Влияние гонадотропных клеток гипофиза на функциональную активность интерстициальных эндокриноцитов семенника овец дагестанской горной породы в динамике постнатального онтогенеза
М.З. Атагимов, д.в.н., профессор, А.Н. Хасаев, к.в.н, Дагестанский ГАУ
Железы внутренней секреции вместе с нервной и сосудистой системами участвуют в координации деятельности отдельных органов и систем в процессе жизнедеятельности, роста, развития, адаптации, размножения и гомеостаза, т.е. в осуществлении единства организма.
Гипофиз, являясь главной железой внутренней секреции, представляет собой большой научный интерес и привлекает внимание исследователей [1—7]. Но вопрос, касающийся связи гипофиза с другими эндокринными железами, в частности с семенником, остаётся недостаточно изученным. Одним из важнейших факторов, определяющих гомеостаз для развивающихся половых клеток, являются интерстициальные эндокриноциты семенников (клетки Лейдига), которые не только модулируют действие гонадотропных гормонов, но и оказывают специфическое действие на орган, участвуя в обеспечении всех сторон ги-стофизиологии семенников [8]. В связи с этим изучение влияния гонадотропоцитов передней доли гипофиза на функциональную активность интерстициальных эндокриноцитов семенника является весьма актуальным, будучи тесно связанным с фундаментальными проблемами и с практическими аспектами ветеринарной медицины.
Цель данной работы — изучение гистофизио-логических взаимосвязей гонадотропных клеток передней доли гипофиза и интерстициальных эндокриноцитов семенника в постнатальном онтогенезе овец дагестанской горной породы отряда парнокопытных.
Материалы и методы. Исследования проводили на клинически здоровых овцах дагестанской горной породы. Материал для исследования отбирали сразу после убоя.
Для общегистологического и гистохимического исследования материал фиксировали растворами Буэна, Ценкера, Карнуа. Для выявления жиров использовали метод Чиачио, для выявления аскорбиновой кислоты пользовались азотнокислым серебром. Парафиновые срезы толщиной 5—6 мкм изготавливали на ротационном микротоме и окрашивали гематоксилином Эрлиха и эозином, гематоксилином и пикро-индигокармином, азановым методом, альдегид-фуксином по Дыбану.
Гистохимическими методами определяли гликоген, липиды, аскорбиновую кислоту. Же-
лезы предварительно взвешивали и измеряли их объём. С помощью окуляр-микрометра МОВ-1 кариометрию проводили при увеличении 600х (об.40, ок.15х). Подсчёт количества клеточных элементов проводили на 20-50-100 полях зрения при увеличении 600х (об.40, ок.15х).
Результаты исследования. В допубертатный период (1—10 дн.) развития овцы гонадотропо-циты выделяются среди остальных клеток адено-гипофиза крупными размерами, многоугольной, овальной и полигональной формой. Цитоплазма обширна, даёт слабо Шик-положительную реакцию. Границы выделяются отчётливо. Ядра крупные, округлой формы, часто прилегают к периферии клетки. Хроматин собран в небольшие гранулы, соединённые между собой тонкими хроматиновыми нитями. Ядрышки чётко выделяются. Диаметр ядер в среднем составляет 11,04±0,32 мкм. Количество их в данном возрасте на одном поле зрения составляет в среднем 5,6±0,59 клетки. Гонадотропоциты обычно лежат одиночно, но могут образовывать скопления из нескольких клеток, тесно прилегая к синусоидальным гемокапиллярам.
Все вышеперечисленные гистологические и гистохимические особенности гонадотропов отражают повышенную активность этих клеток в данный возрастной период.
В описываемый возрастной период в меж-канальцевой соединительной ткани семенника овцы встречаются интерстициальные эндокри-ноциты. Эти клетки многоугольной, округлой, овальной, веретеновидной и реже отростчатой формы, крупных размеров, с чёткими границами. Цитоплазма воспринимает кислые красители, отмечается накопление большого количества суданофильного материала. Ядра крупные, светлые, расположены эксцентрично, с одним или двумя ядрышками. Диаметр ядер интерстициальных эндокриноцитов варьирует в широком пределе — от 5,03 до 12,12 мкм и в среднем составляет 10,44±0,14 мкм. Хроматиновый аппарат рыхлый, неравномерно рассеян по всему ядру или в виде зёрен прилегает к периферии ядра. Количество интерстициальных клеток в этом возрасте в одном поле зрения равняется 7,46±1,4 клетки.
Исследования данного периода развития овцы дают возможность предположить, что существует морфофункциональная взаимосвязь аденогипофиза с интерстициальными эндокри-ноцитами семенника, что можно расценивать как
взаимовлияние секреторной и выделительной функции гонадотропных клеток аденогипофиза и интерстициальных эндокриноцитов семенника животного.
