Ветеринария
стве почки было увеличение клубочков эмбрионального типа. Капиллярные синусы были полнокровны. Отмечалось умеренно-выраженное развитие интерстициального отека паренхимы, и была очаговая десква-мация эпителия канальцев.
В миокарде был умеренно выраженный интерстициальный отёк в эн-домизии был очагово-лимфоидный инфильтрат. В тонком и толстом кишечнике определялась диффузная деструкция эпителия ворсинок, с оголением базальной мембраны и пере-фокальной клеточной реакцией. Сосу-
ды микроциркуляторного русла были полнокровны.
Выводы. Рекомендации
Рекомендуем проводить обязательное исследование каждой партии комбикормов, поступающих на птицефабрику, для определения в них содержания 7п, Си, РЬ, и корректировать их уровень в соответствии с рекомендуемыми нормами. Так как у цыплят бройлеров наблюдается замедление увеличения живой массы тела.
Фоновые значения концентраций 7п у цыплят в тканях более высокие по сравнению с Си и РЬ. У 7п способ-
ность к накоплению в тканях у бройлеров опытной группы ингибируется, возможно, из-за накопления в тех же тканях Си и РЬ.
Кумуляция РЬ в паренхиматозных органах цыплят опытной группы вызывает деструктивные изменения, проявляющиеся в виде нарушения микроциркуляции, отёка тканей, гиалиновокапельной дистрофии почечных канальцев, очаговых некрозов и склерозирование сосудистых петель клубочков в почках и печени.
Литература
1. Боев В.М., Красиков С.И. Загрязнение свинцом некоторых объектов окружающей среды // Гигиена и санитария. -2004. - № 1. - С. 25-27.
2. Лысенко М.А. Влияние унитиола на продуктивность и качество мяса бройлеров // Птица и птицепродукты. - 2003. -№3. - С. 46-49.
3. Вяйзенен Г.Н. Концентрация тяжелых металлов в продуктах животноводства // Новгородский государственный университет. - 2004. - С.27-29.
4. Воробейчик Е.Л. Экологическое нормирование токсических нагрузок на наземные экосистемы / Дисс... доктора биолог, наук. - 2004. - С. 16-30.
5. Мартынюк Т.Г., Севастьянова Н.И. Непламенное атомно-абсорбционное определение содержание свинца в птице-продуктах // Вопросы питания. Медицина. - 1981. - № 2. - С. 19-22.
ВЛИЯНИЕ ХИТИНСОДЕРЖАЩИХ ПРЕПАРАТОВ НА МЕТАБОЛИЧЕСКИЕ ПРОЦЕССЫ В ОРГАНИЗМЕ БЫЧКОВ
А.Р. ТАИРОВА (фото),
доктор биологических наук, зав. кафедрой общей химии и экологического мониторинга Е.В. ЛАЗАРЕВА (фото), аспирант
Р.Л. МИРГАЛИМОВ,
аспирант, Уральская ГАВМ, г. Троицк Челябинской области
Ключевые слова: хитинсодержащие препараты, метаболические процессы, биологическая активность препаратов, противовоспалительное и общеукрепляющее действие препаратов.
В последние годы в нашей стране значительно интенсифицировались исследования по изучению хитина и хитозана, получению их новых форм и модификаций. Этому способствовали успешные разработки зарубежных ученых, показавших возможность широкого практического применения хитина и хитозана в различных областях жизнедеятельности человека [11,12,13,14]. Появился ряд публикаций российских авторов, касающихся как теоретических, так и практических аспектов синтеза препаратов на основе хитин/хитозан определенного целевого назначения [7,9,10].
Среди производных хитина несомненный интерес представляют хито-зан и сукцинат хитозана. Биологическая активность хитозана, его бактери-остатические, иммуностимулирующие
и другие свойства существенно зависят от молекулярной массы [2] и степени деацетилирования [8]. Важным качеством хитозана при пероральном применении являются, наряду с сорбционными свойствами, способность восстанавливать микрофлору кишечника и очищать его эпителий, а также его хелато- и комплексообразующие свойства, обеспечивающие связывание и вывод из организма радионуклидов и различных токсинов, включая и анионные полимеры.
Согласно данным Б.А. Комарова [4], наличие водорастворимой фракции хитозана в препаратах на его основе усиливает противоопухолевое и иммуностимулирующее действие, способствует заживлению ран. Обнаруженную в клинической практике высокую эффективность водораствори-
мой формы хитозана (хитодеза) автор в определенной степени связывает с частичным проникновением хитозана в кровь и различные органы.
