CC BY
17
2017, Т. 19, Специальный выпуск 2017, Vol. 19, Special Issue
Аутоиммунные заболевания Autoimmune diseases
IL-6 на компенсаторную гиперпродукцию инсулина в патогенезе инсулинорезистентности.
Тем не менее, выявленные нами отрицательные ассоциации IL-6 с глюкозой в сыворотке крови у больных без СД 2 типа и, напротив, положительные между содержанием IL-6 и гликированным гемоглобином, а также между уровнем его экспрессии в висцеральной ЖТ с глюкозой и индексом HOMA-IR у больных с СД 2 типа могут свидетельствовать о разнонаправленных эффектах IL-6 на показатели углеводного обмена.
Работа выполнена в рамках программы повышения конкурентоспособности («дорожной карты») и субсидии «Организация проведения научных исследований 20.4986.2017/ВУ» Балтийского федерального университета им. Иммануила Канта.
ВЛИЯНИЕ ЛИПОПОЛИСАХАРИДА НА ПРОДУКЦИЮ КОЛЛАГЕНА IV ТИПА ДЕРМАЛЬНЫМИ ФИБРОБЛАСТАМИ ДЕТЕЙ С ВОСПАЛИТЕЛЬНЫМИ ЗАБОЛЕВАНИЯМИ КИШЕЧНИКА
Васильева Е.А., Федулова Э.Н., Мухина И.В.
ФГБУ«Приволжский федеральный медицинский исследовательский центр» Министерства здравоохранения РФ, Нижний Новгород, Россия
Введение. Фибробласты кожи участвуют в репарации ткани, продуцируя компоненты внеклеточного матрик-са и базальной мембраны. Коллаген IV типа — главный компонент базальной мембраны кожи, участвует в клеточной адгезии и миграции. Для хронического течения болезни Крона и язвенного колита характерно развитие воспаления на системном уровне, появление в кровотоке медиаторов воспаления, в том числе липополисахарида (LPS), которые, в свою очередь, могут влиять на функцию фибробластов, в том числе дермальных, и изменять секрецию фибробластами компонентов внеклеточного матрикса и базальной мембраны.
Цель. Оценить уровень секреции коллагена IV типа дермальными фибробластами при их культивировании in vitro в ответ на стимуляцию липополисахаридом.
Материалы и методы. В исследовании использованы дермальные фибробласты, выделенные от пяти детей с болезнью Крона, пяти детей с язвенным колитом и пяти условно здоровых детей (контрольная группа) в возрасте 13-17 лет. От всех участников и их родителей получено письменное информированное согласие, исследование одобрено этическим комитетом и ученым советом института. Критериями включения пациентов стали возраст, отсутствие других аутоиммунных заболеваний и педиатрический индекс активности болезни Крона и язвенного колита (PCDAI/PUCAI = 10-20 баллов). Первичные культуры дермальных фибробластов получали из биоптатов кожи предплечья путем ферментативной обработки по стандартной методике. Клетки культивировали в среде DMEM (ПанЭко, Россия) c добавлением 10% ЭТС (ПанЭко, Россия), 0,33 мг/мл L-глутамина (ПанЭко, Россия), 55 Ед/мл пенициллина и 55 мкг/мл стрептомицина (ПанЭко, Россия) при 37 °С в атмосфере 5% СО2. Замену среды проводили каждые 3-4 дня. Клетки после третьего пассажа засевали в 24-луночный планшет (Thermo scientific, Германия) и культивировали до достижения культурой монослоя. Для стимуляции секреторной активности дермальных фибро-бластов культуральную среду в соответствующих лунках меняли на питательную среду, содержащую индуктор вос-
паления LPS. Контролями служили лунки с дермальными фибробластами, в которые добавляли питательную среду без индуктора. В качестве стимулятора активности дермальных фибробластов использовали индуктор воспаления Lipopolysaccharides из Escherichia coli, серотип O55:B5 (Sigma, Германия) в концентрации 10 мкг/мл. Стимуляцию дермальных фибробластов проводили в течение 24 часов. Супернатанты отбирали, пропускали через фильтр с диаметром пор 0,22 цм (GE Osmonics, США), и при необходимости аликвоты хранили при -80 °С. Оценку уровня коллагена IV типа в культуральной среде проводили методом ELISA тест-системой EKF diagnostics (Япония) согласно инструкции производителя.
Результаты. Спонтанная продукция коллагена IV типа дермальными фибробластами детей с язвенным колитом статистически значимо снижена по сравнению с ее уровнем в группе условно здоровых детей и детей с болезнью Крона. Средние значения концентраций коллагена IV типа в супернатанте дермальных фибробластов условно здоровых детей и детей с болезнью Крона, язвенным колитом составили соответственно: 5,34±0,93 мкг/мл, 4,27±1,51 мкг/мл; 3,72±1,98 (р = 0,015 против контроля; р = 0,021 против болезни Крона). В ходе исследования установлено, что в ответ на добавление LPS E. coli O55:B5 дермальные фибробласты детей с болезнью Крона и язвенным колитом снижают секрецию коллагена IV типа. Концентрация в супернатанте коллагена IV типа уменьшалась на 50,2%, с 4,27±1,51 мкг/мл до 2,13±0,55 мкг/мл (p = 0,021) у детей с болезнью Крона; на 38,7% с 3,72±1,98 мкг/мл до 2,28±0,83 мкг/мл (p = 0,027) у детей с язвенным колитом; на 3,4% в группе условно здоровых детей.
Заключение. Уровень спонтанной секреции дермаль-ными фибробластами коллагена IV типа снижен в группах детей с болезнью Крона и язвенным колитом по сравнению со значением в группе условно здоровых детей. Индуктор воспаления липополисахарид LPS E. coli O55:B5 снижает его секрецию дермальными фибробластами по сравнению с его уже сниженным базовым уровнем в результате хронического воспаления в кишечнике. Таким образом, механизмом нарушения целостности и защитных функций кожи у детей с воспалительными заболеваниями кишечника может быть снижение продукции дермальными фибробластами коллагена IV типа, потенцируемое липополисахаридом.
КЛЕТКИ-СУПРЕССОРЫ МИЕЛОИДНОГО ПРОИСХОЖДЕНИЯ У ДЕТЕЙ С ПСОРИАЗОМ
Герасимова Д.Г.1, Закиров Р.Ш.2, Радыгина Т.В.2, Курбатова О.В.3, Самохина И.В.2, Мурашкин Н.Н.2, Петричук С.В.2
1ФГБОУ ВО «Российский национальный исследовательский медицинский университет» им. Н.Н. Пирогова, Москва, Россия
2 ФГБНУ «Научный центр здоровья детей», Москва, Россия
3 ФГБНУ «Научный центр акушерства, гинекологии
и перинатологии» Министерства здравоохранения РФ, Москва, Россия
Псориаз является распространенным иммуноопосре-дованным, хроническим воспалительным заболеванием кожи. Важную роль в развитии псориаза играют дендритные клетки и активированные Т-лимфоциты (act-Th),