В препубертатном возрастном периоде (3—4 мес.) в гонадотропоцитах отмечается статистически достоверное (Р<0,001) снижение количества — 2,3±0,49 клетки по сравнению с предыдущим периодом. Это клетки крупных размеров с ясно выраженными границами. Цитоплазма слабо Шик-положительна и при окраске альдегид-фуксином приобретает нежно-зеленоватый фон. Ядро крупное округло-овальной формы, располагается как по центру, так и ближе к периферии. Отмечается статистически достоверное (Р<0,05) уменьшение диаметра ядер, который в среднем составляет 10,6±0,15 мкм. Гетерохроматин плотный, представлен в виде повторяющихся завитков. Отчётливо выделяются ядрышки.
По морфометрическим параметрам в гонадотропоцитах в этом периоде развития овцы идёт снижение функциональной активности. Однако в сохранившихся гонадотропоцитах гистохимически в цитоплазме наблюдается Шик-положительная грануляция, что говорит о том, что данные клетки активно продолжают участвовать в гормонопоэзе.
В семеннике интерстициальные эндокрино-циты отростчатой, реже веретеновидной формы с плотным тёмным ядром, располагающимся по центру клетки. Цитоплазма имеет чёткие очертания и показывает слабую суданофилию. Гранулы аскорбиновой кислоты не обнаруживаются. Ядро округлое с чёткими контурами. В связи с тем что хроматин в виде глыбок и хлопьев заполняет всю поверхность ядра, оно кажется тёмным. Диаметр ядер в этом возрасте по сравнению с предыдущим периодом значительно уменьшился и в среднем составляет 9,19±0,14 мкм, статистически достоверно (Р< 0,001). Заметно уменьшилось число клеток в одном поле зрения по сравнению с допубертатным периодом и составляет 2,8±0,78 клеток. Лежат интерстици-альные эндокриноциты небольшими группами по две-три клетки вблизи крупных кровеносных синусоидов.
Таким образом, снижение гонадотропной активности в передней доле гипофиза приводит к резкому снижению числа активно функционирующих интерстициальных эндокриноцитов семенника животного. Необходимо заметить, что гистохимические исследования свидетельствуют об активном синтезе в сохранивщихся гонадотропоцитах гипофиза и интерстициальных эндокриноцитах семенника.
В пубертатный период (6—8 мес.) постна-тального развития овцы в гонадотропоцитах гистологически и гистохимически наблюдается
повышение функциональной активности. Это клетки крупных размеров с ясно выраженными границами. Цитоплазма обширна, имеет Шик-положительную грануляцию. Отмечается статистически достоверное (Р< 0,001) увеличение диаметра ядер по сравнению с предыдущим периодом, которое составляет в среднем 11,43±0,14 мкм. Отмечается резкое статистически достоверное (Р< 0,001) увеличение численности гонадотропов по сравнению с предыдущим возрастом и составляет в среднем 8,7±1,2 клетки.
Интерстициальные эндокриноциты в семеннике образуют скопления из нескольких клеток. Цитоплазма обширна, границы чётко очерчены, часто на поверхности наблюдается мелкая зернистость. Гранулы аскорбиновой кислоты накапливаются в виде мелких зёрен. Отмечается суданофилия цитоплазмы. Ядро светлое, шаровидной формы, имеет чёткие контуры, располагается эксцентрично. Эухроматин в виде мелких зёрен размещается ближе к периферии ядра. Отмечается одно-два крупных ядрышка. Диаметр ядер в среднем составляет 10,4±0,17 мкм. Количество интерстициальных эндокриноцитов в одном поле зрения по сравнению с предыдущим возрастом заметно увеличивается и составляет 5,07±1,14 клетки.
Из вышеописанного можно прийти к мнению, что в гонадотропоцитах в этом периоде развития животного происходит повышенное образование и секреция гормональных веществ в кровеносное русло. Это активно влияет на гормонопоэз в интерстициальных эндокриноцитах семенника овцы. Полученные данные подтверждают теорию прямой и обратной связи между этими двумя железами.
В дефинитивный период (10—15 мес.) гона-дотропные клетки увеличиваются до 9,4±1, 12 клеток и характеризуются большими размерами, многоугольной или же неправильной формой. Цитоплазма обширная, хорошо выявляется Шик-положительная реакция. Ядра больших размеров, светлые, часто располагаются в центре клетки. Диаметр ядер составляет в среднем 11,12±0,18 мкм. Хроматиновый аппарат ядра представлен мелкими зёрнами. Располагаются гонадотропо-циты часто группами, занимая заднелатеральные участки передней доли гипофиза, но могут встречаться и в центральных участках железы в виде групп из нескольких клеток.
Количество интерстициальных эндокрино-цитов в этом возрасте на одном поле зрения составляет в среднем 4,77± 1,11 клеток. Цитоплазма обширна и обильно красится кислыми красителями. Ядро светлое, форма и величина эндокриноцитов в основном зависит от места расположения самих клеток. Отмечается статистически достоверное (Р<0,001) небольшое увеличение диаметра ядер по сравнению с
предыдущим периодом, что в среднем составляет 11,21 ±0,13 мкм. Хроматин в ядрах мелко гранулирован или собран в плотные образования. Ядрышки чётко выделяются.