Одним из основных компонентов противовоспалительного и общеукрепляющего действия препаратов на основе хитозана является его антиоксидантная активность. При исследовании процессов свободнорадикального повреждения гемоглобина было установлено, что хитозан спо-
Chitin containing preparations, metabolic processes, biological activity of preparations, antiinflammatory and general strengthening action of preparations.
собен улавливать активные формы кислорода, то есть выполнять роль антиоксиданта широкого спектра действия. Сукцинат хитозана - это продукт ионной связи хитозана и янтарной кислоты - метаболита цикла Кребса. Как анионный полиэлектролит сукцинат хитозана также обладает иммуностимулирующим действием. Наличие в хитодезе свободной (не связанной химически с молекулой хитозана) янтарной кислоты выполняет положительную роль при лечении, благодаря стимуляции биологических процессов на клеточном уровне. С помощью хитодеза удается за короткое время излечить дизентерию и сальмонеллез. Испытания показали, что препараты хитозана, в том числе и сукцинат хитозана, активируют фагоцитоз микроорганизмов, увеличивают количество мигрирующих фагоцитов в очаг воспаления. Изучение метаболизма фагоцитирующих клеток цитохимическими методами показало, что сук-цинат хитозана вызывает достоверное увеличение активности ферментов гликолиза, гексозомонофосфатного шунта и цикла Кребса. Вероятно, обогащение хитозана янтарной кислотой усиливает метаболический эффект хитозана.
Многочисленные данные литературы свидетельствуют об уникальных возможностях препаратов на основе хитина. Однако сведения о применении хитиновых препаратов в животноводстве, об их влиянии на рост и развитие молодняка сельскохозяйственных животных весьма ограничены.
Вышеизложенное послужило основанием для изучения влияния препаратов на основе хитин/хитозан на организм бычков в молочный период выращивания.
Цель и методика исследований
Цель эксперимента - изучение метаболических процессов в организме бычков черно-пестрой породы в молочный период выращивания - на фоне применения хитинсодержащих препаратов.
Для реализации поставленной цели на базе ОАО ПКЗ «Дубровский» Красноармейского района Челябинской области были сформированы три группы бычков по десять голов в каждой. Животные 1 группы были контрольными и получали основной рацион хозяйства. Бычки 2 группы дополнительно к основному рациону кормления хозяйства получали с кормом в форме 3%-ного раствора хи-тозан водорастворимый с молекулярной массой 38,0кДа и степенью деацетилирования 85,0% (ТУ 9289002-114/8234-99) в дозе 60мг/кг живой массы животного, 2 раза в день в течение 7 дней с повторением курса через 7 дней. Животные 3 группы дополнительно к основному рациону
кормления получали сукцинат хито-зана (ТУ 9289-003-11734/26-98) с молекулярной массой 80,0 кДа и степенью замещения 75,2% по выше приведенной схеме.
Из числа биохимических показателей в сыворотке крови определяли: общий белок - методом рефрактометрии [5]; белковые фракции - нефелометрии [3]; глюкозу -глюкозооксидантным методом при помощи стандартного набора «Глюкоза
- ФКД». В цельной крови определяли гемоглобин - гемиглобинцианидным методом Л.М. Пименовой и Г.В. Дер-виза [6].
Результаты исследований
При проведении биохимических исследований нами было проведено определение концентрации гемоглобина (таблица 1). Следует отметить, что самый высокий уровень гемоглобина установлен в 2-месячном возрасте бычков как в контроле, так и в опытных группах. Однако существенных различий в изменениях его концентрации в молочный период нами не установлено. Следует только отметить, что на фоне применения сук-цината хитозана к 4-месячному возрасту наблюдается увеличение этого показателя на 5,41%, по сравнению с контролем.
