием внутрибрюшинно
(40 мг/кг). В опытах использовали трифенилтетразолий хлорид и эванс синий производства SIGMA (Швейцария).
На всех экспериментальных моделях в качестве препарата сравнения использовали рибоксин («ICN-Полифарм», Россия) -P-b-D-рибофуранозилгипоксантин - в виде официнального 2% раствора в ампулах по 10 мл.
Результаты исследования подвергались статистической обработке с использованием стандартных статистических пакетов программ “Excel”, “Statistics 5,5” для Windows XP. Достоверность изменений электрофизиологических параметров оценивали методом t-критерия Стьюдента для зависимых и независимых выборок [2].
Резудьтаты и их обсуждение. Электрофизиологические исследования на кошках (табл. 1) показали, что острая церебральная ишемия индуцирует кратковременное повышение автоматизма синусного узла с последующим его подавлением, уменьшение рефрактерности атриовентрикулярного соединения и повышение возбудимости миокарда предсердия и желудочка на протяжении 20-40 минут опыта, что обусловлено, в первую очередь, дезорганизацией центральных звеньев вегетативной иннервации сердечно-сосудистой системы.
Профилактическое курсовое введение животным исследуемых соединений приводит к тому, что деанола ацеглумат, в отличие от препарата сравнения рибоксина, восстанавливает до уровня интактных животных атриовентрикулярное проведение, проводимость по всем отделам сердца на фоне снижения возбудимости предсердия и желудочка.
На следующем этапе нашей работы представляло большой интерес изучить динамику сократимости миокарда кошек с нарушением мозгового кровообращения. В контроле перевязка сонных артерии не приводила к негативным изменениям гемодинамики у подопытных животных (табл. 2) Напротив, мы регистрировали тенденцию к повышению сократительной функции сердца. Следует подчеркнуть, что рост сократимости по сравнению с исходным значением наблюдался, начиная с 20 минуты