Следовательно, для данного возрастного периода характерно повышение синтеза гормонов как в гипофизе, так и в семеннике. Это выявляется более высоким уровнем гормонального взаимовлияния обеих желёз.
В старом возрасте овцы в гонадотропоцитах часто обнаруживаются дистрофические изменения. Цитоплазма теряет Шик-положительную грануляцию. Ядра сморщенные, располагаются по центру клетки. Отмечается статистически достоверное (Р<0,05) уменьшение диаметра ядер до 10,47±0,28 мкм по сравнению с предыдущим возрастом. Хроматин представлен в виде глыбок, заполняющих центральные и периферические части ядра. Ядрышки почти не выделяются. Количество гонадотропоцитов по сравнению с предыдущим возрастом статистически достоверно (Р<0,001) уменьшается до 4,5±0,67 клетки. Нередко на участках железы, занятых гонадотропами, остаются клетки с разрушающейся структурой, на их месте разрастается соединительно-тканная строма, которая в этом возрасте занимает определённые участки. Оставшиеся гонадотропы характеризуются большими размерами, эксцентрически расположенным ядром, при этом цитоплазма занимает основную часть клетки, характеризуется небольшой Шик-положительной мелкой грануляцией. Ядро светлое, округлой формы и крупное. Хрома-тиновый аппарат представлен в виде мелких зёрен, занимающих периферическое положение. Ядрышки крупные, по нескольку штук.
В семеннике животного интерстициальные эндокриноциты характеризуются меньшим полиморфизмом. Чаще встречаются клетки, цитоплазма которых плохо различима, в них наблюдается небольшая зернистость. Часто наблюдается клетки с пикнотическими ядрами. Диаметр ядер в описываемом возрасте по сравнению с предыдущим периодом несколько уменьшился и в среднем составляет 9,6±0,24 мкм, достоверно (Р<0,05). Также статистически
достоверно (Р< 0,001) уменьшилось содержание интерстициальных эндокриноцитов по сравнению с предыдущим возрастом и составило 1,03+0,39 клетки в одном поле зрения.
Выводы. Таким образом, из вышеизложенного мы пришли к следующим выводам:
1. В новорождённый период овцы гонадо-тропные клетки гипофиза и интерстициальные эндокриноциты семенника активно функционируют.
2. В препубертатном периоде активность и количество гонадотропоцитов снижается, что ведёт к резкому снижению численности и функциональной активности интерстициальных эндокриноцитов семенника.
3. Высокая функциональная активность го-надотропоцитов и интерстициальных эндокри-ноцитов наблюдается в пубертатный и дефинитивный возрастные периоды.
4. У старых животных по гистохимическим и морфометрическим параметрам гонадотропная функция резко снижена, что приводит к резкому уменьшению гормональной активности интер-стициальных эндокриноцитов в семеннике.
Литература
1. Алешин Б. В. Гистофизиология гипоталамо-гипофизарной системы. М.: Медицина, 1971. 440 с.
2. Акмаев И.Г. Структурные основы механизмов гипоталами-ческой регуляции эндокринных функций. М.: Наука, 1979. 227 с.
3. Атагимов М.З. Морфофункциональные основы взаимосвязи провизорных и дефинитивных структур эндокринных желёз в пренатальном онтогенезе парнокопытных: дисс. ... докт. вет. наук. СПб., 1996.
4. Атагимов М.З., Хасаев А.Н. Гистофизиологические особенности гонадотропоцитов передней доли гипофиза и интер-стициальных эндокриноцитов семенника в дефинитивном периоде овец дагестанской горной породы // Известия Оренбургского государственного аграрного университета. 2011. №1 (29). С. 77-79.
5. Мицкевич М.С. Развитие обратных связей в эндокринной системе в раннем онтогенезе // Механизмы гормональных регуляций и роль обратных связей в явлениях развития и гомеостаза. М.: Наука, 1981. С. 105-115.
6. Торгун П.М. Функциональная морфология аденогипофиза и коры надпочечников пушных зверей в постнатальном онтогенезе: дисс. . док. вет. наук. Воронеж, 1993.
7. Хасаев А.Н., Атагимов М.З. Морфология аденогипофиза и интерстициальных эндокриноцитов семенника в препубер-татный период овец дагестанской горной породы // Научные труды Уральской государственной академии ветеринарной медицины. 2009. Т. XV. С. 67-70.
8. Шевлюк Н.Н. Сравнительная морфофункциональная характеристика эндокриноцитов семенников позвоночных (онтогенез, сезонные изменения, действие экстремальных факторов): дисс. ... докт. биол. наук. Оренбург-М., 1997.