Применение препаратов на основе хитина оказало значительное влияние на концентрацию глюкозы в крови подопытных бычков. Так, в 2-месячном возрасте (начало опытного периода) концентрация глюкозы в крови бычков при норме для этого возраста 2,86-4,62 ммоль/л составила от 2,74±0,20 до 2,78±0,12 ммоль/ л. К 4-месячному возрасту ее уровень повысился во всех группах, но интенсивность повышения была различной. У контрольных бычков содержание глюкозы увеличилось на 22,30% и составило 3,40±0,10 ммоль/ л. У бычков 2 группы на фоне применения хитозана концентрация глюкозы в крови, по сравнению с исходным уровнем, увеличилась на 71,16%. Также в 1,71 раза увеличилось содержание глюкозы в крови бычков, получавших сукцинат хитозана. Сравнение полученных данных с видовой нормой данного возраста (2,5-5,66 ммоль/л) показало, что значение изучаемого показателя у контрольных бычков оказалось ниже минимальных границ на 5,29%. Несмотря на то, что к концу молочного периода (6 месяцев) происходит снижение ее концентрации, как у контрольных, так и опытных бычков, интенсивность снижения по группам была также различной. Так, если уменьшение концентрации глюкозы у бычков в контрольной группе составило 6,18% (Р<0,05), по сравнению с предыдущим периодом, то снижение уровня глюкозы у бычков 2 и 3 группы, оказалось статистически незна-
Ветеринария
чимым. Это позволяет сделать вывод, что применение хитозана и сук-цината хитозана, тестируемое по увеличению концентрации глюкозы и содержанию эритроцитов в 2-4-месячном возрасте, способствовало усилению окислительно-восстановительных процессов в организме бычков опытных бычков и косвенным образом может объяснить установленные нами высокие показатели роста и развития бычков именно в период 2-4 месяца.
К числу биохимических показателей, тесно связанных с продуктивностью животных, относятся показатели, характеризующие белковый обмен в организме, что послужило основанием их определения в сыворотке крови бычков.
Из данных таблицы 1 видно, что к 4-месячному возрасту, по сравнению с исходным периодом, происходит увеличение общей концентрации белка в сыворотке крови подопытных бычков.
Наиболее высокая концентрация белка была в группе животных, получавших хитозан (72,43±1,12 г/л). В 3 группе бычков в этот период исследований концентрация общего белка составила 70,69±1,05г/л. Однако сопоставление с исходным уровнем показало, что и во 2 и 3 группах бычков общая концентрация белка достоверно повышалась практически с равной интенсивностью, составившей 7,33 (Р<0,01) и 7,12%(Р<0,05) соответственно, что свидетельствует о влиянии обоих препаратов на активность белкового обмена. Это подтверждается значительным количественным увеличением альбуминовой фракции, по сравнению с контролем, которое превысило контрольные показатели на 14,39% и 17,20% соответственно по 2 и 3 группам в 4-месячном возрасте и 9,89 и 12,81%
- в 6-месячном.
Увеличение концентрации сывороточного альбумина под действием изучаемых препаратов, на наш взгляд, также является положительным моментом, так как альбумины играют существенную роль в регулировании активности гормонов, ферментов, антибиотиков и других биологически активных веществ. Наряду с другими сывороточными белками, альбумин участвует в транспорте и регулировании концентрации катионов и анионов - кальция, магния, ацетата, необходимых для нормальной жизнедеятельности организма. Наконец, как основной белок, альбумин служит главным резервом азота аминокислот, а возможно, и пептидов в организме, ему принадлежит ведущая роль в обмене тканей.
Необходимо отметить, что с возрастом к четырем месяцам концентрация альбумина в сыворотке крови
уменьшилась во всех группах, что тестируется по снижению белкового индекса до 0,78 (1 группа); 0,89 (2 группа); и 0,98 (3 группа). Этот факт согласуется как с полученными нами результатами по весовому росту опытных бычков, так и с имеющимися в литературе данными о снижении содержания альбуминов в период их интенсивного роста [1].
Концентрация глобулинов к 4-месячному возрасту бычков возросла и не имела между группами достоверных различий. Но если учесть, что на этом фоне в опытных группах бычков, по сравнению с исходным уровнем, произошло значительное нарастание альбуминовой фракции, составившее 47,29 и 49,54% к общему белку, при значениях белкового коэффициента 0,89 и 0,98 (в контрольной группе бычков он составил 0,78%).
Выводы. Анализ
Таким образом, к концу молочного периода (к 6 месячному возрасту), по сравнению с исходным уровнем (2месячный возраст), происходит дальнейшее снижение концентрации альбуминовой фракции, нарастание глобулиновой, а значения белкового индекса у подопытных бычков, составившие 0,82 - 2 группа (хитозан) и 0,85 - 3 группа(сукцинат хитозана) против 0,77 - в контроле, свидетельствуют о благоприятных условиях для формирования мясной продуктивности.
Ветеринария Таблица 1
Биохимические показатели крови подопытных бычков (х ± $х ; п=10)
Показатель Г руппа
1 2 3
2 месяца
Гемоглобин, г/л 98,16±3,95 100,52±4,16 97,56±3,82
Глюкоза, ммоль/л 2,78±0,12 2,74±0,20 2,75±0,19
Общий белок, г/л 66,82±1,92 67,45±1,85 65,99±1,32
Альбумины, г/л 36,25±0,64 37,18±0,21 36,12±0,75
% к общему белку 54,25 55,12 54,73
Глобулины, г/л 30,57±0,86 30,27±0,41 29,87±0,18
% к общему белку, г/л 45,75 44,88 45,27
Коэффициент А/Г 1,19 1,22 1,20
4 месяца
Гемоглобин, г/л 95,93±3,40 98,61 ±3,62 101,12±4,73
Глюкоза, ммоль/л 3,40±0,10*** 4,69±0,12* 4,70±0,09*
Общий белок, г/л 68,12±0,92 72,43±1,12** 70,69±1,05*
Альбумины, г/л 29,94±0,45 34,25±0,26* 35,09±0,81*
% к общему белку 43,96 47,29 49,54
Глобулины, г/л 38,18±0,16 38,18±0,26 35,60±0,63
% к общему белку, г/л 56,04 52,71 50,46
Коэффициент А/Г 0,78 0,89 0,98
6 месяцев
Гемоглобин, г/л 96,62±2,49 98,25±2,84 99,25±2,47
Глюкоза, ммоль/л 3,19±0,15** 4,42±0,11 4,58±0,14**
Общий белок, г/л 71,25±0,18 74,35±0,20 74,62±0,61
Альбумины, г/л 30,52±0,69 33,54±0436** 34,43±0,29**
% к общему белку 42,84 45,12 46,15
Глобулины, г/л 40,73±1,10 40,81 ±0,65 40,15±0,62
% к общему белку, г/л 57,16 54,88 53,85
Коэффициент А/Г 0,77 0,82 0,85
Литература
1. Азаубаева Г.С. Картина крови у животных и птиц. - Курган: Зауралье, 2004. - 168 с.
2. Антимикробная активность разномолекулярного хитозана в пищевых средах / С.Н. Максимова, Е.В. Ситникова, Г.Н. Ким и др. // Современные перспективы в исследовании хитина и хитозана: Мат-лы 8-й Меджунар. конф./ ВНИРО, 2006.
3. Антонов Б.И. Лабораторные исследования в ветеринарии: биохимические и микологические. - М.:Агропромиз-дат,1991 .-С.16
4. Комаров Б.А. Почему хитозан полезен человеку; Институт проблем химической физики РАН. - Черниголовка,
2001. - С. 187-195.
5. Кондрахин И.П. и др. Клиническая лабораторная диагностика в ветеринарии. - М.: Агропромиздат, 1985.
- С. 100-101.
6. Кондрахин И.П. Методы ветеринарной клинической лабораторной диагностики // Справочник. - М.: Колосс, 2004.
- 520 с.
7. Применение хитодеза и фитохитодеза в клинической практике / Б.А. Комаров, К.А. Трескунов, А.И. Албулов и др. // Новые перспективы в исследовании хитина и хитозана / ВНИРО. - 1999.-С. 148-151.
8. Максимов И.В., Черепанова Е.А., Яруллина Л.Г. и др. Связь элисирной активности хитина со степенью его ацетилирования // Современные перспективы в исследовании хитина и хитозана: Мат-лы 8-й Меджунар.конф. -ВНИРО. - 2006.
9. Скрябин К.Г., Вихорев Г.А., Варламова В.П. Хитин и хитозан. Получение, свойства и применение. - М: Наука,
2002. - С. 217-246.
10. Косяков В.Н., Велешко И.Е., Яковлев Н.Г. и др. Сорбция радионуклидов хитиновыми сорбентами различного происхождения // Современные тенденции в исследованиях и использовании хитина и хитозана: 7 Междунар. конф. -СПб., с. 520-523.
11. M.N.V. Ravi Kumar, RAA. Muzzarelli, C. Muzzarelli, H. Sashiwa and A.J. Domb. Chitosan chemistry and pharmaceutical perspectives. // Chem. Rev. 2004. V. 104. P. 6017-6084.
12. Rhoades J., Roller S. Antimicrobial actions of degraded and native chitosan against spoilage organisms in laboratory media and foods. Appl. Environ. Microbiol. 2000, 66 (1). P 80-86.
13. Terreux R., Domard M., Viton C., Domard. A Interaction study between copper II ions and chitosan by DFT calculation // Advances in Chitin science, V. VIII. Henryk Struszczyk, Alain Domard, G. Peter and Henryk Pospieszny. Eds.: Institute of Plant Protaction, Poznan, Poland. 2005. P. 390-394.
14. Yаn X., Khar. T., Lim L.Y., PEC films prepared from Chitosan-Alginate coacervates // Chem Pharm Bull (Tokyo) 2000. V. 48. N 7. P. 941-946.